醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)1976年美國(guó)國(guó)會(huì)最早立法，授權(quán)食品藥物管理局（FDA）管理醫(yī)療器械，并實(shí)行售前審批制度。隨后西歐、日本、加拿大、澳大利亞等政府也相繼進(jìn)行強(qiáng)制性管理。1979年:美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局和牙科協(xié)

會(huì)發(fā)布“口腔材料生物學(xué)

評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)”

1982年:美國(guó)材料試驗(yàn)協(xié)會(huì)發(fā)布“生

物材料和醫(yī)療器械的生物

學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目選擇標(biāo)準(zhǔn)”

.1984年:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）頒

布“口腔材料生物學(xué)評(píng)價(jià)

標(biāo)準(zhǔn)”，加拿大頒布了“生

物材料評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)”

1986年:美國(guó)、英國(guó)和加拿大的毒

理學(xué)和生物學(xué)專(zhuān)家制定了

“生物材料和醫(yī)療器械生

物學(xué)評(píng)價(jià)指南”

1987年:美國(guó)藥典（USP）發(fā)布

了“醫(yī)用塑料的生物學(xué)

評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法（體外）”

1988年:又發(fā)布了“醫(yī)用塑料的

生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法

（體內(nèi)）”

1989年:英國(guó)發(fā)布了“生物材料

和醫(yī)療器械的生物學(xué)評(píng)

價(jià)標(biāo)準(zhǔn)”

1990年:西德發(fā)布了“生物材料

的生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)”。

1992年:日本完成了“生物材料

和醫(yī)療器械的生物學(xué)評(píng)價(jià)

指南”。

ISO在1989年:制定“生物材料和醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)”。

17個(gè)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：

10993－1（1997）生物學(xué)評(píng)價(jià)和試驗(yàn)；

10993-2（1997）動(dòng)物保護(hù)要求；

10993－3（1997）遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗(yàn)；

10993－4（1992）和血液相互作用試驗(yàn)；

10993—5（1998）細(xì)胞毒性試驗(yàn)（體外）；

10993－6（1999）植人后局部反應(yīng)試驗(yàn)；

10993—7（1995）環(huán)氧乙烷滅菌殘留量；

10993－8（1998）生物學(xué)試驗(yàn)的參照材料選擇和確定指南；

10993－9（1999）潛在降解產(chǎn)物的鑒別和限定；

10993－10（1995）刺激和致敏試驗(yàn)；

10993－11（1997）全身毒性試驗(yàn)；

l0993－12（1996）樣品制備和參照材料；

l0993－13（1998）聚合物降解產(chǎn)物的鑒別和限定；

10993－14（1997）陶瓷制品降解產(chǎn)物的鑒別和限定；

10993—15（1997）涂層和未涂層金屬和合金降解產(chǎn)物的鑒別和限定；l0993－16（1997）降解產(chǎn)物和可瀝濾物毒性動(dòng)力學(xué)研究設(shè)計(jì)；

l0993—17工業(yè)化滅菌的醫(yī)療器械中戊二醛和甲醛殘留量（未完成）；10993—18（1997）材料化學(xué)特性。

我國(guó)1994年正式組團(tuán)參加并申請(qǐng)由觀(guān)察會(huì)員國(guó)成為正式會(huì)員國(guó)。

醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)GB/T16886（ISO10993）生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)原則:

選擇和評(píng)價(jià)任何用于人體的材料和器械，都需要有一套評(píng)價(jià)程序，對(duì)直接或間接與人體接觸的醫(yī)療器械，在設(shè)計(jì)程序中應(yīng)包括生物學(xué)評(píng)價(jià)。

GB/T16886涉及到醫(yī)療器械和材料的使用安全性。作為器械和材料總體評(píng)價(jià)與開(kāi)發(fā)的一部分，用以評(píng)價(jià)器械和材料的生物學(xué)反應(yīng)，用于確定器械和材料在常規(guī)應(yīng)用中對(duì)組織的影響。醫(yī)療器械生物學(xué)危害分為兩個(gè)方面，一是材料帶來(lái)的生物學(xué)危害，二是器械的機(jī)械故障引起的生物學(xué)危害。一、GB/T16886適用范圍

不涉及與病人身體不直接亦不間接接觸的材料和器械，也不涉及由于機(jī)械故障所引起的生物學(xué)危害。二、常用詞的定義和術(shù)語(yǔ)

1、醫(yī)療器械：（略）

2、材料：任何用于器械及其部件的合成或天然的聚合物、金屬、合金、陶瓷或其他無(wú)生長(zhǎng)物質(zhì)，包括無(wú)生命活性的組織。

3、

最終產(chǎn)品：處于“使用”狀態(tài)的醫(yī)療器械。一、材料的特點(diǎn)和性能:

化學(xué)、毒理學(xué)、物理學(xué)、電學(xué)、形態(tài)學(xué)和力學(xué)等性能。

器械總體生物學(xué)評(píng)價(jià)應(yīng)考慮以下方面：a）生產(chǎn)所用材料；

b）助劑、工藝污染和殘留；

c)可瀝濾物質(zhì)；

d）降解產(chǎn)物；

e）其他成分以及它們?cè)谧罱K產(chǎn)品上的相互作用；

f）最終產(chǎn)品的性能與特點(diǎn)

二、產(chǎn)品重新進(jìn)行生物學(xué)評(píng)價(jià)：

a）制造產(chǎn)品所用材料來(lái)源或技術(shù)條件改變時(shí)；

b）產(chǎn)品配方、工藝、初級(jí)包裝或滅菌改變時(shí)；

C）貯存期內(nèi)最終產(chǎn)品中的任何變化；

d）產(chǎn)品用途改變時(shí)；

e）有跡象表明產(chǎn)品用于人體時(shí)會(huì)產(chǎn)生副作用。

四、醫(yī)療器械分類(lèi)

（一）按接觸性質(zhì)分類(lèi)：

1、非接觸器械：不直接或不間接接觸患者的器械，本標(biāo)準(zhǔn)不涉及這類(lèi)器械。

2、表面接觸器械：

a）皮膚：僅接觸未受損皮膚表面的器械，如各種類(lèi)型的電極，體外假體、固定帶、壓迫繃帶和監(jiān)測(cè)器；

b）粘膜：與粘膜接觸的器械，如接觸鏡、導(dǎo)尿管、陰道內(nèi)或消化道器械（胃管、乙狀結(jié)腸鏡、結(jié)腸鏡、胃鏡）、氣管內(nèi)管、支氣管鏡、義齒、畸齒矯正器、宮內(nèi)避孕器；

c)損傷表面：與傷口或其他損傷體表接觸的器械：如潰瘍、燒傷、肉芽組織敷料或治療器械、創(chuàng)可貼等。

3、外部接入器械

a）血路，間接與血路上某一點(diǎn)接觸，作為管路向血管系統(tǒng)輸入的器械；如輸液器、延長(zhǎng)器、轉(zhuǎn)移器、輸血器等；

b）組織／骨／牙質(zhì)接入：接入組織、骨和牙髓／牙質(zhì)系統(tǒng)的器械和材料：如腹腔鏡、關(guān)節(jié)內(nèi)窺鏡、引流系統(tǒng)、齒科水門(mén)汀、齒科充填材料和皮膚鉤等；

c）循環(huán)血液：接觸循環(huán)血液的器械；如血管內(nèi)導(dǎo)管、臨時(shí)性起博電極、氧合器、體外氧合器管及附件，透析器、透析管路及附件、血液吸附劑和免疫吸附劑。

4、植入器械

a)與骨接觸的器械；如矯形釘、矯形板、人工關(guān)節(jié)、骨假體、骨水泥和骨內(nèi)器械。主要與組織和組織液接觸的器械；如起博器、藥物給入器械、神經(jīng)肌肉傳感器和刺激器、人工肌鍵、乳房植入物、人工喉、骨膜下植入物和結(jié)扎夾；

b）與血液接觸的器械；如起博電極、人工動(dòng)靜脈瘺管、心臟瓣膜、血管移植物、體內(nèi)藥物釋放導(dǎo)管和心室輔助裝置。

(二)按接觸時(shí)間分類(lèi)

a）短期接觸：一次或多次使用接觸時(shí)間在24h以?xún)?nèi)的器械；

b）長(zhǎng)期接觸：一次、多次（累積）或長(zhǎng)期使用接觸時(shí)間在24h以上30日以?xún)?nèi)的器械；

c）持久接觸：一次、多次（累積）或長(zhǎng)期使用接觸時(shí)間超過(guò)30日的器械。

五、評(píng)價(jià)試驗(yàn)內(nèi)容

1、細(xì)胞毒性

采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。測(cè)定由器械、材料和／或其浸提液造成的細(xì)胞溶解（細(xì)胞死亡）以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制和其他影響。

2、致敏

采用一種適宜的模型測(cè)定器械、材料和/或其浸提液潛在的接觸致敏性。

3、刺激

采用一種適宜的模型，在相應(yīng)的部位或在皮膚、眼、粘膜等植入組織上測(cè)定器械、材料和／或其浸提液潛在的刺激作用。

4、皮內(nèi)反應(yīng)

評(píng)價(jià)組織對(duì)器械浸提液的局部作用。該試驗(yàn)適用于不適宜做表皮或粘膜刺激試驗(yàn)的情況（如連向血路的器械）還適用于親水性浸提物。

5、全身毒性（急性）

將器械、材料和／或其浸提液在24h內(nèi)一次或多次作用于一種動(dòng)物模型，測(cè)定其潛在的危害作用。該試驗(yàn)適用于接觸會(huì)導(dǎo)致有毒的瀝濾物和降解產(chǎn)物吸收的情況。該試驗(yàn)還包括熱原試驗(yàn)，檢測(cè)器械或材料浸提液的材料致熱反應(yīng)。

6、亞慢性毒性（亞急性毒性）

在大于24小時(shí)但不超過(guò)試驗(yàn)動(dòng)物壽命的10％的時(shí)間（如大鼠是90日）內(nèi)，測(cè)定器械、材料和／或其浸提液一次或多次作用或接觸對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的影響。

7、遺傳毒性

采用哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)或其他技術(shù)，測(cè)定由器械、材料和／或其浸提液引起的基因突變、染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量的改變，以及DNA或基因的其他毒性。8、植入

用外科手術(shù)法，將材料或最終產(chǎn)品的樣品植入或放入預(yù)定植入部位或組織內(nèi)，在肉眼觀(guān)察和顯微鏡檢查下，評(píng)價(jià)對(duì)活體組織的局部病理作用。9、血液相容性

評(píng)價(jià)血液接觸器械、材料或一相應(yīng)的模型或系統(tǒng)對(duì)血液或血液成分的作用。

溶血試驗(yàn)采用體外法測(cè)定由器械、材料和/或其浸提液導(dǎo)致的紅細(xì)胞溶解和血紅蛋白釋放的程度。

補(bǔ)充評(píng)價(jià)試驗(yàn)

1、慢性毒性

在不少于試驗(yàn)動(dòng)物壽命10％（如大鼠是90日以上）的時(shí)間內(nèi)，一次或多次將器械、材料和／或其浸提液作用于試驗(yàn)動(dòng)物，測(cè)定其對(duì)動(dòng)物的影響。

2、致癌性

在試驗(yàn)動(dòng)物的壽命期內(nèi)，一次或多次將器械、材料和／或其浸提液作用于試驗(yàn)動(dòng)物，測(cè)定潛在的致腫瘤性。

試驗(yàn)應(yīng)與接觸途徑和作用時(shí)間相適應(yīng)。

3、生殖與發(fā)育毒性

評(píng)價(jià)器械、材料和/或其浸提液對(duì)生殖功能、胚胎發(fā)育（致畸性），以及對(duì)胎兒和嬰兒早期發(fā)育的潛在影響。試驗(yàn)應(yīng)考慮器械的應(yīng)用位置。4、生物降解

在存在潛在的可吸收和/或降解時(shí)，該試驗(yàn)可測(cè)定器械、材料和/或其浸提液的可瀝濾物和降解產(chǎn)物的吸收、分布、生物轉(zhuǎn)化和消除的過(guò)程。生物學(xué)評(píng)價(jià)流程圖生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的樣品制備

一、試驗(yàn)樣品的選擇原則

1．首先最好直接用醫(yī)療器械作為試驗(yàn)樣品。2．若不能直接用醫(yī)療器成品，可選擇醫(yī)療器械成品中有代表性部分作為試驗(yàn)樣品。如果還不行，可用相同配方材料的有代表性樣品進(jìn)行試驗(yàn)，按照與成品相同的工藝過(guò)程進(jìn)行預(yù)處理。

●合成材料:應(yīng)作為單一材料的試驗(yàn)樣品；

●有表面涂層的器械試驗(yàn)樣品應(yīng)包括涂層材料和基質(zhì)材料.

●器械如果使用粘接劑、射頻密封或溶劑密封，試驗(yàn)樣品應(yīng)包括粘接和（或）密封處有代表性的部分。

●若在臨床中使用固化的材料，如粘固劑、粘接劑或充填劑，采用臨床使用的狀態(tài)進(jìn)行試驗(yàn)；如果不行，應(yīng)采用臨床使用最小固化期作為試驗(yàn)樣品。

●若不能采用醫(yī)療器械成品或有代性表部分作試驗(yàn)樣品時(shí)，可采用樣品制備浸提液進(jìn)行試驗(yàn)。

二、試驗(yàn)樣品的制備要求

1.高分子材料

包括樹(shù)脂、聚合物和所有添加劑。對(duì)于配方的替代成分也要評(píng)價(jià)，并對(duì)配方作詳細(xì)說(shuō)明，包括材料的耐熱性、原始狀態(tài)、再粉碎。

2．金屬材料

取自與醫(yī)療器械相同的原材料，并且與最終產(chǎn)品相同的車(chē)、磨和拋光、表面處理和滅菌等而制備的試驗(yàn)樣品。

3．陶瓷材料

取自與醫(yī)療器械生產(chǎn)的同批粉料，并且用與最終產(chǎn)品生產(chǎn)相同的鑄造、澆鑄、燒結(jié)、表面拋光加工和滅菌而制備的試驗(yàn)樣品。

4．由于器械的表面對(duì)生物反應(yīng)有很大影響，因此最好是使用器械的最終產(chǎn)品與細(xì)胞或生物體接觸，或采用與器械最終產(chǎn)品相同的工藝加工成的器械樣品，這些比代表性部分更能反應(yīng)原醫(yī)療器械的生物學(xué)特性。

三、醫(yī)療器械浸提液制備

1、浸提介質(zhì)：

⑴極性溶液。生理鹽水，無(wú)血清液體培養(yǎng)

基。

⑵非極性溶液。植物油（例如棉籽油或芝

麻油）。

⑶其他浸提介質(zhì)。乙醇/水（5%，V/V），

乙醇/生理鹽水（5％，V／V）聚乙二醇

400，二甲基亞砜，含血清液體培養(yǎng)基。

2．浸提溫度

模擬醫(yī)療器械臨床使用可能經(jīng)受的最高溫度，并且在此溫度可浸提出最大量的濾出物質(zhì)。37±1℃（95±1.8℉）持續(xù)24±2h；37±1℃（95±1.8℉）持續(xù)72±2h；50±2℃（122±3.6℉）持續(xù)72土2h；70土2℃（158±3.6℉）持續(xù)24±2h；121土2℃（250土3.6℉）持續(xù)1±0.2h。推薦五種溫度：3．浸提介質(zhì)與試驗(yàn)樣品表面積（或重量）比例：

●試驗(yàn)樣品被浸提介質(zhì)浸沒(méi)；

●使得生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的劑量體系中所含浸提物質(zhì)的量最大；

●使得生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)?zāi)芊从瞅?yàn)樣品對(duì)人體的潛在危害作用。

●按表1-3-1所列比例進(jìn)行操作。

生物學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法

一、細(xì)胞毒性試驗(yàn)

●利用細(xì)胞體外培養(yǎng)方法來(lái)評(píng)價(jià)醫(yī)療器械或其浸提液可濾出成分中急性細(xì)胞毒性的潛在性。

●試驗(yàn)項(xiàng)目選擇：瓊脂覆蓋法、分子濾過(guò)法、生長(zhǎng)抑制法。

3．試驗(yàn)條件

(1)細(xì)胞株

(2)培養(yǎng)基

(3)樣品的準(zhǔn)備

4．試驗(yàn)方法

（1）瓊脂覆蓋法。本試驗(yàn)方法適用于固體（粉末、纖維狀、金屬）、液體等試驗(yàn)材料。

試驗(yàn)樣品：將試驗(yàn)樣品制成100mm2的圓形，要求邊緣光滑整齊。液體材科用0.1ml的樣品吸收在同面積的無(wú)菌濾紙片或纖維素片上。

陰性樣品：為一已知無(wú)毒的材料，如高密度聚乙烯。

陽(yáng)性對(duì)照：為一已知的有一定毒性的樣品材料（反應(yīng)指標(biāo)為2/2），含錫的聚氯乙烯是一種較為合適的陽(yáng)性對(duì)照。試驗(yàn)步驟（在無(wú)菌條件進(jìn)行):

●制備細(xì)胞懸液

●制備平板細(xì)胞單層

●制備瓊脂培養(yǎng)基平板

●染色

●放置試驗(yàn)樣品

●結(jié)果評(píng)定反應(yīng)指標(biāo)：R=Z/L

Z----區(qū)域指標(biāo)（見(jiàn)表1-4-1），與脫色

區(qū)大小有關(guān)

L----細(xì)胞溶解指標(biāo)（見(jiàn)表1-4-2），與

區(qū)域內(nèi)細(xì)胞溶解的范圍有關(guān)。

分子濾過(guò)法:

將試驗(yàn)樣品制備成直徑7mm的圓形膜片，要求有一個(gè)平面，使其可以充分地與濾膜接觸，試驗(yàn)樣品的重量不應(yīng)超過(guò)3g,亦可用直徑為7mm的纖維素片汲取0.1ml浸提液放置在分子濾膜片上。

空白對(duì)照樣品：只長(zhǎng)有單層細(xì)胞的分子濾膜；單純的分子濾膜。

陽(yáng)性對(duì)照樣品：推薦使用稀釋的苯酚溶液做為陽(yáng)性對(duì)照樣品。

細(xì)胞株：人上皮細(xì)胞株（HeLa）、小鼠成纖維細(xì)胞株（L-929）。

培養(yǎng)基：用于細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)用液。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基：如采用Eagle’s培養(yǎng)基,加入10％胎牛血清，1×105IU/l青霉素，100mg/L鏈霉素及10mmol/L碳酸氫鈉和10mmol/LHEPES緩沖液。

瓊脂培養(yǎng)基：采用2倍Eagle’s培養(yǎng)基，加10％胎牛血清，1×105IU/l青霉素，100mg/L鏈霉素和10mmol/LHEPES緩沖液。

溶血試驗(yàn)

范圍：

本試驗(yàn)是用醫(yī)療器械或其浸提液做體外試驗(yàn)，測(cè)定紅細(xì)胞溶解和血紅蛋白游離的程度，對(duì)醫(yī)療器械的體外溶血性進(jìn)行評(píng)價(jià)。2試劑和儀器：

（1）新鮮抗凝兔血或人血。

由新采的兔血20ml加2％草酸鉀lml，制成新鮮抗凝兔血。

取新鮮抗凝兔血8ml，加0.9％氯化鈉溶液l0ml稀釋。

（2）離心機(jī)。

（3）水浴箱（37±0.5℃）。

（4）分光光度計(jì)。

操作步驟（P31）熱原試驗(yàn)

兔法:

本試驗(yàn)是將一定量試驗(yàn)材料的浸提液由靜脈注入兔體內(nèi)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，觀(guān)察兔體溫變化以確定浸提液中所含熱原量。試樣制備和要求:

●試樣浸提液的制備

●凡與浸提液接觸的容器、量器等玻璃器皿