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文檔簡介
Introductionofhistology組織學緒論Departmentofhistologyandembryologyshanximedicaluniversity山西醫科大學組織學與胚胎學教研室Jingya景雅第一頁,共三十一頁。組織學緒論一、組織學學科特點形態學科,顯微解剖學研究機體(細胞、組織、器官)微細結構與功能的關系toolslightmicroscopeelectronmicroscopehistologyconfocalmicroscope第二頁,共三十一頁。lightmicroscope光鏡結構mastcells第三頁,共三十一頁。Figure4-29.Electronmicrographofpancreaticacinarcell:condensingvacuole(C),receivingasmallquantityofsecretoryproduct(arrow)fromavesiclemadeintheGolgicomplex(G).M,mitochondrion;RER,roughendoplasmicreticulum;S,maturecondensedsecretory(zymogen)granule.x40,000.透射電子顯微鏡電鏡結構第四頁,共三十一頁。激光共聚焦掃描顯微鏡confocallaserscanningmicroscope,CLSM激光光源掃描聚焦定位準確標本熒光標記熒光圖像清晰計算機圖像處理第五頁,共三十一頁。第六頁,共三十一頁。二、組織學研究內容
組織學研究三層次細胞水平組織水平器官水平(一)、細胞水平研究細胞是機體結構和功能的基本單位,數量、種類多,形態各異,形態決定功能,不同形態細胞具有不同功能。根據形態學特點判斷細胞功能。第七頁,共三十一頁。細胞水平:光鏡細胞形態,在組織中排列方式核形態,(判斷細胞形態依據)細胞質染色:嗜酸性或嗜堿性第八頁,共三十一頁。細胞水平:電鏡細胞膜細胞器:種類數量特殊結構:微絨毛,纖毛,突起RER,golgicomplex,SER線粒體,lysosome,分泌顆粒Ribosome細胞核:常染色質,異染色質第九頁,共三十一頁。(二)組織水平研究
細胞是機體結構和功能單位,但在多細胞生物,沒有細胞之間的相互配合,細胞無法完成其功能。細胞要發揮其功能,必須組織在一起,構成特定的細胞群體,才能完成相應的功能。這種特定的細胞群體就是組織。
形態或功能相互關聯的細胞由細胞外基質結合在一起,構成執行一定功能的細胞群體稱組織。tissuesarecomposedofaggregatesorgroupsofcellsandextracellularmatrixorganizedtoperformoneormorespecificfunctions第十頁,共三十一頁。tissue細胞形態或功能相互關聯的細胞組織在一起,執行該組織的功能合成該組織的細胞外基質extracellularmatrixfiber-纖維groundsubstancetissuefluid第十一頁,共三十一頁。(三)、器官水平研究
根據形態和功能不同,構成人體不同器官的組織分四種,稱四種基本組織四種基本組織上皮組織結締組織肌組織神經組織以不同比例與方式結合形成不同器官和系統despiteitscomplicaxity,humanbodiscomposedoffourbasictissuetypes第十二頁,共三十一頁。根據細胞排列方式識別組織,組織在器官中的分布特點識別器官。上皮組織:細胞排列緊密,細胞外基質很少結締組織:細胞種類多,排列稀疏,大量細胞外基質第十三頁,共三十一頁。肌組織:細胞長纖維狀骨骼肌平滑肌第十四頁,共三十一頁。神經組織:細胞突起多,無細胞外基質第十五頁,共三十一頁。三、組織學研究常用方法(一)光鏡石蠟切片應用光學顯微鏡觀察組織切片是研究組織學常用方法,經常觀察的是石蠟包埋后的組織切片,基本原理:用石蠟取代組織中水分,使組織具有一定硬度,便于切片。1.取材、固定5mm3固定常用固定液:乙醇、甲醛防止腐敗、自溶、盡量使組織結構保持在生活狀態第十六頁,共三十一頁。2.脫水、透明脫水:乙醇置換組織中水分透明:二甲苯置換組織中乙醇3.浸蠟、包埋浸蠟:石蠟置換二甲苯組織有硬度包埋:形成石蠟包埋塊,便于切片4.切片石蠟切片機厚度:5--10μm第十七頁,共三十一頁。切片機microtome第十八頁,共三十一頁。glassslidetissueblockparaffinknifetissuesection第十九頁,共三十一頁。(二)、常用染色方法未經染色切片無反差,無法觀察,染色后便于觀察,常用染料為有機化合物,分兩類:染料酸性染料:伊紅Eosin:carriesanetnegativecharge堿性染料:蘇木精Hematoxylin:carriesanetpositivecharge
第二十頁,共三十一頁。嗜酸性(Acidophilia):組織細胞對酸性染料親和力強嗜堿性(Basophilia):組織細胞對堿性染料親和力強中性(Neutrophilia):對堿性和酸性染料親和力都不強affinitiesfordyesreflectcellmorphologicalandfunctioncharacteristics第二十一頁,共三十一頁。1.H.E染色蘇木精:核紫藍色,核糖體,RER伊紅:胞質粉紅色,線粒體,分泌顆粒第二十二頁,共三十一頁。2.組織化學(histochemistry):通過化學或物理反應原理顯示組織或細胞內化學成分,通常是使其形成有色終末產物,以便在鏡下觀察,可進行定位和定量第二十三頁,共三十一頁。PAS反應(periodicacid-schiffreaction)顯示多糖,糖原、蛋白多糖多糖乙二醇基過碘酸氧化HIO4乙二醛基+亞硫酸品紅紫紅色沉淀PASreactionH.Ecounterstaining第二十四頁,共三十一頁。3.Immunohistochemistry
利用抗原抗體反應原理,檢測組織細胞內多肽、蛋白質的技術。特點:靈敏度高、特異性強Antigen:組織內待測物質Antibody和抗原特異結合可以被標記熒光素鐵蛋白過氧化物酶特異抗原刺激后漿細胞產生第二十五頁,共三十一頁。提取抗原注射抗原標記染色提取抗體第二十六頁,共三十一頁。(三)電子顯微鏡術1.transmissionelectronmicroscopy取材:組織小,取材快固定:戊二醛。鋨酸脫水:丙酮包埋:環氧樹脂切片:超薄切片機,50-80nm重金屬鹽染色:檸檬酸鉛,醋酸鈾觀察:黑白圖像第二十七頁,共三十一頁。macrophage電子密度高:重金屬鹽染色深電子密度低:重金屬鹽染色淺第二十八頁,共三十一頁。2.scanningelectronmicroscope掃描電鏡取材,固定,脫水,干燥,表面噴碳膜、金屬膜掃描電鏡觀察:表面立體結構pseudostratifiedciliatedcolumnarepithelium第二十九頁,共三十一頁。第三十頁,共三十一頁。內容總結Introductionofhistology。光鏡結構mastcells。激光共聚焦掃描顯微鏡confocallaserscanningmicroscope,CLSM。核形態,(判斷細胞形態依據)。細胞質染色:嗜酸性或嗜堿性。線粒體,lysosom
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