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文檔簡介
微生物檢驗復合生化反應知識目標:熟悉KIA、MIU生化反應的原理、方法及結果判斷。能力目標:能進行KIA、MIU的生化反應,并判斷正確結果。任務目標一.克氏雙糖鐵(KIA)試驗
乳糖的濃度為葡萄糖的10倍,若細菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,在培養基深層中,氨基酸的降解作用不足以中和所形成的酸,故仍呈黃。因此,KIA斜面呈堿性,深層呈酸性反應,說明該菌只分解葡萄糖而不分解乳糖。
若細菌能分解乳糖則產生大量的酸,這些酸能中和斜面產生的堿,使整個培養基呈黃色。若細菌能分解培養基中含硫氨基酸,則可產生H2S,H2S與培養基中枸櫞酸銨鐵起反應,產生不溶性的黑色硫化亞鐵沉淀。原理KIA里面有哪幾種底物?指示劑是什么?能夠檢測幾種結果?作答主觀題正常使用主觀題需2.0以上版本雨課堂
采用斜面接種法,35℃培養18~24小時,觀察結果。觀察結果時我們用A表示產酸,K表示產堿,+表示產氣或產硫化氫,-表示不產氣或不產硫化氫,報告的順序為斜面(A或K)/底層(A或K)/是否產氣(+-)/是否產硫化氫(+-)方法及結果KIA反應結果請寫出以上4個KIA的結果作答主觀題正常使用主觀題需2.0以上版本雨課堂①斜面酸性/底層酸性:葡萄糖和乳糖發酵,如大腸埃希菌、克雷伯茵屬、腸桿菌屬斜,圖左一(發酵型,產氣)AA+-②斜面堿性/底層酸性:葡萄糖發酵,乳糖不發酵,如志賀菌,圖左二(發酵型,不產氣)KA--常見的KIA反應結果有如下幾種:③斜面堿性/底層酸性(黑色):葡萄糖發酵、乳糖不發酵,產生H2S,如沙門菌、普通變形桿菌,圖左三(產硫化氫)KA-+④不發酵糖類。圖左四(產堿型)KK--常見的KIA反應結果有如下幾種:二、動力靛基質尿素酶(MIU)試驗
動力靛基質(吲哚)尿素酶培養基中,除含200g/L尿素和酚磺酞指示劑外,其蛋白胨較原克利斯頓森尿素培養基高10倍,并制成半固體培養基,以便觀察細菌的動力。由于蛋白胨中含有豐富的色氨酸,產生色氨酸酶的細菌可以水解色氨酸形成靛基質,當加人靛基質試劑后形成玫瑰吲哚。產生尿素酶的細菌將培養基中的尿素分解產堿,使酚磺酞指示劑顯桃紅色。因此,該試驗可同時觀察細菌動力、靛基質的產生和細菌分解尿素的情況。原理MIU的底物有哪幾種?指示劑是什么?檢測哪幾種結果?作答主觀題正常使用主觀題需2.0以上版本雨課堂
取待檢細菌穿刺接種到MIU培養基內,35℃培養18~24小時后,觀察結果。接種線變寬、變模糊,培養基變混濁為動力試驗陽性.當加人靛基質試劑后,試劑與培養基的接觸界面形成玫瑰紅色為靛基質試驗陽性;培養基全部變成桃紅色為尿素酶試驗陽性。方法及結果請寫出上面三個MIU的結果作答主觀題正常使用主觀題需2.0以上版本雨課堂我們按動力\吲哚\尿素的順序來報告結果,+表示陽性,-表示陰性。圖左一的結果:如果動力為陰性,結果為---圖左二動力為陽性,結果為+++圖左三動力為陽性,那結果為++-結果報告大腸埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)志賀菌KIA(KA--)MIU(---)傷寒沙門菌KIA(KA-+)MIU(+--)肺炎克雷伯菌KIA(AA++)、MIU(--+)桿菌肽實驗奧普托欣實驗能初步鑒別致病性腸道桿菌與非致病性腸道桿菌的試驗是:葡萄糖發酵試驗乳糖發酵試驗VP試驗甲基紅試驗ABCD提交單選題一試驗菌在KIA上的24h內的反應為“斜面紅色/底層黃色”,則可判斷:發酵葡萄糖,遲緩或不發酵乳糖既發酵葡萄糖,又發酵乳糖發酵乳糖,不發酵葡萄糖葡萄糖和乳糖
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