DepartmentofLaboratoryMedicine第一部分

性能驗證

王全哲課件編號:JYK-K-03-012014年DepartmentofLaboratoryMedicine性能驗證何時進行性能驗證性能驗證項目如何作性能驗證DepartmentofLaboratoryMedicine何時做性能驗證CLIA`88法案：改進或更換系統時、改變試劑時、增加新項目時。ISO15189：進行能力驗證時，對設備、系統與方法進行性能驗證。《臨床實驗室管理辦法》臨床實驗室應對檢測系統性能進行驗證。儀器進行系統性維修后。DepartmentofLaboratoryMedicine性能驗證包括哪些項目1

精密度2準確度3可報告范圍4參考區間5靈敏度6特異性DepartmentofLaboratoryMedicine如何做性能驗證1

配套系統

2自建系統DepartmentofLaboratoryMedicine配套系統1

精密度2準確度3可報告范圍4參考區間DepartmentofLaboratoryMedicine自建檢測系統1精密度2準確度3可報告范圍4參考區間5靈敏度6特異性DepartmentofLaboratoryMedicine精密度驗證定義：相同的檢測條件下，對某一標本進行重復檢測，所得測量值的離散程度。要求：包括批內與日間精密度實驗DepartmentofLaboratoryMedicine精密度驗證具體方法1.1批內精密度：取同一份標本插入病人標本中，重復檢測20次，計算SD、CV值，可接受范圍：Tea/4為通過。1.2日間精密度，每日檢測同一份標本5次，非一日完成四次檢測，共20次，計算SD、CV，可接受范圍Tea/3為通過。DepartmentofLaboratoryMedicine準確度驗證定義：指測量結果與被測量值的接近程度。方法：①參考方法比較

②應用參考物質

③回收實驗。DepartmentofLaboratoryMedicine準確度驗證2.1參考方法比較取材：20個結果分布于可報告范圍內的標本，使用參考方法與系統使用方法進行檢測，計算相對偏倚，符合廠家說明。2.2應用參考物質：參考物質：質控品、標準品（非系統使用批）、已通過能力驗證的質控標準物質（室間質評品）。

可接受范圍：偏倚值在參考物質允許的范圍為通過。2.3回收實驗：配制已知濃度的樣品，比較結果與預期值，可接受范圍90-110%。DepartmentofLaboratoryMedicine可報告范圍

可報告范圍等同于測量范圍，部分系統與線性范圍一致。測量范圍：測量誤差處于允許的極限（變異系數不大于10%）測量分布于高、低值界限內的范圍。可報告范圍：檢測系統對病人結果的檢測范圍。線性范圍：實驗系統的最終分析結果為可接受的線性的濃度范圍，此時非線性誤差應低于允許誤差。DepartmentofLaboratoryMedicine線性范圍驗證驗證前的準備：

操作人員熟練操作系統，能對標本進行正確處理；儀器狀態：性能指標與標稱值相符，有較好的精密度不存在明顯攜帶污染率；

同批號合格試劑；

標本，無明顯干擾檢測結果的因素；

標準品，配套或經驗證可用的；

標本數量，如為新建需9-11個濃度，如為驗證或評價，只需4-6個樣本。DepartmentofLaboratoryMedicine驗證方法：

標本制備：濃度范圍，預期測定值范圍內并包括與臨床有關的重要評價濃度。

通常取最大濃度與最小濃度標本按比例配比法制備。樣品號編號1（ml）編號2（ml）編號3（ml）編號4（ml）編號5（ml）低濃度血清5.003.752.501.250.00高濃度血清0.001.252.503.755.00線性范圍驗證DepartmentofLaboratoryMedicine線性范圍驗證

測量：每個樣本重復檢測3-4次，隨機檢測，雙盲測定，最好一天內完成。樣品號第一次第二次第三次第四次均值12345DepartmentofLaboratoryMedicine線性范圍驗證剔除離群值

方法：采用Crubbs法，單個離群值不需重測，多個值或數據過于分散應查找原因，糾正后重測。（剔除水平的α*值應不超過檢出水平的α值，除非另有約定，α*值應為0.01）。DepartmentofLaboratoryMedicine線性范圍驗證數據處理

方法：采用SPSS或SAS。回歸分析：回歸方程的線性檢驗價數多項式Rdf一階Y=b0+b1X2二階Y=b0+b1X+b2X23三階Y=b0+b1X+b2X2+b3X34數學模型：一階、二階、三階方程如擬合最優方程為多階，則驗證能否采用一階式方程，需采用t檢驗，計算t值，t=bi/Sei;計算n值，n=LxR-Rdf，雙邊檢驗，a=0.05,如b3、b2經檢驗P>0.05無顯著性差異則可用一階方程，如P<0.05為有顯著性差異，則進行下一步檢驗，即“非線性程度判斷”—臨床標準的線性與非線性檢驗。DepartmentofLaboratoryMedicine線性范圍驗證“非線性程度判斷”—臨床標準的線性與非線性檢驗。計算ADL值，查ADL表，擬合方程為多階性，否則為不可接受的非線性。數據精密度檢驗DepartmentofLaboratoryMedicine參考區間參考區間1驗證取20份標本，檢測如有95%結果在區間內為合格，如未達到需擴大標本量60（大樣本驗證）。2參考區間的制定2.1個體選擇，考慮因素：飲酒、獻血、血壓、疾病、妊娠與哺乳、藥物、肥胖、吸毒、特殊職業、環境、飲食、近期有無手術、吸煙、遺傳因素、輸血史、濫用維生素、運動等。2.2分組：年齡、性別、血型、種族、晝夜節律、取樣時的狀態及時間、月經周期、妊娠、運動、飲食、吸煙、職業、其它。DepartmentofLaboratoryMedicine參考區間

主體準備樣本采集樣本處理飲食進食與禁食藥物禁忌藥物攝取生物節律身體活動采集前休息壓力與情緒采集環境時間身體姿勢標本類型采集地點采集準備血流儀器和技術運送方式標本狀態分離儲存分析前準備試劑檢測系統DepartmentofLaboratoryMedicine參考區間系統要求：質評、質控、精密度與準確度驗證、溯源性證明離群值剔除：D/R大于等于R/3。最小標本量120例，如需分組，每組120例。（90%置信區間）198例為99%置信區間。參考區間確定：正態分布：均值加減1.96S（95%數據分布）、均值加減2.58S（99%分布范圍）非正態分布：取P2，S到P98，S分組：如S2>1.5S1或S2/S2-S1<3或Z>Z*需分組。DepartmentofLaboratoryMedicine自建系統性能驗證定義：實驗室根據自已意愿選定儀器、試劑與操作程序等組成的檢測系統。驗證項目：分析靈敏度、準確度、精密度、可報告范圍、分析特異性（干擾）、校準與質控方法。DepartmentofLaboratoryMedicine靈敏度驗證分析靈敏度包括：最低檢測限LLD、生物檢測限BLD、功能靈敏度FS功能靈敏度定義為：以天間重復CV為20%時對應檢測限樣品具有的平均濃度。標本準備：用稀釋液作空白，將標準品圍繞最低檢測限制成濃度梯度制備液，分別檢測10次，空白日內10次X均值SD制備液1日間10次X均值SDCV值制備液2X均值SDCV值制備液3X均值SD如：CV值=20%FSDepartmentofLaboratoryMedicine攜帶污染率取高低值標本各一份依次測高值3次(i1，i2，i3)、低值3次(j1，j2，j3)，計算各自的攜帶污染率:攜帶污染率(%)=(j1-j3)/(i3-j3)×100%。

特異性實驗將可疑的干擾的物質加入到檢測標本（濃度），以有無偏倚為檢驗標準，如有干擾，確度干擾物濃度范圍。DepartmentofLaboratoryMedicine第二部分

臨床血液學分析質量要求王全哲課件編號:JYK-K-03-012014年DepartmentofLaboratoryMedicine質量管理血液分析儀

儀器本底：檢測項目WBCRBCHbPlt檢測要求≤0.5x109/l≤0.05x1012/l≤2.0g/l≤10x109/l驗證方法：用稀釋液作為樣本連續檢測3次，最大值應在此范圍內。DepartmentofLaboratoryMedicine質量管理血液分析儀

攜帶污染率驗證方法：取高低濃度樣本，連續進行檢測，先檢測高濃度樣本3次連，再檢測低濃度樣品3次。檢測項目WBCRBCHbPlt檢測要求≤3.0%≤2.0%≤2.0%≤4.0%檢測項目結果1結果2結果3高值H1H2H3低值L1L2L3DepartmentofLaboratoryMedicine質量管理樣本濃度要求檢測項目WBCRBCHbPlt高值>9.0x10*9/L>6.2x10*12/L>220g/L>900x10*9低值<3<1.5<50<30DepartmentofLaboratoryMedicine質量管理批內精密度要求。取合格標本一份，重復檢測11次，取后10次檢測值，計算CV。檢測項目測量范圍變異系數WBC4-1010*9/L≤4%RBC3.5-5.510*12/L≤2%Hb110-160g/L≤1.5%Hct35-55%≤3%PLT100-30010*9/L≤5%MCV80-100fl≤2%MCH27-34pg≤2%MCHC320-360g/L≤2%批內精密度日間精密度要求。室內質控數據，剔除失控數據，統計CV。檢測項目變異系數WBC≤6%RBC≤2.5%Hb≤2%Hct≤4%PLT≤8%MCV≤2.5%MCH≤2.5%MCHC≤3%DepartmentofLaboratoryMedicine質量管理不同吸樣模式結果可比性；取五份臨床標本，不同模式檢沒測2次，計算結果均值的相對差異。檢測項目相對差異WBC