第二章

人類疾病動(dòng)物模型的意義和應(yīng)用

60-1第二章60-1第一節(jié)動(dòng)物模型在研究人類疾病中的作用60-2第一節(jié)60-2

人類疾病的動(dòng)物模型(animalmodelsofhumandiseases)，簡稱動(dòng)物模型或疾病模型，是指為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究而建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。60-3人類疾病的動(dòng)物模型(animalmodelsofh

復(fù)制人類疾病的動(dòng)物模型，是醫(yī)學(xué)、藥學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的重要組成部分，已廣泛應(yīng)用于對(duì)人類疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、防治技術(shù)和防治藥物的研究探索中。

60-4復(fù)制人類疾病的動(dòng)物模型，是醫(yī)學(xué)、藥學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的重要人類疾病動(dòng)物模型的發(fā)展最早可追溯到18世紀(jì)。

⊙1796年英國醫(yī)生詹納（EdwardJenner）：人種牛痘后，能避免感染天花

⊙1876年德國醫(yī)生郭霍（RobertKoch）：炭疽桿菌——小鼠炭疽病——分離出炭疽桿菌60-5人類疾病動(dòng)物模型的發(fā)展最早可追溯到18世紀(jì)。⊙187

⊙1884年巴斯德（LouisPasteur）成功研制狂犬病疫苗⊙1965年美國醫(yī)生蓋都塞克（Gajdusek）發(fā)現(xiàn)Kuru病60-6⊙1884年巴斯德（LouisPasteur）成功

20世紀(jì)60年代，學(xué)術(shù)界正式提出了“動(dòng)物模型”的概念。

1961年在美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）主辦的第一次比較病理研討會(huì)上，首次提出加強(qiáng)開發(fā)人類疾病動(dòng)物模型的研究。

▲1968年美國聯(lián)邦實(shí)驗(yàn)生物學(xué)學(xué)會(huì)召開了“人類疾病研究中動(dòng)物模型的選擇”專題會(huì)。60-720世紀(jì)60年代，學(xué)術(shù)界正式提出了“動(dòng)物模型”的概念

▲

1968年美國出版《生物醫(yī)學(xué)研究的動(dòng)物模型》；▲

1972年美國

《人類疾病動(dòng)物模型手冊(cè)》，至1986年已出版15分冊(cè)。

▲1982年Hegreberg和Leathers編輯出版《動(dòng)物模型目錄》；

▲1979~1982年日本學(xué)者《難治疾患模型的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)》。60-8▲1982年Hegreberg和Leathers

20世紀(jì)80年代后，現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用到動(dòng)物模型研究中，建立了許多轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型，不僅加速了人類疾病動(dòng)物模型研究的進(jìn)程，也豐富了動(dòng)物模型的種類和內(nèi)容。

有資料記載的模型已有4000余種，加上利用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)制作的動(dòng)物模型，種類更多。然而，真正能夠保存下來并得到廣泛應(yīng)用的動(dòng)物模型不足二分之一。

60-920世紀(jì)80年代后，現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用到動(dòng)物模型研究動(dòng)物模型在研究人類疾病中的意義和作用

1.利用動(dòng)物進(jìn)行模擬實(shí)驗(yàn),可免去對(duì)人體傷害

對(duì)人體有嚴(yán)重?fù)p害的因素(創(chuàng)傷、劇毒物、致癌物、病原微生物等),是不能直接在人體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的。動(dòng)物作為人的“替身”,作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。60-10動(dòng)物模型在研究人類疾病中的意義和作用對(duì)人體有嚴(yán)重?fù)p害的因

2.可以嚴(yán)格控制條件，排除各種干擾

人類疾病的影響因素極多。很難在同一時(shí)間找到條件相同且數(shù)量足夠的病人。

復(fù)制動(dòng)物模型則可按實(shí)驗(yàn)?zāi)康?嚴(yán)格挑選動(dòng)物和控制實(shí)驗(yàn)條件,最大限度減少可變因素,突出單一可控的實(shí)驗(yàn)因素。意義和作用60-112.可以嚴(yán)格控制條件，排除各種干擾意義和作用60

比如復(fù)制缺鉀性心肌壞死動(dòng)物模型

一組動(dòng)物用缺鉀飼料一組動(dòng)物用含鉀飼料

唯一差別就是飼料中的鉀含量不同這樣就突出了缺鉀因素(處理因素)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的因果聯(lián)系意義和作用60-12比如復(fù)制缺鉀性心肌壞死動(dòng)物模型意義和作用60-12

3.提高復(fù)制成功率和縮短病程,便于多次重復(fù)

人類許多疾病的發(fā)生率低,潛伏期長,病程長,在有限時(shí)間內(nèi)很難重復(fù)觀察。而復(fù)制動(dòng)物模型則可以通過強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)因素,縮短發(fā)病時(shí)間和提高發(fā)生率。

如高氟環(huán)境的居民,發(fā)生重癥氟骨癥需10~20年,累計(jì)患病率一般為2%左右。用大鼠復(fù)制氟骨癥模型—加大投氟劑量＋食餌低鈣,在2~4個(gè)月內(nèi)約100%發(fā)病。意義和作用60-133.提高復(fù)制成功率和縮短病程,便于多次重復(fù)

4.

便于實(shí)驗(yàn)樣品的全面采集

臨床觀察—采血、尿或其他體液樣品,活檢、手術(shù)切除標(biāo)本、尸檢,使研究受到很多限制。

動(dòng)物模型—實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),采集各種樣品,能更系統(tǒng)、更準(zhǔn)時(shí)觀察疾病發(fā)展過程;處死動(dòng)物之前或處死當(dāng)時(shí)給予必要的預(yù)處理,如給予某些標(biāo)記或預(yù)先灌注固定等,更利于保證實(shí)驗(yàn)效果。意義和作用60-144.便于實(shí)驗(yàn)樣品的全面采集意義和作用60-14

動(dòng)物模型具有很多優(yōu)越性,但也應(yīng)看到局限性歸根到底,復(fù)制動(dòng)物模型是一種模擬性間接實(shí)驗(yàn),是借用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人體大致近似的生物學(xué)性質(zhì)與反應(yīng)特點(diǎn),來間接探索病因、發(fā)病機(jī)制或藥物作用效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效,僅僅是對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行當(dāng)時(shí)的條件而言,在作結(jié)論時(shí)必須十分謹(jǐn)慎。意義和作用60-15動(dòng)物模型具有很多優(yōu)越性,但也應(yīng)看到局限性意義和作

因此,用某一種動(dòng)物得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不一定適用于另一種動(dòng)物;如果想肯定一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最好采用兩種以上動(dòng)物進(jìn)行比較觀察,而且其中一種應(yīng)是非嚙齒類動(dòng)物。

用動(dòng)物模型所得出的結(jié)論更不能簡單地照搬到臨床,通過動(dòng)物模型篩選的藥物，必須再經(jīng)臨床試驗(yàn)的檢驗(yàn)。意義和作用60-16因此,用某一種動(dòng)物得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不一定適用于第二節(jié)

動(dòng)物模型的分類60-17第二節(jié)60-17

現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)已形成大量動(dòng)物模型,而且還不斷改進(jìn)、不斷增加。可以從不同角度、按不同標(biāo)準(zhǔn)對(duì)眾多的模型進(jìn)行分類。模型的分類60-18現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)已形成大量動(dòng)物模型,而且還不斷改進(jìn)、不斷增加。

一、按模型的復(fù)制途徑分類

按模型的復(fù)制途徑,動(dòng)物模型可分為自發(fā)性和誘發(fā)性

1.自發(fā)性動(dòng)物模型未經(jīng)人為干預(yù),在自然情況下發(fā)病。這種模型通常通過培育近交系動(dòng)物和發(fā)現(xiàn)突變系動(dòng)物來獲得。模型的分類60-19一、按模型的復(fù)制途徑分類模型的分類60-19

如AKR小鼠的白血病、C3H小鼠的乳腺癌;自發(fā)性高血壓大鼠、肥胖癥小鼠等。這類模型由于疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)疾病很相近,有很大應(yīng)用價(jià)值。模型的分類60-20如AKR小鼠的白血病、C3H小鼠的乳腺癌;自發(fā)性高血壓

2.誘發(fā)性動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加人為處理,出現(xiàn)與人類疾病類似的改變,即復(fù)制動(dòng)物模型,簡稱“造模”。例如，結(jié)扎家兔冠狀動(dòng)脈復(fù)制心肌梗死模型。

這類模型制作方法一般比較簡便,實(shí)驗(yàn)條件容易控制,因而應(yīng)用范圍很廣泛。模型的分類60-212.誘發(fā)性動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加人為處理,模型的分類

3．轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因敲除動(dòng)物60-22模型的分類3．轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型60-22模型的分類

到目前為止，已建立了數(shù)千種轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物，廣泛應(yīng)用于多個(gè)研究領(lǐng)域，并取得了許多有價(jià)值的研究成果。

然而，制備上述動(dòng)物需要熟練的操作技術(shù)，成功率不是很高，儀器價(jià)格昂貴，很難在短期內(nèi)制備出大量模型動(dòng)物。60-23模型的分類到目前為止，已建立了數(shù)千種轉(zhuǎn)基因和基因敲

二、按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類

按復(fù)制模型所用的對(duì)象可分為整體動(dòng)物模型和離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

1.整體動(dòng)物模型通常所說的動(dòng)物模型都是指整體動(dòng)物模型,造模是在動(dòng)物體內(nèi)(invivo)進(jìn)行。模型的分類60-24二、按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類模型的分類60-24

2.離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?shí)驗(yàn)是在體外(invitro)進(jìn)行,包括各種體外的器官、組織、細(xì)胞培養(yǎng)。由于體外培養(yǎng)所使用的材料,通常都取自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,因此可視為整體動(dòng)物模型的延伸和擴(kuò)展。模型的分類60-252.離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?shí)驗(yàn)是在體外(invitro)進(jìn)

離體模型有一定優(yōu)點(diǎn)：減少動(dòng)物的使用量,控制實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)周期短,能大量重復(fù)等。

但離體模型脫離了完整機(jī)體的內(nèi)環(huán)境和多層次的調(diào)節(jié)機(jī)制;對(duì)體外實(shí)驗(yàn)所能施加的干預(yù)因素比較少,因而使用時(shí)會(huì)遇到許多限制。整體模型和離體模型應(yīng)該說各有所長,可以優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。模型的分類60-26離體模型有一定優(yōu)點(diǎn)：減少動(dòng)物的使用量,控制實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)

三、按造模的目標(biāo)分類

1.獨(dú)立疾病模型能模擬人類發(fā)生的各種獨(dú)立疾病,如胃潰瘍、腎炎等。這類模型構(gòu)成人類疾病模型的主體,是本課程討論的主要內(nèi)容。模型的分類60-27三、按造模的目標(biāo)分類模型的分類60-27

2．綜合征模型模擬人類的綜合征(syndrome)。綜合征并非獨(dú)立疾病,而是發(fā)生在不同疾病或病理情況下某些癥狀、體征的組合。例如以心臟房室傳導(dǎo)阻滯、突發(fā)性意識(shí)喪失為特點(diǎn)的Adams-Stokes綜合征;以暴發(fā)性肺間質(zhì)及肺泡水腫為特點(diǎn)的急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、代謝綜合征、更年期綜合征、腎病綜合征等。模型的分類60-282．綜合征模型模擬人類的綜合征(syndrome)

3.基本病理過程模型

是模擬病理過程作為目標(biāo)病理過程：不同疾病中一些共同的改變。

如發(fā)熱、休克、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、電解質(zhì)紊亂等,均可作為模擬的目標(biāo)復(fù)制相應(yīng)的動(dòng)物模型。

模型的分類60-293.基本病理過程模型是模擬病理過程作為目標(biāo)病理

四、按中醫(yī)理論體系分類按中醫(yī)理論體系建立合適的動(dòng)物模型，一直是中醫(yī)藥研究的重要課題。1960年鄺安堃等用大劑量腎上腺皮質(zhì)激素復(fù)制了小鼠陽虛模型。迄今已創(chuàng)建了20多類中醫(yī)證候動(dòng)物模型，并編著了“中醫(yī)證候動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)方法”一書。但模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、觀察指標(biāo)等也有待進(jìn)一步完善和改進(jìn)。模型的分類60-30四、按中醫(yī)理論體系分類模型的分類60-30第三節(jié)復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇60-31第三節(jié)60-31首先要挑選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由于動(dòng)物模型種類繁多,涉及的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多種多樣,因此難以歸納出普遍的原則。一般,在選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)考慮以下幾方面的因素：動(dòng)物的選擇60-32首先要挑選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由于動(dòng)物模型種類繁多,涉及的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多種

1.相似性

動(dòng)物模型與人類疾病相似。例如

高血壓模型—自發(fā)性高血壓大鼠擴(kuò)張性心肌病—敘利亞金倉鼠

腦炎或脊髓灰質(zhì)炎—猴

結(jié)核病模型—豚鼠

在可能條件下,復(fù)制模型應(yīng)選進(jìn)化程度較高動(dòng)物。動(dòng)物的選擇60-331.相似性

動(dòng)物模型與人類疾病相似。例如

2.適用性

在有些情況下,復(fù)制動(dòng)物模型只是根據(jù)動(dòng)物組織器官的結(jié)構(gòu)、功能、病理反應(yīng)特殊性來選擇動(dòng)物,利用其某一方面的特性達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?dòng)物的選擇60-342.適用性

在有些情況下,復(fù)制動(dòng)物模型只是

例如

研究雄激素的作用—雄雞雞冠

研究甲狀腺素對(duì)發(fā)育的影響—蝌蚪

研究嘔吐反應(yīng)—鴿或貓(敏感),不用大鼠、小鼠(缺乏嘔吐反應(yīng)).

腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀呈?/p>

摘除甲狀腺的動(dòng)物模型—兔(甲狀旁腺分散)動(dòng)物的選擇60-35例如

研究雄激素的作用—雄雞雞冠

研究甲狀

3.可重復(fù)性

理想的動(dòng)物模型應(yīng)在相同實(shí)驗(yàn)條件下能夠重復(fù),應(yīng)力求減少動(dòng)物個(gè)體差異,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定一致。為此,應(yīng)盡可能選用遺傳背景明確、微生物控制清楚的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。動(dòng)物的選擇60-363.可重復(fù)性

理想的動(dòng)物模型應(yīng)在相同實(shí)驗(yàn)條件下

就同一種動(dòng)物而言,近交系較遠(yuǎn)交系的均一性好,但近交系動(dòng)物也有費(fèi)用高和抗病力弱等缺點(diǎn)。而封閉群動(dòng)物(遠(yuǎn)交系)雖然個(gè)體間的一致性不如近交系,但遺傳特性及反應(yīng)性保持相對(duì)穩(wěn)定,且繁殖率高,抗病力強(qiáng),因而在很多情況下仍可選用。

動(dòng)物的選擇60-37就同一種動(dòng)物而言,近交系較遠(yuǎn)交系的均一性好,但近交系動(dòng)

4.經(jīng)濟(jì)性

在符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康那疤嵯?應(yīng)選擇體型小、易飼養(yǎng)、性情溫順、費(fèi)用較低的動(dòng)物。靈長目動(dòng)物—最近似人類,可患許多人類疾病,但費(fèi)用昂貴和飼養(yǎng)不便,限制了它的使用。動(dòng)物的選擇60-384.經(jīng)濟(jì)性

在符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康那疤嵯?應(yīng)選擇體型第四節(jié)

動(dòng)物模型設(shè)計(jì)中應(yīng)注意的一些問題60-39第四節(jié)60-39

成功復(fù)制動(dòng)物模型主要取決于三方面因素：一.選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物二.動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境適宜三.造模方法適當(dāng)和技術(shù)操作正確

下面就模型設(shè)計(jì)和評(píng)價(jià)中應(yīng)注意的其他問題進(jìn)行討論.

注意的問題60-40成功復(fù)制動(dòng)物模型主要取決于三方面因素：注意的問題60-

1.應(yīng)盡力排除非實(shí)驗(yàn)因素的干擾

利用動(dòng)物模型進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)因素(處理因素)是指為造模所施加的因素及有目的給予的因素(藥物、毒物等)。除此之外,其他能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的非實(shí)驗(yàn)因素都應(yīng)盡力排除。注意的問題

糖尿病模型糖尿病＋治療藥物治療藥物=實(shí)驗(yàn)因素(處理因素)60-411.應(yīng)盡力排除非實(shí)驗(yàn)因素的干擾注意的問題糖尿病

飼養(yǎng)環(huán)境要標(biāo)準(zhǔn)(光線、噪聲、溫度、濕度、氨氣濃度等達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)),過分擁擠,喂養(yǎng)不當(dāng)?shù)?都可能產(chǎn)生動(dòng)物夾雜癥。這些非實(shí)驗(yàn)因素,必須在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段和整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中盡力加以防范.注意的問題60-42飼養(yǎng)環(huán)境要標(biāo)準(zhǔn)(光線、噪聲、溫度、濕度、氨氣濃度等達(dá)到

2.處理好研制新模型和應(yīng)用傳統(tǒng)模型的關(guān)系

人類疾病的動(dòng)物模型處于不斷發(fā)展與完善中，很多疾病還沒有動(dòng)物模型或模型很不理想，因而,研制新模型是非常必要的。注意的問題

建立新的動(dòng)物模型，這本身就屬于創(chuàng)新性研究。但有些研究工作，則要求應(yīng)用傳統(tǒng)模型,采用標(biāo)準(zhǔn)化的造模方法。60-432.處理好研制新模型和應(yīng)用傳統(tǒng)模型的關(guān)系注意的

現(xiàn)有模型4000余種，并不斷發(fā)展，但有些疾病尚無理想模型，因而研制新模型十分具有創(chuàng)新性的工作。

一般,病因、發(fā)病機(jī)制、藥物作用機(jī)制等基礎(chǔ)性研究,應(yīng)注意模型的改進(jìn)和新模型的建立。從事新藥的藥效或毒性等開發(fā)性研究,應(yīng)優(yōu)先利用成熟的傳統(tǒng)動(dòng)物模型,采用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)方法。注意的問題60-44現(xiàn)有模型4000余種，并不斷發(fā)展，但有些疾病尚無理想模型

3.對(duì)造模與人類疾病相似性和差異性應(yīng)有正確認(rèn)識(shí)

復(fù)制人類疾病模型,總得在某些方面與人類疾病具有相似性,沒有任何相似性,便不成為模型。但是,動(dòng)物模型與人類疾病總是存在一定差異，對(duì)相似性不能苛求,對(duì)差異性不應(yīng)忽視,正確處理相似性與差異性兩者的關(guān)系。注意的問題60-453.對(duì)造模與人類疾病相似性和差異性應(yīng)有正確認(rèn)識(shí)注意

對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的相似性不應(yīng)求全責(zé)備,與人類疾病近似,不能說分毫不差。如用家兔復(fù)制高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型。注意的問題

動(dòng)物模型的優(yōu)點(diǎn)之一：純化、簡化、強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)條件,縮短發(fā)病時(shí)間和提高發(fā)病率。但不能把使用某些極端化條件下得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,任意外推到人類。60-46對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的相似性不應(yīng)求全責(zé)備,與人類疾病近似,不

4.對(duì)照必須完善

對(duì)照（control）是指在實(shí)驗(yàn)時(shí)針對(duì)實(shí)驗(yàn)組而設(shè)立的可供對(duì)比的一組對(duì)象。

評(píng)價(jià)造模動(dòng)物體內(nèi)的各種變化、干預(yù)措施的效果,都要靠與相應(yīng)的對(duì)照作比較來判斷—設(shè)立各種對(duì)照組.在設(shè)立對(duì)照時(shí)要求“組間一致”性，除了觀察研究的因素外，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的一切條件應(yīng)盡量一致，要有完全的可比性，才能消除偏性所致的誤差，對(duì)觀察的項(xiàng)目得出正確的科學(xué)結(jié)論。注意的問題60-474.對(duì)照必須完善注意的問題60-47

常用對(duì)照的類型：

空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)對(duì)照(如假投藥、假手術(shù))陽性對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,等

注意的問題60-48常用對(duì)照的類型：注意的問題60-48

注意的問題

在生物醫(yī)學(xué)研究中常用的對(duì)照有以下幾種：

(1)空白對(duì)照:

即不施加任何處理因素或干預(yù)措施，但其他實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組相同，這種對(duì)照組叫空白對(duì)照。（通常用于無損傷、無刺激的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)室研究）

60-49注意的問題在生物醫(yī)學(xué)研究中常用的對(duì)照有以下幾種注意的問題

(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照:又稱假處理對(duì)照，此對(duì)照組也施加某種處理因素，但不是所研究的處理因素。這些某種處理因素包括：

實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照：灌胃、注射、穿刺、手術(shù)等。如給動(dòng)物結(jié)扎冠狀動(dòng)脈復(fù)制心肌梗死模型的假手術(shù)組。

溶媒對(duì)照：以性狀相同的溶媒作為對(duì)照，可防止誤將溶媒的作用當(dāng)做藥物的作用，得出假陽性結(jié)果。60-50注意的問題(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照:又稱假處理對(duì)照，此對(duì)照組也施注意的問題

在藥效學(xué)研究中，實(shí)驗(yàn)對(duì)照通常也稱模型對(duì)照，即所謂“模型組”，模型組動(dòng)物要經(jīng)受同樣的造模處理，除了不給予被研究的藥物外，其他處理均同給藥組。設(shè)立模型對(duì)照的目的是評(píng)價(jià)藥物的有效性。60-51注意的問題在藥效學(xué)研究中，實(shí)驗(yàn)對(duì)照通常也稱模型對(duì)注意的問題

(3)陽性對(duì)照:陽性對(duì)照藥應(yīng)符合“公認(rèn)有效，類同可比”的原則，采用公認(rèn)療效肯定的同類藥物，要求作用相同，給藥途徑盡量一致，應(yīng)選用我國藥典或部頒標(biāo)準(zhǔn)收藏，或近年批準(zhǔn)生產(chǎn)的合法藥物，在標(biāo)準(zhǔn)條件下與受試藥進(jìn)行對(duì)比。60-52注意的問題(3)陽性對(duì)照:陽性對(duì)照藥應(yīng)符合“公認(rèn)有效，注意的問題

中藥研究陽性對(duì)照藥還應(yīng)注意的功能主治、劑型、給藥途徑的類同性。中藥的作用范圍較廣，有的作用可能與一個(gè)陽性藥不完全相同，可再選作用相似的其他中藥或化學(xué)藥，故一個(gè)受試藥可能設(shè)幾個(gè)陽性對(duì)照藥。60-53注意的問題中藥研究陽性對(duì)照藥還應(yīng)注意的功能主治、劑型注意的問題

(4)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:不設(shè)立對(duì)照組，用標(biāo)準(zhǔn)值或正常值作對(duì)照。

(5)自身對(duì)照:

一是處理前、后自身對(duì)照；二是同時(shí)自身對(duì)照，如在同一受試對(duì)象身體的左、右對(duì)稱部位分別給予和不給予處理因素，觀察某種藥物的致敏作用。

60-54注意的問題(4)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:不設(shè)立對(duì)照組，用標(biāo)準(zhǔn)值或正常值注意的問題

(6)相互對(duì)照:各實(shí)驗(yàn)組之間進(jìn)行相互對(duì)照。例如幾種藥物(新藥與舊藥)治療同一種病，對(duì)比它們之間的療效。

(7)歷史對(duì)照:

(8)配對(duì)對(duì)照:將條件最相近的兩個(gè)個(gè)體配成對(duì)子，分別給予不同的處理。配對(duì)對(duì)照的優(yōu)點(diǎn)是減少個(gè)體差異，節(jié)省樣本例數(shù)，均衡影響因素，有助于減少或消除抽樣誤差。60-55注意的問題(6)相互對(duì)照:各實(shí)驗(yàn)組之間進(jìn)行相互對(duì)照。注意的問題在藥理學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：▲延胡素水煎劑對(duì)小鼠熱板致痛的鎮(zhèn)痛作用

（延胡素水煎劑，0.2ml/10g,灌胃,給藥后30min小鼠置于55℃熱板上，開始計(jì)疼痛反應(yīng)）

對(duì)照組（等體積的生理鹽水：0.2ml/10g

）延胡素水煎劑高劑量組(20g/kg,0.2ml/10g)延胡素水煎劑中劑量組(10g/kg,0.2ml/10g)延胡素水煎劑低劑量組(5g/kg,0.2ml/10g)陽性藥對(duì)照組(哌替啶50mg/kg,0.2ml/10g,灌胃)

（灌胃—實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照）60-56注意的問題在藥理學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：60-56注意的問題在毒理學(xué)試驗(yàn)中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：▲結(jié)核復(fù)合疫苗猴皮下注射給藥長期毒性試驗(yàn)

（輔料:NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、谷氨酸鈉、海藻糖）

（復(fù)合疫苗用生理鹽水稀釋成不同同濃度，SC)對(duì)照組（生理鹽水,0.1ml/kg,SC）輔料對(duì)照組（輔料,0.1ml/kg,SC

）

復(fù)合疫苗高劑量組（10μg/kg,0.1ml/kg,SC)

復(fù)合疫苗中劑量組（5μg/kg,0.1ml/kg,SC)

復(fù)合疫苗低劑量組（2.5μg/kg,0.1ml/kg,SC)（SC—實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照）

60-57注意的問題在毒理學(xué)試驗(yàn)中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：60-5注意的問題藥用輔料(包括溶媒、基質(zhì)等）：加入藥物中除主藥以外的一切藥用物料的統(tǒng)稱，有66種。近年有一些緩釋輔料、納米材料輔料等.

有些藥物的溶媒是具有藥理作用的，如：

*靜脈注射吐溫(Tween)能降壓、溶血、升高血清膽固醇;（研究犬高血壓注射給藥時(shí)，不能用吐溫80，因它可引起組胺釋放，造成血壓下降）

*

DMSO有止痛、抗炎、退熱、擴(kuò)血管、抗菌等作用。60-58注意的問題藥用輔料(包括溶媒、基質(zhì)等）：加入藥物中注意的問題在藥效學(xué)、毒理學(xué)研究的指導(dǎo)文件中關(guān)于設(shè)溶媒對(duì)照組的規(guī)定：如果受試藥中含有特殊輔料(包括溶媒、基質(zhì)等)，而溶媒、基質(zhì)本身具有活性，則除了設(shè)空白對(duì)照外，尚應(yīng)設(shè)輔料對(duì)照，以了解輔料對(duì)藥效的影響，以防止誤將溶媒的作用當(dāng)作藥物的作用，得出假陽性結(jié)果。60-59注意的問題在藥效學(xué)、毒理學(xué)研究的指導(dǎo)文件中關(guān)于設(shè)溶注意的問題

※不溶于水的藥物如果采用助溶劑助溶時(shí)，除了設(shè)空白對(duì)照外，尚應(yīng)設(shè)助溶劑對(duì)照。

※用乙醇、丙二醇、二甲基亞砜(DMSO)助溶的藥物，或用吐溫60、吐溫80、阿拉伯膠、2%~3%淀粉、0.5%羧甲基纖維素等制成的混懸液藥物，必須設(shè)相同濃度的溶劑對(duì)照。

60-60注意的問題※不溶于水的藥物如果采用助溶劑助溶時(shí)，注意的問題在藥效學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：

空白對(duì)照組

(除不施加處理因素外，其他實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組相同)

模型組（模型對(duì)照組)陽性對(duì)照組溶媒對(duì)照組（?）受試藥高劑量組受試藥中劑量組受試藥低劑量組60-61注意的問題在藥效學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：60-61注意的問題

在實(shí)驗(yàn)研究中,可簡化分組數(shù)(僅供參考)：

#研究苦碟子膠囊(懸于蒸餾水)對(duì)糖尿病大鼠降低血糖的效果

空白對(duì)照組（蒸餾水,1ml/100g,

1次/日,灌胃)模型組（蒸餾水,1ml/100g,

1次/日,灌胃)陽性對(duì)照組×溶媒對(duì)照組×苦碟子組(懸于蒸餾水的苦碟子100mg/kg，1ml/100g,1次/日,灌胃)

（灌胃—實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照）60-62注意的問題在實(shí)驗(yàn)研究中,可簡化分組數(shù)(僅供參考)：60-注意的問題#研究大鼠腎間質(zhì)纖維化腎皮質(zhì)CTGFmRNA表達(dá)的特點(diǎn)(UUO模型)

假手術(shù)組

模型組空白對(duì)照組(?)（假手術(shù)—實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照）60-63注意的問題#研究大鼠腎間質(zhì)纖維化腎皮質(zhì)CTGFmR注意的問題補(bǔ)腎化瘀方對(duì)胰島素抵抗大鼠胰島素受體底物-1的影響§空白對(duì)照組（中性茶油，10ml/kg,灌胃）§造模組（中性茶油，10ml/kg,灌胃）§造模+補(bǔ)腎化瘀方組（藥物溶于中性茶油，2.5g/ml,每日10ml/kg,灌胃）60-64注意的問題補(bǔ)腎化瘀方對(duì)胰島素抵抗大鼠胰島素受體底物-1的影響注意的問題理解藥效學(xué)研究中常用分組方式及意義：

空白對(duì)照組

[除不施加處理因素(受試藥)外,其他實(shí)驗(yàn)條件與實(shí)驗(yàn)組相同]

模型組（模型對(duì)照組)陽性對(duì)照組

溶媒對(duì)照組（?）受試藥高劑量組受試藥中劑量組受試藥低劑量組60-65注意的問題理解藥效學(xué)研究中常用分組方式及意義：60-65注意的問題

對(duì)于設(shè)立各種對(duì)照組，必須在數(shù)量、質(zhì)量諸方面堅(jiān)持隨機(jī)、對(duì)等原則，不可“偷工減料”。統(tǒng)計(jì)學(xué)研究表明，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組例數(shù)相等時(shí)，統(tǒng)計(jì)效率最高。輕視對(duì)照或僅設(shè)少數(shù)動(dòng)物作對(duì)照是不妥的。

60-66注意的問題對(duì)于設(shè)立各種對(duì)照組，必須在數(shù)量、質(zhì)量諸方

本章學(xué)習(xí)要點(diǎn)?動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的“3R”原則?疾病動(dòng)物模型在研究人類疾病中的作用?復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本原則?如何排除非實(shí)驗(yàn)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾?疾病動(dòng)物模型設(shè)計(jì)中應(yīng)注意的問題?實(shí)驗(yàn)時(shí)設(shè)置對(duì)照的意義和常用對(duì)照的含義?藥效學(xué)研究中對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組的設(shè)立60-67本章學(xué)習(xí)要點(diǎn)60-67

Thanks60-68Thanks60-68第二章

人類疾病動(dòng)物模型的意義和應(yīng)用

60-69第二章60-1第一節(jié)動(dòng)物模型在研究人類疾病中的作用60-70第一節(jié)60-2

人類疾病的動(dòng)物模型(animalmodelsofhumandiseases)，簡稱動(dòng)物模型或疾病模型，是指為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究而建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。60-71人類疾病的動(dòng)物模型(animalmodelsofh

復(fù)制人類疾病的動(dòng)物模型，是醫(yī)學(xué)、藥學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的重要組成部分，已廣泛應(yīng)用于對(duì)人類疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、防治技術(shù)和防治藥物的研究探索中。

60-72復(fù)制人類疾病的動(dòng)物模型，是醫(yī)學(xué)、藥學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的重要人類疾病動(dòng)物模型的發(fā)展最早可追溯到18世紀(jì)。

⊙1796年英國醫(yī)生詹納（EdwardJenner）：人種牛痘后，能避免感染天花

⊙1876年德國醫(yī)生郭霍（RobertKoch）：炭疽桿菌——小鼠炭疽病——分離出炭疽桿菌60-73人類疾病動(dòng)物模型的發(fā)展最早可追溯到18世紀(jì)。⊙187

⊙1884年巴斯德（LouisPasteur）成功研制狂犬病疫苗⊙1965年美國醫(yī)生蓋都塞克（Gajdusek）發(fā)現(xiàn)Kuru病60-74⊙1884年巴斯德（LouisPasteur）成功

20世紀(jì)60年代，學(xué)術(shù)界正式提出了“動(dòng)物模型”的概念。

1961年在美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）主辦的第一次比較病理研討會(huì)上，首次提出加強(qiáng)開發(fā)人類疾病動(dòng)物模型的研究。

▲1968年美國聯(lián)邦實(shí)驗(yàn)生物學(xué)學(xué)會(huì)召開了“人類疾病研究中動(dòng)物模型的選擇”專題會(huì)。60-7520世紀(jì)60年代，學(xué)術(shù)界正式提出了“動(dòng)物模型”的概念

▲

1968年美國出版《生物醫(yī)學(xué)研究的動(dòng)物模型》；▲

1972年美國

《人類疾病動(dòng)物模型手冊(cè)》，至1986年已出版15分冊(cè)。

▲1982年Hegreberg和Leathers編輯出版《動(dòng)物模型目錄》；

▲1979~1982年日本學(xué)者《難治疾患模型的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)》。60-76▲1982年Hegreberg和Leathers

20世紀(jì)80年代后，現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用到動(dòng)物模型研究中，建立了許多轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型，不僅加速了人類疾病動(dòng)物模型研究的進(jìn)程，也豐富了動(dòng)物模型的種類和內(nèi)容。

有資料記載的模型已有4000余種，加上利用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)制作的動(dòng)物模型，種類更多。然而，真正能夠保存下來并得到廣泛應(yīng)用的動(dòng)物模型不足二分之一。

60-7720世紀(jì)80年代后，現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用到動(dòng)物模型研究動(dòng)物模型在研究人類疾病中的意義和作用

1.利用動(dòng)物進(jìn)行模擬實(shí)驗(yàn),可免去對(duì)人體傷害

對(duì)人體有嚴(yán)重?fù)p害的因素(創(chuàng)傷、劇毒物、致癌物、病原微生物等),是不能直接在人體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的。動(dòng)物作為人的“替身”,作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。60-78動(dòng)物模型在研究人類疾病中的意義和作用對(duì)人體有嚴(yán)重?fù)p害的因

2.可以嚴(yán)格控制條件，排除各種干擾

人類疾病的影響因素極多。很難在同一時(shí)間找到條件相同且數(shù)量足夠的病人。

復(fù)制動(dòng)物模型則可按實(shí)驗(yàn)?zāi)康?嚴(yán)格挑選動(dòng)物和控制實(shí)驗(yàn)條件,最大限度減少可變因素,突出單一可控的實(shí)驗(yàn)因素。意義和作用60-792.可以嚴(yán)格控制條件，排除各種干擾意義和作用60

比如復(fù)制缺鉀性心肌壞死動(dòng)物模型

一組動(dòng)物用缺鉀飼料一組動(dòng)物用含鉀飼料

唯一差別就是飼料中的鉀含量不同這樣就突出了缺鉀因素(處理因素)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的因果聯(lián)系意義和作用60-80比如復(fù)制缺鉀性心肌壞死動(dòng)物模型意義和作用60-12

3.提高復(fù)制成功率和縮短病程,便于多次重復(fù)

人類許多疾病的發(fā)生率低,潛伏期長,病程長,在有限時(shí)間內(nèi)很難重復(fù)觀察。而復(fù)制動(dòng)物模型則可以通過強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)因素,縮短發(fā)病時(shí)間和提高發(fā)生率。

如高氟環(huán)境的居民,發(fā)生重癥氟骨癥需10~20年,累計(jì)患病率一般為2%左右。用大鼠復(fù)制氟骨癥模型—加大投氟劑量＋食餌低鈣,在2~4個(gè)月內(nèi)約100%發(fā)病。意義和作用60-813.提高復(fù)制成功率和縮短病程,便于多次重復(fù)

4.

便于實(shí)驗(yàn)樣品的全面采集

臨床觀察—采血、尿或其他體液樣品,活檢、手術(shù)切除標(biāo)本、尸檢,使研究受到很多限制。

動(dòng)物模型—實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),采集各種樣品,能更系統(tǒng)、更準(zhǔn)時(shí)觀察疾病發(fā)展過程;處死動(dòng)物之前或處死當(dāng)時(shí)給予必要的預(yù)處理,如給予某些標(biāo)記或預(yù)先灌注固定等,更利于保證實(shí)驗(yàn)效果。意義和作用60-824.便于實(shí)驗(yàn)樣品的全面采集意義和作用60-14

動(dòng)物模型具有很多優(yōu)越性,但也應(yīng)看到局限性歸根到底,復(fù)制動(dòng)物模型是一種模擬性間接實(shí)驗(yàn),是借用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人體大致近似的生物學(xué)性質(zhì)與反應(yīng)特點(diǎn),來間接探索病因、發(fā)病機(jī)制或藥物作用效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效,僅僅是對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行當(dāng)時(shí)的條件而言,在作結(jié)論時(shí)必須十分謹(jǐn)慎。意義和作用60-83動(dòng)物模型具有很多優(yōu)越性,但也應(yīng)看到局限性意義和作

因此,用某一種動(dòng)物得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不一定適用于另一種動(dòng)物;如果想肯定一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最好采用兩種以上動(dòng)物進(jìn)行比較觀察,而且其中一種應(yīng)是非嚙齒類動(dòng)物。

用動(dòng)物模型所得出的結(jié)論更不能簡單地照搬到臨床,通過動(dòng)物模型篩選的藥物，必須再經(jīng)臨床試驗(yàn)的檢驗(yàn)。意義和作用60-84因此,用某一種動(dòng)物得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不一定適用于第二節(jié)

動(dòng)物模型的分類60-85第二節(jié)60-17

現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)已形成大量動(dòng)物模型,而且還不斷改進(jìn)、不斷增加。可以從不同角度、按不同標(biāo)準(zhǔn)對(duì)眾多的模型進(jìn)行分類。模型的分類60-86現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)已形成大量動(dòng)物模型,而且還不斷改進(jìn)、不斷增加。

一、按模型的復(fù)制途徑分類

按模型的復(fù)制途徑,動(dòng)物模型可分為自發(fā)性和誘發(fā)性

1.自發(fā)性動(dòng)物模型未經(jīng)人為干預(yù),在自然情況下發(fā)病。這種模型通常通過培育近交系動(dòng)物和發(fā)現(xiàn)突變系動(dòng)物來獲得。模型的分類60-87一、按模型的復(fù)制途徑分類模型的分類60-19

如AKR小鼠的白血病、C3H小鼠的乳腺癌;自發(fā)性高血壓大鼠、肥胖癥小鼠等。這類模型由于疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)疾病很相近,有很大應(yīng)用價(jià)值。模型的分類60-88如AKR小鼠的白血病、C3H小鼠的乳腺癌;自發(fā)性高血壓

2.誘發(fā)性動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加人為處理,出現(xiàn)與人類疾病類似的改變,即復(fù)制動(dòng)物模型,簡稱“造模”。例如，結(jié)扎家兔冠狀動(dòng)脈復(fù)制心肌梗死模型。

這類模型制作方法一般比較簡便,實(shí)驗(yàn)條件容易控制,因而應(yīng)用范圍很廣泛。模型的分類60-892.誘發(fā)性動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加人為處理,模型的分類

3．轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因敲除動(dòng)物60-90模型的分類3．轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型60-22模型的分類

到目前為止，已建立了數(shù)千種轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物，廣泛應(yīng)用于多個(gè)研究領(lǐng)域，并取得了許多有價(jià)值的研究成果。

然而，制備上述動(dòng)物需要熟練的操作技術(shù)，成功率不是很高，儀器價(jià)格昂貴，很難在短期內(nèi)制備出大量模型動(dòng)物。60-91模型的分類到目前為止，已建立了數(shù)千種轉(zhuǎn)基因和基因敲

二、按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類

按復(fù)制模型所用的對(duì)象可分為整體動(dòng)物模型和離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

1.整體動(dòng)物模型通常所說的動(dòng)物模型都是指整體動(dòng)物模型,造模是在動(dòng)物體內(nèi)(invivo)進(jìn)行。模型的分類60-92二、按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類模型的分類60-24

2.離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?shí)驗(yàn)是在體外(invitro)進(jìn)行,包括各種體外的器官、組織、細(xì)胞培養(yǎng)。由于體外培養(yǎng)所使用的材料,通常都取自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,因此可視為整體動(dòng)物模型的延伸和擴(kuò)展。模型的分類60-932.離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?shí)驗(yàn)是在體外(invitro)進(jìn)

離體模型有一定優(yōu)點(diǎn)：減少動(dòng)物的使用量,控制實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)周期短,能大量重復(fù)等。

但離體模型脫離了完整機(jī)體的內(nèi)環(huán)境和多層次的調(diào)節(jié)機(jī)制;對(duì)體外實(shí)驗(yàn)所能施加的干預(yù)因素比較少,因而使用時(shí)會(huì)遇到許多限制。整體模型和離體模型應(yīng)該說各有所長,可以優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。模型的分類60-94離體模型有一定優(yōu)點(diǎn)：減少動(dòng)物的使用量,控制實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)

三、按造模的目標(biāo)分類

1.獨(dú)立疾病模型能模擬人類發(fā)生的各種獨(dú)立疾病,如胃潰瘍、腎炎等。這類模型構(gòu)成人類疾病模型的主體,是本課程討論的主要內(nèi)容。模型的分類60-95三、按造模的目標(biāo)分類模型的分類60-27

2．綜合征模型模擬人類的綜合征(syndrome)。綜合征并非獨(dú)立疾病,而是發(fā)生在不同疾病或病理情況下某些癥狀、體征的組合。例如以心臟房室傳導(dǎo)阻滯、突發(fā)性意識(shí)喪失為特點(diǎn)的Adams-Stokes綜合征;以暴發(fā)性肺間質(zhì)及肺泡水腫為特點(diǎn)的急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、代謝綜合征、更年期綜合征、腎病綜合征等。模型的分類60-962．綜合征模型模擬人類的綜合征(syndrome)

3.基本病理過程模型

是模擬病理過程作為目標(biāo)病理過程：不同疾病中一些共同的改變。

如發(fā)熱、休克、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、電解質(zhì)紊亂等,均可作為模擬的目標(biāo)復(fù)制相應(yīng)的動(dòng)物模型。

模型的分類60-973.基本病理過程模型是模擬病理過程作為目標(biāo)病理

四、按中醫(yī)理論體系分類按中醫(yī)理論體系建立合適的動(dòng)物模型，一直是中醫(yī)藥研究的重要課題。1960年鄺安堃等用大劑量腎上腺皮質(zhì)激素復(fù)制了小鼠陽虛模型。迄今已創(chuàng)建了20多類中醫(yī)證候動(dòng)物模型，并編著了“中醫(yī)證候動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)方法”一書。但模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、觀察指標(biāo)等也有待進(jìn)一步完善和改進(jìn)。模型的分類60-98四、按中醫(yī)理論體系分類模型的分類60-30第三節(jié)復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇60-99第三節(jié)60-31首先要挑選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由于動(dòng)物模型種類繁多,涉及的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多種多樣,因此難以歸納出普遍的原則。一般,在選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)考慮以下幾方面的因素：動(dòng)物的選擇60-100首先要挑選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由于動(dòng)物模型種類繁多,涉及的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多種

1.相似性

動(dòng)物模型與人類疾病相似。例如

高血壓模型—自發(fā)性高血壓大鼠擴(kuò)張性心肌病—敘利亞金倉鼠

腦炎或脊髓灰質(zhì)炎—猴

結(jié)核病模型—豚鼠

在可能條件下,復(fù)制模型應(yīng)選進(jìn)化程度較高動(dòng)物。動(dòng)物的選擇60-1011.相似性

動(dòng)物模型與人類疾病相似。例如

2.適用性

在有些情況下,復(fù)制動(dòng)物模型只是根據(jù)動(dòng)物組織器官的結(jié)構(gòu)、功能、病理反應(yīng)特殊性來選擇動(dòng)物,利用其某一方面的特性達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?dòng)物的選擇60-1022.適用性

在有些情況下,復(fù)制動(dòng)物模型只是

例如

研究雄激素的作用—雄雞雞冠

研究甲狀腺素對(duì)發(fā)育的影響—蝌蚪

研究嘔吐反應(yīng)—鴿或貓(敏感),不用大鼠、小鼠(缺乏嘔吐反應(yīng)).

腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀呈?/p>

摘除甲狀腺的動(dòng)物模型—兔(甲狀旁腺分散)動(dòng)物的選擇60-103例如

研究雄激素的作用—雄雞雞冠

研究甲狀

3.可重復(fù)性

理想的動(dòng)物模型應(yīng)在相同實(shí)驗(yàn)條件下能夠重復(fù),應(yīng)力求減少動(dòng)物個(gè)體差異,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定一致。為此,應(yīng)盡可能選用遺傳背景明確、微生物控制清楚的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。動(dòng)物的選擇60-1043.可重復(fù)性

理想的動(dòng)物模型應(yīng)在相同實(shí)驗(yàn)條件下

就同一種動(dòng)物而言,近交系較遠(yuǎn)交系的均一性好,但近交系動(dòng)物也有費(fèi)用高和抗病力弱等缺點(diǎn)。而封閉群動(dòng)物(遠(yuǎn)交系)雖然個(gè)體間的一致性不如近交系,但遺傳特性及反應(yīng)性保持相對(duì)穩(wěn)定,且繁殖率高,抗病力強(qiáng),因而在很多情況下仍可選用。

動(dòng)物的選擇60-105就同一種動(dòng)物而言,近交系較遠(yuǎn)交系的均一性好,但近交系動(dòng)

4.經(jīng)濟(jì)性

在符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康那疤嵯?應(yīng)選擇體型小、易飼養(yǎng)、性情溫順、費(fèi)用較低的動(dòng)物。靈長目動(dòng)物—最近似人類,可患許多人類疾病,但費(fèi)用昂貴和飼養(yǎng)不便,限制了它的使用。動(dòng)物的選擇60-1064.經(jīng)濟(jì)性

在符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康那疤嵯?應(yīng)選擇體型第四節(jié)

動(dòng)物模型設(shè)計(jì)中應(yīng)注意的一些問題60-107第四節(jié)60-39

成功復(fù)制動(dòng)物模型主要取決于三方面因素：一.選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物二.動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境適宜三.造模方法適當(dāng)和技術(shù)操作正確

下面就模型設(shè)計(jì)和評(píng)價(jià)中應(yīng)注意的其他問題進(jìn)行討論.

注意的問題60-108成功復(fù)制動(dòng)物模型主要取決于三方面因素：注意的問題60-

1.應(yīng)盡力排除非實(shí)驗(yàn)因素的干擾

利用動(dòng)物模型進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)因素(處理因素)是指為造模所施加的因素及有目的給予的因素(藥物、毒物等)。除此之外,其他能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的非實(shí)驗(yàn)因素都應(yīng)盡力排除。注意的問題

糖尿病模型糖尿病＋治療藥物治療藥物=實(shí)驗(yàn)因素(處理因素)60-1091.應(yīng)盡力排除非實(shí)驗(yàn)因素的干擾注意的問題糖尿病

飼養(yǎng)環(huán)境要標(biāo)準(zhǔn)(光線、噪聲、溫度、濕度、氨氣濃度等達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)),過分擁擠,喂養(yǎng)不當(dāng)?shù)?都可能產(chǎn)生動(dòng)物夾雜癥。這些非實(shí)驗(yàn)因素,必須在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段和整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中盡力加以防范.注意的問題60-110飼養(yǎng)環(huán)境要標(biāo)準(zhǔn)(光線、噪聲、溫度、濕度、氨氣濃度等達(dá)到

2.處理好研制新模型和應(yīng)用傳統(tǒng)模型的關(guān)系

人類疾病的動(dòng)物模型處于不斷發(fā)展與完善中，很多疾病還沒有動(dòng)物模型或模型很不理想，因而,研制新模型是非常必要的。注意的問題

建立新的動(dòng)物模型，這本身就屬于創(chuàng)新性研究。但有些研究工作，則要求應(yīng)用傳統(tǒng)模型,采用標(biāo)準(zhǔn)化的造模方法。60-1112.處理好研制新模型和應(yīng)用傳統(tǒng)模型的關(guān)系注意的

現(xiàn)有模型4000余種，并不斷發(fā)展，但有些疾病尚無理想模型，因而研制新模型十分具有創(chuàng)新性的工作。

一般,病因、發(fā)病機(jī)制、藥物作用機(jī)制等基礎(chǔ)性研究,應(yīng)注意模型的改進(jìn)和新模型的建立。從事新藥的藥效或毒性等開發(fā)性研究,應(yīng)優(yōu)先利用成熟的傳統(tǒng)動(dòng)物模型,采用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)方法。注意的問題60-112現(xiàn)有模型4000余種，并不斷發(fā)展，但有些疾病尚無理想模型

3.對(duì)造模與人類疾病相似性和差異性應(yīng)有正確認(rèn)識(shí)

復(fù)制人類疾病模型,總得在某些方面與人類疾病具有相似性,沒有任何相似性,便不成為模型。但是,動(dòng)物模型與人類疾病總是存在一定差異，對(duì)相似性不能苛求,對(duì)差異性不應(yīng)忽視,正確處理相似性與差異性兩者的關(guān)系。注意的問題60-1133.對(duì)造模與人類疾病相似性和差異性應(yīng)有正確認(rèn)識(shí)注意

對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的相似性不應(yīng)求全責(zé)備,與人類疾病近似,不能說分毫不差。如用家兔復(fù)制高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型。注意的問題

動(dòng)物模型的優(yōu)點(diǎn)之一：純化、簡化、強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)條件,縮短發(fā)病時(shí)間和提高發(fā)病率。但不能把使用某些極端化條件下得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,任意外推到人類。60-114對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的相似性不應(yīng)求全責(zé)備,與人類疾病近似,不

4.對(duì)照必須完善

對(duì)照（control）是指在實(shí)驗(yàn)時(shí)針對(duì)實(shí)驗(yàn)組而設(shè)立的可供對(duì)比的一組對(duì)象。

評(píng)價(jià)造模動(dòng)物體內(nèi)的各種變化、干預(yù)措施的效果,都要靠與相應(yīng)的對(duì)照作比較來判斷—設(shè)立各種對(duì)照組.在設(shè)立對(duì)照時(shí)要求“組間一致”性，除了觀察研究的因素外，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的一切條件應(yīng)盡量一致，要有完全的可比性，才能消除偏性所致的誤差，對(duì)觀察的項(xiàng)目得出正確的科學(xué)結(jié)論。注意的問題60-1154.對(duì)照必須完善注意的問題60-47

常用對(duì)照的類型：

空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)對(duì)照(如假投藥、假手術(shù))陽性對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,等

注意的問題60-116常用對(duì)照的類型：注意的問題60-48

注意的問題

在生物醫(yī)學(xué)研究中常用的對(duì)照有以下幾種：

(1)空白對(duì)照:

即不施加任何處理因素或干預(yù)措施，但其他實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組相同，這種對(duì)照組叫空白對(duì)照。（通常用于無損傷、無刺激的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)室研究）

60-117注意的問題在生物醫(yī)學(xué)研究中常用的對(duì)照有以下幾種注意的問題

(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照:又稱假處理對(duì)照，此對(duì)照組也施加某種處理因素，但不是所研究的處理因素。這些某種處理因素包括：

實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照：灌胃、注射、穿刺、手術(shù)等。如給動(dòng)物結(jié)扎冠狀動(dòng)脈復(fù)制心肌梗死模型的假手術(shù)組。

溶媒對(duì)照：以性狀相同的溶媒作為對(duì)照，可防止誤將溶媒的作用當(dāng)做藥物的作用，得出假陽性結(jié)果。60-118注意的問題(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照:又稱假處理對(duì)照，此對(duì)照組也施注意的問題

在藥效學(xué)研究中，實(shí)驗(yàn)對(duì)照通常也稱模型對(duì)照，即所謂“模型組”，模型組動(dòng)物要經(jīng)受同樣的造模處理，除了不給予被研究的藥物外，其他處理均同給藥組。設(shè)立模型對(duì)照的目的是評(píng)價(jià)藥物的有效性。60-119注意的問題在藥效學(xué)研究中，實(shí)驗(yàn)對(duì)照通常也稱模型對(duì)注意的問題

(3)陽性對(duì)照:陽性對(duì)照藥應(yīng)符合“公認(rèn)有效，類同可比”的原則，采用公認(rèn)療效肯定的同類藥物，要求作用相同，給藥途徑盡量一致，應(yīng)選用我國藥典或部頒標(biāo)準(zhǔn)收藏，或近年批準(zhǔn)生產(chǎn)的合法藥物，在標(biāo)準(zhǔn)條件下與受試藥進(jìn)行對(duì)比。60-120注意的問題(3)陽性對(duì)照:陽性對(duì)照藥應(yīng)符合“公認(rèn)有效，注意的問題

中藥研究陽性對(duì)照藥還應(yīng)注意的功能主治、劑型、給藥途徑的類同性。中藥的作用范圍較廣，有的作用可能與一個(gè)陽性藥不完全相同，可再選作用相似的其他中藥或化學(xué)藥，故一個(gè)受試藥可能設(shè)幾個(gè)陽性對(duì)照藥。60-121注意的問題中藥研究陽性對(duì)照藥還應(yīng)注意的功能主治、劑型注意的問題

(4)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:不設(shè)立對(duì)照組，用標(biāo)準(zhǔn)值或正常值作對(duì)照。

(5)自身對(duì)照:

一是處理前、后自身對(duì)照；二是同時(shí)自身對(duì)照，如在同一受試對(duì)象身體的左、右對(duì)稱部位分別給予和不給予處理因素，觀察某種藥物的致敏作用。

60-122注意的問題(4)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:不設(shè)立對(duì)照組，用標(biāo)準(zhǔn)值或正常值注意的問題

(6)相互對(duì)照:各實(shí)驗(yàn)組之間進(jìn)行相互對(duì)照。例如幾種藥物(新藥與舊藥)治療同一種病，對(duì)比它們之間的療效。

(7)歷史對(duì)照:

(8)配對(duì)對(duì)照:將條件最相近的兩個(gè)個(gè)體配成對(duì)子，分別給予不同的處理。配對(duì)對(duì)照的優(yōu)點(diǎn)是減少個(gè)體差異，節(jié)省樣本例數(shù)，均衡影響因素，有助于減少或消除抽樣誤差。60-123注意的問題(6)相互對(duì)照:各實(shí)驗(yàn)組之間進(jìn)行相互對(duì)照。注意的問題在藥理學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：▲延胡素水煎劑對(duì)小鼠熱板致痛的鎮(zhèn)痛作用

（延胡素水煎劑，0.2ml/10g,灌胃,給藥后30min小鼠置于55℃熱板上，開始計(jì)疼痛反應(yīng)）

對(duì)照組（等體積的生理鹽水：0.2ml/10g

）延胡素水煎劑高劑量組(20g/kg,0.2ml/10g)延胡素水煎劑中劑量組(10g/kg,0.2ml/10g)延胡素水煎劑低劑量組(5g/kg,0.2ml/10g)陽性藥對(duì)照組(哌替啶50mg/kg,0.2ml/10g,灌胃)

（灌胃—實(shí)驗(yàn)操作對(duì)照）60-124注意的問題在藥理學(xué)研究中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：60-56注意的問題在毒理學(xué)試驗(yàn)中常用的分組方式和對(duì)照設(shè)立：▲結(jié)核復(fù)合疫苗猴皮下注射給藥長期毒性試驗(yàn)

（輔料:NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、谷氨酸鈉、海藻糖）

（復(fù)合疫苗用生理鹽水稀釋成不同同濃度，SC)對(duì)照組（生理鹽水,0.1ml/kg,SC）輔料對(duì)照組（輔料,0.1ml/kg,SC