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文檔簡介

試劑盒基礎知識試劑盒基礎知識試劑盒的概念把某一項臨床生化分析測定項目的試劑及輔助用品配套組裝在一起,各組分在較長的保存期內穩定使用時按試劑盒中的說明書操作。試劑盒的概念把某一項臨床生化分析測定項目的試劑及輔助用品配套試劑盒所采用的測定方法特異性好、靈敏度、準確度、精密度符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO等推薦的指標。試劑盒的儲存期至少為1年。水溶性、低粘度、無腐蝕、無毒害、不爆炸、不易燃、不污染環境。所用標準品或標準參考物符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO推薦的標準和要求。試劑盒的要求特異性:即專一性,指分析測定中只對某一物質起反應,對其他物質毫無影響或基本沒有影響。例如,GLU的HK法靈敏度:化學反應中能檢出的最小量準確度:測定值與真值的相符合程度,常表示為真值與測定結果之差,單位與結果單位一致,或為真值的百分比,常以“不準確度”表示,目前使用標準差SD來評價精密度:同一標本用同一方法在同樣條件下多次重復測定所得各次結果之間或各次結果與均值之間的相符合程度。精密度不能由數值表示,但以不精度方式進行定量表示,即一組重復測定結果的變異系數CV來表示。

試劑盒所采用的測定方法特異性好、靈敏度、準確度、精密度符合衛試劑盒的類型按劑型分類按試劑組成分類按發展階段分類按是否為專用包裝分類按適用通道的不同分類試劑盒的類型按劑型分類按劑型分類干粉試劑將各組份溶于液體中分裝再凍干,或用球磨粉碎、或混合后打成片劑,用前再加入指定量的緩沖液使其溶解(稱復溶),這種類型的試劑稱為干粉試劑。液體試劑優點:液體試劑具有組份均一、瓶間差和批間差極其微小以及使用方便(不必復溶,避免了復溶時所用蒸餾水中污染雜質的干擾)、操作誤差小等明顯優勢。缺點:許多酶類試劑盒受溫度的影響保質期短。濃縮試劑使用時只取很少的量,再加入重蒸水稀釋(例如:R-50l+重蒸水-250l)配制成工作液。按劑型分類干粉試劑按試劑組成分類單試劑

液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學地混合在一起,組成為一種試劑。應用時,只須將標本和試劑按一定比例混合,即可進行相應的生化反應,然后用適當的方法檢測結果。雙試劑

液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑,按用途科學地分成兩類,分別配成兩種試劑,通常第一試劑加入后可起到全部或部分消除某些內源性干擾的作用,第二試劑為啟動被檢測物質反應的試劑,兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應。按試劑組成分類單試劑按試劑組成分類單試劑優缺點

優點:操作簡便適用于各類生化分析儀,節約試劑位缺點:配方復雜(穩定劑、掩蔽劑),穩定性差,不

能完全避免內外源物質干擾。按試劑組成分類單試劑優缺點按試劑組成分類雙試劑的特點(1)可較徹底排除樣品空白和內外源干擾物(2)更加符合酶偶聯反應的特性和過程(3)試劑配方簡單(4)試劑穩定,便于儲存,運輸和使用(5)可用抑制法直接測定某些同工酶按試劑組成分類雙試劑的特點液體雙試劑的優點提高了抗干擾反應的能力在臨床生化測定過程中,血標本除了含有待測物質外,還含有各種酶、有機物、無機鹽等物質,這些物質都會干擾或參與測試反應,引起非特異性反應干擾,而雙試劑型試劑盒設計的一個主要目的就是為了克服這種干擾反應。排除樣品中非測定成分的干擾,提高準確性例如:ALT

內源性丙酮酸+NADHLDH

乳酸+NADL-丙氨酸+α-酮戊二酸+NADHALT

丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O液體雙試劑的優點提高了抗干擾反應的能力增強了工作試劑的穩定性:試劑組分高度均一:不必凍干復溶,避免了干粉試劑復溶時所用蒸餾水污染雜質的干擾作用。避免了干粉試劑盒分裝,凍干,復溶過程中引起的瓶間差,提高了測定的精密度和準確度.液體雙試劑的優點增強了工作試劑的穩定性:液體雙試劑的優點按發展階段分類傳統試劑盒新型試劑

快速反應試劑盒

一步法試劑盒

多項同測組合試劑盒

卡式試劑盒

濃縮試劑盒按發展階段分類傳統試劑盒按是否為專用包裝分類專用包裝試劑:7060、7170、貝克曼包裝等非專用包裝試劑按是否為專用包裝分類專用包裝試劑:7060、7170、貝克曼按適用通道的不同分類封閉通道:如條碼試劑。開放通道按適用通道的不同分類封閉通道:如條碼試劑。試劑盒性能評價實用性可靠性試劑盒性能評價實用性實用性標本類型操作要求服務要求:電力供應,通風環境,試劑處理等消耗品要求技術職能要求成本分析速度一般問題如臨床應用價值、試劑的效期、包裝規格是否多樣、操作是否簡便等。實用性標本類型可靠性(試劑盒基本性能指標)準確度:測定值與真值的相符合程度精密度:同一標本用同一方法在同樣條件下多次重復測定所得各次結果之間或各次結果與均值之間的相符合程度。線性范圍(分析范圍)干擾性靈敏度:化學反應中能檢出的最小量穩定性特異性方法學性能(IFCC,酶法,HDL,LDL方法等)可靠性(試劑盒基本性能指標)準確度:測定值與真值的相符合程度重點選擇的幾個指標準確度通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗及干擾試驗的結果來分析判斷。精密度試劑的瓶間差異、批內精密度和批間差異三組測定的平均值之間應無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求。線性范圍指該試劑盒按其說明使用時可準確測量的范圍。抗干擾作用雙試劑型試劑盒主要優點是抗干擾作用。重點選擇的幾個指標靈敏度采用蒸餾水(5%牛血清白蛋白溶液)作為空白樣本,空白樣本應不含被測物。在生化分析儀上連續檢測20次,記錄檢測結果。計算20次結果的均值與標準差SD。以空白均值加兩倍標準差作為報告方法的檢測限。穩定性試劑盒穩定性是指試劑盒在規定條件下儲存仍保持其性能指標的期限。該期限應符合規定的儲存期。方法有以下三種。1.原包裝試劑的穩定性2.復溶后試劑的穩定性3.不同溫度下的保存期重點選擇的幾個指標靈敏度重點選擇的幾個指標化學試劑盒常用的反應原理比色法由單純的化學物質參與反應,呈色,在一定波長下比色。例如總蛋白的雙縮脲比色法、白蛋白的溴鉀酚綠法。酶法由特異性的酶來催化反應,在一定波長下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和過氧化物酶來催化反應;尿素有脲酶來催化反應進行。免疫比濁法

抗體(Ab)與可溶性抗原(Ag)反應,形成一定結構的免疫復合物,成為懸浮于反應溶液中的微粒。這種在沉淀反應中形成的微粒具有特殊的光學性質。化學試劑盒常用的反應原理比色法常用監測物質的特性1.NADH輔酶I或NADPH輔酶II:乳酸脫氫酶(LDH)NAD+或NADP+(alt)蘋果酸脫氫酶(MDH)NAD+或NADP+(co2)谷氨酸脫氫酶(GLDH)NAD+或NADP+(hcy)常用監測物質的特性1.NADH輔酶I或NADPH輔酶II:常用監測物質的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光吸收,而它們的氧化型NAD+或NADP+則沒有這個吸收峰,340nm波長處的吸光度與NAD(P)H的濃度成正比。常用監測物質的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光常用監測物質的特性例一:肌酸激酶(CK)磷酸肌酸+ADPCK

肌酸+ATP

葡萄糖+ATPHK

葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADPG6PDH

6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+例二:丙氨酸氨基轉移酶(ALT)丙氨酸+α-酮戊二酸ALT

丙酮酸+谷氨酸丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O常用監測物質的特性例一:肌酸激酶(CK)常用監測物質的特性2.H2O2指示反應

葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、膽固醇氧化酶:用于葡萄糖、尿酸、甘油、膽固醇的測定,可使相應底物被O2氧化成H2O2,H2O2可通過一系列指示反應來檢測。常用監測物質的特性2.H2O2指示反應

常用監測物質的特性①使單一的色素原顯色。無色色素原過氧化物酶(POD)存在下被H2O2氧化后可生成有色的色素。②使成對的色素原顯色。必須要兩個色素原共同存在,再在指示酶POD的催化下生成色素。③發光反應。H2O2也可用化學發光反應來監測,它是憑借某些熒光前身物在氧化后,處于激發狀態的分子可發射光子,光子量和H2O2的濃度成正比。常用監測物質的特性①使單一的色素原顯色。無色色素原過氧化物酶常用監測物質的特性例一:葡萄糖(GLU)葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林過氧化物酶醌亞胺+H2O例二:甘油三酯(TG)甘油三酯+H2O脂蛋白脂酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶

α-磷酸甘油+ADPα-磷酸甘油+O2甘油磷酸氧化酶磷酸二羥丙酮+H2O2H2O2+4-氨基安替比林+ESPAS過氧化物酶醌亞胺+H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-間-茴香胺常用監測物質的特性例一:葡萄糖(GLU)常用監測物質的特性3.硝基苯衍生物

芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶:對-硝基酚和有機酸或無機酸形成的酯類

糖苷酶:對硝基酚和糖苷衍生物

γ-谷氨酰轉肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶:對-硝基苯胺的氨基酰衍生物常用監測物質的特性3.硝基苯衍生物常用監測物質的特性例一:堿性磷酸酶(ALP)磷酸對硝基苯+H2OALP

磷酸鹽+對硝基苯酚例一:γ-谷氨酰轉移酶(γ-GT)

γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+雙甘肽γ-GT

谷氨酰基雙甘肽+5-氨基-2-硝基安息香酸常用監測物質的特性例一:堿性磷酸酶(ALP)試劑盒測定基本方法四個區域三大方法試劑盒測定基本方法試劑盒測定基本方法四大區域實時反應曲線:

Realtimereactioncurve試劑盒測定基本方法四大區域試劑盒測定基本方法四個區域

延遲區:delaytime,lagtime;

等速區:斜率相等的線性段;

過渡區:兩點固定時間法,可在此段開窗;

平衡區:終點法在此區內開窗;試劑盒測定基本方法四個區域試劑盒測定基本方法三大方法

速率法(Rate):亦稱動力學法,連續監測法;

固定時間法(Fixedtime):亦稱兩點法;

終點法(EndPoint):一點終點法、兩點終點法(日立系統);Olympus只有終點法;Beckman的終點法1(不減試劑空白)終點法2(減去試劑空白)試劑盒測定基本方法三大方法試劑盒測定基本方法速率法(Rate):

測光點一般設置在加入啟動因子并孵育一段時間后開始,持續1-3min。

一般應用于酶類項目。

可以使用因數法來計算待測濃度。試劑盒測定基本方法速率法(Rate):固定時間法

測光點設置在加入啟動因子后,分前后兩點。

多用于免疫比濁法類項目終點法(EndPoint):

按照測光點的個數分為:一點終點法、兩點終點法。

兩點終點法的測光點一般分別設置在加入啟動因子前后。

多數基質類項目都采用這種方法。試劑盒測定基本方法固定時間法試劑盒測定基本方法試劑盒說明書一看反應原理,確定測定方法、反應方向、檢測波長二看操作程序,確定試劑量、樣本量、反應量三看標準、質控的使用方式及貨號四看標本的要求,使用血清、血漿還是尿液及注意事項五看試劑/工作試劑的穩定性六看靈敏度、抗干擾性、線性范圍等技術指標,觀察與其它試劑比較的優缺點試劑盒說明書一看反應原理,確定測定方法、反應方向、檢測波長標準物質和質控品標準物質又稱參考物質,是一類充分均勻,并具有一個(或多個)確定的特性值的材料和物質。作用:它用以校準儀器設備、評價測量方法,或給其它物質賦值。標準物質的定值結果一般表示為:標準值±總不確定度。標準物質和質控品理解標準品和校準品標準品標準品的定值由稱量和容積計算確定。檢定不合格即報廢,決不可將實測值替代修正。理解標準品和校準品標準品校準品為了克服因純標準液和患者樣品間的基體差異,對檢驗結果的嚴重誤差,20年前開始引用具有與患者樣品基體相似的校準品替代標準品,用于日常工作。可是,盡管校準品的主要來源是人的血清,為了使校準品內的一些分析物水平達到某個程度,而且形成穩定的產品,所有的校準品、控制品、室間調查品等都是處理過的血清。和原來的天然血清間又產生了新的基體差異。理解標準品和校準品校準品理解標準品和校準品校準品的特點

校準值隨方法而異校準品中被檢分析物的含量無法由稱量法和容量法確定,只能倚賴于分析方法。校準品的校準值必須取決于分析方法或檢測系列。

新鮮患者標本是最佳校準品須明確的,所有用于檢驗中的檢測方法、儀器、試劑等都是用來檢測患者新鮮標本的,不是用來檢測校準品這樣的處理過樣品。理解標準品和校準品校準品的特點理解標準品和校準品質控品IFCC的定是專門用于質量控制目的的標本或溶液,不用于校準,對穩定性、瓶間差要求高。分定值和不定值兩種。質控品選擇:

應該選擇有幾個濃度的、濃度范圍分布較寬的、最好是醫學決定水平的、有可報告范圍范圍是上下限值的質控品。

人血清基質,以減少基質效應;無傳染性;成分分布均勻,瓶間差小;液態及凍干品復溶后穩定性性對要好。質控品IFCC的定是專門用于質量控制目的的標本或溶液,不用于理解室內質量控制

在全面質量管理體系中,室內質量控制(IQC)是各實驗室為了監測和評價本室工作質量,以決定常規檢驗報告能否發出所采取的一系列檢查,控制手段。理解室內質量控制在全面質量管理體系中,室內質量控制(IQ理解室間質量評價室間質量評價(externalqualityassessment,EQA)是指多家實驗室分析同一標本,由外部獨立機構收集、分析和反饋實驗室檢測結果,評定實驗室常規工作的質量,觀察試驗的準確性,建立起各實驗室分析結果之間的可比性。有兩種類型的計劃可進行室間質量評價,一種是能力比對檢驗,一種是區域性質控活動。理解室間質量評價室間質量評價(externalqualit試劑盒基礎知識試劑盒基礎知識試劑盒的概念把某一項臨床生化分析測定項目的試劑及輔助用品配套組裝在一起,各組分在較長的保存期內穩定使用時按試劑盒中的說明書操作。試劑盒的概念把某一項臨床生化分析測定項目的試劑及輔助用品配套試劑盒所采用的測定方法特異性好、靈敏度、準確度、精密度符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO等推薦的指標。試劑盒的儲存期至少為1年。水溶性、低粘度、無腐蝕、無毒害、不爆炸、不易燃、不污染環境。所用標準品或標準參考物符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO推薦的標準和要求。試劑盒的要求特異性:即專一性,指分析測定中只對某一物質起反應,對其他物質毫無影響或基本沒有影響。例如,GLU的HK法靈敏度:化學反應中能檢出的最小量準確度:測定值與真值的相符合程度,常表示為真值與測定結果之差,單位與結果單位一致,或為真值的百分比,常以“不準確度”表示,目前使用標準差SD來評價精密度:同一標本用同一方法在同樣條件下多次重復測定所得各次結果之間或各次結果與均值之間的相符合程度。精密度不能由數值表示,但以不精度方式進行定量表示,即一組重復測定結果的變異系數CV來表示。

試劑盒所采用的測定方法特異性好、靈敏度、準確度、精密度符合衛試劑盒的類型按劑型分類按試劑組成分類按發展階段分類按是否為專用包裝分類按適用通道的不同分類試劑盒的類型按劑型分類按劑型分類干粉試劑將各組份溶于液體中分裝再凍干,或用球磨粉碎、或混合后打成片劑,用前再加入指定量的緩沖液使其溶解(稱復溶),這種類型的試劑稱為干粉試劑。液體試劑優點:液體試劑具有組份均一、瓶間差和批間差極其微小以及使用方便(不必復溶,避免了復溶時所用蒸餾水中污染雜質的干擾)、操作誤差小等明顯優勢。缺點:許多酶類試劑盒受溫度的影響保質期短。濃縮試劑使用時只取很少的量,再加入重蒸水稀釋(例如:R-50l+重蒸水-250l)配制成工作液。按劑型分類干粉試劑按試劑組成分類單試劑

液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學地混合在一起,組成為一種試劑。應用時,只須將標本和試劑按一定比例混合,即可進行相應的生化反應,然后用適當的方法檢測結果。雙試劑

液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑,按用途科學地分成兩類,分別配成兩種試劑,通常第一試劑加入后可起到全部或部分消除某些內源性干擾的作用,第二試劑為啟動被檢測物質反應的試劑,兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應。按試劑組成分類單試劑按試劑組成分類單試劑優缺點

優點:操作簡便適用于各類生化分析儀,節約試劑位缺點:配方復雜(穩定劑、掩蔽劑),穩定性差,不

能完全避免內外源物質干擾。按試劑組成分類單試劑優缺點按試劑組成分類雙試劑的特點(1)可較徹底排除樣品空白和內外源干擾物(2)更加符合酶偶聯反應的特性和過程(3)試劑配方簡單(4)試劑穩定,便于儲存,運輸和使用(5)可用抑制法直接測定某些同工酶按試劑組成分類雙試劑的特點液體雙試劑的優點提高了抗干擾反應的能力在臨床生化測定過程中,血標本除了含有待測物質外,還含有各種酶、有機物、無機鹽等物質,這些物質都會干擾或參與測試反應,引起非特異性反應干擾,而雙試劑型試劑盒設計的一個主要目的就是為了克服這種干擾反應。排除樣品中非測定成分的干擾,提高準確性例如:ALT

內源性丙酮酸+NADHLDH

乳酸+NADL-丙氨酸+α-酮戊二酸+NADHALT

丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O液體雙試劑的優點提高了抗干擾反應的能力增強了工作試劑的穩定性:試劑組分高度均一:不必凍干復溶,避免了干粉試劑復溶時所用蒸餾水污染雜質的干擾作用。避免了干粉試劑盒分裝,凍干,復溶過程中引起的瓶間差,提高了測定的精密度和準確度.液體雙試劑的優點增強了工作試劑的穩定性:液體雙試劑的優點按發展階段分類傳統試劑盒新型試劑

快速反應試劑盒

一步法試劑盒

多項同測組合試劑盒

卡式試劑盒

濃縮試劑盒按發展階段分類傳統試劑盒按是否為專用包裝分類專用包裝試劑:7060、7170、貝克曼包裝等非專用包裝試劑按是否為專用包裝分類專用包裝試劑:7060、7170、貝克曼按適用通道的不同分類封閉通道:如條碼試劑。開放通道按適用通道的不同分類封閉通道:如條碼試劑。試劑盒性能評價實用性可靠性試劑盒性能評價實用性實用性標本類型操作要求服務要求:電力供應,通風環境,試劑處理等消耗品要求技術職能要求成本分析速度一般問題如臨床應用價值、試劑的效期、包裝規格是否多樣、操作是否簡便等。實用性標本類型可靠性(試劑盒基本性能指標)準確度:測定值與真值的相符合程度精密度:同一標本用同一方法在同樣條件下多次重復測定所得各次結果之間或各次結果與均值之間的相符合程度。線性范圍(分析范圍)干擾性靈敏度:化學反應中能檢出的最小量穩定性特異性方法學性能(IFCC,酶法,HDL,LDL方法等)可靠性(試劑盒基本性能指標)準確度:測定值與真值的相符合程度重點選擇的幾個指標準確度通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗及干擾試驗的結果來分析判斷。精密度試劑的瓶間差異、批內精密度和批間差異三組測定的平均值之間應無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求。線性范圍指該試劑盒按其說明使用時可準確測量的范圍。抗干擾作用雙試劑型試劑盒主要優點是抗干擾作用。重點選擇的幾個指標靈敏度采用蒸餾水(5%牛血清白蛋白溶液)作為空白樣本,空白樣本應不含被測物。在生化分析儀上連續檢測20次,記錄檢測結果。計算20次結果的均值與標準差SD。以空白均值加兩倍標準差作為報告方法的檢測限。穩定性試劑盒穩定性是指試劑盒在規定條件下儲存仍保持其性能指標的期限。該期限應符合規定的儲存期。方法有以下三種。1.原包裝試劑的穩定性2.復溶后試劑的穩定性3.不同溫度下的保存期重點選擇的幾個指標靈敏度重點選擇的幾個指標化學試劑盒常用的反應原理比色法由單純的化學物質參與反應,呈色,在一定波長下比色。例如總蛋白的雙縮脲比色法、白蛋白的溴鉀酚綠法。酶法由特異性的酶來催化反應,在一定波長下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和過氧化物酶來催化反應;尿素有脲酶來催化反應進行。免疫比濁法

抗體(Ab)與可溶性抗原(Ag)反應,形成一定結構的免疫復合物,成為懸浮于反應溶液中的微粒。這種在沉淀反應中形成的微粒具有特殊的光學性質。化學試劑盒常用的反應原理比色法常用監測物質的特性1.NADH輔酶I或NADPH輔酶II:乳酸脫氫酶(LDH)NAD+或NADP+(alt)蘋果酸脫氫酶(MDH)NAD+或NADP+(co2)谷氨酸脫氫酶(GLDH)NAD+或NADP+(hcy)常用監測物質的特性1.NADH輔酶I或NADPH輔酶II:常用監測物質的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光吸收,而它們的氧化型NAD+或NADP+則沒有這個吸收峰,340nm波長處的吸光度與NAD(P)H的濃度成正比。常用監測物質的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光常用監測物質的特性例一:肌酸激酶(CK)磷酸肌酸+ADPCK

肌酸+ATP

葡萄糖+ATPHK

葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADPG6PDH

6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+例二:丙氨酸氨基轉移酶(ALT)丙氨酸+α-酮戊二酸ALT

丙酮酸+谷氨酸丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O常用監測物質的特性例一:肌酸激酶(CK)常用監測物質的特性2.H2O2指示反應

葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、膽固醇氧化酶:用于葡萄糖、尿酸、甘油、膽固醇的測定,可使相應底物被O2氧化成H2O2,H2O2可通過一系列指示反應來檢測。常用監測物質的特性2.H2O2指示反應

常用監測物質的特性①使單一的色素原顯色。無色色素原過氧化物酶(POD)存在下被H2O2氧化后可生成有色的色素。②使成對的色素原顯色。必須要兩個色素原共同存在,再在指示酶POD的催化下生成色素。③發光反應。H2O2也可用化學發光反應來監測,它是憑借某些熒光前身物在氧化后,處于激發狀態的分子可發射光子,光子量和H2O2的濃度成正比。常用監測物質的特性①使單一的色素原顯色。無色色素原過氧化物酶常用監測物質的特性例一:葡萄糖(GLU)葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林過氧化物酶醌亞胺+H2O例二:甘油三酯(TG)甘油三酯+H2O脂蛋白脂酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶

α-磷酸甘油+ADPα-磷酸甘油+O2甘油磷酸氧化酶磷酸二羥丙酮+H2O2H2O2+4-氨基安替比林+ESPAS過氧化物酶醌亞胺+H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-間-茴香胺常用監測物質的特性例一:葡萄糖(GLU)常用監測物質的特性3.硝基苯衍生物

芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶:對-硝基酚和有機酸或無機酸形成的酯類

糖苷酶:對硝基酚和糖苷衍生物

γ-谷氨酰轉肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶:對-硝基苯胺的氨基酰衍生物常用監測物質的特性3.硝基苯衍生物常用監測物質的特性例一:堿性磷酸酶(ALP)磷酸對硝基苯+H2OALP

磷酸鹽+對硝基苯酚例一:γ-谷氨酰轉移酶(γ-GT)

γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+雙甘肽γ-GT

谷氨酰基雙甘肽+5-氨基-2-硝基安息香酸常用監測物質的特性例一:堿性磷酸酶(ALP)試劑盒測定基本方法四個區域三大方法試劑盒測定基本方法試劑盒測定基本方法四大區域實時反應曲線:

Realtimereactioncurve試劑盒測定基本方法四大區域試劑盒測定基本方法四個區域

延遲區:delaytime,lagtime;

等速區:斜率相等的線性段;

過渡區:兩點固定時間法,可在此段開窗;

平衡區:終點法在此區內開窗;試劑盒測定基本方法四個區域試劑盒測定基本方法三大方法

速率法(Rate):亦稱動力學法,連續監測法;

固定時間法(Fixedtime):亦稱兩點法;

終點法(EndPoint):一點終點法、兩點終點法(日立系統);Olympus只有終點法;Beckman的終點法1(不減試劑空白)終點法2(減去試劑空白)試劑盒測定基本方法三大方法試劑盒測定基本方法速率法(Rate):

測光點一般設置在加入啟動因子并孵育一段時間后開始,持續1-3min。

一般應用于酶類項目。

可以使用因數法來計算待測濃度。試劑盒測定基本方法速率法(Rate):固定時間法

測光點設置在加入啟動因子后,分前后兩點。

多用于免疫比濁法類項目終點法(EndPoint):

按照測光點的個數分為:一點終點

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