第一節血管壁的止血作用與檢驗一、基礎理論（一）血管壁的結構血管壁的正常結構包括三層：內層、中層和外層。內層：內皮細胞+基底膜；中層：平滑肌細胞（毛細血管無此層）；外層：結締組織。一、基礎理論一、基礎理論（二）血管壁的止血作用血管在止血過程中的作用示意圖二、血管壁（內皮）檢驗（一）毛細血管脆性試驗（見《臨床檢驗基礎》）（二）出血時間測定（見《臨床檢驗基礎》）二、血管壁（內皮）檢驗（三）血管性血友病因子測定【實驗原理】火箭電泳法含vWF抗體的瓊脂板受檢血漿（抗原）電場＋火箭樣沉淀線二、血管壁（內皮）檢驗（三）血管性血友病因子測定【實驗原理】酶聯免疫吸附法vWF抗體包被板待測血漿（抗原）＋加底物顯色酶標記二抗算出vWF：Ag含量二、血管壁（內皮）檢驗（三）血管性血友病因子測定【參考區間】火箭電泳法94.09%±32.46%。酶聯免疫吸附法（1.02±0.56）U/ml。

二、血管壁（內皮）檢驗（三）血管性血友病因子測定【臨床意義】1.減低見于血管性血友病（vWD），是診斷vWD及其分型的重要依據。2.增高見于血栓性疾病，如急性冠脈綜合征、心肌梗死、腦血管病變、妊娠高血壓綜合征、腎小球疾病等，也可見于劇烈運動后腎上腺受體被興奮等。二、血管壁（內皮）檢驗（四）凝血酶調節蛋白測定【實驗原理】放射免疫法TM單克隆抗體包被小杯待測血漿（抗原）＋125I-抗人TM單抗算出樣品中TM的含量二、血管壁（內皮）檢驗（四）凝血酶調節蛋白測定【參考區間】25～52μg/L。【臨床意義】

正常情況下，血漿中的TM含量很低，但當血管內皮受損后，血漿中的TM含量明顯升高且與內皮的損傷程度相關。TM:Ag的檢測是了解血管內皮損傷最好的指標。TM:Ag水平升高見于血栓性疾病，如糖尿病、心肌梗死、腦血栓等。二、血管壁（內皮）檢驗（五）血漿6酮-前列腺素F1a測定【實驗原理】ELISA競爭法抗原6酮-PGF1a包被固相載體

待測樣品或標準品

＋抗血漿6酮-PGF1a抗體

包被抗原與游離抗原競爭性地與抗體結合酶標記二抗加底物顯色算出待檢血漿中6酮-PGF1a的含量二、血管壁（內皮）檢驗（五）血漿6酮-前列腺素F1a測定【參考區間】（17.9±7.2）ng/L。【臨床意義】

血漿6酮-PGF1a減低見于血栓性疾病，如急性心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、動脈粥樣硬化、周圍血管血栓形成及血栓性血小板減少性紫癜等。第二節血小板止血作用與檢驗一、基礎理論（一）血小板的結構光學顯微鏡直徑1～4微米，具有運動和變形能力。瑞氏染色后見血小板胞質呈灰藍色或淡紅色。電子顯微鏡血小板結構可分為表面結構、溶膠質層結構、細胞器內含物。一、基礎理論（一）血小板的結構血小板超微結構示意圖左圖：血小板赤道面右圖：血小板垂直面一、基礎理論（一）血小板的結構1.血小板表面結構

由血小板膜和開放管道系統（opencanalicularsystem，OCS）組成。重要成分：血小板膜糖蛋白/磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine，PS）/血小板第3因子（lateletfactor3，PF3）等。一、基礎理論（一）血小板的結構1.血小板表面結構名稱CD名稱分子量功能特性GPⅠaCD49b150000與GPⅡa形成復合物，是膠原的受體GPⅠbCD42c170000與GPⅨ、GPV形成復合物，是vWF的受體，參與血小板黏附反應，缺乏或減少時血小板黏附功能減低，見于巨大血小板綜合征。GPⅠcCD49f140000與GPⅡ形成復合物，是層素（laminin）的受體GPⅡaCD29138000與GPⅠa和GPⅠc形成復合物，是膠原和層素的受體主要血小板膜糖蛋白及其功能一、基礎理論（一）血小板的結構1.血小板表面結構名稱CD名稱分子量功能特性GPⅡb和ⅢaCD41aⅡb145000Ⅲa90000GPⅡb與Ⅲa形成復合物，是纖維蛋白原（Fg）的受體，參與血小板聚集反應，缺乏或減少時血小板聚集功能減低，見于血小板無力癥。GPⅣCD3688000是TSP的受體GPⅤ82000和GPⅠb、GPⅨ構成vWF受體GPⅠb-Ⅴ-ⅨGPⅨCD42a17000和GPⅠb、GPⅤ形成復合物，構成vWF受體P-selectin140000即α顆粒膜糖蛋白（GMP140）。血小板活化時，可移行至血小板漿膜上，為血小板活化的標志。一、基礎理論（一）血小板的結構2.溶膠質層結構由微管、微絲、致密管道系統等組成。3.細胞器內容物結構主要由α-顆粒、δ-顆粒（致密顆粒）和γ-顆粒（溶酶體）組成。一、基礎理論（二）血小板的花生四烯酸代謝血小板代謝是維持血小板正常結構和功能的基礎，包括能量代謝和膜磷脂代謝。其中與血小板活化最為密切相關的是花生四烯酸代謝。一、基礎理論（二）血小板的花生四烯酸代謝花生四烯酸代謝示意圖一、基礎理論（三）血小板的止血功能血小板黏附促凝反應血小板聚集釋放反應血塊收縮一、基礎理論（三）血小板的止血功能ADP血小板進一步激活、釋放血塊收縮內皮損傷（內皮下組織暴露）血小板黏附血小板初期釋放ADP等血小板聚集纖維蛋白形成堅固的凝血塊血小板促凝作用5-HT血小板血栓一、基礎理論（三）血小板的止血功能類別成分活性胺5-HT，組胺，腎上腺素，去甲腎上腺素腺嘌呤核苷酸ADP,ATP,cAMP陽離子Ca2+,K+血小板因子PF3,PF4等凝血因子凝血因子I，V，VIII，XIII血小板蛋白β-TG，血小板糖蛋白等血栓烷TXA2血小板的主要釋放產物二、血小板檢驗（一）血小板計數（臨床檢驗基礎）（二）血塊退縮試驗（臨床檢驗基礎）二、血小板檢驗（三）血小板黏附試驗（PAdT）【實驗原理】

用一定量的抗凝血與一定表面積的玻璃表面接觸一定時間，血小板可黏附于帶負電荷的玻璃表面，根據黏附前后血小板數量之差，即可計算出血小板的黏附百分率。二、血小板檢驗（三）血小板黏附試驗（PAdT）【參考區間】玻璃珠柱法：62.5%±8.6%。旋轉玻球法（12ml玻瓶）：男性28.9%～40.9%；女性34.2%～44.6%。

二、血小板檢驗（三）血小板黏附試驗（PAdT）【臨床意義】

血小板黏附率減低可見于一些遺傳性與獲得性血小板功能缺陷病，如巨血小板綜合征、血小板無力癥、肝硬化、尿毒癥、骨髓增生異常綜合癥（MDS）、單克隆高球蛋白血癥等，也可見于服用抗血小板藥物等。二、血小板檢驗（三）血小板黏附試驗（PAdT）【臨床意義】血小板黏附率增高常見于血栓前狀態與血栓性疾病，如急性心肌梗死、腦血栓形成、心絞痛、動脈硬化、糖尿病、高脂蛋白血癥等疾患。二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【實驗原理】1.光學比濁法在富血小板血漿（PRP）中加入致聚劑，使血小板發生聚集，血漿濁度減低，透光度增加，血小板聚集儀可將血小板聚集過程記錄于圖紙上，形成血小板聚集曲線。根據曲線變化反映血小板的聚集程度和速度。二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【實驗原理】2.全血電阻抗法在枸櫞酸鈉抗凝的全血中加入血小板激活劑，血小板聚集后導致浸在血液中的兩電極間電阻抗增加，血小板聚集儀可以連續記錄血小板聚集過程中的電阻抗變化并以聚集曲線顯示。二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【參考區間】

不同儀器及誘聚劑或者不同濃度、劑量的同種誘聚劑有不同的參考值。以MG-196型血小板聚集儀為例，幾種常用的體外誘聚劑測得的參考值：ADP(1.0μmol/ml)ADP(0.5μmol/ml)腎上腺素(4.0μg/ml)膠原(4.0μg/ml)瑞斯托霉素(1.5μmg/ml)最大幅度（%）48.6～78.825～5050.2～85.654～9076.1～98.9達到最大幅度時間（S）150～29068～230220～360220～290200～2802min時幅度（%）38～6820～4225～5022～6155～90單峰或雙峰曲線雙峰雙峰雙峰單峰雙峰二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【參考區間】

血小板聚集曲線二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【臨床意義】1.PAgT減低反映血小板聚集功能減低。見于血小板無力癥、巨大血小板綜合征、低（無）纖維蛋白原血癥、肝硬化、尿毒癥、細菌性心內膜炎、急性白血病、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、特發性血小板減少性紫癜、服用抗血小板藥物等。二、血小板檢驗（四）血小板聚集試驗（PAgT）【臨床意義】2.PAgT增高反映血小板聚集功能增強。見于血液高凝狀態和（或）血栓前狀態和血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、動脈粥樣硬化性心臟病、糖尿病、腎病綜合征、心臟瓣膜置換術后、深靜脈血栓形成、高脂飲食、口服避孕藥和吸煙等。二、血小板檢驗（五）血小板第三因子有效性測定【實驗原理】

將健康人與受檢者的富血小板血漿（PRP）和乏血小板血漿（PPP）交叉混合，以白陶土作為活化劑，氯化鈣作為凝血反應啟動劑，促使PF3形成。通過測定各組標本的凝固時間，比較各組凝血時間的差異，從而判斷受檢者PF3是否有缺陷。二、血小板檢驗（五）血小板第三因子有效性測定【實驗原理】組別患者血漿（ml）正常血漿（ml）PRPPPPPRPPPP10.10.120.10.130.10.140.10.1PF3aT測定分組二、血小板檢驗（五）血小板第三因子有效性測定【參考區間】第1組較第2組的結果延長不超過5秒，若延長5秒以上，則視為PF3有效性減低。第3組與第4組分別為患者和正常人（作為對照管），患者PF3有缺陷或內源凝血因子有缺陷（如血友病），第3組凝固時間亦會延長。二、血小板檢驗（五）血小板第三因子有效性測定【臨床意義】1.PF3有效性減低見于先天性血小板PF3缺乏癥、血小板無力癥、巨大血小板綜合征、肝硬化、尿毒癥、彌散性血管內凝血、系統性紅斑狼瘡、特發性血小板減少性紫癜、骨髓增生異常綜合征及一些藥物的影響。二、血小板檢驗（五）血小板第三因子有效性測定【臨床意義】2.PF3有效性增加見于高脂血癥、動脈粥樣硬化、心肌梗死、糖尿病伴血管病變等。二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【實驗原理】

用熒光素標記的抗血小板膜糖蛋白的單克隆抗體作分子探針，與全血或富含血小板的血漿反應，通過流式細胞儀檢測標記于抗體的熒光素發出的熒光信號，計算出陽性血小板的百分率。用定量流式分析技術還可以定量檢測血小板膜糖蛋白分子的數量。二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【實驗原理】CD編號識別的膜糖蛋白CD36GPⅣCD41GPⅡb/Ⅲa和GPⅡbCD42aGPⅨCD42bGPⅠCD42dGPⅤCD61GPⅢaCD62PP-selectin或MP140FCM常用的血小板膜糖蛋白單克隆抗體二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【參考區間】1.FCM分析

糖蛋白GPⅠb（CD42b）、GPⅡb(CD41)、GPⅢa（CD61）、GPⅨ（CD42a）陽性血小板百分率為95%～98%。CD62P（GMP-140）<2%，CD63<2%，FIB-R<5%。二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【參考區間】2.定量流式細胞分析GPⅢa（CD61）：（53±12）×103分子數/血小板。GPⅠb（CD42b）：（38±11）×103分子數/血小板。GPⅠa（CD49b）：（5±2.8）×103分子數/血小板。二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【臨床意義】1.血小板功能缺陷病①巨大血小板綜合征：血小板膜GPⅠb-Ⅸ-Ⅴ含量顯著減少或缺乏；②血小板無力癥：血小板膜GPⅡb-Ⅲa含量顯著減少或缺乏，輕型患者可有部分殘留（5%～25%）；二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【臨床意義】1.血小板功能缺陷病③血小板貯存池缺陷病：致密顆粒缺乏（Ⅰ型）患者，活化血小板膜CD62P表達正常；α顆粒缺乏（Ⅱ型）或α顆粒與致密顆粒聯合缺陷（Ⅲ型）患者，活化血小板膜CD62P表達減低或缺乏，但GPⅠb、GPⅡb、GPⅢa、GPⅤ和GPⅨ表達正常。二、血小板檢驗（六）血小板膜糖蛋白測定【臨床意義】2.血栓前狀態與血栓性疾病

循環血小板膜GPⅡb-Ⅲa分子數量增加、（FIB-R）表達量增加、CD62P或CD63表達增加是血小板活化的特異性分子標志，尤其是FIB-R高表達時，表明血小板的聚集性顯著增高，易導致血栓形成。二、血小板檢驗（七）血小板相關抗體測定【實驗原理】將抗人血小板抗體包被在酶標反應板孔內，加受檢血小板溶解液，如果此液中存在有相關抗體則可與包被的抗體結合，再加入酶聯二抗，最后加入底物顯色，其深淺與血小板溶解液中的抗體含量成正相關。二、血小板檢驗（七）血小板相關抗體測定【參考區間】ELISA法PAIgG：（0～78.8）ng/107血小板；

PAIgA：（0～2）ng/107血小板；

PAIgM：（0～7）ng/107血小板；

PAC3：（0～18）ng/107血小板。二、血小板檢驗（七）血小板相關抗體測定【臨床意義】90%以上的特發性血小板減少性紫癜（ITP）患者PAIgG增加，同時測定PAIgA、PAIgM及PAC3陽性率達100%。且隨治療好轉PAIg水平下降，復發則增加。二、血小板檢驗（七）血小板相關抗體測定【臨床意義】其他疾病如同種免疫性血小板減少性紫癜（多次輸血后）、Evans綜合征、慢性活動性肝炎、系統性紅斑狼瘡、惡性淋巴瘤、慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤等PAIg也可增加。特異性抗血小板膜糖蛋白的自身抗體陽性對診斷ITP有較高的特異性，其中以抗GPⅡb/Ⅲa，GPⅠb/Ⅸ復合物的抗體為主。二、血小板檢驗（八）血小板壽命測定【實驗原理】觀察單次劑量服用阿司匹林后血小板MDA和TXB2生成恢復至服藥前水平的時間，可以反映血小板生存時間。用ELISA法或RIA可測定TXB2或MDA的含量。二、血小板檢驗（八）血小板壽命測定【參考區間】MDA法6.6～15天TXB2法7.6～11天二、血小板檢驗（八）血小板壽命測定【臨床意義】血小板生存期縮短見于①血小板破壞增多性疾病：如特發性血小板減少性紫癜、藥物性血小板減少、脾功能亢進、系統性紅斑狼瘡；②血小板消耗過多性疾病：如DIC、血栓性血小板減少性紫癜、溶血尿毒癥綜合征；③各種血栓性疾病：如心肌梗死、糖尿病伴血管病變、深靜脈血栓形成、肺梗死、惡性腫瘤等。第三節血液凝固與檢驗一、基礎理論（一）凝血因子包括12個經典的凝血因子以及激肽系統的激肽釋放酶原和高分子量激肽原，以羅馬數字命名的凝血因子為Ⅰ～ⅩⅢ。除因子Ⅲ為組織因子，其余均存在于新鮮血漿中。除因子IV為鈣離子外,其余均為蛋白質。因子蛋白質結構酶活性生物半衰期生成部位是否依賴維生素K血漿中濃度(mg/L)BaSO4吸附血漿中是否存在血清中有無Ⅰ3對肽鏈90h肝否2000~4000是無Ⅱ單鏈S*60h肝是200否很少Ⅲ單鏈輔因子—組織細胞內皮細胞單核細胞否———Ⅴ單鏈輔因子12h肝否5~10是無Ⅶ單鏈S4~6h肝是2否有Ⅷ單鏈輔因子12h不明否<10是無Ⅸ單鏈S24h肝是3~4否有Ⅹ雙鏈S30~40h肝是6~8否有Ⅺ雙鏈S48~84h肝否4存在，但減少1/3有Ⅻ單鏈S48~52h肝否2.9是有PK單鏈S6.5天肝否5.0~15存在有HMWK單鏈輔因子3~5天肝否7.0存在有ⅩⅢ雙鏈轉谷氨酰酶10天肝否2.5存在有注：S*表示絲氨酸蛋白酶，因為酶的活化中心含絲氨酸凝血因子的一般特點一、基礎理論（一）凝血因子1.依賴維生素K的凝血因子（1）因子Ⅱ（凝血酶原,prothrombin）（2）因子Ⅶ（穩定因子，stablefactor）（3）因子Ⅸ（血漿凝血活酶成分，plasmathromboplastincomponent，PTC）（4）因子Ⅹ（Stuart-Prower因子）

一、基礎理論（一）凝血因子2.接觸凝血因子（1）因子Ⅺ（2）因子Ⅻ（3）激肽釋放酶原（prokallikrein，PK）（4）高分子量激肽原（highmolecularweightkininogen,HMWK）一、基礎理論（一）凝血因子3.凝血酶敏感因子（1）因子Ⅰ（纖維蛋白原，fibrinogen，Fg）（2）因子Ⅴ（易變因子，labilefactors）（3）因子Ⅷ（抗血友病球蛋白,antiemophiliaglobulin，AHG）（4）因子ⅩⅢ（纖維蛋白穩定因子,fribrinstabilizingfactor）一、基礎理論（一）凝血因子4.其他凝血因子（1）組織因子（tissuefactor，TF）（2）因子Ⅳ（鈣離子,Ca2+）一、基礎理論（二）凝血機制1.內源凝血途徑（1）因子Ⅻ的激活①固相激活；②液相激活。（2）因子Ⅺ的激活（3）因子Ⅸ的激活（4）因子Ⅷ的作用

一、基礎理論（二）凝血機制2.外源凝血途徑（1）因子Ⅲ(TF)：啟動外源凝血途徑（2）因子Ⅶ的激活一、基礎理論（二）凝血機制3.共同凝血途徑（1）凝血酶原酶生成①因子Ⅹ的激活；②因子Ⅴ的激活；③磷脂的作用。（2）凝血酶生成（3）纖維蛋白的形成

一、基礎理論（二）凝血機制3.共同凝血途徑

血液凝固機制二、凝血因子檢驗（一）全血凝固時間測定（CT）（二）活化凝血時間測定（ACT）（三）活化部分凝血活酶時間測定（APTT）（四）血漿凝血酶原時間測定（PT）

二、凝血因子檢驗（五）血漿纖維蛋白原測定血漿纖維蛋白原由肝臟合成，是血漿中含量最高的凝血因子。【實驗原理】1.凝血酶（Clauss）法2.PT衍生法【參考區間】成人：2.00～4.00g/L；新生兒：1.25～3.00g/L。

二、凝血因子檢驗（五）血漿纖維蛋白原測定【臨床意義】Fg可做為溶栓治療檢測的指標。Fg一般不應低于1.2～1.5g/L1.Fg增高①感染；②無菌性炎癥；③血栓前狀態與血栓性疾病；④惡性腫瘤；⑤外傷、燒傷、外科手術或放射治療后；⑥其他。

二、凝血因子檢驗（五）血漿纖維蛋白原測定【臨床意義】Fg可做為溶栓治療檢測的指標。Fg一般不應低于1.2～1.5g/L2.Fg降低①原發性纖維蛋白原減少或結構異常；②繼發性纖維蛋白原減少。

二、凝血因子檢驗（六）血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定【實驗原理】將受檢血漿分別與乏凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ基質血漿混合，做血漿凝血酶原時間測定【參考區間】

FⅡ:C：97.7％±16.7％；

新生兒：FⅤ:C：102.4％±30.9％；FⅦ:C：103％±17.3％；FX:C：103％±19.0％。

二、凝血因子檢驗（六）血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定【臨床意義】1.活性增高①血栓前狀態；②血栓性疾病。2.活性減低①先天性因子缺乏；②獲得性因子減低。

二、凝血因子檢驗（七）血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測定【實驗原理】在受檢血漿中分別加入乏凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的基質血漿、白陶土-腦磷脂懸液和Ca2+溶液，進行APTT測定。【參考區間】

FⅧ:C：103％±25.7％；FⅨ:C：98.1％±30.4％；FⅪ:C：100％±18.4％；FⅫ:C：92.4％±20.7％

二、凝血因子檢驗（七）血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測定【臨床意義】1.增高①高凝狀態；②血栓前狀態；③血栓性疾病。2.減低①因子Ⅷ：C減低見于血友病甲、血管性血友病等；②因子Ⅸ：C減低見于血友病乙、肝臟疾病等；③因子Ⅺ:C減低見于Ⅺ因子缺乏癥、DIC等；④因子Ⅻ:C減低見于先天性因子Ⅻ缺乏癥、DIC等。

二、凝血因子檢驗（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗和亞基抗原測定1.凝血因子ⅩⅢ定性試驗【實驗原理】激活的因子ⅩⅢ可以使纖維蛋白單體間交聯后形成不可溶的纖維蛋白凝塊。【參考區間】24小時內纖維蛋白凝塊不溶解。【臨床意義】①先天性因子ⅩⅢ缺乏癥②獲得性因子ⅩⅢ減少癥：肝病、系統性紅斑狼瘡、DIC等。

二、凝血因子檢驗（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗和亞基抗原測定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測【實驗原理】免疫火箭電泳法：在含有FⅩⅢα亞基和β亞基抗血清的瓊脂凝膠板中，加入受檢血漿在電場作用下，出現抗原-抗體反應形成的火箭樣沉淀峰，此峰的高度與受檢血漿中FⅩⅢ亞基的濃度成正比。

二、凝血因子檢驗（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗和亞基抗原測定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測【參考區間】免疫火箭電泳法：FⅩⅢα：100.4％±12.9％；FⅩⅢβ：98.8％±12.5％。

二、凝血因子檢驗（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗和亞基抗原測定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測【臨床意義】

先天性因子ⅩⅢ缺乏癥：純合子型者的FⅩⅢα：Ag明顯減低（≤1％），FⅩⅢβ：Ag輕度減低；雜合子型的FⅩⅢα：Ag（常≤50％），FⅩⅢβ：Ag正常。獲得性因子ⅩⅢ減少癥：見于肝臟疾病、DIC等

第四節抗凝物質與檢驗學習目標

掌握常用抗凝物質檢驗（復鈣交叉試驗、凝血酶時間測定及糾正試驗）原理、注意事項及臨床意義；熟悉主要抗凝物質的作用原理；了解抗凝物質如抗凝血酶、蛋白C系統、組織因子途徑抑制物等的基本理論。一、基本理論（一）抗凝血酶抗凝血酶（antithrombin，AT）是一種單鏈糖蛋白，由肝、血管內皮細胞和巨核細胞合成，屬于α2球蛋白。AT作用：AT是肝素依賴的絲氨酸蛋白酶抑制物，抑酶譜很廣，能抑制FⅡa、FVⅡa、FIXa、Fxa、FXⅡa以及纖溶酶、胰蛋白酶和激肽釋放酶等，作用機制相同。

一、基本理論（一）抗凝血酶AT作用機制：肝素與AT結合后，導致AT構型發生改變，后者可與這些酶活性中心的絲氨酸殘基結合，“封閉”了這些酶的活性中心而使之失活。此時肝素可從復合物中重新釋出，再與其他游離的AT結合，繼續發揮肝素增強AT抗凝功能的作用。

一、基本理論（二）蛋白C系統蛋白C系統包括蛋白C（PC）、凝血酶調節蛋白（TM）、蛋白S（PS）、活性蛋白C抑制物（APCI）和內皮細胞蛋白C受體（EPCR）蛋白C、蛋白S、APCI由肝臟產生。TM和EPCR由內皮細胞產生和表達。

一、基本理論（二）蛋白C系統APC作用機制蛋白C被凝血酶與凝血酶調節蛋白復合物激活形成活化的蛋白C（APC），這一過程在EPCR輔助下完成。APC在蛋白S的協同下，發揮抗凝作用，主要表現在裂解因子Va、Ⅷa，抑制因子Xa與血小板膜磷脂的結合。

一、基本理論（二）蛋白C系統APCI作用機制APCI通過和APC結合使之失去滅活因子Va、Ⅷa的作用。如果蛋白C或蛋白S有缺陷，與AT缺陷一樣（它們均有遺傳性缺陷），可引起機體凝血和抗凝平衡失調，導致血栓形成。

一、基本理論（三）組織因子途徑抑制物組織因子途徑抑制物（TFPI）是一種單鏈糖蛋白，主要由血管內皮細胞、血小板、單核細胞等合成和分泌。TFPI在血漿中以與脂蛋白結合和游離兩種形在存在。TFPI作用機制：TFPI存在于Ⅶa和Ⅹa的結合部位，通過和TF-Ⅶa復合物結合抑制其活性，從而對組織因子凝血途徑發揮重要調控作用。

一、基本理論（四）生理性和病理性抗凝物質生理性抗凝物質肝素輔因子Ⅱ（HCⅡ）a2-巨球蛋白（a2-MG）a1-抗胰蛋白酶（a1-AT）一、基本理論（四）生理性和病理性抗凝物質病理性抗凝物質主要包括肝素類肝素物質狼瘡抗凝物（LAC）凝血因子抑制物

二、抗凝物質檢驗（一）抗凝血酶活性及抗原測定【實驗原理】1.血漿抗凝血酶活性（AT:A）檢測發色底物法：受檢血漿中加入過量肝素和FⅩa，使AT與FⅩa形成無活性復合物，剩余的FⅩa水解發色底物，釋出發色基團而顯色，色澤的深淺與剩余FⅩa的量呈正相關，而與待測血漿中AT:A呈負相關。

二、抗凝物質檢驗（一）抗凝血酶活性及抗原測定【實驗原理】2.血漿抗凝血酶抗原（AT:Ag）檢測用酶聯免疫吸附法（ELISA法）或免疫火箭電泳法均可檢測。免疫火箭電泳法：以抗凝血酶的抗血清制備瓊脂糖凝膠板，將受檢血漿加入其中一起電泳，抗原和抗體相互作用形成火箭樣沉淀峰，沉淀峰的高度與血漿中AT的含量呈正相關。

二、抗凝物質檢驗（一）抗凝血酶活性及抗原測定【參考區間】血漿AT:A108.5%±5.3%；血漿AT:Ag（0.29±0.06）g/L

二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【實驗原理】1.蛋白C活性（PC:A）檢測①血漿凝固法：在待檢血漿中加入PC激活劑、FⅫ活化劑、磷脂和鈣離子，在活化內源凝血途徑的同時也激活PC系統，測定血漿的凝固時間（APTT）,其APTT比不加PC激活劑的APTT延長，而且APTT延長的程度與血漿PC:A呈正相關，由此可計算出相當于正常血漿PC:A的百分率。二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【實驗原理】1.蛋白C活性（PC:A）檢測②發色底物法：受檢血漿加入PC，PC被激活為活化蛋白C（APC），APC作用于特異性發色底物，釋出顯色基團，色澤的深淺與受檢血漿PC的活性成正相關。

二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【實驗原理】2.蛋白C抗原（PC:Ag）測定火箭電泳法：在含抗人PC抗體的瓊脂板中，加入一定量的受檢血漿（抗原）于檢測孔中，定量抗原在電場作用下由負極向正極泳動，在一定時間內形成火箭樣沉淀峰，峰高與抗原濃度成正比。

二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【參考區間】PC:A100.24%±13.18%；PC:Ag102.5%±20.1%

二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【臨床意義】人體內血漿PC含量隨年齡而增加，每10年約增加4%。1.PC抗原水平減低見于先天性蛋白C缺陷和獲得性蛋白C缺陷，如肝臟疾病、手術后、彌散性血管內凝血、成人型呼吸窘迫綜合征等。二、抗凝物質檢驗（二）蛋白C活性及抗原測定【臨床意義】2.PC抗原水平增高見于血栓性疾病和血栓前狀態，如彌散性血管內凝血、深部靜脈血栓形成、缺血性心臟病、急性心肌梗死、心絞痛、糖尿病、腎病綜合征、妊娠后期等。二、抗凝物質檢驗（三）蛋白S抗原測定【實驗原理】火箭電泳法：血漿總PS（TPS）包括游離PS（FPS）和與補體C4結合的PS（C4bP-PS），火箭電泳法可在瓊脂板上同時測定TPS和FPS。在待測血漿中加一定量聚乙二醇6000，可沉淀C4b-PS，上清部分即為FPS。二、抗凝物質檢驗（三）蛋白S抗原測定【參考區間】TPS：96.6%±9.8%FPS：100.9%±11.6%二、抗凝物質檢驗（三）蛋白S抗原測定【臨床意義】1.PS缺陷患者易出現血液高凝狀態，先天性PS缺陷患者常伴發嚴重的深靜脈血栓栓塞。2.獲得性PS缺陷常見肝臟疾病，如急性肝炎、慢性活動性肝炎、肝硬化、VitK缺乏癥、急性呼吸窘迫綜合征等。口服抗凝藥、口服避孕藥時，PS降低。妊娠及新生兒PS偏低。二、抗凝物質檢驗（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測【實驗原理】1.組織因子途徑抑制物活性（TFPI:A）檢測待測血漿與過量的TF/FⅦa和FⅩ作用，剩余的TF/FⅦa水解發色底物，釋放出發色基團，其顏色的深淺與血漿中TFPI:A呈負相關。2.組織因子途徑抑制物抗原（TFPI:Ag）檢測用ELISA雙抗體夾心法檢測血漿TFPI:Ag含量。二、抗凝物質檢驗（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測【參考區間】TFPI:A99.96%±5.0%；TFPI:Ag97.5μg/L±26.6μg/L二、抗凝物質檢驗（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測【臨床意義】1.老年人血漿中TFPI含量較高。妊娠時血漿TFPI也增高，但胎兒血漿TFPI含量降低。二、抗凝物質檢驗（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測【臨床意義】2.先天性TFPI缺乏易形成血栓，然而常見的TFPI減少大多數是獲得性的。大手術、膿毒血癥與DIC時往往血漿中TFPI減少，主要是過度消耗所致。致死性敗血癥時往往血漿中TFPI增多，可能與廣泛性血管內皮受損使之釋放增加有關。此外，慢性腎衰竭時血中TFPI也增多。二、抗凝物質檢驗（五）凝血酶時間測定（TT）及其糾正實驗【實驗原理】

受檢血漿加入“標準化”的凝血酶溶液后，測定其凝固所需的時間為凝血酶時間（TT）。如血漿中纖維蛋白原的量或質有異常或存在循環抗凝血酶類抗凝物質，則凝血時間延長。因甲苯胺藍可中和肝素和類肝素抗凝物質，故凝血酶時間延長被甲苯胺藍糾正，可認為存在肝素或類肝素物質。二、抗凝物質檢驗（五）凝血酶時間測定（TT）及其糾正實驗【參考區間】

凝固法：16～18秒，若超過正常對照3秒以上者為異常。加甲苯胺藍后TT明顯縮短，與未加甲苯胺藍的TT比較相差5s以上，視為糾正。二、抗凝物質檢驗（五）凝血酶時間測定（TT）及其糾正實驗【臨床意義】

1.凝血酶時間延長以DIC時纖維蛋白原消耗過多多見，也有部分屬于先天性低（無）纖維蛋白原血癥、原發性纖溶及肝病病變，也可見于肝素增多或類肝素抗凝物質增多及FDP增多。二、抗凝物質檢驗（五）凝血酶時間測定（TT）及其糾正實驗【臨床意義】

2.凝血酶時間縮短主要見于某些異常蛋白血癥或巨球蛋白血癥。此外，較多的是技術原因，如標本在4℃環境中放置過久，組織液混入血漿等。二、抗凝物質檢驗（五）凝血酶時間測定（TT）及其糾正實驗【臨床意義】

3.TT延長能被糾正血中類肝素物質增多，多見于過敏性休克、嚴重肝病、肝葉切除、肝移植、DIC，也可見于使用氮芥以及放療后的患者。4.TT延長不能被糾正為其他類抗凝物質或纖維蛋白原缺陷。二、抗凝物質檢驗（六）普通肝素和低分子量肝素測定【實驗原理】抗凝血酶（AT）可抑制凝血酶及Xa，但在正常情況下，其抑制作用較慢。當肝素與AT結合形成1：1的復合物，該復合物滅活因子Xa的作用大大加強；低分子量肝素對AT和Fxa間反應的催化作用較其對AT和凝血酶間反應的催化更容易，而標準肝素對兩者的催化作用相同。二、抗凝物質檢驗（六）普通肝素和低分子量肝素測定【實驗原理】在AT和FXa均過量的反應中，肝素對FXa的抑制速率直接與其濃度成正比，用特異性FXa發色底物法檢測剩余FXa的活性，發色強度與肝素濃度呈負相關。二、抗凝物質檢驗（六）普通肝素和低分子量肝素測定【參考區間】發色底物法：正常人檢測血漿肝素為0U/ml。本法檢測肝素的范圍是0～0.8U/ml。二、抗凝物質檢驗（六）普通肝素和低分子量肝素測定【臨床意義】在過敏性休克、使用氮芥化療或放療后、嚴重肝病或DIC、肝葉切除或肝移植等患者的血漿中肝素樣抗凝物亦增多。某些腫瘤細胞可分泌肝素樣物質，如腎上腺皮質腫瘤、多發性骨髓瘤等。肝臟損傷導致肝素在肝臟內的降解作用減弱，也可導致肝素樣抗凝物增多。二、抗凝物質檢驗（七）復鈣交叉試驗【實驗原理】延長的復鈣時間，如能被1/10量的正常血漿所糾正，表示受檢血漿中缺乏凝血因子；如果不能被等量的正常血漿所糾正，表示受檢血漿中有抗凝物質。二、抗凝物質檢驗（七）復鈣交叉試驗【參考區間】受檢血漿與1/10量正常血漿混合，血漿復鈣時間不在正常范圍內（2.2～3.8分鐘），則認為受檢血漿中存在異常抗凝物質。【臨床意義】血漿中存在異常的抗凝物質，見于反復輸血的血友病患者、肝病患者、系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎及胰腺疾病等。二、抗凝物質檢驗（八）凝血因子VIII抑制物測定【實驗原理】混合血漿法測定：將受檢血漿與已知量的正常人Ⅷ因子血漿混合，溫浴一定時間后測定剩余Ⅷ因子的活性，以Bethesda單位來計算抑制物的含量，一個Bethesda單位相當于滅活50%因子Ⅷ活性。二、抗凝物質檢驗（八）凝血因子VIII抑制物測定【參考區間】陰性【臨床意義】以Bethesda單位來計算抑制物的含量，不僅可用于因子VIII抑制物檢測，還可用于其他因子（IX、X、XI）抑制物的檢測。臨床常見于反復輸血或因子VIII濃縮制劑的血友病患者，也見于某些自身免疫病患者或妊娠期間。第五節纖維蛋白（原）溶解系統與檢驗學習目標

掌握纖溶物質檢驗（3P試驗、t-PA、FDP和D-二聚體）原理、注意事項及臨床意義；2.熟悉纖維蛋白（原）降解產物的作用。纖維蛋白溶解系統簡稱纖溶系統；其主要作用是將沉積在血管內外的纖維蛋白溶解，起到修復、祛除和防止血管內由于纖維蛋白沉著(如血栓形成)引起的阻塞作用。纖溶系統功能亢進可引起出血，功能減低則可導致血栓形成，因而纖溶系統具有重要的生理和病理意義。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點1.纖溶酶原激活物（1）組織纖溶酶原激活物(t-PA)是一種由血管內皮細胞合成的單鏈糖蛋白，屬于絲氨酸蛋白酶。在胰腺、肺、子宮、腎上腺、前列腺和甲狀腺等組織中含量高。t-PA與纖維蛋白具有很強的親和力，t-PA激活纖溶酶原主要在纖維蛋白上進行，是體內最強的纖溶酶原激活物。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點1.纖溶酶原激活物（2）尿激酶樣纖溶酶原激活物(u-PA)是來源于腎小管上皮細胞和血管內皮細胞的單鏈糖蛋白，血中含量極低。u-PA有單鏈和雙鏈二種形式，少量的纖溶酶和激肽釋放酶可使單鏈u-PA裂解成雙鏈u-PA。u-PA激活纖溶過程迅速，不依賴于纖維蛋白。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點2.纖溶酶原(PLG)和纖溶酶(PL)PLG由肝合成的一種單鏈糖蛋白，以無纖溶活性的酶原形式存在于血液中。纖溶酶原在其激活物t-PA或u-PA作用下轉變成有纖溶活性的雙鏈結構絲氨酸蛋白水解酶，它除了能裂解纖維蛋白原和纖維蛋白外，還參與分解凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅺ和因子Ⅻa等。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點3.纖溶抑制物（1）纖溶酶原激活物抑制物(PAI）能特異性抑制t-PA和u-PA激活纖溶酶原，主要有二種：①纖溶酶原抑制物-1(PAI-1)；②纖溶酶原抑制物-2(PAI-2)。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點3.纖溶抑制物（2）纖溶酶抑制物正常血漿中有多種非特異性纖溶酶抑制物，其中以α2抗纖溶酶(α2-AP)最為重要，它與纖溶酶形成1：1復合物(PAP)使其失去蛋白水解活性。一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點3.纖溶抑制物（2）纖溶酶抑制物一、基礎理論（一）纖溶系統的組成及其特點3.纖溶抑制物（3）凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)凝血酶激活的纖溶抑制物是一種血漿蛋白質，以酶原的形式存在。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制纖溶過程是一系列蛋白酶催化的連鎖反應，一般分為二個階段：

1.纖溶酶原被激活為纖溶酶

2.纖溶酶水解纖維蛋白(原)及其他蛋白質一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制1.纖溶酶原激活途徑（1）內激活途徑：主要指血循環中內源凝血途徑中某些因子，如因子Ⅻa、K等能激活纖溶酶原形成纖溶酶。（2）外激活途徑：主要指體內合成的某些激活物，如t-PA、u-PA等進入循環，激活纖溶酶原形成纖溶酶。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制1.纖溶酶原激活途徑（3）外源激活途徑：主要指外界進入體內的某些藥物，如鏈激酶(SK)、尿激酶(UK)等激活纖溶酶原形成纖溶酶，這是溶栓治療的基礎。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制1.纖溶酶原激活途徑一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制2.纖維蛋白(原)降解機制（1）纖維蛋白原的降解：纖溶酶首先作用于纖維蛋白原Bβ鏈，釋放出纖維蛋白Bβ1-42肽；又作用于Aα鏈，釋放出其附屬物A、B、C、H，即Aα羧基端的四個小片段，剩下的部分稱為X片段，然后X片段再依次被纖溶酶裂解出Y、D、E片段。纖溶酶對纖維蛋白原的裂解見于原發性纖溶。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制2.纖維蛋白(原)降解機制（2）可溶性纖維蛋白的降解可溶性纖維蛋白是纖維蛋白原被凝血酶降解釋放出肽A(Aα1-16)和肽B(Bβ1-14)后形成的產物。纖溶酶作用于可溶性纖維蛋白后釋放出Bβ1-14肽，不含FPA的裂解片段分別用X’、Y’、D’、E’命名。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制2.纖維蛋白(原)降解機制（3）交聯纖維蛋白的降解在纖溶酶的作用下交聯纖維蛋白除降解出碎片X’、Y’、D’、E’外，還生成D-D二聚體和DD/E、DY/YD、YY/DXD等復合物。一、基礎理論（二）纖維蛋白的溶解機制2.纖維蛋白(原)降解機制一、基礎理論（三）纖維蛋白（原）降解產物的作用纖溶酶對纖維蛋白和纖維蛋白原的裂解產物統稱為纖維蛋白(原)降解產物(FDP)。FDP可與纖維蛋白原競爭凝血酶，阻止纖維蛋白單體(FM)形成，并可與FM結合形成可溶性復合物，抑制FM聚合和交聯成不溶性纖維蛋白，發揮抗凝作用。而交聯纖維蛋白的裂解產物D二聚體發生在繼發性纖溶之后，對于區別原發性與繼發性纖溶有較高的價值。一、基礎理論（三）纖維蛋白（原）降解產物的作用一、基礎理論（三）纖維蛋白（原）降解產物的作用纖溶活性的檢測及臨床意義

1.優球蛋白溶解時間測定

2.血漿組織纖溶酶原激活物測定

3.血漿纖溶酶原測定

4.血漿組織纖溶酶原激活物抑制物測定

5.血漿a2-抗纖溶酶活性測定

6.血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗二、纖維蛋白溶解系統檢驗（一）優球蛋白溶解時間測定【實驗原理】血漿優球蛋白組分中含纖維蛋白原、纖溶酶原和纖溶酶原激活物等，但不含纖溶酶抑制物。用低離子強度和Ph4.5的溶液沉淀和分離優球蛋白，再溶于緩沖液中，加鈣或凝血酶使其凝固，測定凝塊完全溶解的時間，即優球蛋白溶解時間。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（一）優球蛋白溶解時間測定【參考區間】

加鈣法:129min48s±4min6s加凝血酶法:123±24min二、纖維蛋白溶解系統檢驗（一）優球蛋白溶解時間測定【臨床意義】

ELT縮短（＜70min）表明纖溶活性增強，見于原發性和繼發性（DIC）纖溶亢進。但在DIC早期尚未發生繼發性纖溶亢進時，或當纖溶極度亢進，纖溶酶絕大部分已被消化時，可為陰性。ELT延長表明纖溶活性減低，見于血栓形成前期和血栓形成性疾病。二、纖維蛋白溶解系統檢驗(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測定（ELISA法）【實驗原理】

根據雙抗體夾心法原理，將純化的組織纖溶酶原激活物（t-PA）或纖溶酶原激活物抑制劑（PAI）單克隆抗體包被在反應板上，加入待測樣本和標準品，加過氧化物酶標記的t-PA或PAI抗體，再加鄰苯二胺（OPD）顯色后讀取A值，計算出各自的血漿濃度。二、纖維蛋白溶解系統檢驗(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測定（ELISA法）【參考區間】

t-PA：1～12μg/LPAI：2～10μg/L二、纖維蛋白溶解系統檢驗(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測定（ELISA法）【臨床意義】

血漿t-PA的影響因素較多，可隨年齡的增加而升高；在劇烈運動，機體應激反應時增高。PAI的釋放有明顯的晝夜節律性，早晨較高，下午較低。一般在上午8～10時采血較為適宜。二、纖維蛋白溶解系統檢驗(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測定（ELISA法）【臨床意義】

t-PA增高見于應激反應、劇烈運動、先天性增高以及纖溶亢進時。降低往往見于高凝狀態和血栓性疾病、口服避孕藥、肥胖癥等。PAI增高見于血栓性疾病和高凝狀態，減低見于原發性或繼發性纖溶癥。二、纖維蛋白溶解系統檢驗(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測定（ELISA法）【臨床意義】

t-PA和PAI的檢測不僅是為了了解纖溶系統激活狀態，目前在動靜脈血栓形成性疾病的診斷、預后和治療評價中也被廣泛應用。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（三）血漿纖溶酶原活性測定【實驗原理】免疫擴散法：受檢血漿（含抗原）加到含抗纖溶酶原（PLG）血清的瓊脂糖擴散板中，自然擴散一定時間后，通過測定抗原抗體反應沉淀弧的直徑來計算受檢者血漿纖溶酶原（PLG抗原）含量。其直徑與PLG含量呈正相關。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（三）血漿纖溶酶原活性測定【實驗原理】發色底物法：受檢血漿中加鏈激酶（SK)和發色底物（S-2251)，受檢血漿中的PLG在SK的作用下，轉變成PL，后者作用于發色底物，釋出對硝基苯胺（PNA）而顯色。顯色的深淺與纖溶酶的水平呈正相關，通過計算求得血漿中PLG的活性。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（三）血漿纖溶酶原活性測定【參考區間】

免疫擴散法：230～340mg/L；發色底物法：75%～150%。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（三）血漿纖溶酶原活性測定【臨床意義】1.減低見于先天性纖溶酶原缺乏癥，但更常見于纖溶酶原激活物活性增強的情況，如原發性和繼發性纖溶亢進、溶栓治療后、重癥肝炎、肝硬化、肝葉切除術、大手術后、腫瘤播散、嚴重感染等。2.增高見于纖溶活性的降低，如高凝狀態和血栓性疾病。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（四）血漿a2-抗纖溶酶活性(α2-AP)測定【實驗原理】α2-抗纖溶酶活性（α2-AP:A）發色底物法：受檢血漿中加入過量的纖溶酶，使α2-AP與纖溶酶形成復合物，剩余的纖溶酶作用于發色底物（HD-Nva-CHA-Lys-PNA)釋出對硝基苯胺（PNA）而顯色。顯色的深淺與α2-AP呈負相關。α2-抗纖溶酶抗原（α2-AP:Ag）,常用雙抗體夾心ELISA檢測，也可通過凝膠電泳或免疫比濁法測定。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（四）血漿a2-抗纖溶酶活性(α2-AP)測定【參考區間】

α2-AP:A95.6%±12.8%α2-AP:Ag0.06g～0.10g/L【臨床意義】1.增高見于靜脈、動脈血栓形成、惡性腫瘤、分娩后等。2.減低見于有肝病、DIC、手術后、先天性α2-AP缺乏癥。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（五）血漿硫酸魚精蛋白副凝固(3P)試驗【實驗原理】纖維蛋白原在凝血酶作用下釋放出A肽和B肽后轉變成纖維蛋白單體(FM)。FM具有自行聚合呈肉眼可見的纖維、絮狀或膠凍裝的特性。如發生繼發性纖溶，存在纖維蛋白降解產物，尤其X’片段可和FM形成可溶性復合物，而硫酸魚精蛋白具有分離這種復合物的能力，可使FM游離出來，形成肉眼可見的纖維素樣物質，稱為血漿魚精蛋白副凝固試驗,也稱3P試驗。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（五）血漿硫酸魚精蛋白副凝固(3P)試驗【參考區間】陰性。【臨床意義】1.陽性見于DIC早期、中期、嚴重創傷，大手術，咯血、嘔血以及久置冰箱的樣品。2.DIC晚期和原發性纖溶（因血中無FM）時也表現為陰性，故在區別原發性和繼發性纖溶時有一定意義。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（六）血漿纖維蛋白（原）降解產物的檢測【實驗原理】

膠乳凝集試驗（Fi試驗）：用特異性抗纖維蛋白（原）D、E片段抗體標記的膠乳顆粒與受檢血清混合，如血清中含有纖維蛋白（原）降解產物（FDP），特別是D、E片段，可發生抗原抗體反應，導致膠乳顆粒凝集。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（六）血漿纖維蛋白（原）降解產物的檢測【實驗原理】

膠乳增強散射比濁法：將FDP抗體包被在膠乳顆粒上，然后與FDP結合，形成FDP抗原抗體復合物的膠乳凝集顆粒，體積增大，根據散射光的變化計算出其含量。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（六）血漿纖維蛋白（原）降解產物的檢測【實驗原理】

ELISA法：將抗FDP抗體（多克隆或單克隆抗體）包被于固相載體上（酶標反應板），加入待測血清或尿液。如存在FDP即發生抗原抗體反應，形成的復合物再與酶聯抗體(過氧化物酶標記的相同抗體）反應，以OPD顯色，讀取的A值與FDP含量呈正比，參照用標準品制成的標準曲線可算出待測樣品的FDP量。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（六）血漿纖維蛋白（原）降解產物的檢測【參考區間】

膠乳凝集法陰性；膠乳增強散射比濁法0～5μg/ml；ELISA法血清（28±17）mg/L。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（六）血漿纖維蛋白（原）降解產物的檢測【臨床意義】

血漿FDP增高常見于DIC、急性靜脈血栓、原發性纖溶癥、鏈激酶等溶栓治療、急性心肌梗死、嚴重的肺炎、大手術后、惡性腫瘤和休克等。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測定【實驗原理】膠乳凝集法：受檢血漿中加入標有D-二聚體（DD）單克隆抗體的膠乳顆粒懸液，若血漿中的D-二聚體含量高于0.5mg/L，則與膠乳顆粒標記的單抗發生凝集反應。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測定【實驗原理】膠乳增強散射比濁法：將D-二聚體抗體包被在乳膠顆粒上，然后與D-二聚體結合，形成D-二聚體抗原抗體復合物的膠乳凝集顆粒，體積增大，根據散射光的變化計算出其含量。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測定【實驗原理】

ELISA法：將D-二聚體單抗包被于酶標反應板，加入受檢血漿，血漿中的D-二聚體與包被在反應板中的D-二聚體單抗相結合。然后再加入酶標記的D-二聚體抗體，與被包被的D-二聚體結合。最后加入底物顯色，顯色的深淺與血漿中的D-二聚體含量呈正相關，所測吸光度值可從標準曲線中計算出血漿中D-二聚體的含量。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測定【參考區間】

膠乳凝集法陰性；膠乳增強散射比濁法0～256μg/L；ELISA法0～200μg/L。二、纖維蛋白溶解系統檢驗（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測定【臨床意義】在繼發性纖溶、深靜脈血栓、肺栓塞、彌漫性血管內凝血、重癥肝炎、肺栓塞等疾病中升高。而在原發性纖溶時不增高，是鑒別原發性纖溶和繼發性纖溶的重要指標，也可作為溶栓治療是否有效的觀察指標。陳舊性血栓患者D-二聚體并不升高。第六節血栓形成與檢驗學習目標

掌握血栓前狀態實驗室檢查的原理、臨床應用及評價；了解血栓的分類，血栓的形成機制及血栓對機體的影響。一、基本理論（一）血栓分類1.白色血栓血小板+少量纖維蛋白，動脈內2.混合血栓頭+體+尾3.紅色血栓RBC+WBC，靜脈內4.透明血栓微血栓，微循環內DIC、休克一、基本理論（二）血栓形成機制1.心血管內皮細胞損傷2.血小板數量和活性增高3.血液凝固性增加4.血流狀態的改變一、基本理論（三）血栓對機體的影響1.阻塞血管2.栓塞3.心瓣膜變形4.廣泛性出血二、血栓前狀態檢驗（一）血漿血栓烷B2檢測血小板激活后，膜磷脂花生四烯酸代謝亢進，生成血栓烷A2，后者極不穩定，很快轉化為無生物活性的血栓烷B2（TXB2)。少量血小板在體外活化就可使血漿中TXB2含量可反映花生四烯酸的代謝水平，從而反映血小板是否被激活。二、血栓前狀態檢驗（一）血漿血栓烷B2檢測【實驗原理】用血栓烷B2（TXB2）-牛血清白蛋白包被酶標反應板，加入受檢血漿或TXB2標準品和抗TXB2抗體。包被的TXB2與受檢血漿中或標準品中TXB2競爭性與抗TXB2抗體結合，包被的TXB2與抗體結合的量與受檢血漿中TXB2的含量成負相關。加酶標第二抗體及底物，根據顯色程度推算出樣品的TXB2的含量。二、血栓前狀態檢驗（一）血漿血栓烷B2檢測【參考區間】28.2～124.4ng/L【臨床意義】本實驗受血小板影響因素較大，因此采血后應立即試驗，并避免一些激活或影響血小板活性的藥物及物品。二、血栓前狀態檢驗（一）血漿血栓烷B2檢測【臨床意義】1.TXB2增高見于血栓性疾病和血栓前狀態，如動脈粥樣硬化、心肌梗死、肺梗死、糖尿病、高脂血癥、妊高癥、DVT、惡性腫瘤、大手術后等。2.TXB2

減低見于先天性血小板花生四烯酸代謝障礙性疾病或服用阿司匹林、磺吡酮、咪唑及其衍生物等藥物后。二、血栓前狀態檢驗（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復合物檢測,TAT【實驗原理】

固相包被的兔抗人凝血酶抗體與受測樣品中的凝血酶AT復合物結合，再加入酶標鼠抗人AT與固相上的TAT結合，加入顯色底物顯色，色澤深淺與TAT含量正相關。【參考區間】ELISA法：1.0～4.1μg/L二、血栓前狀態檢驗（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復合物檢測,TAT【臨床意義】血漿水平在DIC前期即升高，所以TAT可作為DIC及Pre-DIC的診斷指標，其特異性和敏感性達80%～90%。二、血栓前狀態檢驗（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復合物檢測,TAT【臨床意義】1.TAT含量增高代表FXa增高和凝血活性亢進，見于血栓前狀態和血栓性疾病，如DIC、急性心肌梗死、不穩定型心絞痛、深靜脈血栓形成、腦梗死、急性白血病等。2.典型DIC時明顯升高，抗凝治療有效后，TAT下降。在急性心肌梗死的患者接受溶栓治療后，如血漿TAT水平仍高于6μg/L，則有再梗死可能。二、血栓前狀態檢驗（四）血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復合物檢測【實驗原理】血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復合物（PAP）檢測：用抗纖溶酶原抗體包被微孔板，加入受檢血漿，血漿中纖溶酶原和PAP中纖溶酶原部分與包被抗體結合于固相載體上。加入過氧化物酶標記的抗α2-抗纖溶酶抗體，它只與已結合在包被抗體上的PAP中的α2-抗纖溶酶部分結合。加入鄰苯二胺顯色，顏色的深淺和樣品中的PAP含量呈正相關。二、血栓前狀態檢驗（四）血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復合物檢測【參考區間】0.12～0.7mg/L【臨床意義】1.PAP增高見于血栓前狀態和血栓性疾病，如急性心肌梗死、腦梗死、腦血栓形成、深靜脈血栓形成、腎病綜合癥等。2.PAP水平的增高與DIC的發展平行，PAP水平的降低與DIC的緩解相關，在DIC的診斷中具有重要的價值。第七節血液流變學及檢驗學習目標

掌握血液流變學檢驗的原理、注意事項及臨床意義。一、基礎理論（一）血液流動性和黏滯性血液流變學是研究血液的流動性和黏滯性、血液中的紅細胞和血小板的聚集性、血漿的流動性、血液和血漿的黏滯性等方面的一門分支科學。在血管疾病中有重要意義。血液的流動性和黏滯性是血液的基本物理特性，它決定血液沿著血管不停地流動，以保證人體各器官的血液供應，是各個器官和組織保持正常生理功能的重要因素。

一、基礎理論（一）血液流動性和黏滯性血液的流動性和黏滯性發生異常時，將引起血液流動緩慢，使器官和組織缺血、缺氧。嚴重時，導致血栓形成，從而阻斷血流，使器官和組織發生嚴重缺血、缺氧，繼而水腫、變性，甚至壞死。血液流變學的研究，有助于對疾病的病因診斷，以便于利用對血液流變學有影響的藥物進行干預，以達到治療或預防的目的。一、基礎理論（二）影響血液黏度的因素1.心臟的泵力2.血管的狀態3.血液的狀態①血細胞容積；②紅細胞的變形性；③紅細胞聚集性④血漿黏度。二、血液流變學檢驗（一）全血黏度測定血液流動時，其內摩擦力阻礙血液的流動，這種阻礙血液流動的內摩擦力就是血液的黏性。度量這種