1、離心機參數計算第1頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Centrifuge rotorsFixed-angleaxis of rotationAt restSwinging-bucketgSpinningg第2頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Geometry of rotorsbcrmaxravrminrmaxravrminSedimentation path lengthaxis of rotationarmaxravrmin第3頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五k-factor of rotorsThe k-factor i

2、s a measure of the time taken for a particle to sediment through a sucrose gradientThe most efficient rotors which operate at a high RCF and have a low sedimentation path length therefore have the lowest k-factorsThe centrifugation times (t) and k-factors for two different rotors (1 and 2) are relat

3、ed by:第4頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Calculation of RCF and QRCF = Relative Centrifugal Force (g-force)Q = rpm; r = radius in cm第5頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五RCF in swinging-bucket and fixed-angle rotors at 40,000 rpmBeckman SW41 swinging-bucket (13 ml)gmin = 119,850g; gav = 196,770g;gmax = 273,690gB

4、eckman 70.1Ti fixed-angle rotor (13 ml)gmin = 72,450g; gav = 109,120g;gmax = 146,680g第6頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Velocity of sedimentation of a particlev = velocity of sedimentationd = diameter of particlep = density of particlel = density of liquid = viscosity of liquidg = centrifugal force第7頁，共2

5、5頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Differential centrifugationDensity of liquid is uniformDensity of liquid gminSwinging-bucket rotor:Long sedimentation path lengthgmax gmin第14頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Differential centrifugation (VI)Rate of sedimentation can be modulated by particle densityNuclei have an un

6、usually rapid sedimentation rate because of their size AND high densityGolgi tubules do not sediment at 3000g, in spite of their size: they have an unusually low sedimentation rate because of their very low density: (p - l) becomes rate limiting. 第15頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Density BarrierDiscont

7、inuousContinuousDensity gradient centrifugation第16頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五How does a gradient separate different particles?Least denseMost dense第17頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五When p l : v is +ve When p = l : v is 0 Predictions from equation (I)第18頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五When p solution densi

8、tyIf particle density solution density, particle will float through solutionWhen particle density = solution density the particle stop sedimenting or floating第20頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五Buoyant density banding Equilibrium density bandingIsopycnic banding15234第21頁，共25頁，2022年，5月20日，11點2分，星期五1233 Formats for separation of particles accordingto their densityWhen density of partic