1、實訓二 青霉素鉀鹽的酸化萃取與萃取率的計算一、實訓目的1.掌握萃取的原理及操作方法；3.掌握碘量法測定青霉素的含量；2.掌握萃取率的計算方法；二、實訓原理青霉素在酸性條件下，以酸的形式存在，很容易溶于醇、酮、醚和酯類等有機溶劑，在水中的溶解度很小，且迅速喪失其抗菌能力。在中性條件下以鹽的形式存在，易溶于水、甲醇等，而幾乎不溶于乙醚、氯仿或醋酸戊酯，微溶于乙醇、丁醇、酮類或醋酸乙酯中，但如果此類溶劑中含有少量水分，其在該溶劑中的溶解度就大大增加。因此，利用萃取法提取青霉素，調節溶液的 PH 值，使其在水相和有機相中的溶解度不同，實現萃取和反萃取。PH=2.02.2 時青霉素以游離酸狀態由水相轉移

2、至丁酯相, 而在 PH=6.87.2時以成鹽狀態由酯相進入緩沖液（水相）。三、藥品和儀器1 萃取試劑和儀器工業品分析純化學純適量80ml醋酸丁酯規格2 碘量法試劑和儀器（1）Na2S2O3(0.1mol/L) 取Na2S2O3 2.6g與無水Na2CO3 0.02g,加入新煮沸過的冷蒸餾水適量溶解，定容到100mL。（2）碘溶液(0.1mol/L) 取碘1.3g，加入KI 3.6g與水5mL使之溶解，再加HCl 1-2滴，定容到100mL。（3）HAc-NaAc（pH4.5）緩沖液 取83g無水NaAc溶于水，加入60mL冰醋酸，定容到1L。（4）淀粉指示劑，儀器：酸式滴定管，移液管，容量瓶，

3、量筒，玻璃棒，小燒杯，電子天平四、實訓步驟1.酸化萃取用天平稱量 40g 青霉素工業鹽，放入燒杯中。在磁力攪拌器下，加入 100ml的蒸餾水溶解（溶液呈透明，無顆粒）。向溶液中滴加 10%的硫酸，注意加入速度一定要緩慢，以白色絮狀物質不產生為宜。邊加入硫酸，邊檢測測 pH 值，當 pH 值=2.00.2 時停止加入硫酸。加入 40ml 的丁酯(分兩次加入，第一次用量 3/5，第二次用量 2/5)，邊加入邊調大攪拌，萃取在 10min 內完成。將上述溶液移入分液漏斗中，靜置 10min。待分層后，用兩個燒杯分別收集上層丁酯相（輕相）和下層水相（重相）。重相計量體積，并做好記錄。加入 40ml 的

4、丁酯，對重相進行第二次萃取（操作方法同第一次萃取）。記錄重相體積。將重相 PH 值調至中性，倒入下水道。收集兩次輕相，記錄體積。2.脫水在磁力攪拌器下，向丁酯萃取相中加入 1/5 體積的飽和食鹽水，分兩次（等量）洗滌萃取液 10min，將上述溶液移入分液漏斗中，靜置 10min，待分層后，將上層萃取相收集在干凈的燒杯中，下層飽和食鹽水廢棄，再重復 1-2 次，得到脫水后的丁酯萃取相。2.反萃取在磁力攪拌器下，向脫水后的丁酯萃取相中，緩慢滴加 30%的碳酸鉀溶液，邊加入邊檢測測 pH 值，當 pH 值=7.00.2 時停止加入。將上述混合液移入分液漏斗中，靜置 10min，待分層后，用燒杯收集下

5、層水相（重相），上層丁酯相（輕相）倒入回收瓶中（避免倒入下水道）。重相加入20ml丁醇，形成稀釋液。3. 萃取率的計算（1）Na2S2O3的標定 取K2Cr2O3 0.15g于碘量瓶中，加入50mL水，使之溶解，再加入KI 2g，溶解后加入稀硫酸40mL，搖勻，密閉，在暗處放置10min,取出后再加水250mL稀釋，用Na2S2O3滴定臨近終點時，加淀粉指示劑3mL，繼續滴定至藍色消失，記錄Na2S2O3消耗的體積。（2）取5 mL定容好的青霉素溶液于碘量瓶中，加NaOH溶液1 mL，放置20min，再加入1 mLHCl溶液與5 mL HAc-NaAc緩沖液，精密加入碘滴定液5 mL，搖勻，密

6、閉，在20-25暗處放置20min,用Na2S2O3滴定液滴定，臨近終點時加入淀粉指示劑3 mL，繼續滴定至藍色消失，記錄Na2S2O3消耗的體積（V對照）（3）另取5 mL定容好的青霉素鈉溶液于碘量瓶中，加入5 mL HAc-NaAc緩沖液，再精密加入碘滴定液5 mL，用Na2S2O3滴定液滴定至藍色消失，記錄Na2S2O3消耗的體積（V空白）（4）取萃余相5mL于碘量瓶中，按步驟（1）的方法進行測定，記錄Na2S2O3消耗的體積（V樣品）五 數據處理（1）根據Na2S2O3-I2 2:1,分別計算操作步驟3 萃取率的計算中各步滴定的碘的量I, I, I（2）萃取前與青霉素反應的碘：總I2= II萃取后與青霉素反應得碘：余I2= I I（3）根據青霉素-I2 1:8計算：萃取前青霉素含量和萃取后青霉素含量（4）計算：萃取率=（萃取前青霉素含量萃取后青霉素含量）/萃取前青霉素含量。六、實訓注意事項1.嚴禁用不合格的注射用水溶解青霉素鉀工業鹽。2.青霉素鉀工業鹽必須溶解完全，嚴禁溶解液發白或