1、羥基喜樹堿半固體脂質納米粒制備工藝研究【摘要】目的制備羥基喜樹堿的半固體脂質納米粒(HPT-SSLN)。要領在單因素觀察的底子上，通過正交方案優選處方和制備工藝，并對優化條件下制備的HPT-SSLN納米溶液舉行質量評價。效果制備的HPT-SSLN均勻粒徑為130.5n，多疏散系數為0.18，載藥量為2.51，包封率為79.19，電位為-33.1V；納米溶液4下安排6個月，納米粒外不雅、粒徑及包封率無顯著變革。結論所制備的HPT-SSLN包封率和載藥量較高，粒徑漫衍勻稱，不變性精良，為羥基喜樹堿的臨床應用提供了更遼闊的遠景。【關鍵詞】羥基喜樹堿；半固體脂質納米粒；制備工藝Keyrds：Hydrx

2、yaptthein;Seislidlipidnanpartiles(SSLN);Preparatin納米粒載藥體系自1976年由Birrenbah初次報道以來，由于其具有可生物落解、低免疫性、有必然靶向性且制劑情勢多樣化等長處，至今已獲得很大生長1。固體脂質納米粒(slidlipidnanpartiles,SLN)是粒徑為501000n的新一代亞微粒給藥體系2，它能將藥物包裹于類脂核中而使藥物不變性增長，并具有緩控釋、靶向、低毒等長處。羥基喜樹堿(hydrxyaptthein,HPT)是拓撲異構酶(TP-)按捺劑35。它抗瘤譜廣，且無交織耐藥性，如今已作為臨床一線用藥。但因其特別的理化性子：水

3、不溶脂難溶、內酯環布局不不變等因素，使得如今臨床應用受到了限定6。本研究在單因素觀察的底子上，通過正交方案優選處方和制備工藝，以固體脂質和液體脂質混淆物為載體質料制備HPT的半固體脂質納米粒(seislidlipidnanpartiles,SSLN)，并對優化條件下制備的HPT-SSLN納米溶液舉行了質量評價。1儀器與試劑UNIAUV500紫外分光光度計(英國TherSpetrni公司)；激光粒度儀-3000HS(英國alvernInstruentsLtd)；冷凍枯燥機(LABNFreeZne12L)；JE-2022透射電子顯微鏡(TE)(日本株式電子會社)；TP-1型電子天平德國Sartri

4、us公司。10-羥基喜樹堿質料藥(含量98，四川廣漢市生化成品)；Palitiaid(十六酸，汕頭市西隴化工場)；Dynasan118(三硬脂酸甘油酯，Sasl)；rnil(玉米油，Siga)；注射用大豆卵磷脂(上海太偉藥業)；SlutlHS15(聚乙二醇15羥基硬脂酸醋，BASF)；rephrEL(氫化蓖麻油，BASF)；PEG-8-酸楚癸酸甘油酯(GATTEFSSE)；酸楚/癸酸三甘油酯(浙江蘭溪物美化工)；泊洛沙姆188(Siga)；賣澤yrj59、芐澤Brij53(Siga)，別的試劑均為闡發純；雙蒸水用前經0.45微孔濾膜過濾。2要領2.1HPT-SSLN的制備接納乳化蒸發-冷卻固化

5、法制備HPT-SSLN。稱取必然量的HPT、脂質、卵磷脂共溶于適量有機溶劑中制得有機相，另稱取適量外貌活性劑溶于水中制得水相，在75水浴下，將有機相勻速注入水相中，避光恒溫攪拌，揮干有機溶劑并濃縮至必然體積，將此半透明乳液快速疏散于適量0冰水中繼承攪拌固化0.5h，經0.8微孔濾膜過濾，即得HPT-SSLN。以納米粒的外不雅、粒徑、包封率為觀察指標，別離觀察了有機溶劑種類、有機相種類、外貌活性劑種類、固態脂質/液態脂質摩爾比、藥脂比、有機溶劑用量、外貌活性劑濃度、水相與油相中外貌活性劑比例、乳化歷程中水相與油比擬例、有機相注入水相速率、乳化蒸發攪拌時間、攪拌速率等單因素的影響。2.2正交方案優

6、化HPT-SSLN的制備工藝在單因素實行觀察的底子上，選擇藥脂比(A)、固態脂質與液態脂質的摩爾比(B)、外貌活性劑濃度()3個因素，每個因素選擇3個程度，按正交方案表L934實行。以包封率為指標，按正交效果制定的最正確處方和工藝制備3批樣品，對制得的HPT-SSLN舉行質量評價來對優化效果舉行驗證。2.3HPT-SSLN凍干粉的制備按2l/瓶將HPT-SSLN分裝在7l的西林瓶中，每瓶中參加4.0%的乳糖，攪拌使完全溶解，放入冷凍枯燥機，根據0.5/in落溫至-34并維持24h，在冷凝器低溫、枯燥箱保持必然真空度條件下，根據0.07，0.04，0.07/in三階段升溫至25，保溫10h，取出

7、樣品，壓蓋處置懲罰，即得HPT-SSLN凍干粉劑。2.4HPT-SSLN納米溶液的質量評價3效果3.1單因素觀察在文獻觀察及單因素觀察的底子上可知：HPT是主藥；十六酸、三硬脂酸甘油酯、玉米油是根本脂質膜材；大豆卵磷脂一有乳化作用，能增長脂質膜的不變性，防范藥物滲漏；二有抗氧化作用，防范HPT和脂質氧化；另有脫模、低落粘度及疏散作用等；SlutlHS15重要作為不變劑和疏散劑；丙酮和乙醇有利于溶解種種脂質質料，并維持HPT內酯情勢；因此末了挑選出來的根本處方構成為：HPT、十六酸、三硬脂酸甘油酯、玉米油、大豆卵磷脂、SlutlHS15、丙酮和乙醇。另由觀察確定以下參數：外貌活性劑為SlutlH

8、S15：Syaleithin為11，有機相溶劑接納12l丙酮：6l乙醇，水相與油比擬為1.5/1，有機相注入水相選定2.0l/in的滴速，攪拌速率為800r/in，乳化蒸發攪拌時間為2h。別的，固態脂質與液態脂質的摩爾比對包封率影響顯著，2/1時包封率最高，將其范疇定為1/24/1；藥脂比對包封率和粒徑影響顯著，1/8時制備工藝不不變，將其范疇定為1/401/15；外貌活性劑過少那么不克不及制備，過量易引起粒子聚合，故將其濃度范疇定為1.5%5；這3個因素仍需進一步觀察優化。3.2正交方案實行因素和程度見表1，正交方案表及效果見表2，方差闡發效果見表3。表1因素程度略表2正交方案HPT-SSL

9、N的效果略表3F查驗的效果略由表2可見，各個因素差異程度對SSLN包封率的影響由大到小依次為：A1A3A2，B2B3B1，321；R為極差值，RRBRA，即外貌活性劑濃度對SSLN的包封率影響最大，其次是固態脂質與液態脂質的摩爾比，再次是藥脂比；當外貌活性劑濃度為5時，包封率均在70以上；而當外貌活性劑濃度只有3時，包封率險些都不凌駕55；為了包管藥效，包封率是關鍵性指標，故我們拔取A1B23為最正確處方條件，即藥脂比為120，固態脂質與液態脂質的摩爾比為21，外貌活性劑濃度為5，比方，以投藥量10g盤算，需十六酸、三硬脂酸甘油酯、玉米油各66.7g，大豆卵磷脂和SlutlHS15各450g。

10、由表3可見只有因素的F值大于0.05(2,2)，說明只有外貌活性劑濃度對包封率的影響有統計學意義，為重要影響因素，其次為固態脂質與液態脂質的摩爾比，再次是藥脂比。履歷證，3批樣品均勻包封率為81.43。3.3HPT-SSLN納米溶液的質量評價圖1HPT-SSLN的TE圖原放大倍數：5000略表4HPT-SSLN的粒徑、電位、包封率和載藥量的測定效果略4討論HPT的溶解性較差，在正辛醇中的表不雅溶解度是其在蒸餾水中的27.2倍，HPT還能插入磷脂酰基鏈中，有必然親和力7。其常見臨床用量為515g/d，故以大量脂質來包封少量HPT是可行的。固體脂質納米粒的制備要領許多，由于HPT不溶于水，與磷脂有

11、必然的親和力，當HPT溶于有機溶媒后與水溶液打仗時，HPT即大量析出。鑒于此性子，接納乳化蒸發法較好，推測制備原理是使HPT在高速攪拌歷程中進入熔化的脂質液滴，插入磷脂雙分子層中而被脂質核包封，表里水相中的游離藥物有部門吸附在脂質核外貌，如許制備的納米粒有較高的包封率，但詳細脂質與HPT的作用干系還需進一步研究。HPT在液體脂質中的溶解度比在固體脂質中大，引入液體脂質可增大其包封率，因此在固體脂質載體中引入rnil制備SSLN，液態脂質的參加還能延緩固態脂質由晶型向晶型的轉化和淘汰藥物的滲漏8。本實行選擇已正式收入歐洲藥典的SlutlHS15作為水相中的外貌活性劑，由于和其他非離子外貌活性劑比

12、擬，它除了具有更好的增溶不變性，更低的機體代謝毒性，還在體外抗表皮樣癌實行中表示出顯著的抗多藥耐藥性，被以為是一種埋伏的抗腫瘤治療因素9，如今被普及應用于靜注、口服等多種劑型的輔料。單因素觀察效果也說明它能有用增長HPT的溶解性，增長SSLN包封率和不變性。通過觀察諸多對HPT-SSLN粒徑和包封率有影響的單因素，本實行挑選出藥脂比、固態脂質與液態脂質的摩爾比、外貌活性劑濃度為制備的3個關鍵要素，并通過正交方案得到了優化工藝和處方，但方差闡發效果說明只有外貌活性劑濃度對包封率的影響有統計學意義，故還存在對包封率、粒徑影響較大的別的因素，有待進一步研究。通過質量評價，本實行所制備的HPT-SSL

13、N包封率和載藥量較高，粒徑漫衍勻稱，不變性精良，為羥基喜樹堿的臨床應用提供了更遼闊的遠景。【參考文獻】1楊綺華.藥物載體體系的研究希望J.中國新藥雜志,2002,11(8):593.2王建新,張志榮.固體脂質納米粒的研究希望J.中國藥學雜志,2001,36(2):73.3IyerL,RatainJ.linialpharalgyfapttheinsJ.anerhetherParal,1998,42:31.4UrasakiY,LaG,TakebayashiY,etal.Usefaptthein-resistantaalianelllinestevaluatetherleftpiseraseIint

14、heantiprliferativeativityftheindlarbazle,NB-506,anditstpiseraseIbindingsiteJ.anerRes,2001,61(2):504.5JungLL,Zabni.ellular,pharakineti,andpharadynaiaspetsfrespnsetapttheins:aneiprveit?J.DrugRessistaneUpdates,2001,4(4):273.6張力,李蘇,廖海,等.羥基喜樹堿期藥代動力學及人體耐受性臨床研究J.癌癥,2001,20(12):1391.7BurkeTG,ishraAK,ani,etal.LipidbilayerpartitiningandstabilityfapttheindrugsJ.Biheistry,1993,32(20):5352.8ullerRH,Radtk