1、乳粉中乳糖、蔗糖及總糖含量的測定（GB5413.52010 第二法萊因埃農氏法）班級： 組別： 姓名：一、原理乳糖：試樣經除去蛋白質后，在加熱條件下，以次甲基藍為指示劑，直接滴 定已標定過的費林氏液，根據樣液消耗的體積，計算乳糖含量。蔗糖：試樣經除去蛋白質后，其中蔗糖經鹽酸水解為還原糖，再按還原糖測定。水解前后的差值乘以相應的系數即為蔗糖含量。二、試劑與配制1、乙酸鉛。2、草酸鉀。3、磷酸氫二鈉。4、鹽酸。5、硫酸銅。6、濃硫酸。7、酒石酸鉀鈉。8、氫氧化鈉。9、酚酞。10、乙醇。11、次甲基藍。12、乙酸鉛溶液（200g/L）：稱取200g乙酸鉛，溶于水并稀釋至1000mL。13、草酸鉀一磷

2、酸氫二鈉溶液：稱取草酸鉀30g，磷酸氫二鈉70g,溶于水并稀釋至 1000mL。14、鹽酸（1+1）： 1體積鹽酸與1體積的水混合。15、氫氧化鈉溶液（300g/L）：稱取300g氫氧化鈉，溶于水并稀釋至1000mL。16、費林氏液（甲液和乙液）16.1、甲液：稱取34.639g硫酸銅，溶于水中，加入0.5mL濃硫酸，加水至500mL。16.2、乙液:稱取173g酒石酸鉀鈉及50g氫氧化鈉溶解于水中，稀釋至500mL,靜置兩天后過濾。16.3、費林氏液的標定16.3.1、用乳糖標定16.3.1.1、稱取預先在94C2C烘箱中干燥2h的乳糖標樣約0.75g （精確到 O.lmg）,用水溶解并定容

3、至250mL。將此乳糖溶液注入一個50mL 滴定管中，待滴定。16.3.1.2、預滴定：吸取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒瓶 中。加入 20mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出 15mL 樣液于三角瓶中，置于電爐上加熱，使其在2min內沸騰，保持沸 騰狀態15s,加入3滴次甲基藍溶液，繼續滴入至溶液藍色完全褪 盡為止，讀取所用樣液的體積。16.3.1.3、精確滴定：另取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三 角燒瓶中，再加入20mL蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預滴定 量少0.5mL1.0mL的樣液，置于電爐上，使其在2min內沸騰，維 持沸騰狀態2

4、min，加入3滴次甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度 徐徐滴入，溶液藍色完全褪盡即為終點，記錄消耗的體積。1.1.4按式（1）、（2）計算費林氏液的乳糖校正值（f1）： TOC o 1-5 h z 人 V xm xlOOO“A = 1+= 4 x V m12501 1 （1）4xV x mf =ii式中：A1實測乳糖數，單位為毫克（mg）；V1滴定時消耗乳糖溶液的體積，單位為毫升（mL）；m1稱取乳糖的質量，單位為克（g）；f1費林氏液的乳糖校正值；AL1由乳糖液滴定毫升數查表1所得的乳糖數，單位為毫克（mg）。16.3.2、用蔗糖標定16.3.2.1、稱取在105C2C烘箱中干燥2h的蔗糖約0.

5、2g（精確到O.lmg）, 用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中，加水10mL,再加入10mL 鹽酸（1+1），置于75C水浴鍋中，時時搖動，使溶液溫度在67.0C 69.5C，保溫5min,冷卻后，加2滴酚酞溶液（10.17）,用氫氧化 鈉溶液（10.15）調至微粉色，用水定容至刻度。16.3.2.2、預滴定：吸取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒瓶 中。加入 20mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出 15mL 樣液于三角瓶中，置于電爐上加熱，使其在2min內沸騰，保持沸 騰狀態15s，加入3滴次甲基藍溶液，繼續滴入至溶液藍色完全褪 盡為止，讀取所用樣液的體積

6、。16.3.2.3、精確滴定：另取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三 角燒瓶中，再加入20mL蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預滴定 量少0.5mL1.0mL的樣液，置于電爐上，使其在2min內沸騰，維 持沸騰狀態2min，加入3滴次甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度 徐徐滴入，溶液藍色完全褪盡即為終點，記錄消耗的體積。16.3.2.4、按式（3）、（4）計算費林氏液的蔗糖校正值（f2）：人 V xm xlOOOA =2= 10.5263 x V x m2100 x0.9522 （3）10.5263xV x mcc4)4)2式中：A2實測轉化糖數，單位為毫克（mg）；V2滴定時消耗蔗

7、糖溶液的體積，單位為毫升（mL）；m2稱取蔗糖的質量，單位為克（g）；0.95果糖分子質量和葡萄糖分子質量之和與蔗糖分子質量的比值； f2費林氏液的蔗糖校正值；AL2由蔗糖溶液滴定的毫升數查表1所得的轉化糖數，單位為毫克（mg ）。17、酚酞溶液（5g/L）：稱取0.5g酚酞溶于100mL體積分數為95%的乙醇中。18、次甲基藍溶液（10g/L）：稱取1g次甲基藍于100mL水中。三、儀器和設備1 天平：感量為 0.1mg。2水浴鍋：溫度可控制在75C2C。四、實驗步驟2、乳糖的測定2.1 試樣處理2.1.1稱取嬰兒食品或脫脂粉2g,全脂加糖粉或全脂粉2.5g，乳清粉1g,精 確到0.1mg，

8、用100mL水分數次溶解并洗入250mL容量瓶中。2.1.2徐徐加入4mL乙酸鉛溶液（10.12 ）、4mL草酸鉀一磷酸氫二鈉溶液（10.13, 并振蕩容量瓶，用水稀釋至刻度。靜置數分鐘，用干燥濾紙過濾， 棄去最初 25mL 濾液后，所得濾液作滴定用。2.2 滴定2.2.1、預滴定：吸取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒瓶中。加入20mL蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出15mL樣液 于三角瓶中，置于電爐上加熱，使其在2min內沸騰，保持沸騰狀 態15s，加入3滴次甲基藍溶液，繼續滴入至溶液藍色完全褪盡為 止，讀取所用樣液的體積。2.2.2、精確滴定：另取10mL費林氏

9、液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒瓶中，再加入 20mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預滴定量少 0.5mL1.0mL的樣液，置于電爐上，使其在2min內沸騰，維持沸 騰狀態2min，加入3滴次甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度徐徐 滴入，溶液藍色完全褪盡即為終點，記錄消耗的體積。3 蔗糖的測定3.1 樣液的轉化與滴定3.1.1取50mL樣液（2.1.2）于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL 鹽酸（1+1），置于75C水浴鍋中，時時搖動，使溶液溫度在67.0C 69.5C，保溫5min，冷卻后，加2滴酚酞溶液（10.17）,用氫氧化 鈉溶液（10.15）調至微粉色，用水定容至

10、刻度。3.1.2預滴定：吸取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒瓶中。加入 20mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出 15mL 樣液 于三角瓶中，置于電爐上加熱，使其在 2min 內沸騰，保持沸騰狀 態15s,加入3滴次甲基藍溶液，繼續滴入至溶液藍色完全褪盡為 止，讀取所用樣液的體積。3.1.3精確滴定：另取10mL費林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角燒 瓶中，再加入 20mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預滴定量少0.5mLI.OmL的樣液，置于電爐上，使其在2min內沸騰，維持沸 騰狀態2min,加入3滴次甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度徐徐 滴入，溶液藍

11、色完全褪盡即為終點，記錄消耗的體積。五、分析結果的表述1、乳糖試樣中乳糖的含量 X 按式（5）計算“ F x f x 0.25 x 100X = 115)Vx5)1式中：X試樣中乳糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g ）；F1由消耗樣液的毫升數查表1所得乳糖數，單位為毫克（mg）；fl費林氏液乳糖校正值；V1滴定消耗濾液量，單位為毫升（mL）；m試樣的質量，單位為克（g）。以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位 有效數字。2、蔗糖利用測定乳糖時的滴定量，按式（ 6）計算出相對應的轉化前轉化糖數 X1。F x f x 0.25x100X 二 T 21V x m1

12、式中：X1轉化前轉化糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g ）;f2由測定乳糖時消耗樣液的毫升數查表1所得轉化糖數，單位為毫克 （ mg）；f2費林氏液蔗糖校正值；V1滴定消耗濾液量，單位為毫升（mL）；m樣品的質量，單位為克（g）。 用測定蔗糖時的滴定量，按式（7）計算出相對應的轉化后轉化糖 X2。F x f x 0.50 x 100X 二 T 22V2xm （7）式中：x2轉化后轉化糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g）；F3由V查得轉化糖數，單位為毫克（mg）；f2費林氏液蔗糖校正值；m樣品的質量，單位為克（g）；V2滴定消耗的轉化液量，單位為毫升（mL）。試樣中蔗糖的含量 x

13、 按式（8）計算X =&2 X）x0.95（8）式中：X試樣中蔗糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g）；X1轉化前轉化糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g）；X2轉化后轉化糖的質量分數，單位為克每百克（g/100g）。以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位 有效數字。3、若試樣中蔗糖與乳糖之比超過 3:1 時，則計算乳糖時應在滴定量中加上 表 2 中的校正值數后再查表 1。數據記錄表格費林氏液的標定(乳糖)實驗記錄和數據處理序號123乳糖標樣質量(g)預滴定讀數V預(mL)精確滴定讀數V將(mL)消耗乳糖溶液體積V1 (mL)計算公式人V x m 000

14、/“A = 1= 4 x V mi250iiA1 (mg)計算公式4 x V x mf 二11iALifi費林氏液的標定(蔗糖)實驗記錄和數據處理序號123蔗糖質量(g)預滴定讀數V預(mL)精確滴定讀數V (mL)精消耗乳糖溶液體積V1 (mL)計算公式” V X m X1000A 10 5263 x V x m2 2丄22丄 2100 X 0.95A2 (mg)計算公式10.5263 x V x mT CC2AL2f2乳粉中乳糖、蔗糖及總糖含量測定實驗記錄和數據處理序號12樣品質量m (g)的測預滴定讀數V預(mL)精確滴定讀數V將(mL)消耗樣液體積V1 (mL)Fifi計算公式乳糖含量

15、X (g/100g )蔗糖的測定預滴定讀數V預(mL)精確滴定讀數V將(mL)消耗樣液體積V1 (mL)F2f2計算公式轉化前轉化糖的質量分數X1(g/100g)F3計算公式轉化后轉化糖的質量分數X2(g/100g)計算公式蔗糖的含量X (g/100g )附表表1孔糖及轉北縫嵐數表(io mL寒林氐液I浦刨(mL)孔糖(mg)轉覽糖(mg)術定扯tniL)乳糖(nig)轉化糖ting)13JI-I4砌51124領51.2426&.0511；557.951.2436S,ft52.226&秒?D446.O52.2J767.851.44568.1523為6?.851.446隔152,J2967.851.5476S.25243067.851.548W.25Z4J67.851.6496S.25153267.851.65052.