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文檔簡介
核酸凝膠電泳技術Made by lionchp1一 原理電荷效應:QV(可忽略)分子篩效應:MV(主要)電滲:不計M V核酸顯酸性,在緩沖液中帶負電:向正極電泳2電泳速率影響因素:DNA大小、形狀、帶電 量三種質粒電泳速率3二 三種凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳:特點:平躺式、影響因素DNA構象:鑲入染料:4SDS:特點:豎式電泳,精確SDS的作用:5脈沖場電泳:優點:分離能力更強原理:6三 電泳后的觀察-EB染色EB:溴乙錠,可鑲嵌入,核酸的堿基對平面間對DNA染色,300nm紫外燈下發出橘黃色熒光EB嵌入堿基對間,可引起DNA框移:有毒,可破壞DNA7觀察方法:電泳后,300nm紫外線照射,發熒光處為DNADNA量越大,熒光越強8四 電泳緩沖液要求有緩沖液,DNA才電離:帶負電,向正極移動9三種常用緩沖液:TAE:Tris-乙酸+EDTATBE:Tris-硼酸+EDTATPE:Tris-磷酸+EDTA10五 對照物-Marker11本章總結12
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