1、高原嚴峻燒傷耽誤清醒大鼠腦損傷與快樂性氨基酸程度變革【摘要】目的：不雅察高原嚴峻燒傷耽誤清醒后早期大鼠腦損傷及快樂性氨基酸含量的變革.要領：130只雄性istar大鼠隨機分為燒傷即時清醒組(n=60)、燒傷耽誤清醒組(n=50)和正常比擬組(高原地域正常比擬組n=10和蘭州地域正常比擬組n=10).前兩組動物被制成高原海拔3800燒傷實行動物模子TBSA30，度.運用高效毛細管電泳法檢測腦構造中快樂性氨基酸谷氨酸，Glu含量，接納干、濕重比重法測定腦構造含水量，原位末了標識表記標幟TUNEL不雅察腦皮質神經細胞凋亡.效果：從蘭州地域急進高原后，大鼠腦構造Glu含量、腦構造含水量、腦皮質中TUN

2、EL陽性細胞數均未產生顯著改變P0.05；高原嚴峻燒傷后腦構造Glu程度于傷后1h即明顯低落，連續至傷后24h，于傷后72h規復至正常程度P0.05；耽誤清醒組腦構造Glu程度在不雅察時限內均低于上述兩正常比擬組，耽誤清醒組與即時清醒組比擬除在傷后12h時相點無統計學差異外，別的時相點均低于即時清醒組P0.05.而腦構造含水量于傷后6h開始升高，于24h達岑嶺，于傷后7d落至正常程度；高原燒傷延復組變革趨勢同高原燒傷即復組，但傷后7d仍未規復.腦皮質TUNEL陽性細胞在傷后1h即增多，也于傷后24h達岑嶺，傷后7d仍高于正常程度.結論：由蘭州地域急進到高原地域，并不敷以導致大鼠腦構造中快樂性氨

3、基酸含量產生變革及大鼠腦水腫的產生和腦皮質凋亡細胞數的增長；高原嚴峻燒傷及耽誤清醒后，細胞外快樂性氨基酸淘汰，同時伴有受傷大鼠敏捷出現腦水腫，腦皮質凋亡細胞明顯增長.【關鍵詞】燒傷；耽誤清醒；快樂性氨基酸類；腦水腫；細胞凋亡；大鼠0弁言嚴峻燒傷引起的腦損傷及腦水腫在平常和戰時均很常見，已有大量文獻報道1-3.大量研究表現快樂性氨基酸exitatryainaids,EAAs的大量開釋而產生的毒性作用，在加重繼發性腦損傷中起緊張作用.本研究使用大鼠嚴峻燒傷后即時清醒與耽誤清醒模子，開端不雅察高原嚴峻燒傷耽誤清醒后早期大鼠腦構造中快樂性氨基酸含量變革及與腦損傷的干系.1質料和要領1.1質料1.2要領

4、致傷前1k，置室溫1925.實行前24h用電推推去背部被毛，單籠豢養.實行前12h禁食、水.用含10g/L的戊巴比妥鈉ip注射麻醉40g/kg后，除正常比擬組外，于大鼠背部創立30%度燙傷模子病理證明.致傷條件為90，20s.正常比擬組：模擬燙傷37水浴，20s.動物隨機分為4組：高原燒傷即時清醒組高傷即復，n=60，傷后立即腹腔注射等滲鹽水按Parkland公式4L/kg；設立不雅察與檢測時間點：1hPB1h，6hPB6h，12hPB12h，24hPB24h，72hPB72h，7dPB7d；高原燒傷耽誤清醒組高傷延復，n=50，傷后6h開始補液；設立不雅察與檢測時間點：PB6h，PB12h，

5、PB24h，PB72h，PB7d；高原正常比擬組高正常，n=10，不補液.蘭州地域正常比擬組蘭正常，n=10，海拔1517，不補液.高傷即復組大鼠于傷后1，6，12，24，72h，7d6個時相點，高傷延復組大鼠于傷后6，12，24，72h，7d5個時相點別離取材，每個時相點各取10只動物，結實于實行臺，于各時相點抽血后，將大鼠斷頭，敏捷取腦，置0冰鹽水沖洗，去除血液、大血管等結締構造，吸干；用0.1l/L磷酸緩沖液沖洗后，用雙面刀片于腦正中線將腦構造縱形剖開，將大腦左半球切取完備的薄片約0.5后置于40g/L的中性甲醛混淆結實液，放于4冰箱，用于光鏡查抄及免疫構造化學檢測.將上述剩余腦構造大腦

6、皮質，用電子天平稱重后置于80烤箱36h再稱重，使用構造干濕重比值，不雅察腦構造含水量，以檢測腦水腫的變革.將大腦右半球敏捷安排于凍存管中置于液氮中保存，用于快樂性氨基酸的檢測.谷氨酸含量接納高效毛細管電泳法4檢測腦構造中谷氨酸含量.所得效果用l/g表現.腦構造含水量接納干濕比重法測定5：腦構造含水量=濕重-干重/濕重100%.細胞凋亡實行步調按文獻6及說明書并稍作革新舉行.DAB顯色，顯微鏡下不雅察，細胞核中出現棕黃色顆粒者為TUNEL陽性細胞，即凋亡細胞.統計學處置懲罰：所得數據以xs表現，接納SPSS統計軟件對組間差異舉行單因素方差闡發及兩兩比力，P0.05為有統計學意義.2效果2.1谷

7、氨酸濃度變革急進高原高正常后腦構造Glu程度較蘭正常組稍低落，但統計學無差異P0.05；高原嚴峻燒傷后，高傷即復組Glu程度于傷后1h即明顯低于上述兩正常比擬組，于傷后6h開始上升，于12h再次落落，傷后24h又升高，傷后72h規復至正常程度P0.05；高傷延復組腦構造Glu程度在不雅察時限內均低于上述兩正常比擬組，高傷延復組與高傷即復組比擬除在傷后12h時相點無統計學差異外，別的時相點均低于高傷即復組P0.05,圖1.2.3細胞凋亡蘭正常組腦皮質中只檢測到很少的TUNEL陽性細胞2個/高倍視野，高正常組腦皮質中TUNEL陽性細胞數較蘭正常組稍增高3.67個/高倍視野，但兩者無統計學差異；而高

8、傷即復組腦皮質在各時相點均檢測到的TUNEL陽性細胞較上述兩正常比擬組顯著增多P0.01，隨著受傷時間的延伸，標本TUNEL陽性細胞漸漸增多，于傷后24h達岑嶺233.67個/高倍視野，今后TUNEL陽性細胞數那么出現落落趨勢，傷后7d仍明顯高于上述兩正常比擬組.高傷延復組腦皮質中TUNEL陽性細胞數變革趨勢根本與高傷即復組雷同，于傷后6h明顯升高，但于12h有一個落落歷程，隨后開始增長，也于24h達峰值(216個/高倍視野,圖3)；但高傷即復組及高傷延復組在上述各時相點所檢測到的凋亡細胞數無統計學差異P0.05).TUNEL標識表記標幟陽性的細胞核被染成棕褐色，胞漿復染為淡藍色.3討論海拔3000，大多數人在靜息狀態下可出現差異程度的高原反響，隨著海拔高度的增高，高原病的發病率漸漸增長7.腦構造對氧的需求量高，對缺氧的耐受性差，是機體對缺氧最敏感的構造8.腦缺血再灌注損傷的機制非常龐大，能量代謝、細胞內鈣、細胞凋亡、快樂性氨基酸毒性、細胞因子、氧自由基RS產生和炎癥反響等大概與再灌注損傷有關9.本研究在高原海拔3800實地情況條件下研究高原大鼠嚴峻燒傷耽誤清醒后腦構造快樂性氨基酸含量動態改變及與腦損傷的干系.黎海濤等10報道犬嚴峻燒傷早期即有腦水腫形成，傷后12h已十明白確.本研究效果表現，由蘭州地域1517豢養的大鼠通過急進高原地域3800，我們