1、內脂素基因啟動子多態性與中國人2型糖尿病脂代謝紊亂的相關性內脂素基因啟動子多態性與中國人2型糖尿病脂代謝紊亂的相關性【關鍵詞】內脂素;多態性;2型糖尿病;血脂異常【摘要】目的討論內脂素基因啟動子-1535/t多態性的分布及其與中國人2型糖尿病(t2d)脂代謝紊亂的關系。方法采用聚合酶鏈反響-限制性片段長度多態性技術，檢測208例初診t2d患者和162例糖耐量正常(ngt)者的內脂素基因啟動子-1535/t多態性，分析該基因多態性與腰圍、bi、血漿內脂素及血脂代謝指標的相關性。結果兩組內脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統計學差異(p0.05);但與t、基因型患者比擬，t2d組tt基因型患者甘油

2、三酯升高、hdl-降低(p0.05)。熒光素酶活性比擬，pgl3-1535t的相對熒光素酶表達活性較pgl3-1535下降了約28%(p0.01)。結論內脂素基因啟動子-1535/t多態性與中國人t2d脂代謝紊亂有相關性。【關鍵詞】內脂素;多態性;2型糖尿病;血脂異常內脂素是近年來發現的一種新脂肪因子，序列分析顯示其為前b細胞克隆增強因子，因在內臟脂肪組織中高表達而命名。內脂素具有類胰島素的降糖作用，并參與脂肪代謝及多種炎癥反響，已成為代謝及炎癥相關疾病的研究熱點。有研究發現內脂素啟動子區基因snps存在有意義的變異位點，部分位點的單核苷酸多態性(snps)與2型糖尿病(t2d)、肥胖有關1。

3、本文旨在討論內脂素基因啟動子-1535/t多態性與t2d脂代謝的關系。1資料與方法1.1一般資料2021年1月至2021年8月，隨機選擇無親緣關系的鎮江地區漢族人370例，根據1999年h制定的糖尿病診斷標準，其中確診為初診t2d(t2d組)208例，男112例，女96例，年齡3475歲，平均(59.379.68)歲;糖耐量正常(ngt組)162例，男86例，女76例，年齡3377歲，平均(56.758.75)歲。兩組均未承受過降糖降脂治療，排除糖尿病急性并發癥、高血壓、其他心血管疾并肝腎功能損害，各種感染、創傷與應激等影響因素。兩組患者年齡、性別經統計學分析均無顯著差異(p0.05)，具有可

4、比性。1.2方法2結果2.1內脂素基因啟動子-1535/t多態性分析兩組內脂素基因啟動子-1535位點單核苷酸存在/t多態性。基因型為時存在srfi限制性內切酶的酶切位點，酶切產物電泳后有103和229bp兩條帶;基因型為tt時該酶切位點消失，只有332bp條帶;基因型為t時有103、229和332bp三條帶。2.2內脂素基因啟動子-1535/t基因型分布和等位基因頻率：兩組基因型分布均符合hardy-einberg定律，說明本研究人群符合平衡群體。兩組內脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統計學差異(p0.05)。見表1。表1兩組內脂素基因型分布及等位基因頻率比擬2.3內脂素基因啟動子-153

5、5/t基因型分布和等位基因頻率與肥胖的關系將受試者以bi25kg/2為界分為肥胖組和非肥胖組，兩組內脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統計學差異(p0.05)。見表2。2.4內脂素基因啟動子-1535/t基因型與糖脂代謝的關系單因素方差分析顯示，t2d組內脂素基因啟動子-1535/t基因型與hdl-和tg相關，與t、基因型患者比擬，tt基因型患者tg升高、hdl降低(p0.05);內脂素基因啟動子-1535/t基因型與其他檢測指標比擬均無統計學差異(p0.05)。ngt組內脂素基因啟動子-1535/t基因型與各檢測指標均無相關性(p0.05)。見表3。表2肥胖組和非肥胖組內脂素基因型分布及等位

6、基因頻率比擬表3不同基因型間臨床和實驗室指標的比擬2.5hepg2細胞熒光素酶的相對表達活性的測定包含內脂素基因-1535/t多態性的兩種表達載體pgl3-1535t及pgl3-1535以及作為陰性對照的pgl3-basi表達載體的熒光素酶的相對活性見圖1。相對熒光素酶活性的比擬顯示pgl3-1535t的相對熒光素酶表達活性(73.064.28)較pgl3-1535(88.105.31)下降了約28%(p0.01)，pgl3-basi的相對熒光素酶活性為22.132.26。圖1三種表達載體構造示意圖3討論已有研究證實，小鼠轉染含內脂素基因的質粒后，其血糖和胰島素均顯著下降;敲除內脂素基因小鼠那

7、么血漿內脂素下降，血糖升高，胰島素無明顯變化1，這提示內脂素在t2d中起重要作用。人類內脂素基因位于染色體7q22.17q31.33，長37.4kb，含11個外顯子和10個內含子3。遺傳學研究證明，正常墨西哥裔美國人血清tg、hdl-與染色體7q22.2有相關性4。祝爾健等5證實，內脂素基因啟動子-3186位點存在snp，其變異與t2d患者的bi有一定關系。tkunaga等6在日本t2d人群中未發現與內脂素snp-1535有相關性;而正常人群snp-1535t/t基因型血清hdl-顯著升高，tg顯著降低。因此認為，內脂素具有獨立于胰島素的類胰島素作用效應。本研究顯示，中國人內脂素基因啟動子-1

8、535位點的snp存在t變異，呈現3種基因型;且其基因型分布在t2d和ngt人群中無統計學差異，在肥胖和非肥胖者間亦無統計學差異;與t、基因型患者比擬，tt基因型患者tg升高、hdl-降低，而3種基因型患者的其他檢測指標比擬均無統計學差異。相對熒光素酶活性的比擬顯示pgl3-1535t的相對熒光素酶表達活性較pgl3-1535下降了約28%，提示其位點的基因多態性影響該基因啟動子的轉錄活性。ye等7報道，內脂素-1535t基因較-1535基因的啟動子活性下降1.8倍，內脂素基因啟動子的轉錄活性改變對糖尿病患者的脂代謝有一定影響。tkunaga等6發現，內脂素基因位點的基因突變與血中脂聯素有相關

9、趨勢，但無統計學意義。這說明內脂素基因可能與其他因子共同構成復雜的脂肪因子調節系統，調控機體糖脂代謝。綜上所述，內脂素-1535t/與中國t2d人群的hdl-和tg有相關性，提示內脂素基因多態性可能對糖脂代謝有一定影響，其作用機制值得進一步研究。【參考文獻】1fukuharaa，atsuda，nishizaa,etal.visfatin:aprteinseretedbyviseralfatthatiistheeffetsfinsulinj.siene,2022;307(5078):426-30.2俞力，陳軍建.人類pf基因轉錄啟動區上游的基因多態性對基因轉錄的影響j.江蘇大學學報(醫學版)，2

10、022;16(6)：473-8.3saalb,suny,stearnsg,etal.lningandharaterizatinfthednaendinganvelhuanpre-b-elllny-enhaningfatrj.lellbil,1994;14(2):1431-7.4aryar,blangerj,illiask,etal.fatrsfinsulinresistanesyndre-relatedphentypesarelinkedtgenetilatinsnhrses6and7innndiabetiexian-aeriansj.diabetes,2002;51(3):841-7.5祝爾健，丁百靜，樸云峰，等.內脂素基因多態性與2型糖尿病的關系j.山東醫藥，2021;48(7)：27-9.6tkunagaa,iuraa,kanhiy,the-1535prtervariantfthevisfatingeneisassiatedithserutriglyerideandhdl-hlesterllevelsinja