1、20152015年年CLSICLSI折點更新折點更新摘要摘要11委員會成員委員會成員55本文件主要變化簡介本文件主要變化簡介 1313CLSICLSI建立解釋標準和質量控制過程簡介建立解釋標準和質量控制過程簡介 1616CLSICLSI參考方法與商品化方法和參考方法與商品化方法和CLSICLSI與與FDAFDA解釋標準（折點）解釋標準（折點）1717自自20102010年以來年以來CLSICLSI折點的增加及修訂折點的增加及修訂 1818抗菌藥物敏感性試驗分委會宗旨聲明抗菌藥物敏感性試驗分委會宗旨聲明 2020表格使用說明表格使用說明 2121Table1A-1C抗菌藥物的分組抗菌藥物的分組T

2、able2A-2J 紙片法及紙片法及MIC法的解釋標準法的解釋標準Table3A-3I篩選實驗及確證實驗的解釋篩選實驗及確證實驗的解釋Table4A-5G質量控制質量控制Table6A-8B制備方案制備方案AppendixA-Glossary3補充說明及術語表補充說明及術語表變化的概要變化的概要M100-S25 第第 13-15頁頁.New!重大的變化重大的變化2015（1）最大變化最大變化引入引入 Carba NP試驗試驗引入流行病學引入流行病學cutoff值（值（ECVs）的概念）的概念折點折點沙門氏菌沙門氏菌增加了增加了“替代藥物替代藥物”培氟沙星紙片法的折點培氟沙星紙片法的折點增加了阿

3、奇霉素的折點（傷寒沙門氏菌）增加了阿奇霉素的折點（傷寒沙門氏菌）New!重大的變化重大的變化2015（2）試驗和報告推薦藥物試驗和報告推薦藥物在在U U組藥物的選擇中增加了磷霉素組藥物的選擇中增加了磷霉素表格使用說明變化表格使用說明變化附加并著重強調附加并著重強調“替代藥物替代藥物”頭孢唑林頭孢唑林澄清澄清CNS CNS - -內酰胺酶的篩選建議內酰胺酶的篩選建議New!重大的變化重大的變化2015（3）篩選及確證試驗篩選及確證試驗增加概述增加概述檢測方法檢測方法刪除刪除MHTMHT操作方法操作方法質量控制質量控制增加當應用商品化系統時，應遵循制造商對于質量增加當應用商品化系統時，應遵循制造商

4、對于質量 控制的建議。控制的建議。澄清應根據需測試的抗菌藥物來選擇澄清應根據需測試的抗菌藥物來選擇QC菌株菌株增加判斷苯唑西林紙片藥物含量衰減與否的評估內容增加判斷苯唑西林紙片藥物含量衰減與否的評估內容 New!重大的變化重大的變化2015（4）質量控制質量控制增加多種藥物在相應的質控菌株中的增加多種藥物在相應的質控菌株中的QC范圍范圍增加增加eco ATCC35218 關于檢測關于檢測 -內酰胺酶的處理意見內酰胺酶的處理意見附錄附錄修改肺炎鏈球菌中頭孢洛林藥敏結果的建議修改肺炎鏈球菌中頭孢洛林藥敏結果的建議增加了腸桿菌科中頭孢吡肟折點變化，增加了腸桿菌科中頭孢吡肟折點變化，SDD的解釋說明的

5、解釋說明增加流行病學增加流行病學cutoff值值碳青霉烯類抗生素碳青霉烯類抗生素耐藥機制耐藥機制腸桿菌科腸桿菌科銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌碳青霉烯水解酶碳青霉烯水解酶水解碳青霉烯類抗生素水解碳青霉烯類抗生素頭孢菌素酶頭孢菌素酶+ +膜孔蛋白缺失膜孔蛋白缺失 一些一些AmpcAmpc、ESBLsESBLs可表現低水平碳青霉烯酶活性可表現低水平碳青霉烯酶活性 膜孔蛋白缺失阻止抗生素進入細胞內膜孔蛋白缺失阻止抗生素進入細胞內 產酶產酶 銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌金屬酶金屬酶 鮑曼不動桿菌鮑曼不動桿菌OXAOXA其他耐藥機制其他耐藥機制 膜孔蛋白缺失、靶位改變、外排泵機制膜孔蛋

6、白缺失、靶位改變、外排泵機制美羅培南（腸桿菌科美羅培南（腸桿菌科MICMIC）舊折點（2010年）新折點（2011）S SI IR RS SI IR R 4 48 8 1616 1 12 2 4 4新新/ /舊舊CLSICLSI判斷標準判斷標準初篩試驗陽性和對三代頭孢菌素初篩試驗陽性和對三代頭孢菌素 中一種或多種藥物耐藥，則常規中一種或多種藥物耐藥，則常規做做MHT， MHT 陽性菌株，應報陽性菌株，應報告對所有碳青霉烯類藥物耐藥；告對所有碳青霉烯類藥物耐藥；若陰性，使用若陰性，使用M100-S20 解釋標準解釋標準來解釋碳青霉烯藥物來解釋碳青霉烯藥物 MICs感染控制程序或流行病學調查需感染

7、控制程序或流行病學調查需要時做要時做MHT，對于，對于MHT 陽性菌陽性菌株，不需要更改碳青霉烯類敏感株，不需要更改碳青霉烯類敏感性試驗結果的解釋。性試驗結果的解釋。Introduction to Tables 3B and 3C. Tests for Carbapenemases in Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, and Acinetobacter spp. P112 P112Introduction to Tables 3B and 3C. Tests for Carbapenemases in Enterobacteriacea

8、e, Pseudomonas aeruginosa, and Acinetobacter spp. P112 P112MHTMHTCarbaCarba NPNP分子檢測分子檢測細細 菌菌腸桿菌科腸桿菌科銅綠假單胞菌不動桿菌屬腸桿菌科銅綠假單胞菌不動桿菌屬優優 勢勢簡單快速可檢測碳青霉烯酶的類型局限性局限性假陽性：ESBL/Ampc+膜孔蛋白缺失的菌株假陰性：產NDM菌株（偶爾出現）僅用于腸桿菌科細菌需要特殊試劑某些菌株檢測結果無效假陰性：產OXA（質粒介導，OXA48）菌株需特殊試劑和儀器只對靶基因特異對未檢測的特異性碳青霉烯酶基因可出現假陰性The Carba NP(Carbapenemas

9、e Nordmann-Poirel) testCarba NP試驗試驗Carba NP確證試驗是一種腸桿菌科、銅綠假單胞菌和不確證試驗是一種腸桿菌科、銅綠假單胞菌和不 動桿菌屬細菌中碳青霉烯酶的表型檢測方法。動桿菌屬細菌中碳青霉烯酶的表型檢測方法。采用比色法采用比色法主要用于流行病學研究或感染控制，尚不推薦作為臨床主要用于流行病學研究或感染控制，尚不推薦作為臨床 常規使用。常規使用。研究表明，此試驗在檢測研究表明，此試驗在檢測KPC、NDM、VIM、SPM和和 SME型碳青霉烯酶方面具有較好的敏感性（型碳青霉烯酶方面具有較好的敏感性（90%）和特）和特 異性（異性（90%）。）。對于對于OXA

10、-48型碳青霉烯酶型碳青霉烯酶敏感性低（敏感性低（11%）。）。 P123 P123什 么 時 候 做什 么 時 候 做 P120 P120（使用（使用M100-S20 (January 2010)）解釋標準）解釋標準在實驗室實施修訂的碳青霉烯類抗生素的在實驗室實施修訂的碳青霉烯類抗生素的MIC標準之前，如標準之前，如果腸桿菌科果腸桿菌科亞胺培南，美羅培南的亞胺培南，美羅培南的MIC值為值為2-4ug/ml或或厄他厄他培南培南MIC值為值為2ug/ml，則可能產碳青霉烯酶，需做此試驗。，則可能產碳青霉烯酶，需做此試驗。（使用當前的解釋標準使用當前的解釋標準）主要用于流行病學研究或感染控制主要用

11、于流行病學研究或感染控制。注意：對于。注意：對于Carba NP 陽性菌株，不需要更改碳青霉烯類敏感性試驗結果的解釋。陽性菌株，不需要更改碳青霉烯類敏感性試驗結果的解釋。目前不推薦作為臨床常規使用。目前不推薦作為臨床常規使用。所需的試劑及材料所需的試劑及材料 P120 P120臨床試驗室試劑級純水臨床試驗室試劑級純水亞胺培南粉末亞胺培南粉末細菌蛋白提取液（細菌蛋白提取液（pH 7.4 pH 7.4 ）ZnSOZnSO4 4. .7H7H2 2O O酚紅粉末酚紅粉末1N 1N NaOHNaOH 溶液溶液10% 10% HClHCl 溶液溶液1.5 1.5 mLmL微量離心管微量離心管1 L L

12、接種環接種環儲存裝置儲存裝置所需的試劑及材料所需的試劑及材料 P120 P120臨床試驗室試劑級純水臨床試驗室試劑級純水亞胺培南粉末亞胺培南粉末細菌蛋白提取液（細菌蛋白提取液（pH 7.4 pH 7.4 ）ZnSOZnSO4 4. .7H7H2 2O O酚紅粉末酚紅粉末1N 1N NaOHNaOH 溶液溶液10% 10% HClHCl 溶液溶液1.5 1.5 mLmL微量離心管微量離心管1 L L 接種環接種環儲存裝置儲存裝置所需的試劑及材料所需的試劑及材料1.1. 10mMZnSO4.7H2O10mMZnSO4.7H2O2.2. 0.5% 0.5% 酚紅試劑酚紅試劑3.3. 0.1 N 0.

13、1 N NaOHNaOH 溶液溶液4.4. CarbaCarba NP NP 試驗試驗A A液液5.5. CarbaCarba NP NP 試驗試驗B B液（液（A A液液+6ug/ml+6ug/ml亞胺培南）亞胺培南） P120 P120+100ul 100ul 細菌蛋白細菌蛋白提取液提取液1ul1ul接種環待測菌接種環待測菌混懸混懸5s5s+Carba NP Solution ACarba NP Solution BA AB B35352 2 2h2h試驗操作步驟試驗操作步驟 注意事項：注意事項： 試驗有三個部分：待測菌、質控菌、試劑質控試驗有三個部分：待測菌、質控菌、試劑質控 試劑質控部

14、分不需要加入細菌，不需要孵育試劑質控部分不需要加入細菌，不需要孵育 選取血平板上過夜的菌落，選取血平板上過夜的菌落，不能選取含有抗生素培養基或選擇培不能選取含有抗生素培養基或選擇培 養基上的菌落養基上的菌落結 果 判 斷結 果 判 斷無 效無 效陽 性陽 性陽 性陽 性陽 性陽 性陽 性陽 性結 果 判 斷結 果 判 斷管管A A（internal control ）管管B B結果解釋結果解釋紅色或橙紅色紅色或橙紅色紅色或橙紅色紅色或橙紅色陰性，未檢出碳青霉烯酶陰性，未檢出碳青霉烯酶紅色或橙紅色紅色或橙紅色淺橙色、深黃色或黃色淺橙色、深黃色或黃色陽性，檢出碳青霉烯酶陽性，檢出碳青霉烯酶紅色或橙

15、紅色紅色或橙紅色橙色橙色結果無效結果無效橙色、淺橙色、深黃色橙色、淺橙色、深黃色或黃色或黃色任何顏色任何顏色結果無效結果無效無效結果處理方法無效結果處理方法通過質控菌株或試劑質控來檢測試劑的有效性通過質控菌株或試劑質控來檢測試劑的有效性重復此試驗，包括試劑質控部分重復此試驗，包括試劑質控部分重復試驗如果再次無效，做分子檢測重復試驗如果再次無效，做分子檢測 試劑質控試劑質控a a、b b管的顏色只能是紅色或橙紅色，如果出現以外的顏色則表明管的顏色只能是紅色或橙紅色，如果出現以外的顏色則表明試劑變質，檢查試劑試劑變質，檢查試劑a a的的PHPH值，如果值，如果PHPH值值 7.832 g/ml =

16、 R)磷霉素磷霉素（200ug200ug，ugug/ml/ml）KBKB法折點法折點MICMIC法折點法折點SIRSIR16 13-151264128256對于由大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌，奇異變形桿菌對于由大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌，奇異變形桿菌菌引起的單純性尿路感染，在口服用藥的基礎上，菌引起的單純性尿路感染，在口服用藥的基礎上，通過頭孢唑林可以預測頭孢克洛、頭孢地尼、頭孢通過頭孢唑林可以預測頭孢克洛、頭孢地尼、頭孢泊肟、頭孢羅齊、頭孢呋辛、頭孢氨芐和氯碳頭孢泊肟、頭孢羅齊、頭孢呋辛、頭孢氨芐和氯碳頭孢的敏感及耐藥性；但如果頭孢唑林耐藥，需測定頭的敏感及耐藥性；但如果頭孢唑林耐藥，需測定頭孢地

17、尼，頭孢泊肟，頭孢呋辛酯的敏感性孢地尼，頭孢泊肟，頭孢呋辛酯的敏感性M100-S24 P53 P53M100-S25 P22 P22New! P28 P2820142015碳青霉烯酶檢測方法概述的增加碳青霉烯酶檢測方法概述的增加 P112 P112碳青霉烯酶檢測方法概述的增加碳青霉烯酶檢測方法概述的增加 P112 P112碳青霉烯酶檢測方法概述的增加碳青霉烯酶檢測方法概述的增加 P112 P112感染控制及流行病學要求感染控制及流行病學要求鑒定腸桿菌科，銅綠假單胞菌，不動桿菌屬碳青霉烯酶的產生時做此試驗，目前不推薦其作為臨床常規使用。產碳青霉烯酶腸桿菌科細菌，用目前的解釋標準，通常會表現對一種

18、或通常會表現對一種或 多種碳青霉烯類藥物中介或耐藥多種碳青霉烯類藥物中介或耐藥。厄他培南非敏感是產生碳青霉烯酶最敏感的指標最敏感的指標。同時會對三代頭孢菌素中（如，頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢 唑肟和頭孢曲松）一種或多種耐藥;然而，含有SEM、IMI型的碳青霉烯酶菌株通常表現為對頭孢菌素敏感。試驗室用M100-S20 (January 2010)碳青霉烯酶MIC解釋標準，當亞胺培 南或美羅培南的MIC為2-4ug/ml，厄他培南為2ug/ml時，懷疑此菌株產碳 青霉烯酶，須執行MTH、Carba NP或分子試驗。20152015年年20142014年年 P112 P112嗜血桿菌嗜血桿菌QC菌株的選擇菌株的選擇 P76 P76苯唑西林藥物含量的評估苯唑西林藥物含量的評估 P84 P84質控菌株新增藥物范圍（KB法）大腸埃希氏菌ATCC25922Pefloxacin （5ug）2533 肺炎克雷伯菌ATCC700603Ceftaroline-avibactam（30/15 ug ）2127 Ceftazidime-avibactam （30/20ug） 2127 Ceftolozane-tazobactam （30/10 ug）1725 新增藥物相應的新增藥物相應的QCQC范圍范圍New!新增藥物相應的新增藥物相應的QCQC范圍范圍Kleb