1、動物實驗的基本操作動物實驗的基本操作和操作技術(shù)和操作技術(shù)劉承武劉承武第一節(jié)第一節(jié) 常用的實驗動物常用的實驗動物 實驗動物？實驗動物？n是指經(jīng)人工飼育，對其攜帶的微生物、寄是指經(jīng)人工飼育，對其攜帶的微生物、寄生蟲實行控制，遺傳背景明確或來源清楚生蟲實行控制，遺傳背景明確或來源清楚的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、鑒定及其他科的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、鑒定及其他科學(xué)實驗的動物。學(xué)實驗的動物。n實驗動物必須具備實驗動物必須具備4 4個條件：？個條件：？n敏感性敏感性n均一性均一性n易獲得性易獲得性n穩(wěn)定性穩(wěn)定性n動物實驗：？動物實驗：？n是以實驗動物為實驗對象的科學(xué)實驗，包括是以實驗動物為實驗對象的科學(xué)實驗，包

2、括以實驗動物以實驗動物整體整體水平或?qū)嶒瀯游锞植科鞴偌八交驅(qū)嶒瀯游锞植科鞴偌跋到y(tǒng)（系統(tǒng)（離體離體）的實驗。）的實驗。n影響動物實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素？影響動物實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素？n與實驗動物的與實驗動物的選擇選擇、實驗、實驗條件條件、實驗、實驗技術(shù)及技術(shù)及方法方法有直接的關(guān)系有直接的關(guān)系-熟練的技術(shù)是實驗成熟練的技術(shù)是實驗成功的基礎(chǔ)功的基礎(chǔ)n常用的有青蛙（常用的有青蛙（ frogfrog）和蟾蜍（）和蟾蜍（toadtoad）n鳥類（鳥類（birdsbirds）n小白鼠（小白鼠（mousemouse）n大白鼠（大白鼠（ratrat）n豚鼠（豚鼠（guinea pigguinea pig）n家兔

3、（家兔（rabbitrabbit）n貓（貓（catcat）和犬（）和犬（dogdog），等。），等。青蛙與蟾蜍（青蛙與蟾蜍（Frog and ToadFrog and Toad） 青蛙與蟾蜍屬兩棲動物，青蛙與蟾蜍屬兩棲動物，其一些基本生命活動與其一些基本生命活動與哺乳動物近似，其離體哺乳動物近似，其離體組織和器官所需的生理組織和器官所需的生理環(huán)境比較簡單環(huán)境比較簡單 ( (無須供氧無須供氧和恒溫和恒溫) )。 青蛙與蟾蜍常用于神青蛙與蟾蜍常用于神經(jīng)生理、肌肉生理、心經(jīng)生理、肌肉生理、心臟生理，微循環(huán)等實驗。臟生理，微循環(huán)等實驗。n特點和應(yīng)用：特點和應(yīng)用：n離體心臟能較持久地有節(jié)律地搏動，常用于

4、離體心臟能較持久地有節(jié)律地搏動，常用于觀察藥物對心臟的作用；觀察藥物對心臟的作用；n坐骨神經(jīng)和腓腸肌標(biāo)本可用來觀察藥物對周坐骨神經(jīng)和腓腸肌標(biāo)本可用來觀察藥物對周圍神經(jīng)、神經(jīng)肌肉或橫紋肌的作用；圍神經(jīng)、神經(jīng)肌肉或橫紋肌的作用；n腸系膜血管微循環(huán)實驗等。腸系膜血管微循環(huán)實驗等。 鳥類鳥類n雞：如離體心臟實驗、肺炎實驗、心雞：如離體心臟實驗、肺炎實驗、心血管動脈粥樣硬化實驗等。血管動脈粥樣硬化實驗等。n鴨：乙型肝炎實驗。鴨：乙型肝炎實驗。n鴿：心血管動脈粥樣硬化實驗、嘔吐鴿：心血管動脈粥樣硬化實驗、嘔吐實驗。實驗。n鵪鶉（鵪鶉（quailquail）：）：小白鼠（小白鼠（Mouse )Mouse )

5、 是醫(yī)學(xué)實驗中用是醫(yī)學(xué)實驗中用途最廣泛和最常用途最廣泛和最常用動物。有多種品種。動物。有多種品種。n習(xí)性？習(xí)性？n易大量繁殖，易大量繁殖，廣泛用于醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗。廣泛用于醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗。n適用需要大量動物的實驗，適用需要大量動物的實驗，被廣泛用于生物學(xué)、醫(yī)被廣泛用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、藥理、毒理、腫瘤、學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。如藥物篩選、半數(shù)致死量測定、抗感染、抗腫瘤藥如藥物篩選、半數(shù)致死量測定、抗感染、抗腫瘤藥物及避孕藥物的研究等，以及物及避孕藥物的研究等，以及鎮(zhèn)咳藥實

6、驗、免疫學(xué)鎮(zhèn)咳藥實驗、免疫學(xué)實驗，等。實驗，等。大鼠（大鼠（Rat )Rat )n有多種品種。有多種品種。n習(xí)性：喜歡啃咬，攻擊性強、群居，晝伏夜習(xí)性：喜歡啃咬，攻擊性強、群居，晝伏夜動。動。n對新環(huán)境適宜性強，行為表現(xiàn)多樣，易接受對新環(huán)境適宜性強，行為表現(xiàn)多樣，易接受通過強化進行的多種感覺指令的訓(xùn)練。通過強化進行的多種感覺指令的訓(xùn)練。n體積較小鼠大，易于復(fù)制多種病理學(xué)模型。體積較小鼠大，易于復(fù)制多種病理學(xué)模型。n大鼠應(yīng)用于生理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)，內(nèi)分大鼠應(yīng)用于生理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)，內(nèi)分泌學(xué)、神經(jīng)生理、營養(yǎng)學(xué)、傳染病、腫瘤和泌學(xué)、神經(jīng)生理、營養(yǎng)學(xué)、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。肝外科等的研究

7、。n也是醫(yī)學(xué)及藥學(xué)實驗中常用的動物，如血壓也是醫(yī)學(xué)及藥學(xué)實驗中常用的動物，如血壓實驗（抗高血壓藥物實驗）、膽管插管，或?qū)嶒灒垢哐獕核幬飳嶒灒⒛懝懿骞埽蛴么蟀资笥^察藥物的長期毒性、用大白鼠觀察藥物的長期毒性、 行為學(xué)、消行為學(xué)、消化系統(tǒng)等方面的實驗。化系統(tǒng)等方面的實驗。一些在小白鼠身上不一些在小白鼠身上不便進行的實驗可選用大白鼠，便進行的實驗可選用大白鼠，如抗炎實驗中如抗炎實驗中關(guān)節(jié)炎模型的制備。關(guān)節(jié)炎模型的制備。豚鼠豚鼠（Guinea pig )n 習(xí)性：溫順膽小，喜歡群居和干燥清潔，好習(xí)性：溫順膽小，喜歡群居和干燥清潔，好動但不善跳躍，草食性，聽覺敏感喜叫。動但不善跳躍，草食性，聽覺敏

8、感喜叫。n主要特點和應(yīng)用：對組胺敏感，常用于平喘主要特點和應(yīng)用：對組胺敏感，常用于平喘藥、抗組胺藥的實驗和皮膚毒理學(xué)的實驗藥、抗組胺藥的實驗和皮膚毒理學(xué)的實驗,亦亦常用語急性高鉀血癥模型的實驗。常用語急性高鉀血癥模型的實驗。n免疫學(xué)中血液可提供補體。免疫學(xué)中血液可提供補體。家兔家兔( (Rabbit )Rabbit )n習(xí)性：溫順膽小，喜歡獨居和干燥清潔，習(xí)性：溫順膽小，喜歡獨居和干燥清潔，草食性草食性n主要特點：體溫調(diào)節(jié)穩(wěn)定主要特點：體溫調(diào)節(jié)穩(wěn)定n家兔也是實驗生理科學(xué)教學(xué)實驗中最家兔也是實驗生理科學(xué)教學(xué)實驗中最常用的動物。常用的動物。n發(fā)熱實驗及熱原實驗、免疫學(xué)實驗、發(fā)熱實驗及熱原實驗、免疫

9、學(xué)實驗、心血管實驗、生殖實驗、眼科實驗、心血管實驗、生殖實驗、眼科實驗、皮膚實驗等。皮膚實驗等。犬犬( (Dog )Dog )在以犬為實驗在以犬為實驗動物的研究成動物的研究成果中，只有應(yīng)果中，只有應(yīng)用用Beagle Beagle 才能被才能被國際公認(rèn)。國際公認(rèn)。 n常用于觀察藥物對心臟泵功能和血流動力常用于觀察藥物對心臟泵功能和血流動力學(xué)的影響，心肌細(xì)胞電生理研究，降壓藥學(xué)的影響，心肌細(xì)胞電生理研究，降壓藥及抗休克藥的研究等。犬還可以通過訓(xùn)練，及抗休克藥的研究等。犬還可以通過訓(xùn)練，用于慢性實驗研究，如條件反射、高血壓用于慢性實驗研究，如條件反射、高血壓的實驗治療、胃腸蠕動和分泌實驗、慢性的實驗

10、治療、胃腸蠕動和分泌實驗、慢性毒性實驗。毒性實驗。 非人靈長類動物，如猴非人靈長類動物，如猴( (Monkey)Monkey)n主要用于藥理學(xué)和毒理學(xué)、生殖生理、口主要用于藥理學(xué)和毒理學(xué)、生殖生理、口腔醫(yī)學(xué)）營養(yǎng)、代謝、行為學(xué)和高級神經(jīng)腔醫(yī)學(xué)）營養(yǎng)、代謝、行為學(xué)和高級神經(jīng)活動研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)活動研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)分泌病和畸胎學(xué)、腫瘤學(xué)。分泌病和畸胎學(xué)、腫瘤學(xué)。n也用于傳染病研究，猴可感染人類特有的也用于傳染病研究，猴可感染人類特有的傳染病。如制造和鑒定脊髓灰質(zhì)炎疫苗傳染病。如制造和鑒定脊髓灰質(zhì)炎疫苗恒恒河猴河猴是唯一的實驗動物。是唯一的實驗動物。貓（貓（CatCa

11、t） 貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達，與人很相似。常用于神貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達，與人很相似。常用于神經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實驗。經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實驗。 豬豬(Pig)常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、心血管及糖尿病、遺常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、心血管及糖尿病、遺傳性和營養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究傳性和營養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究 第二節(jié)第二節(jié) 實驗動物的分類實驗動物的分類近交系 近交系一般是指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或親子（子女與年青的父母）進行交配，而培養(yǎng)出來的遺傳基因純化的品系。（F98.6% ）雜交一代 由兩個近交系雜交產(chǎn)生的子一代稱為雜交一代。它

12、既有近交系動物的特點，又獲得了雜交優(yōu)勢。封閉群 在同一血緣品系內(nèi)，不以近交方式，而進行隨機交配繁衍，經(jīng)五年以上育成的相對維持同一血緣關(guān)系的種群。1.按遺傳學(xué)特征分類突變品系 在育種過程中，由于單個基因的突變，或?qū)⒛硞€基因?qū)耄蛲ㄟ^多次回交“留種”，而建立一個同類突變品系，此類個體中有具同樣遺傳缺陷或病態(tài)。非純系 即一般任意交配繁殖的雜種動物。雜種動物具有旺盛的生命力，適應(yīng)性強，繁殖率高，生長快，易于飼養(yǎng)管理。個體差異大，反應(yīng)性不規(guī)則，實驗結(jié)果的重復(fù)性差。但其中包含有最敏感的與最不敏感的兩種極端的個體。（二）實驗動物的分類（二）實驗動物的分類普通動物（Conventional animals

13、,CV） 又稱一級動物，是微生物控制要求中最低的一個級別的動物，要求不帶有動物烈性傳染病和人畜共患病原體 。清潔動物（Clean animals ,CL） 又稱二級動物，除不帶有普通動物應(yīng)排除的病原體外，還不應(yīng)攜帶對動物危害大和對科學(xué)實驗干擾大的病原體。2.按微生物學(xué)分類無特殊病原體動物（Specific pathogens free animal，SPF動物） SPF動物又稱三級動物，除不帶有普通動物、清潔動物應(yīng)排除的病原體外，還應(yīng)排除有潛在感染或條件性致病的病原體，以及對實驗干擾大的病原。 無菌動物（Germfree animals，GF）和悉生動物（Gnotobiotic animals

14、，GN） 四級動物。無菌動物是指采用當(dāng)前的技術(shù)手段無法在動物體表、體內(nèi)檢出一切其他生物體。 第三節(jié)第三節(jié) 實驗動物的選擇實驗動物的選擇n由于動物對外界刺激的反應(yīng)存在個體差由于動物對外界刺激的反應(yīng)存在個體差異，在選擇實驗動物時，還應(yīng)注意動物異，在選擇實驗動物時，還應(yīng)注意動物的的年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況及其品系、等級狀況及其品系、等級等因素對實驗的影等因素對實驗的影響。響。例如，過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)的研究宜選用豚鼠，因為豚鼠易于致敏。因家兔體溫變化靈敏，故常用于發(fā)熱、熱原檢定、解熱藥和過熱的實驗。狗、大鼠、 家兔常用于高血壓的研究。實驗動物的種屬選擇 應(yīng)注

15、意影響動物實驗效果的各種因素。盡可能選擇其結(jié)構(gòu)、功能和代謝特點接近于人類的動物，不同種屬的動物對于同一刺激的反應(yīng)也不同。 實驗動物品系的選擇實驗動物品系的選擇 同一種屬動物的不同品系，對同一刺激的反應(yīng)也有很大差異。例如：DBA2小鼠100的可發(fā)生聽源性癲癇發(fā)作；而C57BL小鼠根本不出現(xiàn)這種反應(yīng) n選用的動物應(yīng)能較好地反映試驗的目的，并符合選用的動物應(yīng)能較好地反映試驗的目的，并符合節(jié)約的原則。節(jié)約的原則。例如：例如：n半數(shù)致死量和半數(shù)有效量：小白鼠；半數(shù)致死量和半數(shù)有效量：小白鼠；n抗過敏實驗：豚鼠抗過敏實驗：豚鼠n在體心臟實驗：蛙、大白鼠、豚鼠、貓、犬；在體心臟實驗：蛙、大白鼠、豚鼠、貓、犬

16、；n離體心臟實驗：蛙、大白鼠、豚鼠、家兔；離體心臟實驗：蛙、大白鼠、豚鼠、家兔；n離體血管實驗：蛙的后肢血管、大白鼠和家兔的離體血管實驗：蛙的后肢血管、大白鼠和家兔的主動脈等。主動脈等。第四節(jié)第四節(jié) 實驗動物的性別鑒別、編號、捉拿實驗動物的性別鑒別、編號、捉拿與固定與固定n1. 1. 實驗動物的性別鑒別實驗動物的性別鑒別 在常用的動物中，較大的動物在常用的動物中，較大的動物( (如家兔、貓、如家兔、貓、犬等犬等) )可以從生殖器分辨其性別，而較小的動可以從生殖器分辨其性別，而較小的動物物( (如小白鼠、大白鼠、豚鼠等如小白鼠、大白鼠、豚鼠等) )的性別鑒別，的性別鑒別，通常以肛門與生殖孔之間的

17、距離來判斷，通常以肛門與生殖孔之間的距離來判斷，距距離近者為雌性，距離遠者為雄性離近者為雌性，距離遠者為雄性。雄 雌圖3-2-7 小鼠性別的特征n蛙和蟾蜍蛙和蟾蜍 n毀腦和毀脊髓：左手食指和中指夾持蛙或蟾毀腦和毀脊髓：左手食指和中指夾持蛙或蟾蜍的頭部，無名指和小指握持雙下肢，右手蜍的頭部，無名指和小指握持雙下肢，右手持刺針進行操作。持刺針進行操作。n淋巴囊注射：左手握持蛙或蟾蜍，食指和中淋巴囊注射：左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夾住左前肢，拇指壓住右前肢；右手將雙指夾住左前肢，拇指壓住右前肢；右手將雙下肢拉直，左手無名指及小指將其壓住而固下肢拉直，左手無名指及小指將其壓住而固定。定。2、動物的捉

18、拿、固定、動物的捉拿、固定蟾蜍AB圖3-2-1 青蛙(或蟾蜍)捉拿法 圖3-2-2 青蛙(或蟾蜍)固定法n小白鼠小白鼠 可采取雙手法和單手法兩種形式。可采取雙手法和單手法兩種形式。 右手提起鼠尾，放在鼠籠蓋或其他粗糙右手提起鼠尾，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，向后方輕拉，小白鼠則將前肢固定于面上，向后方輕拉，小白鼠則將前肢固定于粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏 住小白鼠頸背部皮膚住小白鼠頸背部皮膚 (見圖見圖)，并以小指與手，并以小指與手 掌尺側(cè)夾持其尾根部，掌尺側(cè)夾持其尾根部， 固定于手中。固定于手中。小鼠圖3-2-2小白鼠的捉拿法n大白鼠大白鼠n容易激怒

19、咬人，捉持時左手應(yīng)戴防護手套或容易激怒咬人，捉持時左手應(yīng)戴防護手套或用厚布蓋住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用用厚布蓋住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住頭部，其余手指與手掌左手拇指和食指握住頭部，其余手指與手掌握住背部和腹部握住背部和腹部(見圖見圖)。 不要用力過大，切勿捏不要用力過大，切勿捏 其頸部，以免窒息致死。其頸部，以免窒息致死。 n豚鼠豚鼠 性情溫順不咬人，可用左手直接從背性情溫順不咬人，可用左手直接從背側(cè)握持前部軀干，體重小者用一只手捉持，側(cè)握持前部軀干，體重小者用一只手捉持，體重大者宜用雙手，右手托住臀部體重大者宜用雙手，右手托住臀部(見圖見圖)。家兔n貓貓貓較為溫順，

20、可用一只手捉住貓的頸部貓較為溫順，可用一只手捉住貓的頸部皮膚，另一只手托起四肢部抱起皮膚，另一只手托起四肢部抱起(見圖見圖)。對。對兇暴貓，將手慢慢伸入籠內(nèi)，輕撫貓的背、兇暴貓，將手慢慢伸入籠內(nèi)，輕撫貓的背、頭、頸部。一只手抓住貓的頸部，取出籠外，頭、頸部。一只手抓住貓的頸部，取出籠外，另一只手捉住從背到腰部的皮膚。當(dāng)貓不許另一只手捉住從背到腰部的皮膚。當(dāng)貓不許手接觸它的皮膚時，可用皮手套或用網(wǎng)捉拿。手接觸它的皮膚時，可用皮手套或用網(wǎng)捉拿。 n犬犬用一捕犬叉夾住犬頸，另一人用一粗棉用一捕犬叉夾住犬頸，另一人用一粗棉帶綁住嘴巴，使其不能咬人。帶綁住嘴巴，使其不能咬人。 綁嘴的方法（打綁嘴的方法（

21、打3結(jié)）：結(jié)）：將扁帶繞上下頜一周，將扁帶繞上下頜一周，在上頜上打一結(jié)，然后轉(zhuǎn)向下頜，再作一結(jié)，在上頜上打一結(jié)，然后轉(zhuǎn)向下頜，再作一結(jié)，最后將帶牽引至頭后頸背上打第三結(jié)，在此最后將帶牽引至頭后頸背上打第三結(jié)，在此結(jié)上須再打一活結(jié)以固定之。結(jié)上須再打一活結(jié)以固定之。染色法染色法掛牌法掛牌法3、動物的編號、動物的編號213456789102030407050 806090圖3-2-8小鼠背部的編號方法 第五節(jié)第五節(jié) 實驗動物的給藥方法實驗動物的給藥方法n經(jīng)消化道給藥法n注射給藥法注射給藥法n涂布給藥法n1、經(jīng)消化道給藥法自動攝取法喂藥法灌胃給藥法經(jīng)直腸給藥n經(jīng)口給藥法經(jīng)口給藥法 (1) 小鼠、大鼠

22、、豚鼠、兔小鼠、大鼠、豚鼠、兔 灌胃法（灌胃法（i.g.） (2) 口服法（口服法（p.o.） 圖3-2-9 小鼠灌胃法小鼠灌胃小鼠灌胃：左手固定小鼠，右手：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃針頭自口角進入持灌胃器，灌胃針頭自口角進入口腔，緊貼上腭插入食道口腔，緊貼上腭插入食道(見圖見圖)，如遇阻力，將灌胃針頭抽回重插，如遇阻力，將灌胃針頭抽回重插，以防損傷。常用灌胃量為以防損傷。常用灌胃量為0.10.2 ml/10g。n家兔灌胃家兔灌胃： n一人將兔身固定于腋下，一手固定兔頭，一人將兔身固定于腋下，一手固定兔頭，另一手將開口器放入兔口。另一人將導(dǎo)尿另一手將開口器放入兔口。另一人將導(dǎo)尿管從開口器

23、孔插入口內(nèi)，再慢慢插入食道管從開口器孔插入口內(nèi)，再慢慢插入食道和胃和胃(見圖見圖)。為慎重起見，可將胃管外端放。為慎重起見，可將胃管外端放入水中，如無氣泡，則可證實導(dǎo)尿管在胃入水中，如無氣泡，則可證實導(dǎo)尿管在胃內(nèi)。灌胃量一般為內(nèi)。灌胃量一般為10 ml/kg。如用兔固定。如用兔固定盒，可由一人操作。盒，可由一人操作。 2、注射給藥法、注射給藥法 (1) 皮下注射皮下注射 (s.c., H.) (2) 腹腔注射腹腔注射 (i.p.) (3) 肌肉注射肌肉注射 (i.m.) (4) 靜脈注射靜脈注射 (i.v.) (5) 淋巴囊注射淋巴囊注射腹腔注射腹腔注射 (i.p.)n家兔靜脈注射家兔靜脈注射

24、：一人固定兔身和兔頭，另：一人固定兔身和兔頭，另一人在使兔耳邊緣血管一人在使兔耳邊緣血管(耳緣靜脈耳緣靜脈)擴張后，擴張后，從靜脈末端刺入血管，左手拇指和食指固從靜脈末端刺入血管，左手拇指和食指固定針頭和兔耳，右手注藥定針頭和兔耳，右手注藥(見圖見圖)。注藥量一。注藥量一般為般為2 ml/kg，等滲液可達，等滲液可達10 ml/kg。 靜脈注射靜脈注射 (i.v.)wrongn小鼠尾靜脈注射8.5cm3.5cm1cm圖3-2-12 小鼠尾靜脈注射法n蛙或蟾蜍淋巴囊注射給藥蛙或蟾蜍淋巴囊注射給藥 蛙皮下有數(shù)個淋巴囊蛙皮下有數(shù)個淋巴囊(見圖見圖)，注藥易吸，注藥易吸收，常用腹淋巴囊。注藥時，將蛙四

25、肢固定，收，常用腹淋巴囊。注藥時，將蛙四肢固定，使腹部向上，注射針頭從蛙大腿上部刺入，使腹部向上，注射針頭從蛙大腿上部刺入，經(jīng)大腿肌層入腹經(jīng)大腿肌層入腹 壁肌層，再淺出至腹壁肌層，再淺出至腹 壁皮下，即是腹淋巴壁皮下，即是腹淋巴 囊。此法可避免藥液囊。此法可避免藥液 外漏。注藥量一般為外漏。注藥量一般為 0.251.0 ml/只。只。 n3、涂布給藥法、涂布給藥法藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏作用時間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定作用時間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定n常用麻醉藥常用麻醉藥氨基甲酸乙酯（烏拉坦）氨基甲酸乙酯（烏拉坦）氯醛糖氯醛糖巴比妥類巴比妥類乙醚乙醚局部麻醉藥局部麻

26、醉藥第六節(jié)、實驗動物的麻醉第六節(jié)、實驗動物的麻醉n氯醛糖氯醛糖：適用于研究要求保留生理反：適用于研究要求保留生理反射（如心血管反射）或研究神經(jīng)系統(tǒng)射（如心血管反射）或研究神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的實驗。反應(yīng)的實驗。n烏拉坦烏拉坦：可導(dǎo)致較持久的淺麻醉，對：可導(dǎo)致較持久的淺麻醉，對呼吸無明顯影響。呼吸無明顯影響。n常用麻醉方法全身麻醉n吸入麻醉n注射麻醉局部麻醉n麻醉操作要求麻醉的基本原則n注意不同個體的耐受性n及時判斷麻醉的深淺n靜脈麻醉堅持先快后慢原則補充麻醉麻醉注意事項第七節(jié)、實驗動物的采血、處死第七節(jié)、實驗動物的采血、處死一、采血一、采血1.1.尾巴尖采血：常用于大小鼠，尾巴尖采血：常用于大小鼠，小

27、量采血。可以多次采血。小量采血。可以多次采血。2.2.眼眶靜脈叢采血：常用于大小鼠、沙鼠的常規(guī)血液檢查。眼眶靜脈叢采血：常用于大小鼠、沙鼠的常規(guī)血液檢查。微量采血。微量采血。3.3.摘眼球采血摘眼球采血: :血量較多，血量較多，常用于大小鼠、沙鼠常用于大小鼠、沙鼠4.4.腹主動脈采血：常用于大小鼠、沙鼠，動物要麻醉后進行，腹主動脈采血：常用于大小鼠、沙鼠，動物要麻醉后進行，用針管在腹用針管在腹主動脈分叉處，與血管平行刺入，此法采血量大。主動脈分叉處，與血管平行刺入，此法采血量大。5.5.心臟采血：心臟采血：6.6.兔耳緣靜脈或耳中動脈、頸動脈采血兔耳緣靜脈或耳中動脈、頸動脈采血7.7.犬犬 在

28、前肢靜脈、后肢小隱靜脈采血在前肢靜脈、后肢小隱靜脈采血8.8.猴猴 可在指尖、足跟、后肢皮下靜脈、頸靜脈采血可在指尖、足跟、后肢皮下靜脈、頸靜脈采血9.9.豬豬 小型豬為耳大靜脈、后肢靜脈小型豬為耳大靜脈、后肢靜脈實驗動物的處死方法實驗動物的處死方法n蟾蜍：剪去頭部蟾蜍：剪去頭部n大白鼠、小白鼠：脊椎脫臼法、斷頭法、打擊法大白鼠、小白鼠：脊椎脫臼法、斷頭法、打擊法 n豚鼠、兔等：空氣栓塞法、急性放血法、藥物法豚鼠、兔等：空氣栓塞法、急性放血法、藥物法 第八節(jié)、實驗動物手術(shù)第八節(jié)、實驗動物手術(shù)n術(shù)前準(zhǔn)備術(shù)前準(zhǔn)備理論準(zhǔn)備：了解結(jié)構(gòu)、方法、應(yīng)急措理論準(zhǔn)備：了解結(jié)構(gòu)、方法、應(yīng)急措施等施等材料準(zhǔn)備：動物

29、準(zhǔn)備、器械準(zhǔn)備材料準(zhǔn)備：動物準(zhǔn)備、器械準(zhǔn)備 藥品準(zhǔn)備、其他準(zhǔn)備藥品準(zhǔn)備、其他準(zhǔn)備 儀器準(zhǔn)備儀器準(zhǔn)備n手術(shù)手術(shù)麻醉動物麻醉動物固定動物固定動物備皮備皮皮膚切開皮膚切開組織分離組織分離結(jié)扎結(jié)扎止血止血手術(shù)部位保護手術(shù)部位保護消毒消毒縫合抗菌縫合抗菌實驗藥品給藥劑量的確定實驗藥品給藥劑量的確定 n給藥劑量可以按下列方法來確定：給藥劑量可以按下列方法來確定：1. 根據(jù)有關(guān)文獻、實驗教材、實驗參考書提供根據(jù)有關(guān)文獻、實驗教材、實驗參考書提供的藥物劑量。由于藥物批號不同、動物、環(huán)的藥物劑量。由于藥物批號不同、動物、環(huán)境條件的差異，必要時通過預(yù)備實驗調(diào)整用境條件的差異，必要時通過預(yù)備實驗調(diào)整用藥劑量。藥劑量

30、。2. 根據(jù)臨床常用有效劑量換算成實驗動物劑量。根據(jù)臨床常用有效劑量換算成實驗動物劑量。n3.對于新藥劑量的確定，先用小鼠粗略地對于新藥劑量的確定，先用小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量，然后用小于中探索中毒劑量或致死劑量，然后用小于中毒量的劑量，或取致死量的若干分之一為毒量的劑量，或取致死量的若干分之一為應(yīng)用劑量，一般為應(yīng)用劑量，一般為1/101/5。通過預(yù)試來。通過預(yù)試來確定。確定。n4.化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是其結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物劑物，特別是其結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物劑量。量。 n確定劑量后，如第一次實驗的作用不明顯，確定劑量后，如第

31、一次實驗的作用不明顯，動物也沒有中毒的表現(xiàn)動物也沒有中毒的表現(xiàn)(如體重下降、精神不如體重下降、精神不振、活動減少或其它癥狀振、活動減少或其它癥狀)，可以加大劑量再，可以加大劑量再次實驗。次實驗。n如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應(yīng)降低劑如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應(yīng)降低劑量再次實驗。一般情況下，在適宜的劑量范量再次實驗。一般情況下，在適宜的劑量范圍內(nèi)，有條件時最好同時用幾個劑量作實驗，圍內(nèi)，有條件時最好同時用幾個劑量作實驗，以便迅速獲得有關(guān)藥物作用的較完整的資料。以便迅速獲得有關(guān)藥物作用的較完整的資料。實驗動物與人用藥量的換算實驗動物與人用藥量的換算n一般可按下列比例換算：一般可按下列比例換算

32、：n如人用藥量為如人用藥量為1， 小鼠小鼠：1220倍倍 ； 大鼠、豚鼠大鼠、豚鼠：612倍；倍； 兔兔：36倍倍 、 犬犬：23倍。倍。n也可按以下方法進行人與不也可按以下方法進行人與不同種類動物之間藥物劑量的同種類動物之間藥物劑量的換算。換算。n1. 按體表面積直接計算法按體表面積直接計算法： (1) 人體體表面積計算法：中國人的體表面積（人體體表面積計算法：中國人的體表面積（m2） = 0.0061身高身高(cm)+ 0.0128體重體重(kg)0.1529(2) 動物的體表面積計算動物的體表面積計算：有多種方法，在需：有多種方法，在需要由體重推算體表面積時，一般認(rèn)為要由體重推算體表面積

33、時，一般認(rèn)為Meeh-Rubner公式較為適用，即：公式較為適用，即： 體表面積體表面積 = K(W2/3/10000)注：注：W為體重，以為體重，以g計算；計算；K為一常數(shù)。為一常數(shù)。 各種動物的各種動物的K值：值： 小鼠和大鼠：小鼠和大鼠：9.1 豚鼠豚鼠9.8 家兔家兔10.1 貓貓9.8 犬犬11.2 猴猴11.8 人人 10.6 (上列上列 K值各家報道略有出入值各家報道略有出入)n例：某利尿藥大白鼠灌胃給藥時的劑量為例：某利尿藥大白鼠灌胃給藥時的劑量為250 mg/kg，試粗略估計犬灌胃給藥時可以，試粗略估計犬灌胃給藥時可以試用的劑量。試用的劑量。解：實驗用大白鼠的體重一般在解：實

34、驗用大白鼠的體重一般在200 g左左右，其體表面積右，其體表面積(A)為：為：A = 9.1(2002/3/10000) = 0.031m2250 mg/kg的劑量如改以的劑量如改以 mg/m2表示，表示，即為：即為：(2500.2)/0.031 = 1608 mg/m2實驗用犬的體重一般在實驗用犬的體重一般在10 kg左右，其體左右，其體表面積表面積(A)為：為：A = 11.2100002/3/10000 = 0.5198m2于是犬的適當(dāng)試用劑量為于是犬的適當(dāng)試用劑量為16080.5198/10 = 84 mg/kg。n2. 按按mg/kg折算折算mg/m2轉(zhuǎn)換因子計算：轉(zhuǎn)換因子計算： 即按甲動物劑量即按甲動物劑量(mg/kg)甲動物轉(zhuǎn)換因子甲動物轉(zhuǎn)換因子/乙動物乙動物轉(zhuǎn)換因子計算。轉(zhuǎn)換因子計算。mg/kg的相應(yīng)轉(zhuǎn)換因子為：的相應(yīng)轉(zhuǎn)換因子為：n小鼠：小鼠：3；大鼠：；大鼠：6；豚鼠：；豚鼠：8；家兔：；家兔：12； 貓：貓：14；狗：；狗：19；人：；人：36。n如上例：犬灌胃給藥的劑量如上例：犬灌胃給藥的劑量=250X6（大鼠轉(zhuǎn)換因（大鼠轉(zhuǎn)換因子）子）/19（狗轉(zhuǎn)換因子）（狗轉(zhuǎn)換因子）=79 mg/kg 。n3. 按每按每kg體重占有體表面積相對比值計算：體重占有體表面積相對比值計算：各種動物的各種動物的“每每kg 體重占有體表面積相對比體重占有體表面