1、滅菌與滅菌技術(shù)滅菌與滅菌技術(shù) 江蘇大學(xué)藥學(xué)院江蘇大學(xué)藥學(xué)院 朱源朱源第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 n需要滅菌的制劑：直接注入機體或與粘膜、創(chuàng)需要滅菌的制劑：直接注入機體或與粘膜、創(chuàng)面接觸的藥劑面接觸的藥劑 l無菌（無菌（Sterility）：是指物體或任一給定的介質(zhì)）：是指物體或任一給定的介質(zhì)中，沒有任何活的微生物存在或無論用任何方中，沒有任何活的微生物存在或無論用任何方法都鑒定不出活的微生物來法都鑒定不出活的微生物來l滅菌（滅菌（Sterilization）：應(yīng)用物理或化學(xué)等方法）：應(yīng)用物理或化學(xué)等方法把物體上或介質(zhì)中所有的微生物及其芽胞全部把物體上或介質(zhì)中所有的微生物及其芽胞全部殺死，即獲得無菌

2、狀態(tài)的總過程殺死，即獲得無菌狀態(tài)的總過程l消毒（消毒（Disinfection）：用物理或化學(xué)等方法殺）：用物理或化學(xué)等方法殺滅物體上或介質(zhì)中的病原微生物（除了芽胞）滅物體上或介質(zhì)中的病原微生物（除了芽胞）l防腐（防腐（Antisepsis）：用物理或化學(xué)等方法抑制）：用物理或化學(xué)等方法抑制微生物生長的作用，稱為防腐或抑菌微生物生長的作用，稱為防腐或抑菌 l熱原（熱原（Pyrogens）：熱原是微生物的一種內(nèi)毒）：熱原是微生物的一種內(nèi)毒素，存在于細(xì)菌的細(xì)胞膜與固體膜之間，能夠素，存在于細(xì)菌的細(xì)胞膜與固體膜之間，能夠引起人或動物體溫的異常升高。致熱能力最強引起人或動物體溫的異常升高。致熱能力最強

3、的是革蘭氏陰性桿菌所產(chǎn)生的熱原的是革蘭氏陰性桿菌所產(chǎn)生的熱原 l無菌操作法（無菌操作法（Aseptic technique）：是指在整個）：是指在整個操作過程中利用和控制一定條件，盡量使產(chǎn)品操作過程中利用和控制一定條件，盡量使產(chǎn)品避免微生物污染的一種操作方法避免微生物污染的一種操作方法 細(xì)菌的耐受性細(xì)菌的耐受性 致死溫度：是指在一定的時間內(nèi)，殺死致死溫度：是指在一定的時間內(nèi)，殺死某種細(xì)菌所需要的最低溫度某種細(xì)菌所需要的最低溫度致死時間：是指在某一溫度下，殺死某致死時間：是指在某一溫度下，殺死某種細(xì)菌所需要的最短時間，又稱熱死時種細(xì)菌所需要的最短時間，又稱熱死時間間 滅菌和除菌對制劑的影響滅菌和

4、除菌對制劑的影響 l滅菌后的制劑中含有細(xì)菌的尸體，尸體過多會滅菌后的制劑中含有細(xì)菌的尸體，尸體過多會因菌體內(nèi)毒素（熱原）而引起副作用因菌體內(nèi)毒素（熱原）而引起副作用 l除菌是指用特殊的濾材把微生物（死菌、活菌）除菌是指用特殊的濾材把微生物（死菌、活菌）全部阻留而濾除，除了原已染有的微量可溶性全部阻留而濾除，除了原已染有的微量可溶性代謝產(chǎn)物，由于沒有菌體的存在，故沒有更多代謝產(chǎn)物，由于沒有菌體的存在，故沒有更多的熱原產(chǎn)生的熱原產(chǎn)生 不同菌種的耐熱性不同菌種的耐熱性芽胞抗高溫的原因芽胞抗高溫的原因芽胞壁厚而致密，熱力不易透入芽胞內(nèi)芽胞壁厚而致密，熱力不易透入芽胞內(nèi) 芽胞內(nèi)水分含量少，加熱時蛋白質(zhì)不

5、易凝芽胞內(nèi)水分含量少，加熱時蛋白質(zhì)不易凝固，酶不易失去活性固，酶不易失去活性 芽胞內(nèi)含有吡啶芽胞內(nèi)含有吡啶2，6-二羧酸鈣，它與蛋二羧酸鈣，它與蛋白質(zhì)結(jié)合成耐熱的復(fù)合體白質(zhì)結(jié)合成耐熱的復(fù)合體 第二節(jié)第二節(jié) 微生物死亡動力學(xué)的研究微生物死亡動力學(xué)的研究 實質(zhì)實質(zhì)是尋找對滅菌效果可靠的驗證參數(shù)是尋找對滅菌效果可靠的驗證參數(shù)原因原因滅菌溫度多是測量滅菌器內(nèi)的溫度而不是滅菌溫度多是測量滅菌器內(nèi)的溫度而不是滅菌物體內(nèi)的溫度滅菌物體內(nèi)的溫度 現(xiàn)行方法不易檢出殘存的微生物現(xiàn)行方法不易檢出殘存的微生物一、一、D值值 D值是指降低微生物數(shù)至原來的值是指降低微生物數(shù)至原來的10或降低一個或降低一個對數(shù)單位所需的時

6、間或劑量，也就是殺滅對數(shù)單位所需的時間或劑量，也就是殺滅90微生物所需的時間或劑量微生物所需的時間或劑量 D=U/（lgN0-lgNu） U為在一定滅菌條件下滅菌經(jīng)歷的時間或接受的為在一定滅菌條件下滅菌經(jīng)歷的時間或接受的劑量；劑量；N0為微生物的初始數(shù)量；為微生物的初始數(shù)量；Nu為接受了為接受了U單單位時間或劑量的滅菌后微生物的數(shù)量；位時間或劑量的滅菌后微生物的數(shù)量；Nt為為t時時間微生物的殘留數(shù)量間微生物的殘留數(shù)量 熱力滅菌或直接用鈷-60輻射滅菌 二、二、Z值值 l不同溫度下對特定的微生物在特定介質(zhì)或環(huán)境中不同溫度下對特定的微生物在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得求得D值后，就可用值后，就可用lgD對

7、溫度作圖對溫度作圖 Z=（T2-T1）/（lgD1-lgD2） l表示降低一個表示降低一個lgD值所需升高的溫度，及滅菌時值所需升高的溫度，及滅菌時間減少到原來的間減少到原來的10所需升高的溫度所需升高的溫度 三、三、F值與值與F0值值 F=t10 T-T0/Z t是測量被滅菌物溫度的時間間隔，一般為是測量被滅菌物溫度的時間間隔，一般為0.51.0分鐘或更小；分鐘或更小；T是每個時間間隔是每個時間間隔t所所測得的被滅菌物料的溫度，測得的被滅菌物料的溫度，T0是參比溫度是參比溫度 F值是指在一定溫度值是指在一定溫度T下給定下給定Z值所產(chǎn)生的滅值所產(chǎn)生的滅菌效力與在參比溫度菌效力與在參比溫度T0下

8、給定下給定Z值所產(chǎn)生的滅值所產(chǎn)生的滅菌效力相同時，菌效力相同時，T0溫度下所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r間溫度下所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r間 F值適用于干熱滅菌值適用于干熱滅菌 F0值值-物理物理F0值值 在濕熱滅菌條件下測定的，且以嗜熱脂肪芽在濕熱滅菌條件下測定的，且以嗜熱脂肪芽胞桿菌作為微生物指示菌，該菌在胞桿菌作為微生物指示菌，該菌在121下，下，Z值為值為10 F0=t10 T-121/10 F0為一定滅菌溫度為一定滅菌溫度T，Z值為值為10時所產(chǎn)生的時所產(chǎn)生的滅菌效力與滅菌效力與121，Z值為值為10所產(chǎn)生的滅菌所產(chǎn)生的滅菌效力相同時所相當(dāng)?shù)臅r間效力相同時所相當(dāng)?shù)臅r間 F0值將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉(zhuǎn)換值

9、將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉(zhuǎn)換為滅菌物品完全暴露于為滅菌物品完全暴露于121對微生物的致死對微生物的致死效力，所以效力，所以F0值又稱為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間，適用值又稱為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間，適用于熱壓滅菌法于熱壓滅菌法 F0值值-生物生物F0值值 將將F0值看作是值看作是D121值與微生物數(shù)量對數(shù)降低值值與微生物數(shù)量對數(shù)降低值的乘積的乘積 F0=D121（lgN0-lgNt） 其中其中Nt為滅菌后預(yù)期達(dá)到的微生物殘存數(shù)，又為滅菌后預(yù)期達(dá)到的微生物殘存數(shù)，又叫染菌度概率叫染菌度概率 ，一般取，一般取Nt為為10-6 生物生物F0值可認(rèn)為是以相當(dāng)于值可認(rèn)為是以相當(dāng)于121熱壓滅菌時熱壓滅菌時殺死容器中全部微

10、生物所需要的時間殺死容器中全部微生物所需要的時間例如，將含有例如，將含有200個嗜熱脂肪芽胞桿菌的個嗜熱脂肪芽胞桿菌的5葡葡萄糖水溶液以萄糖水溶液以121熱壓滅菌時，其熱壓滅菌時，其D值為值為2.4分，則分，則F0=2.4（lg200-lg10-6）=19.92min 由于由于F0是將不同滅菌溫度折算到相當(dāng)于是將不同滅菌溫度折算到相當(dāng)于121濕濕熱滅菌時的效力，故熱滅菌時的效力，故F0值可作為滅菌過程的比較值可作為滅菌過程的比較參數(shù)參數(shù) 為了使為了使F0測定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性測定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性好，精密度為好，精密度為0.1的熱電偶，并對熱電偶進(jìn)行校驗的熱電偶，并對熱

11、電偶進(jìn)行校驗 滅菌時應(yīng)將熱電偶的探針置于被測物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌時應(yīng)將熱電偶的探針置于被測物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向柜外的濕度記錄儀，有些滅菌記錄儀滅菌器通向柜外的濕度記錄儀，有些滅菌記錄儀附有附有F0顯示器，在滅菌過程中和滅菌后，自動顯顯示器，在滅菌過程中和滅菌后，自動顯示示F0值值 影響影響F0值的因素值的因素 容器的形狀、大小、熱穿透系數(shù)容器的形狀、大小、熱穿透系數(shù) 滅菌產(chǎn)品溶液粘度、容器充填量滅菌產(chǎn)品溶液粘度、容器充填量 容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量與排布容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量與排布注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分布是否均勻，以便合理排布布是否均勻，以便合理排布

12、為了確保滅菌效果，還應(yīng)注意兩個問題：為了確保滅菌效果，還應(yīng)注意兩個問題： 根據(jù)生物根據(jù)生物F0值的計算公式，若值的計算公式，若N0越大，即被滅菌越大，即被滅菌物中微生物越多，則滅菌時間越長，故生產(chǎn)過程物中微生物越多，則滅菌時間越長，故生產(chǎn)過程中應(yīng)盡量減少微生物的污染，應(yīng)采取各種措施使中應(yīng)盡量減少微生物的污染，應(yīng)采取各種措施使每個容器的含菌數(shù)控制在每個容器的含菌數(shù)控制在10以下以下 計算計算F0時，應(yīng)適當(dāng)考慮增加安全因素，一般增加時，應(yīng)適當(dāng)考慮增加安全因素，一般增加50，如規(guī)定，如規(guī)定F0為為8分，則實際操作應(yīng)控制分，則實際操作應(yīng)控制F0為為12分分 藥劑學(xué)中滅菌法可分為三大類：即物理滅菌、藥劑

13、學(xué)中滅菌法可分為三大類：即物理滅菌、化學(xué)滅菌、無菌操作法。化學(xué)滅菌、無菌操作法。第三節(jié)第三節(jié) 物理滅菌法物理滅菌法 一、熱力滅菌法（一、熱力滅菌法（Thermal sterilization）加熱可破壞蛋白質(zhì)和核酸中的氫鍵，故導(dǎo)致核酸加熱可破壞蛋白質(zhì)和核酸中的氫鍵，故導(dǎo)致核酸破壞，蛋白質(zhì)變形或凝固，酶失去活性，微生物破壞，蛋白質(zhì)變形或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡因而死亡 熱力滅菌法分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同熱力滅菌法分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效力比干熱滅菌大一溫度下，濕熱滅菌的效力比干熱滅菌大細(xì)菌在濕熱下，菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較細(xì)菌在濕熱下，菌體吸收水分，蛋

14、白質(zhì)較易凝固。這點可以從雞蛋白含水量與凝固易凝固。這點可以從雞蛋白含水量與凝固溫度之間的關(guān)系看出來，凝固蛋白質(zhì)所需溫度之間的關(guān)系看出來，凝固蛋白質(zhì)所需要的溫度與蛋白質(zhì)的含水量有關(guān)要的溫度與蛋白質(zhì)的含水量有關(guān) 濕熱的穿透力比干熱大濕熱的穿透力比干熱大 濕熱滅菌時，水蒸氣與物品接觸而凝結(jié)成濕熱滅菌時，水蒸氣與物品接觸而凝結(jié)成水，因而發(fā)出潛熱（汽化熱），加速細(xì)菌水，因而發(fā)出潛熱（汽化熱），加速細(xì)菌的死亡的死亡 雞蛋白含水量與凝固溫度關(guān)系表雞蛋白含水量與凝固溫度關(guān)系表(一一)干熱滅菌法干熱滅菌法 火焰滅菌法火焰滅菌法 灼燒是最迅速、可靠、簡便、緊急的滅菌方法灼燒是最迅速、可靠、簡便、緊急的滅菌方法金屬

15、品如鉑絲、鐵或鎳制。不銹鋼制的刮刀、鑷金屬品如鉑絲、鐵或鎳制。不銹鋼制的刮刀、鑷子等，瓷制品如研缽等，玻璃制器皿如玻棒、載子等，瓷制品如研缽等，玻璃制器皿如玻棒、載玻片、試管等的滅菌都可用此玻片、試管等的滅菌都可用此 采用該法滅菌時，最少須在火焰中加熱采用該法滅菌時，最少須在火焰中加熱20秒，通秒，通常是要將滅菌的物品迅速通過火焰常是要將滅菌的物品迅速通過火焰34次。對研次。對研缽的簡便滅菌方法是在其中加入少量乙醇點火燃缽的簡便滅菌方法是在其中加入少量乙醇點火燃燒；對于玻璃、瓷制品，操作前應(yīng)充分干燥，以燒；對于玻璃、瓷制品，操作前應(yīng)充分干燥，以免燒灼時炸裂損壞免燒灼時炸裂損壞 干熱空氣滅菌法干

16、熱空氣滅菌法 本法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設(shè)備本法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設(shè)備中、利用干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或消除熱原物中、利用干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或消除熱原物質(zhì)的方法質(zhì)的方法 本法并不是一種優(yōu)良理想的滅菌方法，其原因是本法并不是一種優(yōu)良理想的滅菌方法，其原因是干熱空氣的穿透力很弱而不均勻；另外，空氣的干熱空氣的穿透力很弱而不均勻；另外，空氣的比熱低，是一種不良的傳熱介質(zhì)。因此須長時間比熱低，是一種不良的傳熱介質(zhì)。因此須長時間受高熱的作用才能達(dá)到滅菌的目的受高熱的作用才能達(dá)到滅菌的目的 加熱溫度及時間根據(jù)滅菌器和滅菌物性質(zhì)的不同加熱溫度及時間根據(jù)滅菌器和滅菌物性質(zhì)的不同而

17、異，目的是達(dá)到微生物殘留量在而異，目的是達(dá)到微生物殘留量在10-6以內(nèi)。根以內(nèi)。根據(jù)中國藥典規(guī)定，干熱滅菌條件一般為：據(jù)中國藥典規(guī)定，干熱滅菌條件一般為： 160170120min、17018060min上或上或25045min 對于磺胺等遇高熱熔化或容易分解的藥物或?qū)釋τ诨前返扔龈邿崛刍蛉菀追纸獾乃幬锘驅(qū)崦舾械牟牧希瑧?yīng)采用較低溫度與較長時間滅菌敏感的材料，應(yīng)采用較低溫度與較長時間滅菌 對耐熱物品可采用較高的溫度和相應(yīng)較短的時間對耐熱物品可采用較高的溫度和相應(yīng)較短的時間 凡應(yīng)用濕熱方法滅菌無效的非水性物質(zhì)，或極粘凡應(yīng)用濕熱方法滅菌無效的非水性物質(zhì)，或極粘稠的液體如甘油、液體石蠟、油類等藥

18、物也可以稠的液體如甘油、液體石蠟、油類等藥物也可以采用此法采用此法 藥物的干熱空氣滅菌藥物的干熱空氣滅菌對玻璃容器或瓷制與金屬制的容器滅菌時，必須對玻璃容器或瓷制與金屬制的容器滅菌時，必須先洗凈，不使其沾染有油脂或其他有機物質(zhì)，然先洗凈，不使其沾染有油脂或其他有機物質(zhì)，然后用適當(dāng)?shù)陌b材料包裹后用適當(dāng)?shù)陌b材料包裹 燒瓶或其他容器口上用棉花塞密，外面再覆以紗燒瓶或其他容器口上用棉花塞密，外面再覆以紗布或一層堅韌的紙，置干熱空氣滅菌器中，布或一層堅韌的紙，置干熱空氣滅菌器中，160滅菌滅菌2小時以上小時以上 空安瓿的滅菌，可置于密蓋的金屬盒中，用空安瓿的滅菌，可置于密蓋的金屬盒中，用200或或2

19、00以上的高溫保持至少以上的高溫保持至少45min以上，以上，當(dāng)溫度達(dá)到當(dāng)溫度達(dá)到250時，滅菌時，滅菌45min后，熱原也可以后，熱原也可以被破壞被破壞 器皿的干熱空氣滅菌器皿的干熱空氣滅菌(二二)濕熱滅菌法濕熱滅菌法 本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法 本法是制劑生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛的一種滅菌法本法是制劑生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛的一種滅菌法 具有可靠、操作簡便，易于控制和經(jīng)濟等優(yōu)點。具有可靠、操作簡便，易于控制

20、和經(jīng)濟等優(yōu)點。缺點是不適用于對濕熱敏感的藥物缺點是不適用于對濕熱敏感的藥物 影響濕熱滅菌的因素影響濕熱滅菌的因素 微生物的種類和數(shù)量微生物的種類和數(shù)量 各種細(xì)菌對熱的抵抗力相差很大，處于不同發(fā)育各種細(xì)菌對熱的抵抗力相差很大，處于不同發(fā)育階段，所需滅菌的溫度與時間也不相同階段，所需滅菌的溫度與時間也不相同 繁殖期間的微生物對高溫比衰老時期的抵抗力小繁殖期間的微生物對高溫比衰老時期的抵抗力小得多得多 最初菌數(shù)越少，越能短時間內(nèi)達(dá)到滅菌，同時，最初菌數(shù)越少，越能短時間內(nèi)達(dá)到滅菌，同時，如果最初菌數(shù)多，即使細(xì)菌全部殺滅，而藥液中如果最初菌數(shù)多，即使細(xì)菌全部殺滅，而藥液中細(xì)菌尸體、熱原過多，亦會引起不良

21、反應(yīng)細(xì)菌尸體、熱原過多，亦會引起不良反應(yīng) 介質(zhì)的性質(zhì)介質(zhì)的性質(zhì) 溶液中若有營養(yǎng)性物質(zhì)如糖類、氨基酸等，對微溶液中若有營養(yǎng)性物質(zhì)如糖類、氨基酸等，對微生物有營養(yǎng)保護(hù)的作用，能增強其抗熱性生物有營養(yǎng)保護(hù)的作用，能增強其抗熱性 細(xì)菌的生活能力也因介質(zhì)的酸堿度而不同，一般細(xì)菌的生活能力也因介質(zhì)的酸堿度而不同，一般微生物在中性溶液中耐熱性最大，在堿性溶液中微生物在中性溶液中耐熱性最大，在堿性溶液中次之，酸性則不利于微生物的發(fā)育次之，酸性則不利于微生物的發(fā)育 藥物的性質(zhì)藥物的性質(zhì) 一般說，滅菌所需時間與溫度成反比。但是藥液一般說，滅菌所需時間與溫度成反比。但是藥液溫度增高，藥物分解的反應(yīng)速度也增加。所以在

22、溫度增高，藥物分解的反應(yīng)速度也增加。所以在殺滅細(xì)菌的前提下，可適當(dāng)降低滅菌溫度或時間殺滅細(xì)菌的前提下，可適當(dāng)降低滅菌溫度或時間 比如，維生素比如，維生素C注射液用流通蒸汽注射液用流通蒸汽15min即可達(dá)即可達(dá)到滅菌，氯化鈉輸液用到滅菌，氯化鈉輸液用115，30min進(jìn)行滅菌進(jìn)行滅菌 蒸汽的性質(zhì)蒸汽的性質(zhì) 濕飽和蒸汽：即飽和水蒸汽中帶有水分，常由于濕飽和蒸汽：即飽和水蒸汽中帶有水分，常由于蒸汽輸送管路中熱量損失所形成的，因此在蒸汽蒸汽輸送管路中熱量損失所形成的，因此在蒸汽中混懸著無數(shù)微細(xì)水滴，此種蒸汽的熱含量較低，中混懸著無數(shù)微細(xì)水滴，此種蒸汽的熱含量較低，穿透力較差，故滅菌效力較低穿透力較差，

23、故滅菌效力較低 飽和蒸汽：即蒸汽的溫度與水的沸點相當(dāng)，當(dāng)蒸飽和蒸汽：即蒸汽的溫度與水的沸點相當(dāng)，當(dāng)蒸汽的壓力達(dá)到平衡時，蒸汽中不含有微細(xì)的水滴。汽的壓力達(dá)到平衡時，蒸汽中不含有微細(xì)的水滴。飽和蒸汽熱含量較高，潛熱大，穿透力較大，因飽和蒸汽熱含量較高，潛熱大，穿透力較大，因此滅菌效力也較大此滅菌效力也較大 過熱蒸汽：如在熱壓滅菌器中的水不足，液體狀過熱蒸汽：如在熱壓滅菌器中的水不足，液體狀態(tài)的水完全蒸發(fā)后，再繼續(xù)加熱即生成過熱蒸汽，態(tài)的水完全蒸發(fā)后，再繼續(xù)加熱即生成過熱蒸汽，這種蒸汽與干熱狀態(tài)相似。在壓力不變、溫度繼這種蒸汽與干熱狀態(tài)相似。在壓力不變、溫度繼續(xù)上升的情況下此溫度雖比飽和溫度高，但

24、穿透續(xù)上升的情況下此溫度雖比飽和溫度高，但穿透力很差，因此滅菌效力不如飽和蒸汽力很差，因此滅菌效力不如飽和蒸汽 不飽和蒸汽：若滅菌器內(nèi)空氣未排盡，則蒸汽為不飽和蒸汽：若滅菌器內(nèi)空氣未排盡，則蒸汽為不飽和蒸汽，內(nèi)含不同比例的空氣，由于空氣是不飽和蒸汽，內(nèi)含不同比例的空氣，由于空氣是熱的不良導(dǎo)體，空氣與被滅菌的物體接觸后又無熱的不良導(dǎo)體，空氣與被滅菌的物體接觸后又無潛熱放出，故滅菌效力降低潛熱放出，故滅菌效力降低 1、熱壓滅菌法、熱壓滅菌法 本法系在熱壓滅菌器內(nèi)進(jìn)行的用高壓飽和蒸汽加本法系在熱壓滅菌器內(nèi)進(jìn)行的用高壓飽和蒸汽加熱殺滅微生物的方法。是常用的濕熱滅菌法熱殺滅微生物的方法。是常用的濕熱滅菌

25、法熱壓滅菌器有密蓋，可以使飽和蒸汽不逸出，由熱壓滅菌器有密蓋，可以使飽和蒸汽不逸出，由于蒸汽量不斷增加而使器內(nèi)壓力增大，此法有很于蒸汽量不斷增加而使器內(nèi)壓力增大，此法有很強的滅菌作用強的滅菌作用 如在表壓如在表壓1.05kg/cm2的飽和蒸汽（達(dá)的飽和蒸汽（達(dá)121.3）經(jīng)）經(jīng)過過20min，能殺滅所有細(xì)菌繁殖體和芽胞能殺滅所有細(xì)菌繁殖體和芽胞 熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相當(dāng)?shù)膲毫皶r間熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相當(dāng)?shù)膲毫皶r間如下：如下： 115，1.7atm（67kPa，7.1kg/cm2），），30min 121，2.0atm（97kPa，11kg/cm2），），20min 126，2.

26、4atm（139kPa，14.1kg/cm2），），15min 濕熱滅菌一般要求濕熱滅菌一般要求F0=112分分 臥式熱壓滅菌柜臥式熱壓滅菌柜 必須使用飽和蒸汽必須使用飽和蒸汽 必須排盡滅菌柜內(nèi)空氣必須排盡滅菌柜內(nèi)空氣 滅菌結(jié)束后，應(yīng)待壓力滅菌結(jié)束后，應(yīng)待壓力降至零后，緩慢打開柜降至零后，緩慢打開柜門后取出樣品門后取出樣品 滅菌時間必須由全部藥滅菌時間必須由全部藥液達(dá)到滅菌溫度時算起液達(dá)到滅菌溫度時算起 熱壓滅菌器內(nèi)滅菌溫度檢查法熱壓滅菌器內(nèi)滅菌溫度檢查法 碘淀粉溫度指示紙碘淀粉溫度指示紙 取碘和碘化鉀各取碘和碘化鉀各0.5g，淀粉淀粉25g，加水至加水至300ml使使成糊狀，然后將濾紙條浸入

27、，取出干燥，裝入安成糊狀，然后將濾紙條浸入，取出干燥，裝入安瓿內(nèi)熔封，檢查時與產(chǎn)品一起滅菌，經(jīng)滅菌后，瓿內(nèi)熔封，檢查時與產(chǎn)品一起滅菌，經(jīng)滅菌后，觀察紙條，如果溫度超過觀察紙條，如果溫度超過114115則紙條的則紙條的藍(lán)色褪為白色，說明滅菌器內(nèi)溫度已到藍(lán)色褪為白色，說明滅菌器內(nèi)溫度已到115 熔融溫度指示劑熔融溫度指示劑 利用某些化學(xué)藥品，其熔點正好是滅菌所需溫度，利用某些化學(xué)藥品，其熔點正好是滅菌所需溫度，可以作為溫度指示劑可以作為溫度指示劑 取這樣的藥品結(jié)晶少量密封于安瓿中，與待滅菌取這樣的藥品結(jié)晶少量密封于安瓿中，與待滅菌制劑同置于滅菌器中，觀察指示劑是否熔化來判制劑同置于滅菌器中，觀察指

28、示劑是否熔化來判斷滅菌溫度斷滅菌溫度 常用的溫度指示劑有焦性兒茶酚（常用的溫度指示劑有焦性兒茶酚（140）、氨基）、氨基比林（比林（107109）、安替比林（）、安替比林（110112）、）、乙酰苯胺（乙酰苯胺（113114）、升華硫（）、升華硫（117）、苯）、苯甲酸（甲酸（121）、）、-萘酚（萘酚（121）等）等 在指示劑中加入少許亞甲藍(lán)或蘇丹紅可以方便觀在指示劑中加入少許亞甲藍(lán)或蘇丹紅可以方便觀察其熔變情況察其熔變情況 留點溫度計留點溫度計 其結(jié)構(gòu)原理與體溫表類似，溫度指示最高為其結(jié)構(gòu)原理與體溫表類似，溫度指示最高為140 與一般體溫計不同的是當(dāng)滅菌器內(nèi)溫度達(dá)到最高與一般體溫計不同的是

29、當(dāng)滅菌器內(nèi)溫度達(dá)到最高并降低以后，水銀面不會隨著溫度下降而是留在并降低以后，水銀面不會隨著溫度下降而是留在最高點指示滅菌溫度達(dá)到的最高點最高點指示滅菌溫度達(dá)到的最高點 自動記錄熱電偶自動記錄熱電偶 自動記錄滅菌器內(nèi)溫度的變化和時間。分布于滅自動記錄滅菌器內(nèi)溫度的變化和時間。分布于滅菌器不同的水平面和垂直面，探測熱量的分布菌器不同的水平面和垂直面，探測熱量的分布 脈動真空蒸汽滅菌柜脈動真空蒸汽滅菌柜 適合對藥棉、紗布、手術(shù)適合對藥棉、紗布、手術(shù)無菌衣、醫(yī)療器械等滅菌。無菌衣、醫(yī)療器械等滅菌。能自動抽真空，可有效地能自動抽真空，可有效地從多孔性物質(zhì)中驅(qū)除空氣，從多孔性物質(zhì)中驅(qū)除空氣，并在真空條件下

30、通入水蒸并在真空條件下通入水蒸汽，利用飽和蒸汽進(jìn)行滅汽，利用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，內(nèi)層再菌。滅菌結(jié)束后，內(nèi)層再一次抽真空，把蒸汽從滅一次抽真空，把蒸汽從滅菌物品中抽出，而夾層中菌物品中抽出，而夾層中仍然通有蒸汽，便于物品仍然通有蒸汽，便于物品的干燥的干燥 快速冷卻滅菌器快速冷卻滅菌器 適合對玻璃瓶裝液體適合對玻璃瓶裝液體（注射劑、大輸液）進(jìn)（注射劑、大輸液）進(jìn)行自動真空飽和蒸汽滅行自動真空飽和蒸汽滅菌，并附有噴淋冷水裝菌，并附有噴淋冷水裝置，在滅菌時間達(dá)到后，置，在滅菌時間達(dá)到后，可噴淋冷卻，使被滅菌可噴淋冷卻，使被滅菌物迅速冷卻，利于藥品物迅速冷卻，利于藥品的穩(wěn)定的穩(wěn)定 軟包裝滅菌器

31、軟包裝滅菌器 適合對軟包裝液體適合對軟包裝液體（軟塑料裝大輸液、（軟塑料裝大輸液、袋裝食品）進(jìn)行蒸袋裝食品）進(jìn)行蒸汽滅菌。自動抽真汽滅菌。自動抽真空，飽和蒸汽滅菌空，飽和蒸汽滅菌后，附有噴淋冷水后，附有噴淋冷水裝置，滅菌結(jié)束后裝置，滅菌結(jié)束后迅速冷卻，利于藥迅速冷卻，利于藥品食品的穩(wěn)定品食品的穩(wěn)定 2、流通蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法 流通蒸汽滅菌是在不密閉的容器內(nèi)，用蒸汽滅菌，流通蒸汽滅菌是在不密閉的容器內(nèi)，用蒸汽滅菌，壓力與大氣壓相等，即壓力與大氣壓相等，即100的蒸汽滅菌的蒸汽滅菌目前我國某些藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是目前我國某些藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是12ml的的注射劑及不耐高熱的品種，基本上

32、都是采用這種注射劑及不耐高熱的品種，基本上都是采用這種滅菌法滅菌法3、煮沸滅菌法、煮沸滅菌法 煮沸滅菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸煮沸滅菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸滅菌，一般是滅菌，一般是10030min或或60min。此法不能保此法不能保證殺滅所有的芽胞，例如破傷風(fēng)菌等厭氧菌的芽證殺滅所有的芽胞，例如破傷風(fēng)菌等厭氧菌的芽胞胞加有適當(dāng)抑菌劑時，藥液經(jīng)加有適當(dāng)抑菌劑時，藥液經(jīng)10030min煮沸，可煮沸，可殺死抵抗力強的芽胞。適合煮沸滅菌法使用的抑殺死抵抗力強的芽胞。適合煮沸滅菌法使用的抑菌劑主要有：甲酚（菌劑主要有：甲酚（0.1%0.3%）、氯甲酚）、氯甲酚（0.05%0.1%）

33、等）等 4、低溫間歇滅菌法、低溫間歇滅菌法 此法系將待滅菌物于此法系將待滅菌物于80加熱加熱1h后，在后，在2025保持保持24h，連續(xù)操作三次以上的滅菌方法（以連續(xù)操作三次以上的滅菌方法（以80滅菌結(jié)束）滅菌結(jié)束）此法在較高溫下可以殺死細(xì)菌繁殖體但不能殺死此法在較高溫下可以殺死細(xì)菌繁殖體但不能殺死芽胞，所以在較低溫度下殺死細(xì)菌繁殖體的同時芽胞，所以在較低溫度下殺死細(xì)菌繁殖體的同時讓芽胞發(fā)育變?yōu)榉敝丑w，這樣下一次加熱時可以讓芽胞發(fā)育變?yōu)榉敝丑w，這樣下一次加熱時可以將其殺死，反復(fù)操作至芽胞全部滅絕將其殺死，反復(fù)操作至芽胞全部滅絕由于此法效果比較差，所以常常加入抑菌劑增強由于此法效果比較差，所以常

34、常加入抑菌劑增強滅菌效力滅菌效力 5、油浴和鹽水浴滅菌法、油浴和鹽水浴滅菌法 在制備小量注射劑時，藥房中如果沒有熱壓滅菌在制備小量注射劑時，藥房中如果沒有熱壓滅菌器，或因為量小而使用不經(jīng)濟時，可用鹽水浴代器，或因為量小而使用不經(jīng)濟時，可用鹽水浴代替，能同樣達(dá)到滅菌的目的替，能同樣達(dá)到滅菌的目的 可用飽和氯化銨溶液（沸點可用飽和氯化銨溶液（沸點114）在加熱鍋中）在加熱鍋中同安瓿一起煮沸同安瓿一起煮沸30min，溶液中可放紅色染料少溶液中可放紅色染料少許，用于判斷安瓿是否破裂許，用于判斷安瓿是否破裂 油浴滅菌法即用不發(fā)揮性的脂肪油或輕質(zhì)礦物油油浴滅菌法即用不發(fā)揮性的脂肪油或輕質(zhì)礦物油置油浴中，將

35、待滅菌的物品浸入，在置油浴中，將待滅菌的物品浸入，在115加熱加熱滅菌。此法適用于外科器械與其他鋒利的器具滅菌。此法適用于外科器械與其他鋒利的器具 二、過濾滅菌法二、過濾滅菌法 過濾滅菌法是使藥液通過無菌的濾器除去活的或過濾滅菌法是使藥液通過無菌的濾器除去活的或死的微生物而得到不含微生物的濾液死的微生物而得到不含微生物的濾液 供滅菌用濾器和過濾介質(zhì)（濾材）的理想條件：供滅菌用濾器和過濾介質(zhì)（濾材）的理想條件：有效地從溶液中除凈微生物，溶液可以順暢地從有效地從溶液中除凈微生物，溶液可以順暢地從濾器和濾材中通過。濾器和濾材無吸附性，也無濾器和濾材中通過。濾器和濾材無吸附性，也無落屑進(jìn)入濾液中，容易

36、清洗、更換落屑進(jìn)入濾液中，容易清洗、更換 (一一)過濾滅菌法的特點過濾滅菌法的特點 適于不耐熱藥物的溶液，如生物堿、激素、生化適于不耐熱藥物的溶液，如生物堿、激素、生化制劑等，可以減少藥液中的熱原但不能破壞熱原制劑等，可以減少藥液中的熱原但不能破壞熱原 加壓、減壓過濾均可，但加壓過濾用的較多，因加壓、減壓過濾均可，但加壓過濾用的較多，因過濾設(shè)備如有漏隙則往外泄漏，而不會污染藥液過濾設(shè)備如有漏隙則往外泄漏，而不會污染藥液室溫下易揮發(fā)、易氧化的藥物宜用加壓過濾法室溫下易揮發(fā)、易氧化的藥物宜用加壓過濾法 過濾滅菌法應(yīng)配合無菌操作技術(shù)進(jìn)行過濾滅菌法應(yīng)配合無菌操作技術(shù)進(jìn)行 在過濾滅菌前，藥液應(yīng)進(jìn)行預(yù)過濾

37、，盡量除去顆在過濾滅菌前，藥液應(yīng)進(jìn)行預(yù)過濾，盡量除去顆粒雜質(zhì)，以便提高除菌過濾的速度粒雜質(zhì)，以便提高除菌過濾的速度 用過濾法滅菌的成品必須進(jìn)行無菌檢查，合格后用過濾法滅菌的成品必須進(jìn)行無菌檢查，合格后方能使用方能使用 (二二)過濾滅菌常用的濾器與濾材過濾滅菌常用的濾器與濾材 硅藻土濾柱硅藻土濾柱由硅藻土及有機粘合劑等物混合，在由硅藻土及有機粘合劑等物混合，在1200高溫下高溫下燒制而成。濾孔為燒制而成。濾孔為34m的細(xì)號濾柱可濾除溶液的細(xì)號濾柱可濾除溶液中的顆粒雜質(zhì)和一部分細(xì)菌中的顆粒雜質(zhì)和一部分細(xì)菌 白陶土濾器白陶土濾器 由白陶土及細(xì)砂混合，經(jīng)高溫?zé)Y(jié)而成，為瓷制品，由白陶土及細(xì)砂混合，經(jīng)高

38、溫?zé)Y(jié)而成，為瓷制品，孔徑孔徑1.3m以下的可濾除細(xì)菌以下的可濾除細(xì)菌 垂熔玻璃濾器垂熔玻璃濾器硬質(zhì)中性玻璃粉加高溫至接近其熔點熔合而成均勻硬質(zhì)中性玻璃粉加高溫至接近其熔點熔合而成均勻孔徑的濾板，然后再把濾板粘連于不同的玻璃器孔徑的濾板，然后再把濾板粘連于不同的玻璃器內(nèi)制成。孔徑為內(nèi)制成。孔徑為1.52m的的6號濾器可以濾除細(xì)號濾器可以濾除細(xì)菌但不能濾除芽胞菌但不能濾除芽胞 多孔聚乙烯多孔聚乙烯 簡稱多孔簡稱多孔PE，是將聚乙烯高分子粉末燒結(jié)以后形是將聚乙烯高分子粉末燒結(jié)以后形成的具有一定孔徑的濾膜。多孔成的具有一定孔徑的濾膜。多孔PE可以濾除雜質(zhì)可以濾除雜質(zhì)和一部分細(xì)菌，但不能完全除菌，常用

39、于過濾滅和一部分細(xì)菌，但不能完全除菌，常用于過濾滅菌前的預(yù)過濾，用于濾除藥液中的活性炭最方便菌前的預(yù)過濾，用于濾除藥液中的活性炭最方便 三、紫外線滅菌法三、紫外線滅菌法 紫外線由汞蒸汽燈產(chǎn)生，波長為紫外線由汞蒸汽燈產(chǎn)生，波長為200300nm，其中波長在其中波長在253.7nm的紫外線殺菌作用最強，是的紫外線殺菌作用最強，是近紫外線（近紫外線（300400nm）的數(shù)千倍至數(shù)萬倍的數(shù)千倍至數(shù)萬倍 紫外線殺滅細(xì)菌的機制是，經(jīng)紫外線照射后，細(xì)紫外線殺滅細(xì)菌的機制是，經(jīng)紫外線照射后，細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)脫氧核糖核酸的胸腺嘧啶成為二聚體而菌細(xì)胞內(nèi)脫氧核糖核酸的胸腺嘧啶成為二聚體而失去活性失去活性 根據(jù)紫外線的特性

40、，目前紫外線殺菌應(yīng)用于：空根據(jù)紫外線的特性，目前紫外線殺菌應(yīng)用于：空氣滅菌、水中滅菌及固體表面直接照射滅菌氣滅菌、水中滅菌及固體表面直接照射滅菌 1、紫外線空氣滅菌、紫外線空氣滅菌 紫外線空氣滅菌效果與環(huán)境溫度有關(guān)。室溫紫外線空氣滅菌效果與環(huán)境溫度有關(guān)。室溫20時，輻射的時，輻射的253.7nm紫外線最強；室溫在紫外線最強；室溫在10或或40時，所輻射的紫外線降低時，所輻射的紫外線降低1015，而，而0時降低時降低50室內(nèi)空氣濕度與灰塵影響紫外線在空氣中的穿透室內(nèi)空氣濕度與灰塵影響紫外線在空氣中的穿透率，故也影響紫外線的滅菌效果。比如，空氣相率，故也影響紫外線的滅菌效果。比如，空氣相對濕度對濕

41、度75時，其殺菌率比時，其殺菌率比RH25時降低時降低18.7；空氣中含塵量空氣中含塵量8.5105粒粒/升時，殺菌率比無塵時升時，殺菌率比無塵時降低降低2030 2、紫外線水中滅菌、紫外線水中滅菌 紫外線對一些液體的透過率很低，使透到液體內(nèi)紫外線對一些液體的透過率很低，使透到液體內(nèi)部的紫外線量減少，故液體中殺菌所需紫外線劑部的紫外線量減少，故液體中殺菌所需紫外線劑量比空氣中要大的多量比空氣中要大的多紫外線透過率與溶液中的溶質(zhì)濃度有關(guān)，溶質(zhì)濃紫外線透過率與溶液中的溶質(zhì)濃度有關(guān)，溶質(zhì)濃度增加，透過率減少，溶液滅菌時，照射劑量應(yīng)度增加，透過率減少，溶液滅菌時，照射劑量應(yīng)相應(yīng)增加相應(yīng)增加 一般來說，

42、紫外線在水中的透過率最高，故紫外一般來說，紫外線在水中的透過率最高，故紫外滅菌可應(yīng)用于飲用水、無鹽水、純凈水、蒸餾水滅菌可應(yīng)用于飲用水、無鹽水、純凈水、蒸餾水及注射用水的生產(chǎn)及注射用水的生產(chǎn)3、固體表面滅菌、固體表面滅菌 制藥生產(chǎn)中，物料、機械、容器等表面所附著的制藥生產(chǎn)中，物料、機械、容器等表面所附著的細(xì)菌，采用紫外線滅菌比較有效。可以放置于滅細(xì)菌，采用紫外線滅菌比較有效。可以放置于滅菌柜中，柜的內(nèi)壁應(yīng)采用反射率較高的鋁板，柜菌柜中，柜的內(nèi)壁應(yīng)采用反射率較高的鋁板，柜的隔板需用網(wǎng)狀的隔板需用網(wǎng)狀 紫外線滅菌的注意事項：紫外線滅菌的注意事項： 紫外線能促使易氧紫外線能促使易氧化的藥物或油脂等氧

43、化變質(zhì)，故生產(chǎn)此類藥物制化的藥物或油脂等氧化變質(zhì)，故生產(chǎn)此類藥物制劑時不能使用紫外線滅菌；劑時不能使用紫外線滅菌； 普通玻璃可吸收普通玻璃可吸收紫外線，因此安瓿中的藥物不能用此法滅菌；紫外線，因此安瓿中的藥物不能用此法滅菌； 紫外線對人體如果照射過久，會產(chǎn)生眼結(jié)膜炎或紫外線對人體如果照射過久，會產(chǎn)生眼結(jié)膜炎或皮膚灼燒等現(xiàn)象；皮膚灼燒等現(xiàn)象； 各種紫外燈都有一定的有各種紫外燈都有一定的有效時間，一般為效時間，一般為3000h 四、微波滅菌法四、微波滅菌法 微波通常是指頻率大于微波通常是指頻率大于300兆赫，波長短于兆赫，波長短于1m的的高頻率振蕩電磁波高頻率振蕩電磁波 微波滅菌法是利用高頻電場使

44、物質(zhì)內(nèi)部分子極化微波滅菌法是利用高頻電場使物質(zhì)內(nèi)部分子極化迅速升溫的滅菌方法。微波穿透物質(zhì)使之吸收微迅速升溫的滅菌方法。微波穿透物質(zhì)使之吸收微波能量，并轉(zhuǎn)化為熱能呈現(xiàn)滅菌作用波能量，并轉(zhuǎn)化為熱能呈現(xiàn)滅菌作用微波滅菌常用于口服液的滅菌微波滅菌常用于口服液的滅菌 普通微波爐中可以發(fā)射出頻率為普通微波爐中可以發(fā)射出頻率為2450兆赫的微波，兆赫的微波，產(chǎn)生高溫，也可以殺滅細(xì)菌。廣東格蘭仕集團進(jìn)產(chǎn)生高溫，也可以殺滅細(xì)菌。廣東格蘭仕集團進(jìn)行了以下測定：用行了以下測定：用WP700格蘭仕微波爐對每克含格蘭仕微波爐對每克含有有200萬個細(xì)菌的熏肉進(jìn)行滅菌，發(fā)現(xiàn)萬個細(xì)菌的熏肉進(jìn)行滅菌，發(fā)現(xiàn)30秒后僅秒后僅存活

45、每克存活每克18個，個，60秒后全部殺死秒后全部殺死 五、輻射滅菌法五、輻射滅菌法 輻射滅菌是應(yīng)用射線滅菌的方法，目前應(yīng)用的有輻射滅菌是應(yīng)用射線滅菌的方法，目前應(yīng)用的有穿透力較強的穿透力較強的射線和穿透力較弱的射線和穿透力較弱的射線射線 其優(yōu)點在于：其優(yōu)點在于： 價格便宜，節(jié)約能源；價格便宜，節(jié)約能源； 可在可在常溫下進(jìn)行，不破壞被輻射的揮發(fā)性成分，適合常溫下進(jìn)行，不破壞被輻射的揮發(fā)性成分，適合熱敏材料的消毒、滅菌，這也是輻射滅菌的最大熱敏材料的消毒、滅菌，這也是輻射滅菌的最大特點；穿透力強，在包裝條件下也可以滅菌；特點；穿透力強，在包裝條件下也可以滅菌； 速度快，操作簡便，便于連續(xù)作業(yè)速度快

46、，操作簡便，便于連續(xù)作業(yè) (一一)射線種類射線種類 射線是由鈷射線是由鈷-60或銫或銫-137發(fā)出的電磁波，不帶電發(fā)出的電磁波，不帶電荷即穿透力很強的光子，適用于較厚樣品的滅菌，荷即穿透力很強的光子，適用于較厚樣品的滅菌，可用于密封安瓿和和整瓶藥物的滅菌，還可以穿可用于密封安瓿和和整瓶藥物的滅菌，還可以穿透包裝進(jìn)行滅菌透包裝進(jìn)行滅菌 射線是由電子加速器產(chǎn)生的高速電子流，帶負(fù)射線是由電子加速器產(chǎn)生的高速電子流，帶負(fù)電荷，穿透力較弱，通常僅用于非常薄和密度低電荷，穿透力較弱，通常僅用于非常薄和密度低的物質(zhì)的滅菌，在物質(zhì)的比重為的物質(zhì)的滅菌，在物質(zhì)的比重為1，不計容器壁，不計容器壁的比重和厚度時，它

47、平均只能穿透層后約的比重和厚度時，它平均只能穿透層后約2cm的的物質(zhì)，比物質(zhì)，比射線的滅菌效果差射線的滅菌效果差 (二二)輻射滅菌的機制輻射滅菌的機制 直接電離作用直接電離作用射線可使微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等有機大分子射線可使微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等有機大分子化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代謝化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代謝的自由基。這種自由基可以和水中的氫氧自由基的自由基。這種自由基可以和水中的氫氧自由基或氫自由基繼續(xù)起反應(yīng)，形成不穩(wěn)定的有機過氧或氫自由基繼續(xù)起反應(yīng)，形成不穩(wěn)定的有機過氧化物，導(dǎo)致生物大分子的分解化物，導(dǎo)致生物大分子的分解 直接激發(fā)作用直接激發(fā)作用射線除了能

48、促使分子電離以外，也能激發(fā)各種復(fù)射線除了能促使分子電離以外，也能激發(fā)各種復(fù)雜的生物大分子，使其結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一系列化學(xué)變化，雜的生物大分子，使其結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一系列化學(xué)變化，繼而擾亂正常的代謝過程。如輻射后導(dǎo)致微生物繼而擾亂正常的代謝過程。如輻射后導(dǎo)致微生物的細(xì)胞核和細(xì)胞漿不可逆的化學(xué)變化，傷害染色的細(xì)胞核和細(xì)胞漿不可逆的化學(xué)變化，傷害染色體的粗大結(jié)構(gòu)，以致許多細(xì)菌立即死亡，剩余的體的粗大結(jié)構(gòu)，以致許多細(xì)菌立即死亡，剩余的逐漸死亡逐漸死亡 化學(xué)鍵的斷裂化學(xué)鍵的斷裂大劑量的射線可以使構(gòu)成微生物體的物質(zhì)如蛋白大劑量的射線可以使構(gòu)成微生物體的物質(zhì)如蛋白質(zhì)分子中的化學(xué)鍵發(fā)生斷裂，而使與這些物質(zhì)有質(zhì)分子中的化學(xué)鍵發(fā)

49、生斷裂，而使與這些物質(zhì)有關(guān)的某些代謝環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，從而使微生物細(xì)胞關(guān)的某些代謝環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，從而使微生物細(xì)胞生長和分裂停止，導(dǎo)致死亡生長和分裂停止，導(dǎo)致死亡 間接作用間接作用輻射射線還可作用于微生物體內(nèi)的水分子，引起輻射射線還可作用于微生物體內(nèi)的水分子，引起水的電離和激發(fā)，生成自由基進(jìn)而作用于生物大水的電離和激發(fā)，生成自由基進(jìn)而作用于生物大分子的正常代謝分子的正常代謝 (三三)滅菌輻射的劑量滅菌輻射的劑量 輻射滅菌劑量是指被照射的藥品達(dá)到如同用熱壓輻射滅菌劑量是指被照射的藥品達(dá)到如同用熱壓滅菌法時所達(dá)到的同樣的滅菌程度時的劑量。包滅菌法時所達(dá)到的同樣的滅菌程度時的劑量。包括最大承受劑量、最大處

50、理劑量和最小處理劑量括最大承受劑量、最大處理劑量和最小處理劑量 劑量的確定是由劑量的確定是由1962年成立的美國醫(yī)療儀器發(fā)展年成立的美國醫(yī)療儀器發(fā)展協(xié)會（協(xié)會（AAMI）組成的一個輻射滅菌小組委員會組成的一個輻射滅菌小組委員會確定的確定的 最大承受劑量是指導(dǎo)致藥品質(zhì)量發(fā)生不可接受的最大承受劑量是指導(dǎo)致藥品質(zhì)量發(fā)生不可接受的變化的極限以下的最大劑量變化的極限以下的最大劑量 最大處理劑量是由判斷決定，通常設(shè)定在最大承最大處理劑量是由判斷決定，通常設(shè)定在最大承受劑量以下，以保證產(chǎn)品不會受到過多的輻射。受劑量以下，以保證產(chǎn)品不會受到過多的輻射。一般是由產(chǎn)品的裝載量和輻射源的強度等確定一般是由產(chǎn)品的裝載

51、量和輻射源的強度等確定 最小處理劑量是指對產(chǎn)品能達(dá)到預(yù)期的消毒和滅最小處理劑量是指對產(chǎn)品能達(dá)到預(yù)期的消毒和滅菌目的的最小劑量菌目的的最小劑量 最大處理劑量和最小處理劑量的比值是輻射滅菌最大處理劑量和最小處理劑量的比值是輻射滅菌成功的關(guān)鍵成功的關(guān)鍵 FDA認(rèn)可的最小處理劑量一般是認(rèn)可的最小處理劑量一般是1.5Mrad（兆拉兆拉德），但也需要提供適當(dāng)?shù)奈⑸餃y試數(shù)據(jù)作為德），但也需要提供適當(dāng)?shù)奈⑸餃y試數(shù)據(jù)作為批準(zhǔn)依據(jù)。英國藥典、美國藥典都規(guī)定最大輻射批準(zhǔn)依據(jù)。英國藥典、美國藥典都規(guī)定最大輻射滅菌處理劑量為滅菌處理劑量為2.5Mrad，實驗證明，劑量為實驗證明，劑量為2.5Mrad的輻射滅菌等于在

52、高壓滅菌器內(nèi)的輻射滅菌等于在高壓滅菌器內(nèi)120滅滅菌菌20分鐘分鐘 在實際生產(chǎn)應(yīng)用中，由于制劑不可能污染很多細(xì)在實際生產(chǎn)應(yīng)用中，由于制劑不可能污染很多細(xì)菌，所以劑量往往要小的多。例如，菌，所以劑量往往要小的多。例如，12ml塑料塑料安瓿的阿托品、嗎啡注射液和安瓿的阿托品、嗎啡注射液和250500ml塑料袋塑料袋裝的氯化鈉或葡萄糖溶液，用裝的氯化鈉或葡萄糖溶液，用510410104R劑量的劑量的射線進(jìn)行照射即可達(dá)到滅菌效果射線進(jìn)行照射即可達(dá)到滅菌效果 (四四)影響輻射滅菌的因素影響輻射滅菌的因素 大腸桿菌混懸液，每大腸桿菌混懸液，每ml含含80萬萬1億個細(xì)菌，照億個細(xì)菌，照射射20104R即可滅

53、菌，而每即可滅菌，而每ml含含100億個細(xì)菌，億個細(xì)菌，則要照射則要照射60104R才能完全滅菌才能完全滅菌 水和氧氣均能增加輻射滅菌的效果，原因是射線水和氧氣均能增加輻射滅菌的效果，原因是射線可以將水或氧氣電離成自由基，進(jìn)而影響細(xì)菌代可以將水或氧氣電離成自由基，進(jìn)而影響細(xì)菌代謝謝 加入鹵代酚可使輻射滅菌效應(yīng)顯著增加，并且得加入鹵代酚可使輻射滅菌效應(yīng)顯著增加，并且得到以下規(guī)律：到以下規(guī)律：IBrCl，取代位次序是：對位取代位次序是：對位間位鄰位，并且效應(yīng)隨鹵原子數(shù)目的增加而間位鄰位，并且效應(yīng)隨鹵原子數(shù)目的增加而增強增強 (五五)可用輻射法滅菌的藥品和材料可用輻射法滅菌的藥品和材料 v 抗生素類

54、：青霉素抗生素類：青霉素G鉀、鏈霉素、土霉素、紅鉀、鏈霉素、土霉素、紅霉素、利副平等；霉素、利副平等； 激素類：雌二醇、可的松、激素類：雌二醇、可的松、強的松龍等；強的松龍等； 巴比妥類：苯巴比妥、戊巴比妥巴比妥類：苯巴比妥、戊巴比妥等；等； 疫苗、抗毒素類：斑疹傷害疫苗、白喉抗疫苗、抗毒素類：斑疹傷害疫苗、白喉抗毒素等；毒素等； 其他：生理鹽水、注射用水、鹽酸普其他：生理鹽水、注射用水、鹽酸普魯卡因溶液、維生素魯卡因溶液、維生素C注射液等注射液等 (六六)不宜用輻射法滅菌的藥品和材料不宜用輻射法滅菌的藥品和材料 v 生物堿類：硫酸阿托品注射液、磷酸可待因、生物堿類：硫酸阿托品注射液、磷酸可待

55、因、鹽酸嗎啡注射液等；鹽酸嗎啡注射液等； 生物制品：胰島素注射生物制品：胰島素注射液、破傷風(fēng)抗毒素、凍干人血漿等；液、破傷風(fēng)抗毒素、凍干人血漿等； 強心苷強心苷類：洋地黃毒苷注射液；類：洋地黃毒苷注射液； 維生素類：維生素維生素類：維生素B6注射液、維生素注射液、維生素B12注射液等；注射液等； 酶類：玻璃酶類：玻璃質(zhì)酸酶；質(zhì)酸酶； 其他：其他：5葡萄糖注射液、葡萄糖注射液、20甘露甘露醇注射液等；醇注射液等； 有機顏料：經(jīng)射線照射易分解有機顏料：經(jīng)射線照射易分解產(chǎn)生致癌物，所以應(yīng)嚴(yán)格控制輻射劑量產(chǎn)生致癌物，所以應(yīng)嚴(yán)格控制輻射劑量 第四節(jié)第四節(jié) 化學(xué)滅菌法化學(xué)滅菌法 一、氣體滅菌法一、氣體滅菌

56、法 是指用化學(xué)品的氣體或蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。用是指用化學(xué)品的氣體或蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。用于藥物滅菌的氣體希望具備下列要求：于藥物滅菌的氣體希望具備下列要求： 在室溫在室溫時能形成氣體或蒸汽；時能形成氣體或蒸汽； 穿透力強，并容易在滅穿透力強，并容易在滅菌物中分布；菌物中分布； 滅菌作用快、毒性低，在低濃度滅菌作用快、毒性低，在低濃度就具有殺菌作用；就具有殺菌作用； 無腐蝕性、爆炸性及刺激性無腐蝕性、爆炸性及刺激性 (一一)環(huán)氧乙烷環(huán)氧乙烷 在室溫下無色，沸點在室溫下無色，沸點10.8，沸點以下為，沸點以下為無色透明液體；在水中溶解度很大，無色透明液體；在水中溶解度很大，1ml水中可溶水中可溶1

57、95ml；有較強的擴散和穿透力，有較強的擴散和穿透力，作用快；對細(xì)菌芽胞、真菌、病毒等各種作用快；對細(xì)菌芽胞、真菌、病毒等各種微生物均有殺滅作用，屬于廣譜殺菌劑微生物均有殺滅作用，屬于廣譜殺菌劑 環(huán)氧乙烷屬烷化劑，細(xì)菌蛋白質(zhì)分子、酶、核環(huán)氧乙烷屬烷化劑，細(xì)菌蛋白質(zhì)分子、酶、核酸中的氨基、羥基、羧基與環(huán)氧乙烷相結(jié)合，酸中的氨基、羥基、羧基與環(huán)氧乙烷相結(jié)合，對菌體細(xì)胞的代謝產(chǎn)生不可逆的破壞對菌體細(xì)胞的代謝產(chǎn)生不可逆的破壞 CH2CH2O+R-SHR-S-(CH2CH2OH)應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍可用于對熱敏感的固體藥物、塑料容器、注射器、可用于對熱敏感的固體藥物、塑料容器、注射器、皮革制品、手術(shù)器械等皮

58、革制品、手術(shù)器械等 滅菌機制滅菌機制環(huán)氧乙烷滅菌的注意事項環(huán)氧乙烷滅菌的注意事項 環(huán)氧乙烷具可燃性，當(dāng)與空氣混合后空氣含量達(dá)環(huán)氧乙烷具可燃性，當(dāng)與空氣混合后空氣含量達(dá)3.0（V/V）時即可爆炸。故應(yīng)用時需用惰性氣時即可爆炸。故應(yīng)用時需用惰性氣體二氧化碳或鹵代烴稀釋體二氧化碳或鹵代烴稀釋 環(huán)氧乙烷對塑料、橡膠、紙板等穿透力強，親和環(huán)氧乙烷對塑料、橡膠、紙板等穿透力強，親和力強，故滅菌完畢后需通潔凈空氣力強，故滅菌完畢后需通潔凈空氣1224h驅(qū)除驅(qū)除殘余氣體。另外，某些被滅菌材料能吸收環(huán)氧乙殘余氣體。另外，某些被滅菌材料能吸收環(huán)氧乙烷而降低其濃度烷而降低其濃度 環(huán)氧乙烷滅菌器裝置環(huán)氧乙烷滅菌器裝置

59、 自動化連續(xù)作業(yè)：加溫、加濕、啟動真空泵、輸自動化連續(xù)作業(yè)：加溫、加濕、啟動真空泵、輸入氣體、滅菌、殘余氣體排出入氣體、滅菌、殘余氣體排出 滅菌器使用的滅菌氣體包括三種：滅菌器使用的滅菌氣體包括三種： 甲：甲：12環(huán)氧乙烷十環(huán)氧乙烷十88氟利昂氟利昂 乙：乙：30環(huán)氧乙烷十環(huán)氧乙烷十70二氧化碳二氧化碳 丙：純環(huán)氧乙烷丙：純環(huán)氧乙烷溫度儀和濕度儀控制溫度達(dá)到溫度儀和濕度儀控制溫度達(dá)到5055，濕度，濕度50，此時滅菌效果最好，此時滅菌效果最好 氣體輸入量準(zhǔn)確，常用范圍是氣體輸入量準(zhǔn)確，常用范圍是400800mg/L 滅菌后，真空泵將環(huán)氧乙烷氣體抽盡，用濾過后滅菌后，真空泵將環(huán)氧乙烷氣體抽盡，用

60、濾過后的凈化空氣輸入滅菌柜，保持的凈化空氣輸入滅菌柜，保持1224h驅(qū)除殘余驅(qū)除殘余氣體，并防止外界空氣的污染氣體，并防止外界空氣的污染 影響環(huán)氧乙烷滅菌效果的因素影響環(huán)氧乙烷滅菌效果的因素 環(huán)氧乙烷的濃度大，滅菌所需的時間短。如濃度環(huán)氧乙烷的濃度大，滅菌所需的時間短。如濃度為為850900mg/L（45），），滅菌時間為滅菌時間為3h；濃度濃度為為450mg/L，滅菌時間為滅菌時間為56h 滅菌溫度如果低于最佳溫度滅菌溫度如果低于最佳溫度5055，則滅菌效，則滅菌效果差果差 相對濕度相對濕度3060為宜，為宜，50最佳，小于最佳，小于20大于大于80則滅菌效果減弱，則滅菌效果減弱，RH在在2