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文檔簡介
1、精選優質文檔-傾情為你奉上§1.書本知識點:一、三型八大類(三菌四體一病毒)1.真核細胞型微生物細胞核有核膜和核仁,細胞器完整,如真菌。2.原核細胞型微生物僅有原始核,無核膜、核仁。細胞器很不完善。DNA和RNA同時存在。有細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體3.非細胞型微生物是最小的一類微生物。無典型的細胞結構,只能在活細胞內生長繁殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之。球菌:桿菌:螺旋狀菌:二、細菌基本形態與排列狀態單球菌、雙球菌、鏈球菌、四聯球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。 細菌按其外形,主要有短桿狀、長桿狀、棒桿狀、梭狀桿狀、月亮狀、竹節狀等;按桿菌細胞繁殖后的排列方式
2、則有鏈狀、柵狀、“八”字狀等。弧菌、螺旋菌三、細菌的特殊狀態n 細菌的活的非可培養狀態:指細菌處于不良環境條件下,細胞縮成球形,用常規方法培養不能生長繁,但仍是活的一種特殊存在形式.處于活的非可培養狀態的細菌在一定的條件下可以復蘇,并仍具有毒性.如霍亂弧菌,大腸桿菌O157:H7等。四、物質攝取的方式:單純擴散、促進擴散、主動運輸、基團轉位五、菌落 菌落:單個細菌在適當的固體培養基表面或內部,經過一段時間培養后,生長繁殖出數量巨大的菌體,形成肉眼可見、有一定形態的群體。可用于細菌的分離、純化、計數和鑒定。六、細菌培養基及分類(一)、細菌培養基:是人工配制的基質,含有細菌生長繁殖必需的營養物質。
3、培養基制成后,通常都要經滅菌處理。(二)、分類、按營養組成的差異 1.基礎培養基 : 基本營養成分 2.營養培養基 : 在基礎培養基中添加一些其它營養物質,如葡萄 糖、血液、血清、生長因子等、按狀態的差異1.固體培養基 : 1.5%2%瓊脂,用于細菌分離純化。 2.半固體培養基: 0.5%瓊脂,作穿刺試驗。3.液體培養 : 擴增純培養的菌體。、按功能的差異1.鑒別培養基:在培養基中加入特定底物,觀察細菌在其生長后分解底物如何,從而鑒別細菌。 2.選擇培養基:在培養基中加入某種化學物質,使之抑制一類細菌生長,而有利于另一類細菌生長,從而將后者選擇出來。 3.厭氧培養基:專供厭氧菌的分離、培養和鑒
4、別用. 將普通培養基放在無氧環境中培養,或者使培養基本身成為無氧的環境七、生物被膜 生物被膜:一般情況下,生活在自然界中的細菌并非以游離的單個菌體形式存在,而是以群落的形式出現,此種群落的主要表現形式為生物被膜。八、無特定病原體動物:指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動物。例如為了排除某些細菌如假單胞菌屬、變形桿菌屬、克雷伯菌屬等的干擾,可通過無菌動物與這些細菌以外的正常菌群相聯系培育SPF動物。九、滅菌 滅菌:指殺滅物體中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。十、巴氏消毒法巴氏消毒法 :以較低溫度殺滅液態食品中的病原菌或特定微生物,而又不致嚴重損害其營養成分和風
5、味的消毒方法 . 1.低溫維持巴氏消毒法 636530min 2.高溫瞬時巴氏消毒法 717215s 3.超高溫巴氏消毒法 13212s 十一、影響消毒滅菌效果的因素(1)消毒劑的性質、濃度與作用時間(2)微生物的污染程度(3)微生物的種類和生活狀態(4)環境中有機物(5)溫度、濕度、酸堿度(6)化學拮抗物十二、經典柯赫法則(1) 特殊的病原菌應在同一疾病中查見,在健康者不存在 (2) 此病原菌能被分離培養而得到純種 (3) 此純培養物接種易感動物,能導致同樣病癥 (4) 自實驗感染的動物體內能重新獲得該病原菌的純培養 十三、細菌毒力的測定1.半數致死量(LD50) 是指能使接種的實驗動物在感
6、染后一定時限內死亡一半所需的微生物量或毒素量。 2.半數感染量(ID50) 某些病原微生物只能感染實驗動物、雞胚或細胞,但不引致死亡,可用ID50來表示其毒力。 十四、細菌的遺傳變異 n 細菌的遺傳:指親代細菌與子代細菌的相似性,它使細菌的性狀保持相對穩定,是各種細菌存在的根據。n 細菌的變異:指親代與子代以及子代細菌之間的不相似性,細菌得以發展進化。十五、毒力島 毒力島:指病原菌的某個或某些毒力基因群,分子結構與功能有別于細菌染色體,但位于細菌染色體之內 。十六、基因轉移供體細菌間接或直接地將部分遺傳物質單向傳遞給受體細菌,從而導致受體細菌發生基因重組的現象稱為基因轉移。細菌的基因轉移主要形
7、式有轉化、轉導、接合、原生質體融合和溶原性轉換。十七、轉化感受態及轉導轉化:供體菌游離的DNA片段直接進入受體菌,使受體菌獲得新的遺傳性狀。 (注:受體菌必須處于感受態才能轉化 )感受態 :細胞生活周期中的一種特殊的生理狀態。轉導:以溫和噬菌體為媒介,把供體菌的DNA小片段攜帶到受體菌中,通過交換與整合,使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀 。 兩種類型:普遍性轉導(任何)和局限性轉導(特定,)。1.普遍性轉導:被裝入的DNA片段可以是供體菌染色體上的任何部分。 (完全轉導,流產轉導)2.局限性轉導 :為噬菌體所介導的供體菌染色體上個別特定基因的轉導 。(特異性轉導)十八、溶源轉換溶源轉換 :指溫
8、和噬菌體感染其寄主后,噬菌體基因整合于寄主基因組中,寄主的性狀發生變異。十九、病毒子病毒子:一個形態和結構上完整的病毒顆粒。二十、傳染性核酸有些病毒去除囊膜和衣殼,裸露的DNA或RNA也能感染細胞,這樣的核酸稱為傳染性核酸。二十一、病毒的復制1. 復制:病毒在活細胞內,以其基因為模板,在酶的作用下,分別合成病毒基因及蛋白質,再組裝成完整的病毒顆粒,這種方式稱為復制。2. 感染比:指在一個系統中,感染病毒的細胞數與細胞總數之比。3. 復制周期:從病毒進入宿主細胞開始,經過基因組復制和病毒蛋白合成,至釋放出子代病毒的全過程,稱為一個復制周期。4. 四個步驟:病毒的復制周期主要包括吸附和穿入、脫殼、
9、生物合成、組裝和釋放四個連續步驟。5. 隱蔽期:病毒侵入易感細胞后在一個斷短的的時間內,病毒完全消失,甚至在細胞內也找不到。該感染的病毒顆粒,直到新的病毒子出現為止。這一段時間稱為病毒復制的隱蔽期。6. 病毒的一步生長曲線:以感染時間為橫坐標,病毒效價為縱坐標,繪制出的病毒特征曲線。二十二、病毒的釋放方式1. 絕大多數無囊膜病毒釋放,一次同步,破壞宿主細胞膜,細胞迅速死亡。2. 絕大多數有囊膜病毒以出芽方式釋出時包上細胞核膜或細胞膜而成為成熟病毒。逐個釋出,非一次同步,細胞死亡緩慢。二十三、重配:對于分節段的RNA病毒,通過交換RNA節段而進行的重組稱為重配。二十四、細胞培養:細胞培養是指利用
10、機械、酶或化學方法使動物組織或傳代細胞分散成單個乃至24個細胞團懸優點:n 每個細胞生理特性基本一致,對病毒易感性相等n 無個體差異,準確性和重復性好n 可嚴格執行無菌操作n 細胞培養本身就能顯示病毒的生長特征n 應用空斑技術可進行病毒的克隆化二十五、細胞的類型細胞的類型原代細胞:動物組織經胰蛋白酶消化處理,使細胞分散而得到的細胞二倍體細胞株:將長成單層的原代細胞消化分散成單個細胞,繼續培養傳代,其染色體數與原代細胞一樣,保持其二倍染色體數目的細胞,稱為二倍體細胞。傳代細胞系:能在體外持續增殖傳代的細胞,大多數由癌細胞或二倍體細胞突變而成。二十六、細胞培養的方法1. 靜置培養:實驗室常用。細胞
11、懸液裝瓶,5%CO2溫箱靜置培養,細胞沉降并貼附在玻面上生長分裂,最后長成單層。2. 旋轉培養:大規模生產疫苗。細胞在玻瓶內生長時,玻瓶不斷緩慢旋轉,細胞貼附于玻瓶四周,長成單層。3. 懸浮培養4. 微載體培養二十七、細胞病變效應由病毒感染導致的細胞損傷。CPE能在光學顯微鏡下觀察。細胞圓縮,如痘病毒和呼腸孤病毒等;細胞聚合,如腺病毒;細胞融合形成合胞體,如副粘病毒和皰疹病毒;有些病毒能形成包涵體。二十八、半數細胞感染量半數細胞感染量:能夠使半數組織細胞在一定條件下發生細胞病變的病毒量。用于判定病毒的毒力。二十九、空斑及包涵體空斑:是由一個感染性病毒粒子復制形成的,類似于細菌的菌落,稱為空斑形
12、成單位(PFU)。病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升含有的PFU來表示。 包涵體:是某些病毒感染細胞產生的特征性的形態變化,在普通光學顯微鏡下可見胞漿或胞核內出現的呈嗜酸性或嗜堿性染色、大小數量不等的圓形或不規則形的團塊狀結構,稱為包涵體。空斑是由一個感染性病毒粒子復制形成的,類似于細菌的菌落,稱為空斑形成單位(PFU)。三十. 機會致病菌機會致病菌:正常菌群與宿主之間,正常菌群之間,通過營養競爭,代謝產物的相互制約等因素,維持著良好的生存平衡。在一定條件下這種平衡關系被打破,原來不致病的正常菌群中的細菌可成為致病菌,稱這類細菌為機會性致病菌。三十一. 轉位因子轉位因子:是細菌基因組中能改變自身
13、位置的一類獨特的DNA片段。§2、大題一.芽胞的特點(1)對高溫、干燥、輻射、化學藥物有強大的抵抗力。 (2)含水量低、壁厚而致密,通透性差,不易著色,折光性強。(3)芽胞內新陳代謝幾乎停止,處于休眠狀態,但保持潛在萌發力。(4)不是繁殖器官,一個芽孢萌發只產生一個營養狀態的細胞。二.經典柯赫法則 (1)特殊的病原菌應在同一疾病中查見,在健康者不存在 (2)此病原菌能被分離培養而得到純種 (3)此純培養物接種易感動物,能導致同樣病癥 (4)自實驗感染的動物體內能重新獲得該病原菌的純培養 三.細菌的毒力因素細菌的毒力因素毒素外毒素(exotoxin)內毒素(endotoxin)侵襲力:
14、定殖-干擾宿主防御機制 -體內增殖-體內擴散四.雙命名法所謂“雙名法”就是每一種細菌的拉丁文名稱由屬名和種名兩部分構成,屬名第一個字母必須大寫,其余均應小字。整個屬名及種名在出版物中應排成斜體。 五.內毒素與外毒素的比較種類內毒素外毒素來源革蘭陰性菌革蘭陽性菌部及分革蘭陰性菌存在部位細胞壁成分、細菌裂解后釋出活菌分泌或細菌溶解后散出化學成分脂多糖蛋白質穩定性好、160 2-4小時破壞差、60-80 30分鐘破壞毒性作用較弱、各種內毒素作用大致相同,起休克,發熱,等強、對機體組織器官有選擇性,引起特殊臨床表現抗原性弱,能刺激機體形成抗體,但無中和作用,甲醛處理后不能形成類毒素強,能刺激機體形成抗
15、毒素,經甲醛脫毒后能形成類毒素六. 革蘭氏染色法基本步驟:(1)結晶紫初染(2)碘液媒染(3)95%乙醇脫色(4)沙黃復染基本原理G+ 菌:肽聚糖含量高,交聯度大,當乙醇脫色時,肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結晶紫-碘復合物被阻留在細胞內,細胞仍呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯松散,乙醇脫色不能使其結構收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,酒精將細胞脫色,細胞無色,沙黃(石炭酸復紅)復染后呈紅色。革蘭染色的方法:細菌標本固定后,先用結晶紫初染,再用碘液媒染,使之生成結晶紫-碘復合物,然后用95%酒精脫色,最后用稀釋的復紅復染。可將細菌分成2類,不被酒精脫色仍保留紫色者為革蘭陽性菌;被酒精脫色后
16、復染為紅色者是革蘭陰性菌。用途:細菌形態鑒定、菌種鑒定意義:鑒別細菌:可分為2類、研究細菌對抗生素的敏感性,選擇抗菌藥物、研究細菌對結晶紫的敏感性、細菌的等電點、指導臨床用藥有重要意義。七. 生物膜的特性(1)生長速度緩慢,而且不均一。 細菌生物膜的形成就是在不利環境下形成的,環境的變化對它的影響較小。在膜表面的細菌,由于營養等因素,分裂較快,體積也大,內層則相反。(2)細菌毒力下降 毒力強的細菌形成被膜菌后,一般不會使動物致死。(3)耐藥性提高(4)逃逸宿主的免疫監視多糖膜能降低免疫細胞和免疫分子的趨化,而使被膜菌與宿主長期共存狀態。八.空斑試驗將適當濃度的病毒懸液加入單層細胞培養中,當病毒
17、吸附細胞后,再覆蓋一層融化的瓊脂。病毒在細胞內復制后產生局限性病灶,病灶逐漸擴大,肉眼也能看見,此即空斑試驗。九. 細胞培養的優點:n 每個細胞生理特性基本一致,對病毒易感性相等n 無個體差異,準確性和重復性好n 可嚴格執行無菌操作n 細胞培養本身就能顯示病毒的生長特征n 應用空斑技術可進行病毒的克隆化十. 革蘭氏陽性細菌與革蘭氏陰性細菌細胞壁成分比較革蘭氏陽性菌細胞壁:由肽聚糖和磷壁酸組成 革蘭氏陰性菌細胞壁外膜(外壁層):位于肽聚糖層的外部。 內壁層(周質間隙):緊貼胞膜,僅由12層肽聚糖分子構成。革蘭氏陽性細菌與革蘭氏陰性細菌細胞壁成分比較 革蘭氏陽性菌革蘭氏陰性菌細胞壁厚度層次是否含磷壁酸脂多糖對青霉素敏感性對溶菌酶敏感性厚(20-80nm)主要為1層肽聚糖層 有無高高 薄(10nm)2層,肽聚糖層和外膜層 無 有 低或不敏感敏感性相對較低十一.細菌生長繁殖四個期的特點 n (1)遲緩期:細菌被接種于培養基后,對新的環境有一個短暫的適應過程。因細菌繁殖極少,故生長曲線平緩穩定,一般為14小時。此期細菌菌體增大,代謝活躍,為細菌進一步分裂增殖而合成充足的酶、能量及中間代謝產物。n (2)對數期(指數期):此期
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