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文檔簡介
職業教育醫學檢驗技術專業教學資源庫生物化學檢驗技術第七章糖代謝紊亂的生物化學檢驗BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2目錄第一節糖代謝調節1第二節糖代謝紊亂2第三節糖代謝紊亂的實驗室檢查3
第一節糖代謝調節一、血糖(bloodglucose,BG):指血液中的葡萄糖。
糖的主要生理功能
①為機體提供能量,②作為組織細胞的結構材料
③轉變為其他物質。正常人空腹血糖濃度為:3.9mmol/L~6.1mmol/L,
食物中的糖肝糖原非糖物質消化吸收分解糖異生CO2+
H2O肝、肌糖原其他糖或非糖物質氧化分解合成轉變
空腹血糖3.9mmol/L~6.1mmol/L血糖濃度>腎糖閾(8.89mmol/L~10.00mmol/L)尿糖來源去路
一、
血糖的來源與去路CO2+
H2O其他糖或非糖物質雙向調節血糖通過下丘腦和神經系統調節激素的分泌降低血糖激素與升高血糖激素作用于肝臟
二、血糖濃度的調節(一)神經系統的調節
神經系統對血糖濃度的調節作用,主要通過下丘腦和自主神經系統控制其所控激素的分泌,后者再通過調節糖代謝關鍵酶的活性來實現。神經系統的調節最終是通過細胞水平的調節來達到目的。(二)激素的調節(三)
激素和組織器官的協同調節第二節糖代謝紊亂一、高血糖與糖尿病高血糖癥(hyperglycemia):是指空腹血糖濃度超過7.0mmol/L。單擊此處添加文本具體內容單擊此處添加標題病理性糖尿病內分泌性疾病應激性高血糖脫水所致血液濃縮情感性(情緒激動)飲食性(高糖飲食)生理性高血糖糖尿病(diabetesmellitus,DM):是一組由遺傳和環境因素引起的胰島素分泌不足或(和)胰島素作用低下所致的以慢性血糖增高為特征的代謝性疾病。臨床表現與癥狀:多尿、多飲、多食、消瘦等,以高血糖為其主要特征,伴有糖、蛋白質、脂肪、水和電解質等一系列代謝紊亂,長期的高血糖可引起功能紊亂、多器官損害甚至衰竭。糖尿病WHO推薦病因學糖尿病分型:1型糖尿病(T1DM)2型糖尿病(T2DM)特殊類型糖尿病妊娠期糖尿病GDM03040102胰島素絕對不足,存在自身抗體。見于青少年、兒童,易發生DKA,占DM患者5%~10%,胰島素治療敏感。胰島素抵抗伴有胰島素相對不足。見于中老年肥胖者,DKA發生低于1型,占我國糖尿病患者90%以上胰島β細胞基因缺陷;胰島素受體基因異常;內分泌疾??;胰腺疾病;藥物或化學物質所致胰腺損傷妊娠期首次發生或發現的糖尿病,含妊娠前已患有,但妊娠期內首次診斷的患者(一)糖尿病分型①糖尿病癥狀+隨機血糖濃度≥11.1mmol/L。典型糖尿病癥狀包括多食、多飲、多尿和不明原因的體重下降。隨機血糖是指末次進食后任意時間點測得的血糖濃度;②空腹血糖濃度≥7.0mmol/L。空腹指持續8小時以上無任何熱量攝入;③口服葡萄糖耐量試驗中2小時血糖≥11.1mmol/L。注:以上三種方法都可以單獨用來診斷糖尿病,但需要另一天采取靜脈血重復試驗,兩次的試驗結果有相關性才能確診。(二)糖尿病診斷標準
妊娠期糖尿病的診斷標準
方法時間血漿葡萄糖濃度100g葡葡糖耐量試驗空腹<5.3mmol/L1h≤10.0mmol/L2h≤8.6mmol/L3h≤7.8mmol/L75g葡萄糖耐量試驗空腹≤5.3mmol/L1h≤10.0mmol/L2h≤8.6mmol/L注:①妊娠期糖尿病診斷標準長期未統一,表7-1為美國糖尿病學會所推薦;②臨床采用100g和75g葡萄糖耐量試驗均可,后者較為常用;③以上檢測結果每一個試驗中如果有2項以上陽性,即可診斷,1項陽性為妊娠糖耐量減退,各項均陰性為正常.三)糖尿病的主要代謝紊亂糖尿病酮癥酸中毒昏迷
常見于1型患者伴應激時。表現為:嚴重失水、代謝性酸中毒、電解質紊亂和廣泛的功能紊亂。除尿酮癥呈強陽性外,血酮體>5mmol/L、HCO-3濃度降低、血pH<7.35,病情嚴重時可致昏迷。糖尿病非酮癥高滲性昏迷多見于60歲以上老年(2型)輕癥糖尿病及少數幼年(1型)病者。血糖極高,沒有明顯的酮癥酸中毒,是一種因高血糖引起高滲性脫水和進行性意識改變的臨床綜合癥。糖尿病非酮癥高滲性昏迷糖尿病乳酸酸中毒昏迷糖尿病人,由于胰島素的絕對或相對不足,機體組織不能有效地利用血糖,丙酮酸大量還原為乳酸,使體內乳酸堆積增多。(四)糖尿病急性代謝并發癥低血糖癥(hypoglycemia):指血糖濃度低于空腹血糖的參考水平下限,也有專家建議2.78mmol/L為低血糖癥的臨界值。低血糖的臨床癥狀:主要是交感神經興奮癥狀如出汗、神經質、顫抖、無力、眩暈、心悸、饑餓感,以及中樞神經系統癥狀如意識混亂、行為異常、視力障礙、癲癇等,嚴重者可出現神志喪失、昏迷甚至死亡。
二、低血糖
新生兒低血糖
早產、母體糖尿病、GDM和妊娠子癇、呼吸窘迫綜合征、其他(冷應激,紅細胞增多癥等)嬰幼兒低血糖
遺傳性代謝缺陷、同性低血糖、先天性酶缺乏、半乳糖血癥餐后低血糖
原因不明的功能性低血糖、T2DM早期、胃腸手術后、大量攝入半乳糖或果糖等①胰島素或胰島素樣物質過多、升高血糖激素缺乏等;②嚴重肝臟疾病、重度心衰伴肝淤血、肝酶異常等;③高熱、慢性腹瀉、長期饑餓、過度飲酒、腎性糖尿、嚴重營養不良等;④先天性代謝病:如糖原貯積病等成人空腹低血糖糖尿病性低血糖
胰島素或降糖藥使用過多(一)病因及臨床分型
可以根據Whipple三聯征確診:①低血糖癥狀;②發作時空腹血糖濃度≤2.8mmol/L(60歲以上老人≤3.0mmol/L);③供糖后低血糖癥狀迅速緩解。(二)低血糖的診斷標準
三、糖代謝的先天異常糖原貯積癥(GSD)參與糖原合成或分解的酶缺乏,使糖原在肝、肌肉等臟器中大量堆積,造成這些器官的肥大及功能障礙。半乳糖血癥是機體不能轉化利用半乳糖及其中間代謝產物的一種常染色體隱性遺傳性疾病,其特征主要是血和尿中半乳糖增高。Ⅰ型:
葡萄糖6-磷酸酶缺乏癥,最常見,病情最重。Ⅱ型:a-1,4-葡萄糖苷酶缺乏癥,主要影響心臟和骨骼肌。Ⅲ型:淀粉-1,6-葡萄糖苷酶缺乏癥。Ⅳ型:分支酶缺乏癥。V型:肌磷酸化酶缺乏癥。Ⅵ型:肝磷酸化酶或磷酸化酶激酶缺乏癥。Ⅶ型:肌磷酸果糖激酶缺乏癥等。共分13型常用的實驗室檢查項目糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測定反映血糖控制情況酮體、乳酸、丙酮酸測定餐后2小時血糖、口服葡萄糖耐量試驗、胰島素測定及胰島素釋放試驗、C-肽測定及C-肽釋放試驗反映機體對糖負荷的調節能力
第三節糖代謝紊亂的實驗室檢查體液葡萄糖測定反映體內血糖水平反映機體代謝狀態空腹血糖(FPG):是在隔夜空腹至少8~10小時未攝入任何食物后,早餐前采血所測定的葡萄糖濃度。FPG是診斷糖尿病最主要的依據,若兩次重復測定FPG都≥7.0mmol/L,即可確診為糖尿病。
一、血清(血漿)葡萄糖測定(一)標本采集與處理1.標本采集空腹靜脈采血。血清和血漿都可以作為血糖檢驗的標本,如果用血漿標本,最好選擇草酸鉀-氟化鈉抗凝劑。2.標本處理標本采集后,應立即送檢,并迅速分離血清(或血漿),如果不能及時檢驗,可置2℃~8℃冰箱保存,標本中的葡萄糖濃度可穩定3天。(二)測定方法目前臨床檢驗主要采用酶法測定已糖激酶(HK)法葡萄糖氧化酶(GOD)法
葡萄糖脫氫酶(GDH)法。常規方法參考方法干擾最少【實驗原理】1.己糖激酶法NADPH的生成速率與血液中葡萄糖的濃度成正比。NADPH在340nm波長處有吸收峰,通過監測其吸光度升高速率,可計算標本中葡萄糖濃度?!痉椒ㄔu價】
準確度、精密度都非常高不受輕度溶血(血紅蛋白小于5g/L)、脂血、黃疸、尿酸、維生素C、氟化鈉、肝素、EDTA和草酸鹽等干擾。線性范圍可達33.31mmol/L適用于自動生化分析目前被認為是血糖測定的參考方法【實驗原理】2.葡萄糖氧化酶法(GOD-POD偶聯法)
紅色醌類化合物在505nm有吸收峰,其生成量在一定范圍內與葡萄糖的含量成正比,與同樣處理的標準管比較,即可求得標本中葡萄糖濃度。是衛生部臨床檢驗中心推薦的血糖測定的常規方法?!痉椒ㄔu價】GOD僅對β-葡萄糖高度特異性,對α-葡萄糖作用弱,延長孵育時間可使其變旋。GOD-POD法準確度、精密度都能達到臨床要求,操作簡單,可用于自動化分析儀,是目前我國臨檢中心推薦的常規方法ABPOD的特異性較低,一些還原性物質如尿酸、維生素C、膽紅素和谷胱甘肽等可消耗過氧化氫,使測定結果偏低(引起負誤差),具有氧化劑作用的化合物參與反應,可引起正誤差CGOD-POD法可直接測定腦脊液中葡萄糖的含量,但由于尿液中尿酸等干擾物濃度過高,所以該法不能直接測定尿液中葡萄糖的含量。D【實驗原理】3.葡萄糖脫氫酶法(GDH法)NADH的生成量與葡萄糖濃度成正相關。NADH在340nm波長處有吸收峰,通過監測其吸光度升高速率,可計算標本中葡萄糖濃度?!痉椒ㄔu價】(1)GDH對葡萄糖高度特異,其檢測結果與己糖激酶法有很好的一致性。(2)常規抗凝劑和血清中的常見物質都不會對本法產生干擾。(三)參考區間血糖增高(四)臨床意義高血糖癥:空腹血糖≥7.0mmol/L生理性高血糖:飲食性(高糖飲食)情感性(情緒激動)病理性高血糖:①糖尿病;②內分泌系統的疾?、蹜ば愿哐洽苊撍鸬难簼饪s⑤嚴重的肝硬化,⑥胰腺病變。(四)臨床意義血糖降低低血糖病理性低血糖:內分泌疾病致胰島素分泌絕對或相對過量;對抗胰島素的激素分泌不足;嚴重肝病生理性低血糖:見于饑餓、劇烈運動等。(四)臨床意義降糖藥、中毒劑量對乙酰氨基酚、抗組胺藥、致毒量阿司匹林、乙醇、胍乙啶、普萘洛爾引起血糖降低的藥物噻嗪類利尿藥、口服避孕藥、兒茶酚胺吲哚美辛、咖啡因、甲狀腺素、腎上腺素引起血糖升高的藥物藥物的影響葡萄糖耐量(耐糖現象):正常人由于體內有一套完善的調節血糖濃度的機制,即使一次攝入大量的葡萄糖,血糖濃度也僅暫時升高,且于2h內恢復到正常血糖水平,而不出現糖尿,此即為葡萄糖耐量或耐糖現象。糖耐量降低:若調節功能失調,口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后、血糖急劇升高,在一定時限內不能恢復到原有水平,此種現象稱為糖耐量降低。糖耐量增加:一次給予大量葡萄糖后,血糖升高不明顯,或緩慢地輕度上升,稱糖耐量增加。
二、口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)什么是OGTT口服葡萄糖耐量試驗(OGTT):是一種糖負荷試驗,即經口服給予受試者一定負荷量的葡萄糖后,通過測定不同時間的血糖和尿糖濃度,了解受試者胰島β細胞功能和血糖調節能力。那些人適合做OGTT?
1.受試者實驗前三天停用胰島素治療及影響實驗的藥物。維持正常飲食及活動(每天食物糖含量不低于150g)。試驗前應空腹10~16小時。2.空腹靜脈取血2ml,抗凝,測定血漿葡萄糖(稱空腹血漿血糖,FPG)。3.將75g無水葡萄糖溶于250m1水中(妊娠婦女用量為100g;兒童葡萄糖用量可按1.75g/kg體重計算,總量不超過75g),5分鐘內飲完。4.從服第一口糖水開始計時,每隔30分鐘取血1次,共4次,歷時2小時(必要時可延長至6小時)。采血同時每隔1小時留取尿液做尿糖測定。整個試驗過程中不可吸煙、喝咖啡、喝茶或進食。5.繪制糖耐量曲線:以測定血糖的時間為橫坐標(空腹時為0時),血糖濃度為縱坐標,繪制糖耐量曲線。
試驗方法【參考區間】健康成年人正常糖耐量:FPG≤6.1mmol/L;服糖后30~60分鐘血糖升高達高峰,但一般<10.0mmol/L,2hPG≤7.8mmol/L;同時測定上述各時段的尿糖均應為陰性。不同人群葡萄糖耐量曲線C糖耐量減退DFPG≥7.0mmol/L,和(或)2hPG≥11.1mmol/L糖尿病性糖耐量PFG<7.0mol/L,2hPG介于7.8mmol/L~11.1mol/L正常糖耐量FPG≤6.1mmol/L并且2hPG<7.8mmol/LFPG介于6.1mmol/L~7.Ommon/L之間,且2hPG<7.8mmol/L空腹血糖受損OGTT結合FPG可協助診斷糖尿病及相關狀態結果判斷
1.OGTT在糖尿病的診斷中并非必須,因此不推薦臨床常規應用。臨床上首先推薦測定FPG。2.雖然OGTT比FPG更靈敏,但它受多種因素影響且重復性差。除非第一次OGTT結果明顯異常,否則應該在不同時間做兩次OGTT測定以判斷是否異常。3.對不宜作OGTT的患者(如不能承受大劑量口服葡萄糖、胃切除后及其他可致口服葡萄糖吸收不良的患者),應按WHO的方法進行靜脈葡萄糖耐量試驗(IGTT)。但50歲以上者對葡萄糖的耐受力有下降的趨勢,不宜做此試驗。應用評價
三、糖化血紅蛋白測定
正常成人血紅蛋白(Hb)HbA(97%):由α2β2組成HbA2(2.5%):由α2δ2組成HbF(0.5%):由α2γ2組成HbA(α2β2)模型圖+葡萄糖分子血紅蛋白分子糖化血紅蛋(GHb)血清中的糖類物質通過紅細胞膜進入紅細胞內與HbA的β鏈N-末端纈氨酸殘基,以非酶促、共價的方式結合形成的糖化血紅蛋白,稱為HbA1。若糖類物質與HbA的β鏈N-末端的賴氨酸殘基或α鏈結合,形成的糖化血紅蛋白稱為HbA0,但HbA0不能根據電荷不同而將其與普通血紅蛋白分離。HbA1和HbA0統稱為糖化血紅蛋白(GHb)。這種結合是一種緩慢的,不可逆的反應,糖化血紅蛋白一旦形成就不再解離,在血液中會相對穩定的存在。GHb生成速率取決于一段時間內血糖的平均含量和紅細胞的壽命,血糖濃度越高,血糖與紅細胞接觸時間越長,GHb的生成量也就越多。正常紅細胞平均壽命約為120天,因此GHb的濃度可以反映測定前2~3個月內受試者血糖的平均水平;而與血糖的短期波動無關,是評價糖尿病患者血糖控制效果的良好指標。HbA1aHbA1bHbA1c:葡萄糖與HbA的β鏈N末端纈氨酸殘基縮合而成;占HbA170%~90%HbA1c代表GHb的水平
糖化血紅蛋白(GHb)HbA1HbA0:不能根據電荷不同而將其與普通血紅蛋白分離(一)測定方法GHb的測定方法根據電荷差異:離子交換層析、常規電泳和等電聚焦電泳根據結構差異:可采用親和層析和免疫測定法化學分析技術:可采用比色法、分光光度法;質譜法酶法離子交換層析法離子交換樹脂微柱法低壓液相層析(LPLC)法高效液相層析(HPLC)法:國際臨床化學聯合會(IFCC)推薦的參考方法目前臨床上多采用HPLC和免疫比濁法。(一)測定方法1、HPLC法:【實驗原理】用偏酸緩沖劑處理Bio-Rex70陽離子交換樹脂,使之帶負電荷,它與帶正電荷的Hb有親和力。HbA及HbA1均帶正電荷,由于HbA1的兩個β鏈N末端正電荷被糖基清除,正電荷較HbA少,兩者對樹脂的附著力不同。用pH6.7磷酸鹽緩沖劑可首先將帶正電荷較少、吸附力較弱的HbA1洗脫下來,再用分光光度計測定洗脫液中的HbA1占總Hb的百分數。(一)測定方法【參考區間】健康成人HbA15.0%~8.0%(均值6.5%)HbA1c3.6%~6.0%2.HbA1c免疫法【實驗原理】首先用TTAB(四癸基三甲銨溴化物)作為溶血劑(不溶解白細胞),用來消除白細胞物質的干擾。將處理好的樣本先加入抗體緩沖液,樣本中的糖化血紅蛋白(HbA1c)和抗HbA1c抗體反應形成可溶性的抗原-抗體復合物,由于在HbA1c分子上只有一個特異性的HbA1c抗體結合位點,不能夠形成凝集反應。然后,加入多聚半抗原緩沖液,多聚半抗原和反應液中過剩的抗HbA1c抗體結合,生成不溶性的抗體-多聚半抗原復合物,可用比濁法進行測定。同時在另一個通道上測定Hb濃度。在該通道中,溶血液中的血紅蛋白轉變為具有特征性吸收光譜的血紅蛋白衍生物,用重鉻酸鹽作標準參照物,進行比色法測定Hb濃度。(一)測定方法【參考區間】(1)IFCC計算方案:健康成年人:HbA1c:2.8%~3.8%(2)DCCT/NGSP(糖尿病控制和并發癥試驗/美國糖化Hb標準化方案)計算方案:
健康成年人:HbA1c4.8%~6.0%3、酶法【實驗原理】(一)測定方法【參考區間】HbA1c4.0%~6.0%(HPLC法)第一步:在蛋白酶的作用下,切斷糖化血紅蛋白的β鏈N末端的糖化甘氨酰谷氨酰胺,通過測定600nm與800nm的吸光度差,求出Hb的濃度;第二步:果糖基氨基酸氧化酶(FPOX)作用于糖化甘氨酰谷氨酰胺,在過氧化物酶的存在下,生成的過氧化氫與顯色劑產生顯色反應,通過吸光度求出HbA1c的濃度,進一步計算得出HbA1c(%)。反應式如下:1.是糖尿病患者長期血糖控制的評價指標:4%~6%:血糖控制正常6%~7%:血糖控制比較理想。7%~8%:血糖控制一般8%~9%:控制較差,需注意飲食結構及運動,在醫生指導下調整治療方案。>9%:血糖控制很差,是慢性并發癥發生發展的危險因素。并有可能出現酮癥酸中毒等急性并發癥(二)臨床意義
HbA1c≥6.5%:糖尿病患者;HbA1c在5.7%~6.4%之間:屬于糖尿病前期。2.對糖尿病性高血糖和應激性高血糖做出鑒別:前者GHb水平多增高,后者正常。3.HbA1c水平低于確定的參考區間,可能表明最近有低血糖發作、Hb變異體存在或紅細胞壽命短,減少或縮短了紅細胞暴露到葡萄糖中的時間。當解釋此類患者的HbA1c結果時應當小心。4.GHb對監測糖尿病微小血管并發癥、慢性并發癥的發生和發展都有積極的意義。若GHb>9%說明患者有持續性高血糖存在,會發生糖尿病腎病、白內障等,同時也是AMI、腦卒中死亡的高危因素。(二)臨床意義
四、糖化血清蛋白測定糖化血清蛋白是指血液中的葡萄糖與血清蛋白的N末端發生非酶促的糖基化反應,形成高分子酮胺化合物,其結構類似果糖胺,總稱為糖化血清蛋白。由于90%以上糖化血清蛋白是糖化白蛋白(glycatedalbumin,GA),即葡萄糖與白蛋白鏈內賴氨酸殘基上的ε-氨基結合生成,因此GA可以反映糖化血清蛋白的總體水平。什么是糖化血清蛋白?白蛋白的半壽期為17~19天,比血紅蛋白短,轉換率快,故可通過測定GA水平來反映受試者2~3周前的血糖控制情況,是一個短期血糖控制的評價指標。為什么要測糖化血清蛋白?(一)測定方法目前臨床常用:果糖胺法、酮胺氧化酶法
【實驗原理】血清中的果糖胺,在堿性環境下能還原硝基四氮唑藍(NBT)為紫紅色甲臜,在530nm波長處有最大吸收峰,與同樣處理的果糖胺標準液進行比較,即可計算出樣本中糖化血清蛋白的含量?!緟⒖紖^間】成人果糖胺:1.9mmol/L±0.25mmol/L【方法評價】該法經濟、快速,適用于自動生化分析儀,但pH、反應溫度、反應時間,對本實驗影響較大,必須嚴格予以控制。血液中的膽紅素、乳糜和低分子物質會對測定造成干擾。(一)測定方法1、果糖胺法【實驗原理】(一)測定方法2、酮胺氧化酶法藍紫色色素生成量在一定范圍內與GA含量成正比,通過測定吸光度值來定量GA;同時采用溴甲酚綠法測定血清總白蛋白的含量,從而計算出糖化白蛋白占總白蛋白的百分比?!緟⒖紖^間】
成人糖化白蛋白:10.8%~17.1%(引自2011年《中國血糖監測臨床應用指南》)【方法學評價】
本法簡便快捷,可運用于自動生化分析儀,精密度、準確度優于果糖胺法,而且膽紅素、甘油三酯、抗壞血酸、尿酸、血紅蛋白及葡萄糖等對其干擾較小。該法與HPLC參考方法有極好的相關性。(一)測定方法
1、評價短期血糖控制情況:白蛋白在體內半壽期較短(約20天左右),且白蛋白與葡萄糖結合的速度比血紅蛋白快,故GA可有效地反映糖尿病患者近2~3周內血糖控制情況,特別適用于住院調整藥物的病人。
2、輔助鑒別應激性高血糖:急性應激如外傷、感染以及急性心腦血管事件等發生時,非糖尿病會出現高血糖,與糖尿病難以區分。GA與HbA1c聯合測定有助于判斷高血糖的持續時間,可作為既往糖尿病病史的輔助診斷。3、GA≥17.1%可以篩査出大部分未經診斷的糖尿病患者,同時測定FPG和GA可提高糖尿病的篩查率。(二)臨床意義
五、胰島素測定及胰島素釋放試驗
它由胰島β細胞合成、分泌,并以胰島素原的形式儲存在胰島β細胞中,最終胰島素原被水解成等分子的活性胰島素和無活性的C肽,并釋放入血液中發揮生物學作用。胰島素是降低血糖的主要激素胰島素胰島素的主要作用促進肝、骨骼肌和脂肪組織對葡萄糖的攝取抑制肝臟的糖異生促進葡萄糖轉換成糖原或脂肪儲存刺激蛋白質合成并抑制其分解總效應:血糖降低
胰島素測定及胰島素釋放試驗是診斷和治療糖尿病的兩個主要試驗。試驗方法和測定對象完全相同,但標本的采集方法和觀察目的有所區別。通過胰島素測定,可以了解胰腺β細胞的分泌功能。胰島素釋放試驗可反映胰腺β細胞的儲備能力。標本采集方法及注意事項與OGTT完全相同,常與OGTT試驗同時進行。(一)測定方法胰島素檢測方法免疫學法放射免疫分析(RIA)酶聯免疫吸附分析(ELISA)化學發光免疫分析(CLIA)電化學發光免疫分析(ECLIA)時間分辨熒光免疫分析法(TrFIL)非免疫法同位素稀釋法(IDA)高效液相色譜法(HPLC)(一)測定方法現在臨床多采用CLIA或ECLIA標本中的胰島素和包被于固相磁珠或固相上的單克隆抗體及標記有酶或電化學發光物質的單克隆抗體形成雙抗體夾心復合物,通過磁場或沖洗除去未反應的標記單克隆抗體,加入酶底物使之顯色或通電使電化學發光物質形成激發態并在衰減時發射光子,底物顯色強度或發光強度與胰島素含量成正比?!緦嶒炘怼靠崭挂葝u素:4.0U/L~15.6U/L(CLIA法)??崭挂葝u素:17.8pmol/L~173.0pmol/L(ECLIA法)正常人胰島素分泌常與血糖值呈平行狀態,服糖后高峰在30~60分鐘,通常為空腹值的5~10倍,達到峰值后的胰島素下降很快,180分鐘的測定值只比空腹值略高。【參考區間】
對存在空腹低血糖的患者進行評估。預測2型糖尿病的發展趨勢并可評估患者狀況,也可預測糖尿病易感性。通過測定血漿胰島素濃度和胰島素抗體水平來評估胰島素抵抗機制。糖尿病的早期檢測和診斷:糖尿病臨床癥狀出現之前,胰島素對服用葡萄糖的反應較遲鈍。鑒別需胰島素治療的糖尿病患者和僅靠飲食即可控制的糖尿病患者。如:在口服75g葡萄糖后血漿胰島素水平超過60μU/ml時不可能發生微血管并發癥,這時能夠靠飲食控制;但如果胰島素峰值<40μU/ml,則需要胰島素治療而且很可能發生微血管病變。(二)臨床意義胰島素測定的主要臨床用途:
ABCDE1型糖尿病空腹胰島素值低,服糖后仍無反應或反應低下,呈
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