1、第三章第三章 藥品定量分析與分析方藥品定量分析與分析方法驗證法驗證第一節第一節 定量分析樣品的前處置方法定量分析樣品的前處置方法一、含鹵素有機藥物的分析一、含鹵素有機藥物的分析 含鹵素有機藥物系指藥物分子構含鹵素有機藥物系指藥物分子構造中所含鹵素直接與芳環或脂肪鏈相造中所含鹵素直接與芳環或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機藥物的鹵酸連者，而不包括某些有機藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽鹽或氫鹵酸鹽構造特點：構造特點：CX一鹵原子的活潑性一鹵原子的活潑性1. 1. 鹵原子與碳原子直接相連，鹵原鹵原子與碳原子直接相連，鹵原子的活潑性和它直接相連的烴基的構子的活潑性和它直接相連的烴基的構造有很大關系造有很大關系1

2、乙烯型鹵和芳鹵乙烯型鹵和芳鹵 不活潑不活潑CH2CH XX2烯丙型鹵和芐鹵烯丙型鹵和芐鹵 活潑活潑CH2XCH2CH CH2X3鹵代烷型鹵代烷型 介于兩者之間介于兩者之間CH2CH (CH2)nX n22. 分子中所含鹵原子的個數分子中所含鹵原子的個數 分子中所含鹵原子的個數越多，分子中所含鹵原子的個數越多，活潑性越低，特別是同一碳上含多個活潑性越低，特別是同一碳上含多個鹵原子或一個苯環上含多個鹵原子時，鹵原子或一個苯環上含多個鹵原子時，活潑性降低更加明顯活潑性降低更加明顯3. 鹵素的種類鹵素的種類IBrClF常見的含鹵素有機藥物常見的含鹵素有機藥物NNNOFCOOH恩諾 沙星鹽酸胺碘酮鹽酸胺

3、碘酮OCH2CH2CH2CH3COOCH2CH2N(C2H5)2IIHClHNNFNC2H5OCOOH諾氟沙星諾氟沙星OFFCH3HHOHCH3CCH2OCOCH3OOOCCH3CH3醋酸氟輕松醋酸氟輕松二含鹵素有機藥物的分析二含鹵素有機藥物的分析XXC適當的處理直接回流后測定法直接回流后測定法堿性或酸性復原后測定法堿性或酸性復原后測定法氧瓶熄滅分解后測定法氧瓶熄滅分解后測定法1. 直接回流后測定法直接回流后測定法 本法是將含鹵素有機藥物溶于適當本法是將含鹵素有機藥物溶于適當溶劑如乙醇中，參與氫氧化鈉溶溶劑如乙醇中，參與氫氧化鈉溶液或一定量過量的硝酸銀滴定液液或一定量過量的硝酸銀滴定液后，加熱

4、回流使其水解，將有機結合后，加熱回流使其水解，將有機結合的鹵素轉變為無機的鹵素離子，然后的鹵素轉變為無機的鹵素離子，然后采用銀量法采用銀量法Volhard法測定。法測定。 本法適用于含鹵素有機藥物構造本法適用于含鹵素有機藥物構造中鹵素原子結合不結實的藥物如鹵中鹵素原子結合不結實的藥物如鹵原子和脂肪碳原子相連者。原子和脂肪碳原子相連者。 原理原理 三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，氯元素全部轉變成氯加熱回流水解，氯元素全部轉變成氯化鈉，然后用剩余滴定法，即于水解化鈉，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再參與定量過量的液中加硝酸酸化，再參與定量過量的硝酸銀滴

5、定液，使硝酸銀滴定液，使Cl-生成生成AgCl沉淀，沉淀，過量的硝酸銀，以過量的硝酸銀，以Fe3+為指示劑，用為指示劑，用硫氰酸銨液回滴定。硫氰酸銨液回滴定。 例三氯叔丁醇的測定例三氯叔丁醇的測定 ChP2000CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH 回流回流(CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3淡棕紅色淡棕紅色(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010-12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 測定方法測定方法 取本品約取本品約0

6、.1g，精細稱定，加，精細稱定，加乙醇乙醇5ml溶解后，加溶解后，加20%氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液5ml，加熱回流加熱回流15min，放冷至室溫，加水，放冷至室溫，加水20ml與與硝酸硝酸5ml，精細加硝酸銀滴定液，精細加硝酸銀滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加鄰苯二甲酸二丁酯，再加鄰苯二甲酸二丁酯5ml，密塞，密塞，強力振搖后，加硫酸鐵胺指示液強力振搖后，加硫酸鐵胺指示液2ml，用硫，用硫氰酸胺滴定液氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的滴定，并將滴定的結果用空白實驗校正。每結果用空白實驗校正。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于相當于6.216mg的

7、的C4H7Cl3O1/2H2O。反響摩爾比為1 3mlmg216. 6Lg216. 63molg47.186Lmol1 . 0ncMTT滴定度，每1ml滴定液相當于被測組分的mg數c滴定液濃度，mol/LM被測物的摩爾質量，g/moln1mol樣品耗費滴定液的摩爾數，常用反響摩爾比表達，即反響摩爾比為1n 2. 堿性或酸性復原后測定法堿性或酸性復原后測定法 本法是將含鹵素有機藥物在堿性或本法是將含鹵素有機藥物在堿性或酸性下，加復原劑如鋅粉加熱回酸性下，加復原劑如鋅粉加熱回流，藥物產生復原裂解反響，使有機流，藥物產生復原裂解反響，使有機結合的鹵素轉變為無機的鹵素離子，結合的鹵素轉變為無機的鹵素離

8、子，然后采用銀量法然后采用銀量法Fajans法測定。法測定。 本法適用于測定構造中碘與苯環本法適用于測定構造中碘與苯環直接相連，且一個苯環上含多個碘原直接相連，且一個苯環上含多個碘原子的含鹵素有機藥物。子的含鹵素有機藥物。 1 堿性復原后測定法堿性復原后測定法例例 泛影酸的測定泛影酸的測定 ChP (2000) 取本品約取本品約0.4g，精細稱定，加氫氧化鈉溶，精細稱定，加氫氧化鈉溶液液30ml與鋅粉與鋅粉1.0g，加熱回流，加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水洗滌洗滌3次，每次次，每次15ml，洗液與濾液合并，加冰，

9、洗液與濾液合并，加冰醋酸醋酸5ml與曙紅鈉指示液與曙紅鈉指示液5滴，用硝酸銀滴定液滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于相當于20.46mg的的C11H9 I 3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H2 H2N+ 3NaI + 2CH3COONa+ 2Na2ZnO2 + H2O USP (24)、BP2019 ChP(2000)收載的膽影酸、碘番收載的膽影酸、碘番酸、膽影葡胺、泛影葡胺、碘他拉酸酸、膽影葡胺、泛影葡胺、碘他拉酸等均采用同法測定。等均采用同法測定

10、。 2酸性復原后測定法酸性復原后測定法 取本品的枯燥品約取本品的枯燥品約0.4g，精細稱定，加鋅，精細稱定，加鋅粉粉1g及冰醋酸及冰醋酸10ml，加熱回流，加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用水冷凝管用水30ml洗滌，用脫脂棉過濾，燒瓶與洗滌，用脫脂棉過濾，燒瓶與脫脂棉用水洗滌脫脂棉用水洗滌2次，每次次，每次20ml，洗液與濾液，洗液與濾液合并，加四溴酚酞乙酯指示液合并，加四溴酚酞乙酯指示液1ml ，用硝酸銀，用硝酸銀滴定液滴定液(0.1mol/L)滴定。終點時黃色沉淀變為綠滴定。終點時黃色沉淀變為綠色。每色。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于相當于19.031mg

11、的的C11H12 I 3NO2。例例 碘番酸的測定碘番酸的測定 JP (13)3. 氧瓶熄滅分解后測定法氧瓶熄滅分解后測定法 1原理原理 氧瓶熄滅法：將有機藥物放入充溢氧氧瓶熄滅法：將有機藥物放入充溢氧氣的密閉熄滅瓶中進展熄滅，并將熄滅所氣的密閉熄滅瓶中進展熄滅，并將熄滅所產生的欲測物質吸收于適當的吸收液中，產生的欲測物質吸收于適當的吸收液中，然后根據欲測物質的性質，采用適宜的分然后根據欲測物質的性質，采用適宜的分析方法進展鑒別、檢查或含量測定析方法進展鑒別、檢查或含量測定NaClHClOClCNaOH2 溶液點燃 適用于含鹵素、硫、氮、硒等適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機藥物的分析有機藥物的分

12、析 本法特點是簡便、快速、破壞完本法特點是簡便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析全，尤其適用于微量樣品的分析 2 儀器與資料儀器與資料 儀器安裝儀器安裝 熄滅瓶為熄滅瓶為500、1000或或2000ml無色、磨口、厚壁、無色、磨口、厚壁、硬質玻璃錐型瓶；瓶塞空硬質玻璃錐型瓶；瓶塞空心，底部熔封鉑絲一根，心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網狀下端呈螺旋狀或網狀稱樣用資料及稱樣稱樣用資料及稱樣 A. 固體樣品固體樣品 無灰濾紙無灰濾紙 B. 液體樣品液體樣品 紙袋紙袋 C. C. 軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成分的蠟油紙中包裹嚴密，外層再用無灰濾紙包

13、分的蠟油紙中包裹嚴密，外層再用無灰濾紙包裹裹吸收液吸收液 A. 作用：吸收液的作用是將樣品經作用：吸收液的作用是將樣品經熄滅分解所產生的各種價態的鹵素、熄滅分解所產生的各種價態的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉變為硫、氮、硒等，定量地吸收并轉變為一定的便于測定的價態一定的便于測定的價態氧氣氧氣B. 吸收液的選擇吸收液的選擇氟氟 水水 氯氯 NaOH水溶液水溶液溴溴 NaOH二氧化硫飽和溶液二氧化硫飽和溶液碘碘 NaOH二氧化硫飽和溶液二氧化硫飽和溶液硫硫 濃濃H2O2 水溶液水溶液 、加、加HCl除除硒硒 硝酸溶液硝酸溶液磷磷 水水3操作方法操作方法熄滅瓶熄滅前的預備熄滅瓶熄滅前的預備 用洗

14、液洗凈后，按各藥品項下的規定參用洗液洗凈后，按各藥品項下的規定參與吸收液，將瓶口用水潮濕，小心急速地與吸收液，將瓶口用水潮濕，小心急速地通入氧氣通入氧氣1min，立刻用外表皿覆蓋瓶口。，立刻用外表皿覆蓋瓶口。樣品的預備樣品的預備 取樣品適量，精細稱定后按規定方法取樣品適量，精細稱定后按規定方法包裹，固定于鉑絲下端的網內或螺旋處。包裹，固定于鉑絲下端的網內或螺旋處。樣品的熄滅樣品的熄滅 點燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放點燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放入熄滅瓶中，按緊瓶塞，加水少量封鎖瓶入熄滅瓶中，按緊瓶塞，加水少量封鎖瓶口，俟熄滅終了應無黑色碎片，充分口，俟熄滅終了應無黑色碎片，充分振搖，使生成

15、的煙霧完全吸入吸收液中，振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放置放置15min，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白實驗。合并洗液及吸收液，同法另做空白實驗。然后按各藥品項下規定的方法進展鑒別、然后按各藥品項下規定的方法進展鑒別、檢查或含量測定。檢查或含量測定。 待分解樣品量待分解樣品量 燃燒瓶的體積燃燒瓶的體積 310mg（微量分析）（微量分析） 150250ml 1020mg（半微量分析）（半微量分析）500ml 200mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊結或特殊結構的燃燒瓶構的燃燒瓶98：140. 氧瓶熄滅法中的安裝

16、有A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 磨口軟質玻璃錐形瓶C. 鉑絲D. 鐵絲E. 鋁絲96：13399x：選擇氧瓶熄滅法所必備的實驗物品A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 鉑絲C. 普通濾紙D. 氫氣 E. 無灰濾紙99：76氧瓶熄滅法測定含氯有機藥物時所用的吸收液多數為A. H2O溶液B.濃H2O2 水溶液 C. NaOH溶液D. NaOH二氧化硫飽和溶液E. 硝酸溶液99：134. 氧瓶熄滅法可用于A. 含鹵素有機藥物的含量測定B. 醚類藥物的含量測定C. 檢查甾體激素類藥物中的氟D. 檢查甾體激素類藥物中的硒E. 芳酸類藥物的含量測定二、含有金屬有機藥物的分析方法二、含有金屬有機藥物的分析方法 含金

17、屬的有機藥物：金屬原子不與碳原子直接含金屬的有機藥物：金屬原子不與碳原子直接相連，通常為有機酸及酚的金屬鹽或配位化合相連，通常為有機酸及酚的金屬鹽或配位化合物物 如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵鐵 有機金屬藥物：金屬原子直接與碳有機金屬藥物：金屬原子直接與碳原子以共價鍵相連，結合比較結實原子以共價鍵相連，結合比較結實 如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利CCHOCHOOOCOOSbSbOOCOOOCHOCHC2K+ 3H2O酒石酸銻鉀酒石酸銻鉀CCHCCOOOFeOMg(C17H35COO)2硬脂酸鎂硬脂酸鎂富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵CH2O

18、HCHOHCHOCHOCHOCOO-SbOHOSbO-OCHCHCHCCHOOCH2-OOHOHONa39H2O葡萄糖酸銻鈉葡萄糖酸銻鈉NHCONH2AsOOHHO卡巴胂卡巴胂HgOCOCH3醋酸苯汞醋酸苯汞OCH2COONaCONHCH2CHCH2HgOHOCH3汞撒利汞撒利含金屬有機藥物定量分析前的含金屬有機藥物定量分析前的處置方法處置方法 不經有機破壞的分析方法不經有機破壞的分析方法 直接測定法直接測定法;經水解后測定法經水解后測定法;經復原經復原-汞齊化后測定法汞齊化后測定法 經有機破壞的分析方法經有機破壞的分析方法 濕法破壞濕法破壞(硝酸硝酸-高氯酸法高氯酸法;硝酸硝酸-硫酸法硫酸法

19、;硫酸硫酸-硫酸鹽法等硫酸鹽法等);干法破壞干法破壞一不經有機破壞的分析方法一不經有機破壞的分析方法1. 直接測定法直接測定法 適用于金屬原子不直接與碳原子適用于金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬有機藥物或某些相連的含金屬有機藥物或某些CM鍵鍵結合不結實的有機金屬藥物。結合不結實的有機金屬藥物。富馬酸亞鐵的含量測定富馬酸亞鐵的含量測定 ChP (2000) 取本品約取本品約0.3g，精細稱定，加稀硫酸，精細稱定，加稀硫酸 15ml，加熱溶解后，放冷，加新沸過的，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水冷水50ml與鄰二氮菲指示液與鄰二氮菲指示液2 滴，立刻用滴，立刻用硫酸鈰滴定液硫酸鈰滴定液(0.1m

20、ol/L)滴定，并將滴定滴定，并將滴定的結果用空白實驗校正。每的結果用空白實驗校正。每1ml硫酸鈰滴硫酸鈰滴定液定液(0.1mol/L)相當于相當于16.99mg 。C4H2FeO4原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ NN3Fe2+ + e-NN3Fe3+紅色紅色淺藍色淺藍色OCCHOFeHCCOOOOCCHOHCCO+Fe2+2. 用硫酸水解后測定法用硫酸水解后測定法例例 硬脂酸鎂的測定硬脂酸鎂的測定 取本品約取本品約0.1g，精細稱定，精細加硫酸滴定，精細稱定，精細加硫酸滴定液液(0.05mol/L) 50ml，煮沸至油滴廓清，繼續加，煮沸至油滴廓清，繼續加熱熱10mi

21、n，放冷至室溫，加甲基橙指示液，放冷至室溫，加甲基橙指示液12滴，滴，用氫氧化鈉滴定液用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硫酸硫酸滴定液滴定液(0.05mol/L)相當于相當于2.016mg的的MgO。原理：原理：Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2 C17 H35COOH2NaOH + H2SO4 Na2SO4 + 2H2O 3. 經復原經復原-汞齊化后測定法汞齊化后測定法 本法系在酸性或堿性溶液中，加本法系在酸性或堿性溶液中，加鋅粉、加熱回流，將藥物中有機結合鋅粉、加熱回流，將藥物中有機結合的汞復原析出金屬汞，并與過量的鋅的汞復原析出金屬

22、汞，并與過量的鋅生成鋅汞齊。將鋅汞齊溶于硝酸后，生成鋅汞齊。將鋅汞齊溶于硝酸后，選用適當的方法測定汞的含量，并換選用適當的方法測定汞的含量，并換算成含汞有機藥物的含量。算成含汞有機藥物的含量。 二經有機破壞的分析方法二經有機破壞的分析方法 適用于金屬原子與碳原子結合結實的有機適用于金屬原子與碳原子結合結實的有機金屬藥物。金屬藥物。1. 濕法破壞濕法破壞 1 硝酸硝酸-高氯酸法高氯酸法 本法適用于血、尿、組織等生物樣本法適用于血、尿、組織等生物樣品的破壞，有機金屬藥物經破壞后，品的破壞，有機金屬藥物經破壞后，得到的無機金屬離子普通呈高價態。得到的無機金屬離子普通呈高價態。 本法不能用于含氮雜環藥

23、物的破壞本法不能用于含氮雜環藥物的破壞 2 2 硝酸硝酸- -硫酸法硫酸法 本法適用于大多數有機物質的破本法適用于大多數有機物質的破壞，破壞得到的無機金屬離子均為高壞，破壞得到的無機金屬離子均為高價態。價態。 本法不能用于含堿土金屬有機藥本法不能用于含堿土金屬有機藥物的破壞物的破壞 3 3 硫酸硫酸- -硫酸鹽法硫酸鹽法 本法是往樣品中參與濃硫酸作氧本法是往樣品中參與濃硫酸作氧化劑，參與硫酸鹽提高硫酸的沸點，化劑，參與硫酸鹽提高硫酸的沸點，加強硫酸的氧化破壞才干，且防止硫加強硫酸的氧化破壞才干，且防止硫酸的分解損失。酸的分解損失。 本法常用于含砷或銻有機藥物的本法常用于含砷或銻有機藥物的破壞，

24、破壞得到的無機金屬離子多為破壞，破壞得到的無機金屬離子多為低價態。低價態。 4 4 其它濕法其它濕法 硝酸硝酸硫酸硫酸高氯酸法高氯酸法 硫酸硫酸氧化劑法過氧化氫法、氧化劑法過氧化氫法、高錳酸鉀高錳酸鉀 破壞后，金屬呈高價態破壞后，金屬呈高價態2. 干法破壞干法破壞 適用于濕法不易破壞完全的有機物以及適用于濕法不易破壞完全的有機物以及某些不能用硫酸進展破壞的有機藥物。不某些不能用硫酸進展破壞的有機藥物。不適用于含易揮發性金屬如汞、砷等有適用于含易揮發性金屬如汞、砷等有機藥物的破壞機藥物的破壞本卷須知：本卷須知：1加熱或灼燒時，應控制溫度在加熱或灼燒時，應控制溫度在420以下以下2一定要灰化完全一

25、定要灰化完全3經本法破壞后，所得灰分往往不經本法破壞后，所得灰分往往不易溶解，但不要隨便棄去易溶解，但不要隨便棄去第二節第二節 定量分析方法的特點定量分析方法的特點一、容量分析法的特點一、容量分析法的特點 容量分析法是將知濃度的滴定液容量分析法是將知濃度的滴定液由滴定管滴加到待測藥物的溶液中，由滴定管滴加到待測藥物的溶液中，直到所加滴定液與被測藥物按化學直到所加滴定液與被測藥物按化學計量反響完全為止，然后根據滴定計量反響完全為止，然后根據滴定液的濃度和耗費的體積，就可以計液的濃度和耗費的體積，就可以計算被測藥物的含量。算被測藥物的含量。 特點：操作簡便、快速、比較準確，特點：操作簡便、快速、比

26、較準確，所用儀器普通易得，在藥品檢驗任所用儀器普通易得，在藥品檢驗任務中具有很大的適用價值務中具有很大的適用價值二、光譜分析法二、光譜分析法一、紫外可見分光光度法特點一、紫外可見分光光度法特點 原理：很多物質分子對波長原理：很多物質分子對波長200nm760nm 的紫外光有吸收特征。的紫外光有吸收特征。 特點：靈敏度高，可達特點：靈敏度高，可達10-4g/ml10-7g/ml 準確度高，相對誤差為準確度高，相對誤差為25 儀器價錢較低廉，操作簡單，易于儀器價錢較低廉，操作簡單，易于 普及。普及。二、熒光分析法 某些物質遭到紫外光或可見光照射激發后能發射出比激光波長較長的熒光。 特點：1、靈敏度

27、高10-10g/ml10-12g/ml ， 紫外10-4g/ml10-7g/ml 2、樣品的濃度比較低1g/L 3、必需做空白實驗 4、對易被光分解的樣品，用基準溶液替代對照品溶液校正儀器的靈敏度。 5、為擴展熒光分析法的運用范圍，應采用熒光衍生試劑。 6、取樣少，方法快速，在藥物分析領域中是重要的分析手段。三、色譜分析法三、色譜分析法 色譜分析法又稱層析法根據基分別原理色譜分析法又稱層析法根據基分別原理可分為：吸附色譜、分別色譜、離子交換色可分為：吸附色譜、分別色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。譜與排阻色譜等。 根據分別方法分為：紙色譜法、薄層色譜、根據分別方法分為：紙色譜法、薄層色譜、柱色譜

28、法、氣相色譜法、高效液相色譜法。柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法。 色譜分析法是一種分別分析方法，是分析混色譜分析法是一種分別分析方法，是分析混合物的最有力手段。具有高靈敏度可達合物的最有力手段。具有高靈敏度可達 10-12g/ml10-15g/ml 、高選擇性、高效能、高選擇性、高效能、高速度和運用廣泛等特點高速度和運用廣泛等特點 。第三節 藥質量量規范分析方法驗證 一、目的 證明所采用的分析方法適宜于相應的檢測要求，方法驗證過程和結果均應記載在藥品規范起草和修訂闡明中。 二、用途一藥質量量規范起草時，分析方法需閱歷證。二藥物合成方法變卦、制劑的組分變卦、原分析方法進展修訂時，分析方法需

29、閱歷證。三、需驗證的分析工程1. 鑒別實驗；2. 雜質定量或限制檢查；3. 原料或制劑中有效成分含量測定；4. 制劑中其它成分降解產物、防腐劑等的測定；5. 溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法。 驗證內容有：準確度、精細度驗證內容有：準確度、精細度反復性、中間精細度和重現性、反復性、中間精細度和重現性、專屬性、檢測限、定量限、線性、范專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性圍和耐用性四、驗證內容 一 準確度accuracy 準確度是指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。 測定回收率Rrecovery的詳細方法可采用“回收實驗法和“加樣回收實驗法。 回收

30、實驗 空白+知量A的對照品或規范品測定，測定值為M%100AMR 加樣回收實驗 已準確測定藥物含量P的真實樣品+知量A的對照品或規范品測定，測定值為M%100APMR 數據要求 規定的范圍內，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次。1. 含量測定方法的準確度含量測定方法的準確度 原料藥可用知純度的對照品或樣品進展測原料藥可用知純度的對照品或樣品進展測定，或用本法所得結果與已建立準確度的另一定，或用本法所得結果與已建立準確度的另一方法測定的結果進展比較。方法測定的結果進展比較。 制劑可用含己知量被測物的各組制劑可用含己知量被測物的各組分混合物進展測定，即采用在空白輔分混合物進展測

31、定，即采用在空白輔料中參與原料藥對照品的方法。料中參與原料藥對照品的方法。 如不能得到制劑的全部組分，可向如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中參與知量的被測物進展測定，制劑中參與知量的被測物進展測定，或與另一個已建立準確度的方法比較或與另一個已建立準確度的方法比較結果。結果。 中藥分析的準確度普通用加樣回中藥分析的準確度普通用加樣回收實驗衡量。中藥回收率普通要求在收實驗衡量。中藥回收率普通要求在95105%范圍內，有些方法操作步驟范圍內，有些方法操作步驟繁多時，可要求在繁多時，可要求在90110%范圍內。范圍內。RSD普通在普通在3%以內。以內。 2雜質定量測定的準確度雜質定量測定的準確度 可

32、向原料藥或制劑中參與知量雜質可向原料藥或制劑中參與知量雜質進展測定。假設不能得到雜質或降解進展測定。假設不能得到雜質或降解產物，可用本法測定結果與另一成熟產物，可用本法測定結果與另一成熟的方法進展比較。的方法進展比較。 二精細度precision 精細度是指在規定條件下，同一個均勻樣品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度。用偏向d、規范偏向(SD)、相對規范偏向(RSD)變異系數，CV表示。 偏向d：丈量值與平均值之差xxdi規范偏差SD或S12nxxSi相對規范偏差RSD，也稱變異系數CV%100 xSRSD 1. 反復性 在一樣條件下，由同一個分析人員測定所得結果的精細度；在規定的范圍內

33、，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當作100%，至少測6次進展評價。 2. 中間精細度 同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設備所得結果的精細度。調查隨機變動要素的影響。變動要素為不同日期、不同分析人員、不同設備 3. 重現性 不同實驗室，不同分析人員測定結果的精細度。當分析方法將被法定規范采用時，應進展重現性實驗。如建立藥典分析方法時經過協同檢驗得出重現性結果，協同檢驗的過程、重現性結果均應記載在起草闡明中。 三專屬性specificity 指有其他成分雜質、降解物、輔料等能夠存在情況下采用的方法能準確測定出被測物的特性，能反映該方法在有共存物時對供試

34、物準確而專屬的測定才干。是指該法用于復雜樣品分析時相互關擾程度的度量。 四 檢測限limit of detection， LOD 檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。是限制實驗參數，無需定量測定。常用%、ppm、ppb表示。1非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用知濃度的被測物，實驗出能被可用知濃度的被測物，實驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。靠地檢測出的最低濃度或量。 2信噪比法 用于能顯示基線噪音的分析方法儀器分析方法，是把知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進展比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。普通以信噪比S/N3 1或2 1時的相應濃度或注入儀器的量確定檢測限。3數

35、據要求數據要求 應附測試圖譜，闡明測試過程和檢應附測試圖譜，闡明測試過程和檢測限結果。測限結果。 五定量限1imit of quantitation，LOQ 指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結果應具有一定準確度和精細度。常用%、ppm、ppb表示。 常用信噪比法確定定量限，普通以信噪比S/N為10 1時相應的濃度或注入儀器的量進展確定，也可用儀器所測空白背景呼應規范差SD的10倍為估計值，再經實驗確定。 六 線性 在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。 數據要求：應列出回歸方程、相關系數和線性圖。七范圍七范圍 指到達一定精細度、準確度和線性指到達一定精細度、準確度

36、和線性的條件下，測試方法適用的高低限濃度的條件下，測試方法適用的高低限濃度或量的區間。或量的區間。八八 耐用性耐用性 指測定條件稍有變動時，結指測定條件稍有變動時，結果不受影響的接受程度，為常規檢驗提供根果不受影響的接受程度，為常規檢驗提供根據。是衡量實驗室和任務人員之間在正常情據。是衡量實驗室和任務人員之間在正常情況下實驗結果重現性的尺度。況下實驗結果重現性的尺度。 九運用九運用 1. 鑒別實驗除專屬性、檢測限、耐用性鑒別實驗除專屬性、檢測限、耐用性外，其它都不要求。外，其它都不要求。 2. 雜質的限量檢查除專屬性、檢測限、耐用性外，其它都不要求。雜質的定量測定除檢測限外，其它都要求。 3.

37、 含量測定及溶出量測定除檢測限、定量限外，其它都要求。十各種含量測定方法對效能目的十各種含量測定方法對效能目的的要求的要求 1. 1. 容量分析法：用原料藥精制品容量分析法：用原料藥精制品( (含量含量99.599.5) )或對照品調查方法的或對照品調查方法的精細度，相對規范差普通應不大于精細度，相對規范差普通應不大于0.20.2；進展回收率實驗。回收率普通在；進展回收率實驗。回收率普通在99.799.7100.3100.3之間。之間。 2. UV 2. UV法：用適當濃度的精制品進展法：用適當濃度的精制品進展測定，其測定，其RSDRSD普通不大于普通不大于1 1。制劑的。制劑的測定，回收率普

38、通應在測定，回收率普通應在9898102102之間。之間。 線性：吸光度線性：吸光度A普通在普通在0.20.7，濃度點濃度點n5。用濃度。用濃度c對對A作線性回歸作線性回歸處置，得不斷線方程，處置，得不斷線方程，r應大于應大于0.999(n5)，方程的截距應近于零。，方程的截距應近于零。 3. HPLC法：要求法：要求RSD2，回收，回收率率98102之間。之間。 線性范圍：用精制品配制一系列線性范圍：用精制品配制一系列規范溶液，濃度點規范溶液，濃度點n應為應為57，用濃，用濃度度c對峰高對峰高h或被測物的呼應值之比進或被測物的呼應值之比進展回歸處置，建立回歸方程，展回歸處置，建立回歸方程，r應大應大于于0.999，截距應趨于零。，截距應趨于零。 專屬性：要調查輔