1、精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -三、環(huán)境微生物學(xué)和大氣污染掌握工程部分試驗(yàn)一水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定一、目的要求l 學(xué)習(xí)水樣的實(shí)行方法和水樣細(xì)菌總數(shù)測(cè)定的方法；2明白水源水的平板菌落計(jì)數(shù)的原就；二、基本原理本試驗(yàn)應(yīng)用平板菌落計(jì)數(shù)技術(shù)測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù)；由于水中細(xì)菌種類(lèi)繁多， 它們對(duì)養(yǎng)分和其他生長(zhǎng)條件的要求差別很大，不行能找到一種培育基在一種條件下，使水中全部的細(xì)菌均能生長(zhǎng)繁衍，因此， 以肯定的培育基平板上生長(zhǎng)出來(lái)的菌落，運(yùn)算出來(lái)的水中細(xì)菌總數(shù)僅是一種近似值；目前一般是采納一般肉膏蛋白胨瓊脂培育基；三、器材l 培育基：肉膏蛋白胨瓊脂培育基，無(wú)菌水；2. 儀器或其

2、他用具：滅菌三角燒瓶，滅菌的帶玻璃塞瓶，滅菌培育皿，滅菌吸管，滅菌試管等；3.玻璃器皿的洗滌和滅菌3.1 玻璃器皿的洗滌新購(gòu)置的玻璃器皿，因含游離堿，應(yīng)先在此2%鹽酸中浸泡數(shù)小時(shí)，用自來(lái)水沖洗潔凈，再用蒸餾水沖洗1-2 次并瀝干；培育細(xì)菌的玻璃器皿， 應(yīng)先經(jīng)高壓蒸汽滅菌， 趁熱倒出培育基， 用熱肥皂水或洗滌劑洗刷殘漬，再用清水沖洗潔凈，最終用蒸餾水沖洗1-2 次，瀝干；洗滌劑吸管量，可先置3%來(lái)蘇液內(nèi)浸 30min 或高壓政策蒸汽滅菌，再用洗滌劑洗滌，用清水及蒸餾水沖洗潔凈；洗滌染色瓶時(shí)，可在5%漂白粉中浸泡 24h 后，再用常規(guī)方法洗滌潔凈；含油脂的玻璃器皿，應(yīng)單獨(dú)高壓滅菌洗滌，趁熱倒出污物

3、，置100干燥箱內(nèi)烘 0.5h ，再放入 5%碳酸氫鈉水中煮沸，先去脂再行常規(guī)洗滌；3.2 玻璃器皿的滅菌（1）高壓蒸汽滅菌精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 1 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -這是應(yīng)用爭(zhēng)論最廣泛的滅菌方法，滅菌是用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行；手提式高壓蒸汽滅菌器，使用便利，其操作方法主留意事項(xiàng)如下：打開(kāi)鍋蓋或從加入口處向鍋內(nèi)加入適量的水；加水后，將待滅菌器皿放入鍋內(nèi)，不要塞得過(guò)緊，以使鍋內(nèi)溫度勻稱(chēng)，再將鍋蓋蓋好，擰緊螺旋，使其密封；打開(kāi)放氣閥， 打開(kāi)熱源加熱至水沸騰， 讓鍋內(nèi)冷空氣充分逸出； 否就鍋內(nèi)溫度達(dá)不到壓力表所指示的對(duì)應(yīng)溫度

4、，滅菌不完全；當(dāng)冷空氣由排氣孔排盡后， 再關(guān)緊放氣活塞；等鍋內(nèi)蒸汽壓上升至所需壓力時(shí)，掌握熱源，維護(hù)所需時(shí)間， 一般為 0.10343MPa121 表壓，保持 20min；滅菌完畢，關(guān)閉熱源，必需待壓力自然降至“0”時(shí)，方可啟蓋取出滅菌物品，否就易發(fā)生危急；（2）干熱滅菌試驗(yàn)室中常用的仍有熱空氣滅菌的方法，即將洗潔凈的待滅菌器皿勻稱(chēng)放入恒溫干燥箱內(nèi)，便不得與內(nèi)層底板直接接觸；關(guān)閉箱門(mén)，開(kāi)戶電源開(kāi)關(guān)，用恒溫 調(diào)劑器，使溫度上升至160-170，維護(hù) 2h，即可達(dá)到滅菌目的；滅菌完畢后，需關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)，待溫度降至50以下時(shí)，方可開(kāi)門(mén)取物，否就玻璃器皿可因 驟冷而爆裂；4. 培育基的制備配制一般培育

5、基的主要程序可分為：調(diào)配、溶化、調(diào)劑Ph、澄清過(guò)濾、分裝、滅菌、鑒定等步驟；調(diào)配：按培育基配方精確稱(chēng)取各成分，用少量水溶解；對(duì)于肉膏之類(lèi)粘、膠狀物，可盛在小燒杯或表面皿中稱(chēng)量，然后加水移入培育基中；此外，也可放在稱(chēng)量紙上稱(chēng)量后直接放入水中，這時(shí)如略微加熱， 肉膏便會(huì)與稱(chēng)量紙分別， 然后立刻取出紙片； 蛋白胨等極易吸潮物質(zhì)， 在稱(chēng)取時(shí)動(dòng)作要快速； 此外，維生素、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽等微量成分， 可預(yù)先配制高深度的貯備液，在配制培育基過(guò)程中再按配方比例取肯定量加入培育液中即可；融解：將各成分混勻于水中，最好以流通蒸汽融解0.5h ，如在電爐上融解應(yīng)隨時(shí)攪拌，如有瓊脂成分時(shí)，應(yīng)留意防止外溢；融解后，應(yīng)留意

6、補(bǔ)充失去的 水分，補(bǔ)足至原體積；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 2 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -制備大量培育基時(shí)，除玻璃器皿外，仍可用搪瓷桶、鋁鍋等容器加熱融解，但不行用鍋或鐵鍋，以免金屬離子進(jìn)入培育基中影響細(xì)菌生長(zhǎng)；調(diào)劑 pH 值：一般細(xì)菌用的培育pH 調(diào)整在 6.8-7.2之間，但也有需要酸性或堿性的培育基； 培育基高壓滅菌后， pH值約降低 0.1-0.2，故調(diào)劑時(shí)應(yīng)比實(shí)際需要的 pH值高 0.1-0.2；但有時(shí)也可降低0.4 ，因所使用的滅菌器不同而不同；調(diào)劑 pH 值，用鹽酸和氫氧化鈉， 由于在相同 pH值下， 有機(jī)酸比無(wú)機(jī)更

7、易抑制微生物生長(zhǎng)，因此，除非特殊情形，最好不要用乙酸等有機(jī)酸來(lái)調(diào)劑pH值；一般用精密 pH試紙調(diào)劑（精確到0.1pH 單位），必要時(shí)也可酸度計(jì)；調(diào)劑時(shí)需留意 逐步滴加，勿使過(guò)酸或過(guò)堿而破壞培育基中某些組分；過(guò)濾澄清：培育基配成后，一般都有沉渣或混濁，需過(guò)濾，使其清楚透亮 方可使用； 液態(tài)培育基常用濾紙過(guò)濾； 固態(tài)培育基如瓊脂培育基，加熱后需趁熱用脫脂棉或多層紗布過(guò)濾；分裝：將調(diào)劑 pH 值后的培育基按需要趁熱分裝于三角瓶或試管內(nèi)，以免瓊脂冷凝；分裝量不宜超過(guò)容器的2/3 ，以免滅菌時(shí)外溢；分裝時(shí)應(yīng)留意勿使培育基粘附于管口與瓶口部位，以免沾染棉塞而滋生雜菌；基礎(chǔ)培育基一般常分裝于三角瓶?jī)?nèi)，分裝的

8、量應(yīng)依據(jù)使用目的和要求打算，但必需定量分裝，以便滅菌后使用；瓊脂斜面分裝量為試管容量的1/5 ，滅菌后須趁熱放置成斜面，斜面長(zhǎng)度約為試管長(zhǎng)度的 2/3 ；半固體培育基分裝量約占試管長(zhǎng)度的1/3 ，滅菌后趁熱直立，待冷卻凝固；高層瓊脂分裝量約為試管長(zhǎng)度的1/3 ，滅菌后直立凝固待用；瓊脂平板是將滅菌后的培育基，冷卻至50左右，在無(wú)菌條件下傾入滅菌 平皿內(nèi)；內(nèi)徑 9cm的平皿傾注培育基約15ml 左右， 使培育基平鋪于皿底部， 凝固后即成；傾注培育基時(shí)， 切勿將皿蓋全部啟開(kāi)， 以免空氣中塵埃及細(xì)菌落入；新制成的培育平板， 表面水分較多， 不利于細(xì)菌的分別， 通常應(yīng)將平皿倒扣置于 37培育箱內(nèi)約 3

9、0min，待平板干燥后使用；滅菌：加熱配制培育基后，在2h 內(nèi)進(jìn)行了滅菌處理；不要把未滅菌的培育基冷藏或存放；絕大多數(shù)培育基都應(yīng)放在高壓滅菌器內(nèi)于121滅菌，并應(yīng)在達(dá)到這一溫度后連續(xù)15min；糖類(lèi)液態(tài)培育基或含有其他特殊成分的培育基，精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 3 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -高壓蒸汽滅菌會(huì)使其分解，一用濾膜過(guò)濾滅菌；或者將不耐熱物質(zhì)用其他方法滅菌（如流通蒸汽滅菌）后，再加入已滅菌的培育基中；儲(chǔ)存：配制好的培育基，不宜儲(chǔ)存過(guò)久，以少量勤配制為宜；每批應(yīng)注明 制作日期；已滅菌的培育基可在4-10 存放 1 個(gè)月；存放

10、時(shí)應(yīng)防止陽(yáng)光直射，并且要防止雜菌浸入和液體蒸發(fā)；當(dāng)發(fā)酵管中的液體培育基存放在冰箱或者適中的低溫時(shí)， 可能有空氣溶解進(jìn)去，以致在 37培育時(shí)， 會(huì)在管內(nèi)形成空氣泡； 因此， 凡存放在低溫的發(fā)酵管， 使用前應(yīng)先予以培育過(guò)夜，棄去有氣泡的管子；液態(tài)培育基在室溫下存放超過(guò)一周，可能有水分蒸發(fā)，假如管內(nèi)液體缺失10%，應(yīng)棄去不用；5. 各種培育基的成分與制備為削減配制中的誤差，盡量選用市售已配好的綜合培育基；（1）養(yǎng)分瓊脂培育基蛋白胨10牛肉浸膏3氯化鈉5瓊脂15-20 蒸餾水1000ml將上述成分混勻后，調(diào)劑pH為 7.4-7.6，過(guò)濾去除沉淀，分裝于玻璃容器中，經(jīng) 121高壓蒸汽滅菌15min，貯存

11、于暗處備用；（2）乳糖蛋白胨培育液蛋白胨10牛肉浸膏3氯化鈉5乳糖51.6 溴甲酚紫乙醇溶液1ml蒸餾水1000ml將蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氧化鈉加熱溶解于1000 ml 蒸餾水中，調(diào)劑pH為 7.2-7.4，再加入 1.6 溴甲酚紫乙醇溶液1ml，充分混勻， 分裝于含有倒置的小玻璃管的試管中，于高壓蒸汽滅菌器中，在115高壓蒸汽滅菌20min， 貯于暗處備用；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 4 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -此培育基適用于檢驗(yàn)大腸菌群時(shí)作發(fā)酵試驗(yàn)用；依據(jù)實(shí)際需要， 也可按上述配方比例（除蒸餾水外）配成二倍、三倍或五倍濃

12、縮的乳糖蛋白胨培育液，制法同上；（3）品紅亞硫酸鈉培育基（多管發(fā)酵用）蛋白胨10乳糖10瓊脂20-30 磷酸氫二鉀3.5 無(wú)水亞硫酸鈉5ml蒸餾水1000ml 5堿性品紅乙醇溶液20 ml貯備培育基：先將瓊脂加至900 ml 蒸餾水中，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，渴勻使其溶解，再以蒸餾水補(bǔ)足至1000 ml ，調(diào)劑 pH為 7.2-7.4；趁熱用脫脂棉或多層紗布過(guò)濾，再加入乳糖， 混勻后定量分裝于燒瓶?jī)?nèi)，置高壓蒸汽器中，在115高壓蒸汽滅菌20min；貯于暗處備用；平板培育基： 將上述貯備培育基加熱融解；以無(wú)菌操作， 依據(jù)瓶?jī)?nèi)培育基的容量，用滅菌吸管按1：50 的比例吸取肯定量的5堿

13、性品紅乙醇溶液置于滅菌空試管中； 再按 1：200 的比例稱(chēng)取所需的無(wú)水亞硫酸鈉置于另一滅菌空試管內(nèi)，加滅菌水少許使其溶解，再置于沸水浴中煮沸10min 滅菌；用滅菌吸管吸取已滅菌的亞硫酸鈉溶液，滴加于堿性品紅乙醇溶液內(nèi)至深紅色褪成淡紅色為止（不宜多加）；將此混合液全部加入已融解的貯備培育基內(nèi)，并充分混勻（防止產(chǎn)憤怒泡）；立刻將此種培育基適量（約15 ml ）傾入已滅菌的空平皿內(nèi)，待其冷卻凝固后，倒置冰箱內(nèi)備用；此種已制成的培育基于冰箱內(nèi)儲(chǔ)存不 宜超過(guò)兩周，如培育基已由淡紅色變成深紅色，就不能再用；（4）伊紅美藍(lán)培育基（ ERB培育基）蛋白胨10乳糖10瓊脂20磷酸氫二鉀2.0 蒸餾水1000

14、ml2伊紅（曙紅）水溶液20ml0.5 美藍(lán)（亞甲基藍(lán)）水溶液13 ml貯備培育基：先將瓊脂加至900 ml 蒸餾水中，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，渴勻使其溶解，再以蒸餾水補(bǔ)足至1000 ml ，調(diào)劑 pH為精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 5 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -7.2-7.4；趁熱用脫脂棉或多層紗布過(guò)濾，再加入乳糖， 混勻后定量分裝于燒瓶?jī)?nèi)，置高壓蒸汽器中，在115高壓蒸汽滅菌20min；貯于暗處備用；平板培育基： 將上述貯備培育基加熱融解； 以無(wú)菌操作， 依據(jù)瓶?jī)?nèi)培育基的容量，用滅菌吸管按比例吸取肯定量的 2伊紅水

15、溶液及 0.5 美藍(lán)水溶液加入已融解的培育基內(nèi)，并充分混勻（防止產(chǎn)憤怒泡）；當(dāng)混合好的培育基冷卻至 45，便立刻將此種培育基適量（約15 ml ）傾入已滅菌的空平皿內(nèi)，待其冷卻凝固后，倒置冰箱內(nèi)備用；四、操作步驟l 水樣的實(shí)行(1) 自來(lái)水：先將自來(lái)水龍頭用火焰燒灼3min 滅菌，再開(kāi)放水龍頭使水流5min 后，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析；(2) 池水、河水或湖水： 應(yīng)取距水面 l0 15cm的深層水樣， 先將滅菌的帶玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛滿 后，將瓶塞蓋好，再?gòu)乃腥〕?，最好立刻檢查，否就需放入冰箱中儲(chǔ)存2細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(1) 自來(lái)水用滅菌

16、吸管吸取lml水樣，注入滅菌培育皿中；共做兩個(gè)平皿；分別傾注約 15mL己溶化并冷卻到45左右的肉膏蛋白胨瓊脂培育基，并立刻在桌上作平面旋搖，使水樣與培育基充分混勻；另取一空的滅菌培育皿，傾注肉膏蛋白胨瓊脂培育基15mL作空自對(duì)比；培育基凝固后，倒置于37溫箱中，培育 24h，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)；兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)即為lml水樣的細(xì)菌總數(shù)；(2) 池水、河水或湖水等稀釋水樣： 取 3 個(gè)滅菌空試管， 分別加入 9ml 滅菌水；取 lml水樣注入第一管 9ml 滅菌水內(nèi)、搖勻， 再自第一管取 1ml 至下一管滅菌水內(nèi)， 如此稀釋到第三管，稀釋度分別為10-1 、10-2 與 10-3 ；稀釋倍數(shù)看水

17、樣污濁程度而定，以培育后平板的菌落數(shù)在30300 個(gè)之間的稀釋度最為合適， 如三個(gè)稀釋度的菌數(shù)均多到無(wú)法計(jì)數(shù)或少到無(wú)法計(jì)數(shù)，就需連續(xù)稀釋或減小稀釋倍數(shù)；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 6 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -一般中等污穢水樣，取10-1 、10-2 、10-3 三個(gè)連續(xù)稀釋度，污穢嚴(yán)峻的取10-2 、10-3 、10-4 三個(gè)連續(xù)稀釋度；自最終三個(gè)稀釋度的試管中各取lmL 稀釋水加入空的滅菌培育皿中， 每一稀釋度做兩個(gè)培育皿；各傾注 15ml 已溶化并冷卻至45左右的肉膏蛋白胨瓊脂培育基，立刻放在桌上搖勻；凝固后倒置于 37培育

18、箱中培育24h； 3菌落計(jì)數(shù)方法(1) 先運(yùn)算相同稀釋度的平均菌落數(shù)；如其中一個(gè)平板有較大片狀菌苔生長(zhǎng)時(shí)，就不應(yīng)采納， 而應(yīng)以無(wú)片狀菌苔生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的平均菌落數(shù)； 如片狀菌苔的大小不到平板的一半， 而其余的一半菌落分布又很勻稱(chēng)時(shí)， 就可將此一半的菌落數(shù)乘 2 以代表全平板的菌落數(shù)，然后再運(yùn)算該稀釋度的平均菌落數(shù)；(2) 第一挑選平均菌落數(shù)在30300 之間的，當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范疇時(shí)，就以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)即為該水樣的細(xì)菌總數(shù)；(3) 如有兩個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)均在 30300 之間，就按兩者菌落總數(shù)之比值來(lái)打算；如其比值小于 2，應(yīng)實(shí)行兩者的平均數(shù)；如大于 2

19、，就取其中較小的菌落總數(shù)；(4) 如全部稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，就應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)；(5) 如全部稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，就應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù) 乘以稀釋倍數(shù)；(6) 如全部稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300 之間，就以最近 300 或 30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)；五、試驗(yàn)報(bào)告1結(jié)果（1）自來(lái)水（2）池水、河水或湖水等2摸索題（1）從自來(lái)水的細(xì)菌總數(shù)結(jié)果來(lái)看，是否合乎飲用水的標(biāo)準(zhǔn)？精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 7 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -（2）你所測(cè)的水源水的污穢程度如何？（3）國(guó)家對(duì)自

20、來(lái)水的細(xì)菌總數(shù)有一標(biāo)準(zhǔn)，那么各地能否自行設(shè)計(jì)其測(cè)定條件（諸如培育溫度，培育時(shí)間等）來(lái)測(cè)定水樣總數(shù)呢？為什么？試驗(yàn)二、試驗(yàn)室環(huán)境和人體表面微生物的檢查一、目的要求1. 證明試驗(yàn)室環(huán)境與體表存在微生物；2比較來(lái)自不同場(chǎng)所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類(lèi)型；3觀看不同類(lèi)群微生物的菌落外形特點(diǎn)； 4體會(huì)無(wú)菌操作的重要性；二、基本原理平板培育基含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的養(yǎng)分成分，當(dāng)取自不同來(lái)源的樣品接種于培育基上，在相宜溫度下培育12d 內(nèi)每一菌體即能通過(guò)很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁衍，形成一個(gè)可見(jiàn)的細(xì)胞群體集落，稱(chēng)為菌落； 每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點(diǎn)，例如菌落的大小，表面干燥或潮濕、隆起或扁平、粗糙或光滑，

21、 邊緣整齊或不整齊，菌落透亮或半透亮或不透亮，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等； 因此，可通過(guò)平板培育來(lái)檢查環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類(lèi)型；三、器材l 培育基：肉膏蛋白胨瓊脂平板；2儀器或其他用具：無(wú)菌水，滅菌棉簽 裝在試管內(nèi) ，接種環(huán)，試管架，酒精燈或煤氣燈，記號(hào)筆，廢物缸；四、操作步驟每組在“試驗(yàn)室”和“人體”兩大部分中各挑選一個(gè)內(nèi)容做試驗(yàn)，或由老師指定安排，最終結(jié)果供全班爭(zhēng)論；l 寫(xiě)標(biāo)簽任何一個(gè)試驗(yàn)，在動(dòng)手操作前均需第一將器皿用記號(hào)筆做上記號(hào)， 寫(xiě)上班級(jí)、姓名、日期，本次試驗(yàn)仍要寫(xiě)上樣品來(lái)源 照試驗(yàn)室空氣或無(wú)菌室空氣或頭發(fā)等 ， 字盡量小些，寫(xiě)在皿底的一邊，不要寫(xiě)在當(dāng)中，以免影響觀看結(jié)果；精選名師 優(yōu)秀

22、名師 - - - - - - - - - -第 8 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -培育皿的記號(hào)一般寫(xiě)在皿底上；假如寫(xiě)在皿蓋上， 同時(shí)觀看兩個(gè)以上培育皿的結(jié)果，打開(kāi)皿蓋時(shí)，簡(jiǎn)單混淆；2試驗(yàn)室細(xì)菌檢查(1) 空氣：將一個(gè)肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當(dāng)時(shí)做試驗(yàn)的試驗(yàn)室，移去皿蓋，使瓊脂培育基表面暴露在空氣中； 將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無(wú)菌室或無(wú)人走動(dòng)的其他試驗(yàn)室，移去皿蓋；lh 后蓋上兩個(gè)皿蓋；(2) 試驗(yàn)臺(tái)和門(mén)的旋鈕用記號(hào)筆在皿底外面中心畫(huà)始終線，再在此線中間處畫(huà)一垂直線；取棉簽： 左手拿裝有棉簽的試管， 在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無(wú)名指夾持棉塞 或試管帽 ，將其取出

23、， 將管口很快地通過(guò)煤氣燈 或酒精燈 的火焰，燒灼管口；輕輕地傾斜試管，用右手的拇指和食指將棉簽當(dāng)心地取出；塞回棉塞 或試管帽 ，并將空試管放在試管梁上；弄濕棉簽：左手取滅菌水試管，如上法撥出棉塞 或試管帽 并燒灼管口，將棉簽插入水中， 再提出水面， 在管壁上擠壓一下以除去過(guò)多的水分， 當(dāng)心將棉簽取出，燒灼管口，塞回棉塞 或試管帽 ，并將滅菌水試管放在試管梁上；取樣：將濕棉簽在試驗(yàn)臺(tái)面或門(mén)旋鈕上擦拭約2cm2的范疇；接種： 在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿開(kāi)啟成一縫， 再將棉簽伸人，在瓊脂表面頂端接種，即滾動(dòng)一下，立刻閉合皿蓋；并按圖 27-2E 和 F，將原放棉簽的空試管撥出棉塞 或試管

24、帽 ，燒灼管口， 插入用過(guò)的棉簽， 將試管放回試管架；劃線：另取接種環(huán)在火焰上滅菌，按圖3 3 方法進(jìn)行劃線，整個(gè)劃線操作均要求無(wú)菌操作，即靠近火焰，而且動(dòng)作要快；3人體細(xì)菌的檢查（ 1）手指 洗手前與洗手后 分別在兩個(gè)瓊脂平板上標(biāo)明洗手前與洗手后 班級(jí)、姓名日期 ；移去皿蓋， 將未洗過(guò)的手指在瓊脂平板的表面，輕輕地來(lái)回劃線，蓋上皿蓋；用肥皂和刷子，用力刷手，在流水中沖洗潔凈，干燥后，在另一瓊脂平板表面來(lái)回移動(dòng)，蓋上皿蓋；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 9 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -(2) 頭發(fā)：在掀開(kāi)皿蓋的瓊脂平板的上方，用手將頭發(fā)

25、用力搖動(dòng)數(shù)次，使細(xì)菌降落到玻脂平板表面，然后蓋上皿蓋；A. 接種時(shí)，用左手將平皿開(kāi)啟一縫；B. 棉簽伸入平板接種；C.用己滅菌并冷卻了的接種環(huán)劃線；D.其次部分劃線；E. 最終部分劃線(3) 咳嗽：將去皿蓋的瓊脂平板放在離口約68cm處，對(duì)著瓊脂表面用力咳嗽，然后蓋上皿蓋；(4) 鼻腔依據(jù)試驗(yàn)臺(tái)檢查法的步驟和，取出棉簽，并將其弄濕；用濕棉簽在鼻腔內(nèi)滾動(dòng)數(shù)次；按試驗(yàn)臺(tái)檢查法的步驟和，接種與劃線，然后蓋上皿蓋；4將全部的瓊脂平板翻轉(zhuǎn)，使皿底朝上，放37培育箱，培育1 2d；五、結(jié)果記錄方法(1) 菌落計(jì)數(shù)在劃線的平板上，假如菌落很多而重疊，就數(shù)平板最終1/4 面積內(nèi)的菌落數(shù)；不是劃線的平板，也一分

26、為四，數(shù)l/4面積的菌落數(shù)；(2) 依據(jù)菌落大小、外形、高度、干濕等特點(diǎn)觀看不同的菌落類(lèi)型；但要留意，假如細(xì)菌數(shù)量太多， 會(huì)使很多菌落生長(zhǎng)在一起，或者限制了菌落生長(zhǎng)而變得很小，因而外觀不典型，故觀看菌落的特點(diǎn)時(shí)，要挑選分別得很開(kāi)的單個(gè)菌落；菌落特點(diǎn)描寫(xiě)方法如下：大?。捍?、中、小、針尖狀；可先將整個(gè)平板上的菌落粗略觀看一下，再打算大、中、小的標(biāo)準(zhǔn)，或由老師指出一個(gè)大小范疇；顏色：黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等；干濕情形：干燥、潮濕、粘稠；外形：圓形、不規(guī)章等；高度：扁平、隆起、凹下；透亮程度：透亮、半透亮、不透亮；邊緣：整齊、不整齊；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - -

27、 - -第 10 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -六、菌落總數(shù)運(yùn)算方法空氣中細(xì)菌總數(shù)（ cfu/m 3）= N50000AT式中：N 平皿菌落數(shù)；A 平皿面積（cm2 ；T 平皿暴露時(shí)間 分鐘 七、試驗(yàn)報(bào)告1結(jié)果（1）將你自已的平板結(jié)果記錄于下表中；（2）與其他同學(xué)所做的結(jié)果進(jìn)行比較2摸索題(1) 比較各種來(lái)源的樣品，哪一種樣品的平板菌落數(shù)與菌落類(lèi)型最多？(2) 人多的試驗(yàn)室與無(wú)菌室 或無(wú)人走動(dòng)的試驗(yàn)室 相比，平板上的菌落數(shù)與菌落類(lèi)型有什么區(qū)分？你能說(shuō)明一下造成這種區(qū)分的緣由嗎？(3) 洗手前后的

28、手指平板，菌落數(shù)有無(wú)區(qū)分？(4) 通過(guò)本次試驗(yàn)，在防止培育物的污染與防止細(xì)菌的擴(kuò)散方面，你學(xué)到些什么？有什么體會(huì)；試驗(yàn)三大氣環(huán)境中 TSP 的測(cè)定一、目的要求大氣環(huán)境中TSP 是一種常規(guī)的污染物，它們對(duì)人體健康、植被生態(tài)和能見(jiàn) 度等都有著特別重要的直接和間接影響；因此，對(duì)TSP 污染物的濃度監(jiān)測(cè)是環(huán)境監(jiān)測(cè)中一項(xiàng)重要的工作；本試驗(yàn)在校內(nèi)中及鄰近的工業(yè)區(qū)、大路傍進(jìn)行采樣分析； 通過(guò)本試驗(yàn)， 應(yīng)達(dá)到以下目的：（）把握重量量測(cè)定大氣環(huán)境中TSP 濃度的方法；（）明白 TSP 污染物對(duì)人體健康的危害；（）學(xué)習(xí)環(huán)境監(jiān)測(cè)中質(zhì)量掌握和保證的概念；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 1

29、1 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -二、基本原理通過(guò)具有肯定切割特性的采樣器，以恒速抽取肯定體積的空氣， 空氣中粒徑小于 100 m的懸浮顆粒物被截留在已恒重的濾膜上；依據(jù)采樣前、后濾膜質(zhì)量之差及采樣體積， 運(yùn)算總懸浮顆粒物的濃度； 濾膜經(jīng)處理后， 可再進(jìn)行組分分析；3本方法適用于大流量或中流量總懸浮顆粒物采樣器（簡(jiǎn)稱(chēng)采樣器） 進(jìn)行空氣中總懸浮顆粒物的測(cè)定； 方法的檢測(cè)限為0.001mg/m ；總懸浮顆粒物含量過(guò)高或霧天采樣使濾膜阻力大于10kPa 時(shí)，本方法不適用；三、試驗(yàn)儀器和材料（1）大流量

30、或中流量采樣器：1 臺(tái)，應(yīng)按 1.1-89 總懸浮顆粒物采樣器技術(shù)要求（暫行） 的規(guī)定；（2）大流量孔口流量計(jì)： 1 個(gè)，量程 0.7-1.4m 3/min ，流量辨論率 0.01 m3/min ，精度優(yōu)于± 2；（3）中流量孔口流量計(jì)： 1 個(gè)，量程 70-160L/min ，流量辨論率 1 L /min，精度優(yōu)于± 2；（4） U型管壓差計(jì)： 1 個(gè)，最小刻度 0.1hPa；（5） X 光看片機(jī)： 1 臺(tái)，用于檢查濾膜有無(wú)缺損；（6）打號(hào)機(jī)： 1 臺(tái)，用于在濾膜及濾袋上打號(hào)；（7）鑷子： 1 個(gè)，用于夾取濾膜；（8）超細(xì)玻璃纖維濾膜： 10 片，對(duì) 0.3 m標(biāo)準(zhǔn)粒子的

31、截留效率不低于99，在氣流速度為0.45m/s時(shí)，單張濾膜阻力不大于3.5kPa ，在同樣氣流速度下， 抽取經(jīng)高效過(guò)濾器凈化的空氣5h，1 cm2 濾膜失重不大于0.012 mg ；（9）濾膜袋： 10 個(gè)，用于存放采樣后對(duì)折的采塵濾膜，袋面印有編號(hào)、采樣日期、采樣地點(diǎn)、采樣人等項(xiàng)欄目；（10）濾膜儲(chǔ)存盒： 1 個(gè)，用于儲(chǔ)存、運(yùn)輸濾膜，保證濾膜在采樣前處于平展不受折狀態(tài)；（11）恒溫恒濕箱： 1 臺(tái)，箱內(nèi)空氣溫度要求在15-30 范疇內(nèi)可調(diào)，控溫精度± 1；箱內(nèi)空氣相對(duì)濕度掌握在（50±5），恒溫恒濕箱可連續(xù)工作；（12）總懸浮顆粒物大盤(pán)天平： 1 臺(tái)，用于大流量采樣器濾膜

32、稱(chēng)量，稱(chēng)量范圍 10g，感量 1 mg，標(biāo)準(zhǔn)差 2 mg；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 12 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -（13）分析天平： 1 臺(tái)，用于中流量采樣濾膜稱(chēng)量，稱(chēng)量范疇10g，感量0.1 mg ，標(biāo)準(zhǔn)差 0.2 mg ；四、試驗(yàn)方法和步驟1. 采樣器的流量校準(zhǔn)新購(gòu)置或修理后的采樣器在啟用前，須進(jìn)行流量校準(zhǔn)； 其校準(zhǔn)方法按儀器使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；2. 總懸浮顆粒物含量測(cè)試（1）濾膜預(yù)備：每張濾膜均需用X 光看片機(jī)進(jìn)行檢查，不得有針孔或任 何缺陷；在選中的

33、濾膜光滑表面的兩個(gè)對(duì)角上打印編號(hào)；濾膜袋上打印同樣編號(hào) 備用；將濾膜放在恒溫恒濕箱中平穩(wěn)24h，平穩(wěn)溫度取 15-30 中任一點(diǎn)，記錄下平穩(wěn)溫度與濕度； 在上述平穩(wěn)長(zhǎng)期保持下稱(chēng)量濾膜，大流量采樣器濾膜稱(chēng) 量精確到 1 mg，中流量采樣器濾膜稱(chēng)量精確到0.1 mg ；記錄下濾膜質(zhì)量m0g ；稱(chēng)量好的濾膜平展地放在濾膜儲(chǔ)存盒中，采樣前不得將濾膜彎曲或折疊；（2）安放濾膜及采樣：打開(kāi)采樣頭頂蓋，取出濾膜夾；用清潔干布擦去 采樣頭內(nèi)及濾膜夾上的灰塵； 將已編號(hào)并稱(chēng)量過(guò)的濾膜絨面對(duì)上，放在濾膜支持網(wǎng)上，放上濾膜夾，對(duì)正，擰緊，使不漏氣；安裝好采樣頭頂蓋，依據(jù)采樣器 使用使用說(shuō)明，設(shè)置采樣時(shí)間，即可啟動(dòng)采

34、樣；樣品采完后，打開(kāi)采樣頭，用 鑷子輕輕取下濾膜，采樣面對(duì)上，將濾膜對(duì)折，放入號(hào)碼相同的濾膜袋中；取濾 膜時(shí)，如發(fā)覺(jué)濾膜損壞，或?yàn)V膜上塵的邊緣輪廓不清楚、濾膜安裝歪斜（說(shuō)明漏 氣），就本次采樣作廢，需重新采樣（記錄表格見(jiàn)附錄C）；（3）塵膜的平穩(wěn)及稱(chēng)量：塵膜在恒溫恒濕箱中，與二次濾膜平穩(wěn)條件相同 的溫度、濕度下，平穩(wěn)24h；在上述平穩(wěn)條件下稱(chēng)量濾膜，大流量采樣器濾膜稱(chēng) 量精確到1 mg，中流量采樣器濾膜稱(chēng)量精確到0.1 mg ；記錄下濾膜質(zhì)量m1g（記錄表格見(jiàn)附錄D）；濾膜增重，大流量濾膜不小于100 mg，中流量濾膜不小于 10 mg ；（4）運(yùn)算：總懸浮顆粒物含量（ug / m3）Km1m

35、0 QNt式中： t 累積采樣時(shí)間， min；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 13 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -QN采樣器平均抽氣流量，即式（1-3 ）或式（ 1-4 ）QHN或 QMN的運(yùn)算值； K常數(shù)，大流量采樣器K=1x 106 ,中流量采樣器 K=1x 109；（5）測(cè)試方法的再現(xiàn)性：當(dāng)兩臺(tái)總懸浮顆粒物采樣器安放位置相距不大于4m，不少于 2m時(shí)，同時(shí)采樣測(cè)定總懸浮顆粒物含量，相對(duì)偏差不大于15； 五、數(shù)據(jù)記錄與處理按下表進(jìn)行；六、問(wèn)題分析與爭(zhēng)論1.大氣環(huán)

36、境中的TSP 的主要污染來(lái)源有哪些？2.大氣環(huán)境中的TSP 有哪些危害？精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 14 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -3.如何預(yù)防 TSP 的污染？試驗(yàn)四空氣中甲醛污染的測(cè)定監(jiān)測(cè)一、目的要求室內(nèi)空氣污染對(duì)人體健康的影響最為顯著，與大氣環(huán)境相比有其特殊性； 室內(nèi)空氣污染監(jiān)測(cè)是評(píng)判居住環(huán)境的一項(xiàng)重要工作；本試驗(yàn)挑選剛裝修完和裝修已久的不同房間，或者在一個(gè)剛裝修完房間的不同通風(fēng)條件下，進(jìn)行采樣分析；通過(guò)本試驗(yàn)達(dá)到以下目的：（1）把握酚試劑分光光度法測(cè)

37、定空氣中甲醛濃度的方法；（2）初步明白影響室內(nèi)空氣質(zhì)量的因素；二、基本原理甲醛與酚試劑反應(yīng)生成嗪， 在高鐵分子存在下， 嗪與酚試劑的氧化產(chǎn)物反應(yīng)生成藍(lán)綠色化合物，在波長(zhǎng)630nm 處，用分光光度法測(cè)定；采樣體積為 5mL 時(shí)，村法檢出限為0.02g/m3，當(dāng)采樣體積為10L 時(shí)，最低檢出濃度為 0.01mg/m3；三、試驗(yàn)儀器和試劑1儀器（1）大型氣泡吸取管： 10 只， 10mL；（2）空氣采樣器： 1 臺(tái)，流量范疇 0-2L/min ；（3）具塞比色管： 10 只， 10mL；（4）分光光度計(jì)： 1 臺(tái)；2試劑（1）吸取液：稱(chēng)取0.10g 酚試劑（ 3-甲基 -苯并噻唑胺， C6H4 SN

38、CH3C：NNH 2 .HCl，簡(jiǎn)稱(chēng) MBTH ），溶于水中，稀釋至100mL，即為吸取原液，貯存于棕色瓶中，在冰箱內(nèi)可以穩(wěn)固3 天；采樣時(shí)取 5.0mL 原液加入 95mL ，即為吸取液；（2）硫酸鐵銨溶液（ 10g/L）：稱(chēng)取 1.0g 硫酸鐵銨，用0.10mol/L 鹽酸溶液精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 15 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -溶解，并稀釋至100mL；（3）硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.10mol/L）：稱(chēng)取 26g 硫代硫酸鈉（Na2S2O3.5H

39、2O）和 0.2 無(wú)水碳酸鈉溶于1000mL 水中，加入 10mL 異戊醇，充分混合，貯存于棕 色瓶中；（4）甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：量取10mL濃度為36 -38的甲醛，用水稀釋至 500mL，用碘量法標(biāo)定甲醛溶液濃度；使用時(shí)，先用水稀釋至每毫升含10.0 g甲醛的溶液，然后立刻吸取10.00 mL 此稀釋液于 100 容量瓶中，加 5.0吸取原液，用水稀釋至標(biāo)線；此溶液每毫升含1.0 g 甲醛；放置 30min 后，用此溶液配制標(biāo)準(zhǔn)色列，此標(biāo)準(zhǔn)溶液可穩(wěn)固24h；標(biāo)定方法：吸取 5.00mL甲醛溶液于 250mL碘量瓶中，加入 40.00mL0.10mol/L 碘溶液，立刻逐滴加入濃度為30%的氫氧化

40、鈉溶液，至顏色褪至淡黃色為止；放 置 10min，用 5.0mL 鹽酸溶液（ 1:5 ）酸化（空白滴定時(shí)需多加2mL）；置暗處放 10min，加入 100-150mL水，用 0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡黃色，加1.0mL 新配制的 5%淀粉指標(biāo)劑，連續(xù)滴定至藍(lán)色剛剛褪去；加取 5mL水，同上述方法進(jìn)行空白滴定；按下式運(yùn)算甲醛溶液濃度：2 2 3V0VcNa S Of5.0015.0式中：f 被標(biāo)定的溶液的濃度，g/L ； V0、V分別為滴定空白溶液、甲醛溶液所消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積， mL；2 2 3cNa S O 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度， ；15.0 與 1L 1mol/

41、L的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液等當(dāng)量的甲醛質(zhì)量，g；四、采樣與測(cè)定1. 采樣用內(nèi)裝 5.00mL 吸取液的氣泡吸取管，以0.5l/min流量，采氣 10L2. 測(cè)定（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取 8 支 10mL比色管，按表 2-1 配制標(biāo)準(zhǔn)系列；然后向各管中加入 1%硫酸鐵銨溶液 0.40mL，搖勻；在室溫下（ 8-35 ）顯色 20min；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 16 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -在波長(zhǎng) 630nm處，用 1cm比色皿，以水作為參比溶液，測(cè)定吸光度；

42、以吸光度對(duì)甲醛含量（ g），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；（2）樣品的測(cè)定：采樣后，將樣品溶液移入比色皿中，用少量吸取液洗滌吸取管、洗滌液并入比色兒，使總體積為5.0mL；室溫下（ 8-35 ）放置 80min后，以下操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制；表 2-1甲醛標(biāo)準(zhǔn)系列管號(hào)01234567甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液 /mL00.100.200.400.600.801.001.50吸取液 /mL5.004.904.804.604.404.204.003.50甲醛含量 / g00.100.200.400.600.801.001.50五、試驗(yàn)結(jié)果運(yùn)算mfVN3式中：f 空氣中甲醛的含量，mg/m；m樣品中甲醛含量，g； VN標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下采樣

43、體積，L；六、試驗(yàn)留意事項(xiàng)（1）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)與樣品測(cè)定時(shí)溫差不超過(guò)2；（2）標(biāo)定甲醛時(shí)， 在搖動(dòng)下逐滴加入 30氫氧化鈉溶液， 至顏色明顯減退， 再搖片刻，待褪成淡黃色，放置后應(yīng)褪至無(wú)色；如堿加入量過(guò)多，就 5mL鹽酸溶液（ 1：5）不足以使溶液酸化；（3）當(dāng)與二氧化硫共存時(shí)，會(huì)使結(jié)果偏低；可以在采樣時(shí)，使氣樣先通過(guò)裝有硫酸錳濾紙的過(guò)濾器，排除干擾；試驗(yàn)五大氣環(huán)境中氮氧化物的測(cè)定鹽酸萘乙二胺分光光度法精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 17 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - -

44、 -一、目的要求空氣中氮氧化物的種類(lèi)很多，如亞硝酸、硝酸、N2O、NO、NO2、N2O4、 N2 O5 等；其中 NO2 和 NO 是大氣中的主要污染物質(zhì)；通常所指的氮氧化物即為中 NO2 和 NO；測(cè)定環(huán)境中的氮氧化物常用的化學(xué)分析法為鹽酸萘乙二胺分光光度法，其采樣與顯色同時(shí)進(jìn)行，操作簡(jiǎn)便、方法靈敏，目前被國(guó)內(nèi)外普遍采納；鹽酸萘乙二胺分光光度法有兩種采樣方法：方法一吸取液用量少， 適用于短時(shí)間采樣，測(cè)定空氣中氮氧化物的短時(shí)濃度；方法二吸取液用量大，適用于24小時(shí)連續(xù)采樣，測(cè)定空氣中氮氧化物的日平均濃度；二、試驗(yàn)原理二氧化氮被吸取液吸取后， 生成亞硝酸和硝酸； 其中亞硝酸與對(duì)氨基苯磺酸起重氮化

45、反應(yīng)，再與鹽酸萘乙二胺偶合，呈玫瑰紅色，依據(jù)顏色深淺，于波長(zhǎng)540 處用分光光度法測(cè)定；反應(yīng)方程式如下：空氣中的氮氧化物包括NO 及 NO2 等；在測(cè)定氮氧化物時(shí)，應(yīng)先用三氧化鉻將 NO 氧化成 NO2，然后測(cè)定 NO2 的濃度；短時(shí)間采樣（方法一）檢出限為0.01 g/mL（按與吸光度0.01 相對(duì)應(yīng)的亞硝酸根含量計(jì)），當(dāng)采樣體積為6L 時(shí)，氮氧化物（以二氧化氮計(jì)）的最低檢出 濃度為 0.01 mg/m3；24 采樣（方法二）檢出限為0.01 mg/L（按與吸光度 0.01 相對(duì)應(yīng)的亞硝酸根含量計(jì)） ，當(dāng)用 50 mL 吸取液， 24 h 采氣樣 288 L 時(shí)，氮氧化物（發(fā)二氧化氮計(jì)）的最

46、低檢出濃度為0.002mg/m3； 三、試驗(yàn)儀器和試劑精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 18 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -1儀器（1）多孔玻板吸取管： 10 只，用于短時(shí)間采樣， 10 mL；（2）多孔板吸取瓶： 10 個(gè)，用于 24 h 采樣， 75mL；（3）雙球玻璃管： 10 只；（4）恒溫自動(dòng)連續(xù)空氣采樣器：1 臺(tái)，流量范疇 0-1 L/min；（5）分光光度計(jì)： 1 臺(tái)；（6）具塞比色管： 10 只；用于短時(shí)間采樣， 10 mL；（7）具塞比色管： 10

47、只；用于 24 h 采樣， 25 mL；（8）容量瓶： 10 只；用于 24 h 采樣， 50 mL；（9）移液管：如干，各種；2試劑所用試劑均用不含亞硝酸根的重蒸餾水配制， 即所配吸取液的吸光度不超過(guò) 0.005；（1）吸取原液：稱(chēng)取5.0g 對(duì)氨基苯磺酸，通過(guò)玻璃小漏斗直接加入1000mL容量瓶中，加入50 mL 冰乙酸和 900 mL 水的混合溶液，蓋塞振搖使其溶解，待對(duì)氨基苯磺酸完全溶解后，加入0.050 g 鹽酸萘乙二胺溶解后，用水稀釋至標(biāo)線；此為吸取原液，貯于棕色瓶中，在冰箱中可儲(chǔ)存兩個(gè)月；儲(chǔ)存時(shí)岢用聚四氟 乙烯生料帶密封瓶口，以防止仰不愧天民吸取液接觸；（2）采樣用吸取液：按4

48、份吸取原液和 1 份水的比例混合；（3）三氧化兒海砂（河砂）氧化管：篩取20-40 目海砂（河砂），用鹽酸溶液（ 1：2）浸泡一夜，再用水沖洗至中性，烘干；把三氧化鉻及海砂（河砂） 按質(zhì)量比 1：20 混合，加少量水調(diào)勻，放在紅外燈下或烘箱里于105烘干，烘干過(guò)程中應(yīng)攪拌幾次； 制備好的三氧化鉻海砂是松散的，如黏在一起， 說(shuō)明三氧化鉻比例太大，可適當(dāng)增加一些砂子，重新制備；稱(chēng)取約三氧化鉻海砂裝入雙球玻璃管中，兩端用少量脫指棉塞好， 并用乳膠管或塑料管制的小帽將密封；使用時(shí)氧化管與吸取管之間用一小段乳膠管連接，采集的氣體盡可能少和乳膠管接觸，以防止氮氧化物被吸附；（4）亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱(chēng)取0

49、.1500 g 粒狀亞硝酸鈉（ NaNO2，預(yù)先在干燥器內(nèi)放置 24 h 以上），溶解于水， 移入 1000 mL 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線；精選名師 優(yōu)秀名師 - - - - - - - - - -第 19 頁(yè)，共 44 頁(yè) - - - - - - - - - -精品word 名師歸納總結(jié) - - - - - - - - - - - -此溶液每毫升 100.0 g 含亞硝酸根（ NO2-），貯存于棕色瓶并儲(chǔ)存冰箱中，可穩(wěn)固 3 個(gè)月；2（5）亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液： 臨用前， 吸取 5.00 mL貯備液于 100 mL容量瓶中， 用水稀釋至標(biāo)線；此溶液每毫升含5.0 g 亞硝酸根（ NO- ）；四

50、、采樣與測(cè)定1采樣短時(shí)間采樣：將一支內(nèi)裝 5.00 mL 吸取液的多孔玻板吸取管進(jìn)氣口與氧化管 連接，并使氧化管略微向下傾斜，以免當(dāng)濕空氣將氧化劑（Cr2O3）弄濕時(shí)，污染后面的吸取液； 以 0.2-0.3 L/min 流量， 避光采樣至吸取液呈微紅色為止，登記采樣時(shí)間，密封好采樣管，帶回試驗(yàn)室，當(dāng)日測(cè)定；采樣時(shí)，如吸取液不變色， 采樣量應(yīng)不少于6L；長(zhǎng)時(shí)間采樣：將一個(gè)內(nèi)裝50 mL 吸取液的多孔玻板吸取瓶進(jìn)氣口與氧化 管連接，并使氧化管略微向下傾斜，以免當(dāng)濕空氣將氧化劑（Cr2O3）弄濕時(shí)，污染后面的吸取液；用恒溫、自動(dòng)連續(xù)空氣采樣器以0.2 L/min 流量采樣 24h，采氣體積約為 288 L；采樣后，將樣品帶回試驗(yàn)室，如當(dāng)天不測(cè)定，樣品溶液保存在冰箱中，于3 天內(nèi)測(cè)定；2測(cè)定（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別取7 支 10 mL 或 25 mL 具塞比色管，按表1-1 和表 1-2 分別配制短時(shí)間和24 h 采樣的標(biāo)系列；表 1-1亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)系列（短時(shí)間采樣）管號(hào)0123456亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液/mL00.100.200.300.400.500.60吸取原液 /mL4.004.004.004.004.004.004.00水/mL1.000.900.800.700.