1、細胞生物學實驗細胞生物學實驗廣東藥學院廣東藥學院生命科學與生物制藥學院生命科學與生物制藥學院實驗三實驗三 細胞膜的通透性細胞膜的通透性1. 掌握細胞膜通透性的實驗方法。掌握細胞膜通透性的實驗方法。2. 觀察并掌握相對分子量、脂溶性大小、電解觀察并掌握相對分子量、脂溶性大小、電解質和非電解質對細胞膜通透性的影響。質和非電解質對細胞膜通透性的影響。一、實驗目的與要求一、實驗目的與要求l細胞膜在不斷變化的環細胞膜在不斷變化的環境中必須保持自身的穩境中必須保持自身的穩定狀態才能生存。細胞定狀態才能生存。細胞膜允許一些物質通透，膜允許一些物質通透，又能降低甚至阻止另一又能降低甚至阻止另一些物質的通透，所

2、以細些物質的通透，所以細胞膜具有選擇通透性。胞膜具有選擇通透性。二、實驗原理二、實驗原理l血紅蛋白從紅細胞中血紅蛋白從紅細胞中逸出的現象稱為溶血逸出的現象稱為溶血現象。現象。二、實驗原理未溶血未溶血溶血溶血l滲入紅細胞的溶質能提高紅細胞滲透壓，使水滲入紅細胞的溶質能提高紅細胞滲透壓，使水進入紅細胞，引起溶血及細胞膜破裂。此時光進入紅細胞，引起溶血及細胞膜破裂。此時光線較容易通過溶液，使溶液呈現透明即溶血。線較容易通過溶液，使溶液呈現透明即溶血。二、實驗原理l在不同相對分子量、脂溶性大小以及電解質和在不同相對分子量、脂溶性大小以及電解質和非電解質等各種溶液中，非電解質等各種溶液中， 紅細胞質膜對

3、各種紅細胞質膜對各種溶質的滲透性不同。由于溶質透入速度不同，溶質的滲透性不同。由于溶質透入速度不同，溶血時間也不同。因此，通過觀察紅細胞溶血溶血時間也不同。因此，通過觀察紅細胞溶血現象時間的不同來記錄滲入速度，從而測量各現象時間的不同來記錄滲入速度，從而測量各種物質通透性的差別。種物質通透性的差別。三、實驗材料、儀器和主要試劑三、實驗材料、儀器和主要試劑1. 材料：材料：含適量肝素的兔血。含適量肝素的兔血。2. 實驗儀器實驗儀器 小燒杯，試管，試管架，刻度吸管，注射器，秒表等。小燒杯，試管，試管架，刻度吸管，注射器，秒表等。3. 試劑試劑 乙二醇、丙三醇、葡萄糖；甲醇、乙醇、丙醇等。乙二醇、丙

4、三醇、葡萄糖；甲醇、乙醇、丙醇等。四、實驗方法與步驟四、實驗方法與步驟1 .相對分子質量大小對膜通透性的影響相對分子質量大小對膜通透性的影響 在編號的三支試管中，分別加入在編號的三支試管中，分別加入2ml的的1mol/L 等等摩爾濃度的乙二醇、丙三醇、葡萄糖高滲液，分別滴摩爾濃度的乙二醇、丙三醇、葡萄糖高滲液，分別滴加兩滴血液，用手腕輕輕擺動，晃動試管觀察溶血時加兩滴血液，用手腕輕輕擺動，晃動試管觀察溶血時間，最長延長至間，最長延長至15分鐘，記錄溶血時間、實驗結果。分鐘，記錄溶血時間、實驗結果。四、實驗方法與步驟2 . 脂溶性大小對細胞膜通透性的影響脂溶性大小對細胞膜通透性的影響 在在3 支

5、試管中，各加入支試管中，各加入3mol/L甲醇、乙醇、丙醇甲醇、乙醇、丙醇溶液溶液2ml 后，分別滴加血液后，分別滴加血液2 滴，輕輕搖動試管并觀滴，輕輕搖動試管并觀察溶血現象，記錄各管的溶血時間。察溶血現象，記錄各管的溶血時間。四、實驗方法與步驟3 . 電解質和非電解質對細胞通透性的影響電解質和非電解質對細胞通透性的影響 在在16 支試管中，各加入不同濃度的葡萄糖及氯化支試管中，各加入不同濃度的葡萄糖及氯化鈉溶液鈉溶液2ml 后，分別滴加血液后，分別滴加血液2 滴，輕輕搖動試管，滴，輕輕搖動試管，室溫放置室溫放置15min，觀察發生溶血的濃度，確定等滲濃，觀察發生溶血的濃度，確定等滲濃度，并計算等滲摩爾系數。度，并計算等滲摩爾系數。 五、注意事項五、注意事項1. 溶血現象可用一張有字的白紙來輔助識別，能夠清楚溶血現象可用一張有字的白紙來輔助識別，能夠清楚地透過溶液看到溶液后方紙上清晰的字跡時，為完全地透過溶液看到溶液后方紙上清晰的字跡時，為完全溶血。溶血。2. 因相對分子質量大小對膜通透性有影響，所以將溶血因相對分子質量大小對膜通透性有影響，所以將溶血時間適當地延長至時間適當地延長至15mi