1、編寫：審核：批準：日期：日期：日期：生效日期：1. 目的：規范Waters1525型高效液相色譜儀的操作，確保檢測設備安全穩定的運行。2. 范圍：適用于Waters1525型高效液相色譜儀的操作使用。3. 職責：檢驗員負責本規程的執行。4. 操作步驟4.1開機前檢查 流動相對應泵單元放置，檢查電源線接口連接完好4.2色譜柱的安裝安裝待測樣品所需的色譜柱，注意色譜柱方向。打開柱溫箱電源開關，設置柱溫箱溫度。4.3開機泵單元打開泵電源，待自檢通過后排氣泡。（注：上泵是B泵，一般放置水系流動相；下泵是A泵，一般放置有機系流動相。）擰開上泵排液（空）閥螺旋，用注射器抽去管道及泵頭內氣泡，然后立即擰緊排

2、液（空）閥螺旋。下泵排氣泡操作與上泵相同。 打開檢測器電源等待自檢通過，大約5min。打開色譜工作站打開計算機電源，點擊桌面圖標，進入Breeze2 色譜工作站，用戶名輸入breeze，點擊確定按鈕，操作的項目選擇“hd”，色譜系統選擇“1525/2489”，點擊確定。 4.4建立分析方法點擊（調用方法組編輯器向導）圖標，點擊對話框中的“新建”，在電腦下方任務欄中出現（儀器方法編輯器），點開，設置波長等條件，再點擊，設置A、B兩泵的流速，然后點擊保存圖標 ，在對話框中輸入此方法的名稱，比如“亞麻酸方法”，再點擊保存。在“新方法組”的對話框中點擊 圖標，選擇“亞麻酸方法”，點擊兩次下一步，再點擊

3、完成。 4.5平衡儀器點擊(平衡系統/監視基線圖標)，在對話框中，選擇方法如“亞麻酸方法”，點擊設置。等待儀器設置反應，再次點擊（平衡系統/監視基線）。等待基線平衡（一般約30-40min）。4.6進樣與數據采集：基線平衡后（30-40min），點擊（中斷正在運行的樣品組或單進樣）圖標，結束平衡。點擊（單進樣）圖標，編輯樣品名稱、進樣體積和運行時間，選擇方法組，點擊進樣即可開始進樣。4.7譜圖處理：點擊 圖標，點，再點，雙擊所要查看的譜圖。建立譜圖處理方法：在通道中選中標準品譜圖，雙擊點開，出現的對話框點擊“是”，再點擊（處理參數向導），選擇“新建處理方法”，點確定，用鼠標左鍵拖住選擇目標峰段

4、，然后點基“下一步”，直到出現 ，輸入目標峰名稱后點擊“下一步”，直到出現，輸入譜圖處理方法名稱，點擊完成，在出現的對話框中點擊保存。點擊 圖標，點，再點，選擇所需處理的標準品及樣品圖譜，單擊右鍵，單擊處理，選擇“使用指定的方法處理”，單擊下拉菜單，選擇所需方法后點擊確定，點擊，再點，選擇所需查看的圖譜雙擊左鍵，即可查看目標峰的數據。4.7結果計算（標準曲線）進入查詢數據，在通道中，選擇標準譜圖，右擊選擇改變樣品，在其工具欄中點擊 （量），在對話框中將樣品類型選擇標準樣，點擊 （從處理方法復制） ，選擇譜圖新建的處理方法名，在當前項下，輸入組分名稱，對應組分的濃度，單位（<mg/ml）

5、，確定，保存，關閉對話框。點擊標準品，右擊選擇處理，選擇使用指定的處理方法，選擇譜圖新建的處理方法名稱，標準品（選擇清除校正）；樣品（無需校正），確定。在結果中，更新查看。系統計算出樣品濃度C樣（mg/ml） 組分質量分數X（%）=C樣（mg/ml）*稀釋倍數/ M樣 4.8報告打印在結果中，選擇樣品，右鍵選擇預覽，在報告方法對話框中，選擇Peak Summary Report。4.9色譜柱清洗、關機：樣品分析結束后，關閉檢測器電源及柱溫箱。按規定20倍柱體積沖洗色譜柱，（如反相色譜：含鹽或酸、堿的流動相先用10%甲醇水沖洗再用甲醇沖洗）清洗結束后，點擊圖標，在流量A和流量B欄中分別輸入0，變化率欄中輸入0.5-1.0min，點擊應用，確定，等壓力為0時即可關掉泵的電源。進樣針用甲醇清洗后放回，然后做好儀器使用記錄。5. 注意事項：5.1 雙泵在運行中需要更換流動相之前，必須把雙泵的流速設置為0，即把泵關掉，具體操作為點擊圖標，在流量A和流量B欄中分別輸入0，最好在變化率欄中輸入0.5-1min，保護泵單元。點擊應用，再確定，等壓力為0時再更換流動相。5.2 每次更換流動相后，必須排（液）氣泡。5.3 每隔一段時間（約一周），在使用儀器時，上下泵排完氣泡后，將泵單元的參比閥切換至排空（向右轉90°），單擊圖標，設置A、B兩泵流量，使其排空約10