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文檔簡介
1、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統稱為脂類。它是構成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醴、氯仿等脂溶劑中。在化學組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關的物質。脂類的主要功能是氧化供能。脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內。在病理檢驗中,脂類染色法最常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及月中瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹田,蘇丹IV,蘇丹黑及油紅。等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現染料的顏色。經研究認為組織中脂質在液態或半液態時,對蘇丹染料著色效果最好。根據這一原理,適當提高溫度(37C-60C)對組織切片染色效果是有
2、好處的。脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油明膠和阿拉伯糖膠等。一、蘇丹田(Sudan田)染色法:操作方法:(1)固定于10刈醛的組織。(2)水洗后采用冰凍或石蠟切片。(3)經蒸儲水后,浸染于Harris蘇木素或明磯蘇木素中淡染1-2分鐘。(4)自來水沖洗。(5)水洗后,移入70%酉精5秒鐘。(6)投入蘇丹田染液中約30分鐘或更長時間,置于56c溫箱中。(7)在70%H精中洗滌5-10秒鐘。(8)洗于蒸儲水中,然后將切片移于載玻片上。(9)切片移于玻片上,將切片周圍的水分小心擦掉。(10) 甘油明膠封固。結果:脂肪呈橙紅色或鮮紅色或黑色,膽脂素呈淡紅色,脂肪酸不著色,細胞核呈
3、藍色。試劑配制:1 .蘇丹田染液配法:將0.15克蘇丹田溶解于100m170%H精或純丙酮和70%酉精混合7中(各50ml),臨用時過濾,所得濾液即為飽和濃度。注:浸染時,容器必須蓋好,否則酒精或丙酮揮發,染料沉淀。2 .甘油明膠配制:明膠40g蒸儲水210ml甘油250ml石碳酸結晶5ml先將明膠浸入蒸儲水中2小時或更長時間,然后加甘油和石碳酸,加熱15分鐘,搖攪直至混合液均勻為止。二、蘇丹IV(SudanIV)染色法:蘇丹IV又名猩紅,是蘇丹田的衍生物,作為脂肪染劑,經各地實驗證明,其結果優于蘇丹田。其染色步驟與蘇丹田染法完全相同,從略。試劑配制:將1-2克猩紅染劑加純酒精70ml,10%
4、C氧化鈉20ml,蒸儲水10ml,制成混合液,以微火加熱,置37c溫箱中1小時,取出冷卻后過濾,12小時后即可使用。注:此液5天內失效,如此看來,浪費較大,建議配制70%酉精飽和液,或純丙酮和70%酉精飽和液,它們使用方便,且不易失效。結果:脂肪呈猩紅色,比蘇丹田更為清晰。三、油紅染色法:油紅作為脂肪染色劑,具染色步驟簡便,染色結果肯定,并且優于蘇丹IV。試劑配制:油紅O0.5g異丙醇(含量98%100ml此為油紅飽和液,可長期保存備用。染色步驟:(1)凍切片(2)蒸儲水充分洗滌。(3)油紅稀釋液染10-15分鐘,避光、密封。油紅稀釋液的配制:(4)取油紅飽和液6毫升,加蒸儲水4毫升,靜置5-10分鐘后過濾后使用。(5)60%乙醇鏡下分化至間質清晰。(6)水洗。(7)Marry氏蘇木素復染核。(8)水洗。甘油或甘油明膠封片。結果:脂肪呈鮮紅色,細胞核呈藍色,間質無色。
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