1、抑肽酶對兔鈍性心肌損傷的實驗研究         【摘要】  目的：探討大劑量抑肽酶對兔胸部撞擊傷后心肌挫傷治療作用。方法：采用兔左側胸部撞擊傷生物模型,動態觀察抑肽酶對最大縮短速度(),等容收縮期左室內壓最大上升速度(+/),等容舒張期左室內壓最大下降速度(-/)及左室舒張末期壓()和血漿心肌肌鈣蛋白(cTnI)的動態變化，觀察心肌病理及超微結構的改變。測定心肌組織中CK MB、6 k PGF1含量及心肌含水量(MWC)。 結果：胸部撞擊傷后血流動力學發生明顯改變，左心室舒張期末壓(LVEDP)和左心室

2、內壓最大下降速率(-dp/dtmax)，在傷后24h仍較傷前明顯增高(P0.01);血漿cTnI釋放較傷前增加明顯(0.05)，而治療組與創傷組相比較，左心功能明顯改善(0.05)，血漿cTnI釋放減少(0.05)，心肌腫脹減輕，間質出血、肌絲斷裂和溶解明顯減輕。結論:胸部撞擊傷后造成心肌病理損害及心功能不全，大劑量抑肽酶有顯著的心肌保護作用。 【關鍵詞】  抑肽酶; 肌損傷; 心肌肌鈣蛋白胸部外傷，除可造成急性肺損傷外, 多合并有心肌挫傷，心肌損傷也是嚴重的并發癥之一，導致心功能不全，是早期死亡的重要原因1。及時判斷心肌損傷及其嚴重程度，保護心功能，對指導臨床搶救具有重要意義。本實

3、驗利用家兔胸部沖擊傷模型，對沖擊傷后早期血漿心肌肌鈣蛋白(cTnI)濃度變化規律及其與心功能變化的關系進行了探討，研究大劑量抑肽酶治療心功能不全的作用。1  資料與方法1.1  動物及分組：健康大白兔26只(第三軍醫大學大坪醫院動物實驗中心提供),雌雄不限,體重(2.40±0.20)kg，隨機分為2組:創傷模型組(n=10):致傷后立即給予吸氧、低分子右旋糖酐20l/kg靜注補液抗休克治療。抑肽酶治療組(n=10):致傷后即刻耳靜脈注射抑肽酶30000KIU/kg(蘭州大得力制藥公司提供,甘衛藥準字1996第11119號)，以后10000KIU/(kg/h)維持至

4、實驗結束 ，其它治療同創傷組。1.2  撞擊傷模型： 經兔耳緣靜脈注射30g/L戊巴比妥鈉(30mg/kg)麻醉，此后10mg/kg·h持續靜脈滴注麻醉。將動物固定,剪去胸部兔毛，右側頸總動脈和頸內靜脈置管。用惠普心電四導生理記錄儀連接, 左室心肌收縮成分的最大縮短速度()，等容收縮期左室內壓最大上升速度(+/),等容舒張期左室內壓最大下降速度(-/)及左室舒張末期壓()。撞擊前留取血清標本。將兔架直立，用BMI 型水平式生物撞擊機準靜態撞擊兔左側胸部,撞擊點位于兔右側第3、4肋間與腋中線交界處,采用準靜態撞擊,驅動壓力為250kPa，撞擊面積為4cm2，胸壁壓縮3cm，撞

5、擊時相為吸氣末1。1.3  觀察指標及方法1.4  統計學處理：實驗數據用SPSS11.0統計軟件處理。實驗數據用均數±標準差(±)表示,采用 t檢驗和直線相關分析。0.05為差異有顯著統計學意義。2  結果  21  胸部撞擊傷后血流動力學改變： 左心室收縮/舒張功能降低，特別是LVEDP和-dp/dtmax在傷后12h仍然較傷前明顯增高(t=3.302,2.737;P0.01,0.05)，表明胸部撞擊傷后左心室功能受到損害,特別是舒張功能損害更為明顯, 抑肽酶可明顯改善急心肌挫傷時左室舒張及收縮功能,顯著升高左室

6、7;dp/dt max和降低LVEDP（表1）。表1  心功能指標的比較（略）注:與對照組相比 *0.05;  *0.012.2  血漿cTnI濃度變化：家兔胸部爆炸沖擊傷后1h血漿cTnI顯著升高(0.05)，以后持續至12后達峰值(0 05),治療組6h-12 較傷前升高，但明顯低于創傷組(0.05) 見表2。表2  血清心肌肌鈣蛋白()的變化（略）注:與對照組相比 *0.05;  *0.01         2.3  心肌組織CK MB、6 k PG

7、F1含量及MWC比較：實驗結束后，治療組CK MB、6 k PGF1含量均高于對照組,差異有統計學意義(P0.001)。治療組心肌含水量低于對照組,差異有統計學意義(P0.001)（表3）。表3  心肌組織CK MB、6 k PGF1含量及MWC比較（略）注:與對照組比較,P0.001表4  各組兔心肌挫傷范圍比較（略）2.4  心肌病理學變化：撞擊傷后1h即可見心內膜點狀出血,光鏡下見胞漿內灶狀溶解，炎性細胞浸潤;6后上述病變明顯增多，心肌灶狀壞死,間質內較多點片狀出血，肌纖維有溶解及波浪樣改變,局部可見核溶解。治療組心肌腫脹減輕，肌絲排列紊亂,肌絲溶解減少，間

8、質出血減少。治療組范圍均明顯低于對照組 (P0.01) （表4）。3  討論胸部撞擊傷，可導致心肌直接損害，此外，也可因缺血、缺氧、感染或全身炎癥反應綜合征，各種細胞因子的釋放而導致心肌損害1，造成心功能不全。肌鈣蛋白是一種由肌鈣蛋白原肌球蛋白有序構成的復合抑制蛋白，與心肌損傷程度呈平行關系,目前被視為判斷心肌損傷最特異和敏感的指標2。當心肌細胞因創傷、缺血、缺氧等因素發生變性壞死時, cTnI可通過破損的細胞膜彌散進入細胞間質,隨之進入血管和淋巴管內。血中cTnI濃度變化可特異性地反映心肌結構蛋白的破壞情況。本實驗采用家兔為實驗動物，為排除傷后血容量不足和肺損傷的影響,傷后補足血容

9、量和摒棄肺損傷嚴重的動物。實驗結果表明，沖擊傷后1h即有cTnI水平升高,表明有明顯心肌損害,傷后12內一直持續處于高水平, 心肌橫紋受損斷裂,cTnI釋放進入血清,心肌損害有加重趨勢通過傷后cTnI的濃度變化可以反映心肌損傷的情況。同時,左室內壓變化可直接反映心功能狀況，實驗研究結果表明,家兔胸部沖擊傷后cTnI水平動態變化與左室內壓的變化密切相關(0.05),在一定程度上可反映心臟功能的變化情況。病理觀察亦發現心肌變性、壞死的嚴重程度與血漿cTnI升高基本一致,說明cTnI濃度變化可較敏感地反映心肌損害的有無及其嚴重程度。治療組心肌細胞CK MB含量升高,提示細胞損傷及膜的通透性改變減輕;

10、心肌細胞中6 k PGF1含量反映了前列環素含量變化,而PGI2增加可改善心肌供氧及增加冠脈血流量,從而減輕心肌損傷，有利于左室功能恢復,減輕細胞水腫。   抑肽酶是一種非特異性的廣譜絲氨酸蛋白酶抑制劑。近年來發現抑肽酶具有抑制體外循環()手術引起的的作用3。體內許多炎性級聯反應是由絲氨酸蛋白酶介導的,抑肽酶可以與酶的活性中心特異性的結合,通過多種途徑如激肽 ，激肽釋放酶系統和補體系統,抑制炎性反應。此外，抑肽酶可以抑制中性粒細胞和血小板的激活，從而抑制炎性反映。應用大劑量抑肽酶使血清中含量明顯降低，心功能改善，心肌病理損害減輕，其機理可能在于抑肽酶抑制炎癥反應有

11、關4。【參考文獻】  1 閔家新,王正國.不同致傷條件撞擊對兔鈍性胸部創傷傷情影響的實驗研究J.第三軍醫大學學報,2000,22(06):509-511.2 Adams JE, Bessey PQ,Bessey PQ.Improved detection of cardiac contusion with cardiac troponin IJ. American Heart,1996,131: 308-312.3 Landis RC, Poullin M , Poullin M.The antithrombotic and antiinflammatory mechanisms of action of aprotinin, Annals of Thoracic SugeryJ.2001,72(06):2169-2175.4