第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)_第1頁(yè)
第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)_第2頁(yè)
第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)_第3頁(yè)
第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)_第4頁(yè)
第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)_第5頁(yè)
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1、福建省高等教育自學(xué)考試藥學(xué)專業(yè)(獨(dú)立本科段)分子生物學(xué)課程考試大綱第一部分 課程性質(zhì)與設(shè)置目的藥學(xué)分子生物學(xué)是分子生物學(xué)理論和技術(shù)在藥學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域中的滲透形成的新的交叉學(xué)科。它的發(fā)展將解決大量醫(yī)藥科學(xué)的前沿課題,為藥物臨床實(shí)踐、新藥研究和生產(chǎn)等開(kāi)拓出美好的前景。它是藥學(xué)理論的重要組成部分,是高等藥學(xué)教育的專業(yè)課程。本課程學(xué)分為6分。藥學(xué)分子生物學(xué)主要內(nèi)容包括:遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能,染色質(zhì)、染色體、基因和基因組的結(jié)構(gòu)與功能;可移動(dòng)的遺傳因子(轉(zhuǎn)座子)和染色體外遺傳因子的基本知識(shí);DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù),基因轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工、蛋白質(zhì)翻譯的機(jī)制;基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制;以及基因工程及其

2、在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用等。通過(guò)學(xué)習(xí)使考生掌握分子生物學(xué)的基本概念和基本理論,較系統(tǒng)地了解分子生物學(xué)知識(shí),并熟悉由分子生物學(xué)派生的基因工程及其在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用。自學(xué)教材:史濟(jì)平主編,全國(guó)高等學(xué)校教材藥學(xué)分子生物學(xué)(人民衛(wèi)生出版社2003年版第二部分 考核內(nèi)容與考核目標(biāo)第一章 遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述了遺傳物質(zhì)核酸包括DNA和各種RNA分子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能。重點(diǎn)是DNA和各種RNA的功能、核酸變性和復(fù)性及形成雜交體的性質(zhì),以及核酸研究的技術(shù)和核酸在基因治療中的應(yīng)用。學(xué)習(xí)本章要求掌握核酸的種類和分布、DNA的一、二級(jí)結(jié)構(gòu),熟悉RNA的結(jié)構(gòu)。掌握DNA、mRNA、tRN

3、A、rRNA、核酶的功能,熟悉端粒酶和端粒酶RNA的功能,了解原核生物和真核生物rRNA的不同。掌握DNA變性、復(fù)性和核酸分子雜交的概念,熟悉影響DNA變性的因素、增色效應(yīng)和融解溫度(Tm),了解Southern印跡、Northern印跡和原位雜交的原理和應(yīng)用。掌握基因芯片的概念,熟悉基因芯片的原理和應(yīng)用。掌握病毒的基本概念和病毒核酸的一般特征,熟悉DNA病毒和RNA病毒的核酸結(jié)構(gòu)。掌握反義DNA和反義RNA的概念、反義技術(shù)的原理,熟悉反義核酸的掌握反義DNA和反義RNA的概念、反義技術(shù)的原理,熟悉反義核酸的種類和應(yīng)用。二、課程內(nèi)容第一節(jié)核酸是遺傳物質(zhì)1、核酸的種類和分布2、核酸是遺傳物質(zhì)第二

4、節(jié)核酸的結(jié)構(gòu)1、DNA的結(jié)構(gòu)2、RNA的結(jié)構(gòu)第三節(jié)核酸的功能1、DNA的功能及基因治療2、RNA的功能第四節(jié)核酸的變性、復(fù)性和雜交1、核酸的變性2、核酸的復(fù)性3、核酸的雜交和應(yīng)用4、生物芯片和基因芯片第五節(jié) 病毒核酸1、病毒的基本概念2、病毒核酸的一般特征3、DNA病毒的核酸結(jié)構(gòu)4、RNA病毒的核酸結(jié)構(gòu)第六節(jié) 反義核酸1、反義核酸概述2、反義技術(shù)3、反義核酸應(yīng)用三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)核酸是遺傳物質(zhì)(二)核酸的結(jié)構(gòu)(三)核酸的功能(四)核酸的變性、復(fù)性和雜交(五)病毒核酸(六)反義核酸四、考核要求(一)核酸是遺傳物質(zhì)識(shí)記:核酸的種類和分布領(lǐng)會(huì):核酸是遺傳物質(zhì)(二)核酸的結(jié)構(gòu)識(shí)記:DNA的一、二級(jí)結(jié)

5、構(gòu),RNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)領(lǐng)會(huì):DNA的三、四級(jí)結(jié)構(gòu)和拓樸結(jié)構(gòu) (三)核酸的功能識(shí)記:DNA、mRNA、tRNA、rRNA、核酶的功能領(lǐng)會(huì):端粒酶和端粒酶RNA的功能,原核生物和真核生物rRNA的不同。(四)核酸的變性、復(fù)性和雜交識(shí)記:DNA變性、復(fù)性和核酸分子雜交領(lǐng)會(huì):影響DNA變性的因素、增色效應(yīng)和融解溫度應(yīng)用:Southern印跡、Northern印跡、原位雜交和基因芯片技術(shù)(五)病毒核酸識(shí)記:病毒的基本概念領(lǐng)會(huì):病毒核酸的一般特征(六)反義核酸識(shí)記:反義DNA、反義RNA和反義技術(shù)的原理領(lǐng)會(huì):反義核酸的種類應(yīng)用:反義核酸的應(yīng)用第二章 染色質(zhì)、染色體、基因和基因組一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述染色

6、質(zhì)及染色體的結(jié)構(gòu)、形態(tài)及功能,基因及基因組的定義、結(jié)構(gòu)特征及功能。重點(diǎn)是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位核小體的組成及作用、染色體在遺傳中的作用;基因的定義、功能;原核生物與真核生物基因的特征;基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。學(xué)習(xí)本章要求掌握核小體的組成;染色體中組蛋白的種類及功能。熟悉從DNA到染色單體的結(jié)構(gòu)變化過(guò)程,以及染色體在遺傳中的作用。了解中期染色體的結(jié)構(gòu);染色體結(jié)構(gòu)改變的類型;組蛋白磷酸化在核內(nèi)信息傳遞和基因調(diào)節(jié)中的作用。掌握基因的分子生物學(xué)定義;基因的功能;原核生物及真核生物基因的特征;熟悉線粒體DNA的遺傳方式。了解亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)基因單位;原核和真核細(xì)胞中基因和順?lè)醋拥年P(guān)系。掌握基因組的定義,以及原核生物與

7、真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。熟悉線粒體的基因組結(jié)構(gòu);了解葉綠體的基因組結(jié)構(gòu)。熟悉真核生物中染色體的數(shù)量,了解遺傳圖譜、物理圖譜、基因圖譜;以及人類基因組。二、課程內(nèi)容第一節(jié)染色質(zhì)和染色體1、染色質(zhì)和染色體的形態(tài)2、染色質(zhì)和染色體的化學(xué)成分及組成3、染色質(zhì)和染色體的功能第二節(jié)基因1、基因生物學(xué)定義2、基因的分子生物學(xué)定義3、基因的功能4、原核生物基因特征5、真核生物基因特征6、細(xì)胞器基因7、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)基因單位8、原核和真核細(xì)胞中基因和順?lè)醋拥年P(guān)系第三節(jié)基因組1、基因組定義2、基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)3、基因組的染色體倍數(shù)性和數(shù)目4、遺傳圖譜、物理圖譜、基因圖譜5、人類基因組三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)DNA是染色

8、體的重要成分,是遺傳信息的載體;染色體是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ),對(duì)遺傳信息的貯存和傳遞及蛋白質(zhì)的合成有重要作用。(二)基因的分子生物學(xué)定義;基因的功能;原核生物基因及真核生物基因的特征;(三)基因組定義;基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。四、考核要求(一)染色質(zhì)和染色體識(shí)記:染色質(zhì)的類型;核小體的組成;領(lǐng)會(huì):DNA是染色體的重要成分,是遺傳信息的載體;染色體是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)。應(yīng)用:染色體在遺傳中的作用。(二)基因識(shí)記:基因的分子生物學(xué)定義。領(lǐng)會(huì):原核生物基因及真核生物基因的特征。應(yīng)用:基因的功能。(三)基因組識(shí)記:基因組定義;基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。領(lǐng)會(huì):基因組的染色體倍數(shù)性和數(shù)目應(yīng)用:人類基因組計(jì)劃研究的意義。第三章 可

9、移動(dòng)的遺傳因子(轉(zhuǎn)座子)和染色體外遺傳因子一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述可移動(dòng)的遺傳因子和染色體外遺傳因子的類型、特征及效應(yīng)。學(xué)習(xí)本章要求掌握轉(zhuǎn)座子的概念、分類和結(jié)構(gòu)特征;熟悉轉(zhuǎn)座子機(jī)制及轉(zhuǎn)座效應(yīng);掌握原核生物和真核生物的轉(zhuǎn)座子;了解逆轉(zhuǎn)錄病毒和逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子。掌握質(zhì)粒的遺傳學(xué)類型及特性;了解特殊細(xì)菌的質(zhì)粒和真核生物中的質(zhì)粒。熟悉同源重組和位點(diǎn)特異性重組;了解遺傳重組在分子生物學(xué)中的應(yīng)用。二、課程內(nèi)容第一節(jié) 轉(zhuǎn)座子1. 轉(zhuǎn)座子的分類和結(jié)構(gòu)特征:轉(zhuǎn)座子的概念;轉(zhuǎn)座子的類型;轉(zhuǎn)座子的共有特點(diǎn)。2. 轉(zhuǎn)座子機(jī)制:轉(zhuǎn)座子復(fù)制子融合形成共合體;轉(zhuǎn)座子的復(fù)制過(guò)程;轉(zhuǎn)座作用模型。3. 轉(zhuǎn)座效應(yīng):轉(zhuǎn)座的遺傳效應(yīng);精

10、確轉(zhuǎn)座的結(jié)構(gòu)效應(yīng);異常轉(zhuǎn)座的效應(yīng);對(duì)宿主細(xì)胞活力的影響;轉(zhuǎn)座子作為研究工具。4. 原核生物和真核生物的轉(zhuǎn)座子:原核生物的轉(zhuǎn)座子,插入序列,轉(zhuǎn)座子A家族,轉(zhuǎn)座噬菌體;真核生物的轉(zhuǎn)座子,酵母菌的Ty成分,還原病毒與轉(zhuǎn)座子,非病毒返座子,玉米調(diào)控元件。5. 逆轉(zhuǎn)錄病毒和逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子:逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組與逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu);逆轉(zhuǎn)錄病毒與轉(zhuǎn)座;逆轉(zhuǎn)錄病毒與轉(zhuǎn)錄。第二節(jié) 質(zhì)粒1. 質(zhì)粒遺傳學(xué)類型:質(zhì)粒的概念,質(zhì)粒的類型。2. 質(zhì)粒DNA特性:質(zhì)粒的復(fù)制;質(zhì)粒的不相容性;質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性;質(zhì)粒中的選擇標(biāo)記。3. 特殊細(xì)菌質(zhì)粒:性質(zhì)粒F質(zhì)粒;耐藥性質(zhì)粒R質(zhì)粒;大腸桿菌質(zhì)粒Col質(zhì)粒。4. 真核生物中的質(zhì)粒:2

11、1;m質(zhì)粒。第三節(jié) 遺傳重組1. 遺傳重組的概念。2. 同源重組:同源重組的產(chǎn)生;同源重組的分子機(jī)制;同源重組的酶學(xué)。3. 位點(diǎn)特異性重組:噬菌體對(duì)E.coli的整合;免疫球蛋白(抗體)VDJ重排,VDJ重排特點(diǎn),重組信號(hào),重組酶,V(D)J重組機(jī)制。3. 遺傳重組在分子生物學(xué)中的應(yīng)用:轉(zhuǎn)基因;轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于疾病治療;基因打靶。三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)轉(zhuǎn)座子(二)質(zhì)粒(三)遺傳重組四、考核要求(一)轉(zhuǎn)座子識(shí)記:轉(zhuǎn)座子的概念;轉(zhuǎn)座子的類型;轉(zhuǎn)座子的共有特點(diǎn)。領(lǐng)會(huì):轉(zhuǎn)座子復(fù)制子融合形成共合體;轉(zhuǎn)座子的復(fù)制過(guò)程;轉(zhuǎn)座作用模型。轉(zhuǎn)座的遺傳效應(yīng);精確轉(zhuǎn)座的結(jié)構(gòu)效應(yīng);異常轉(zhuǎn)座的效應(yīng);對(duì)宿主細(xì)胞活力的影響;轉(zhuǎn)

12、座子作為研究工具。原核生物的轉(zhuǎn)座子,插入序列,轉(zhuǎn)座子A家族,轉(zhuǎn)座噬菌體;真核生物的轉(zhuǎn)座子,酵母菌的Ty成分,還原病毒與轉(zhuǎn)座子,非病毒返座子,玉米調(diào)控元件。逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組與逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu);逆轉(zhuǎn)錄病毒與轉(zhuǎn)座;逆轉(zhuǎn)錄病毒與轉(zhuǎn)錄。應(yīng)用:轉(zhuǎn)座子在分子生物學(xué)研究中主要有哪些方面的應(yīng)用?(二)質(zhì)粒識(shí)記:質(zhì)粒的概念,質(zhì)粒的類型。質(zhì)粒的復(fù)制;質(zhì)粒的不相容性;質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性;質(zhì)粒中的選擇標(biāo)記。領(lǐng)會(huì):性質(zhì)粒F質(zhì)粒;耐藥性質(zhì)粒R質(zhì)粒;大腸桿菌質(zhì)粒Col質(zhì)粒。真核生物酵母菌的2µm質(zhì)粒。應(yīng)用:質(zhì)粒是如何在細(xì)菌中進(jìn)行復(fù)制和分配的?(三)遺傳重組識(shí)記:遺傳重組、轉(zhuǎn)基因及基因打靶的概念。領(lǐng)會(huì):同源重組的產(chǎn)生;同源

13、重組的分子機(jī)制;同源重組的酶學(xué)。噬菌體對(duì)E.coli的整合;免疫球蛋白(抗體)VDJ重排,VDJ重排特點(diǎn),重組信號(hào),重組酶,V(D)J重組機(jī)制。應(yīng)用:遺傳重組在分子生物學(xué)中主要有哪些方面的應(yīng)用?第四章 DNA的復(fù)制、突變、損傷和修復(fù)一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述DNA復(fù)制的特征和機(jī)制,DNA突變及其修復(fù),重點(diǎn)是DNA復(fù)制的特征、復(fù)制的機(jī)制、基因突變的類型及DNA損傷修復(fù)的機(jī)制等。學(xué)習(xí)本章要求掌握DNA復(fù)制的一般特征、DNA復(fù)制的酶系、DNA的復(fù)制過(guò)程、大腸桿菌基因組復(fù)制的起始與終止、基因突變概念和類型、DNA修復(fù)系統(tǒng)的類型;熟悉真核細(xì)胞DNA復(fù)制的起始點(diǎn)、真核細(xì)胞端粒復(fù)制過(guò)程、基因突變?cè)颉ⅲ涣私?/p>

14、線粒體DNA復(fù)制、噬菌體和病毒DNA的復(fù)制。二、課程內(nèi)容第一節(jié) DNA的復(fù)制 1. DNA復(fù)制的一般特征:半保留復(fù)制、復(fù)制子、復(fù)制叉、雙向復(fù)制;DNA復(fù)制的酶系;DNA的復(fù)制過(guò)程2. 原核生物的DNA復(fù)制:大腸桿菌基因組復(fù)制的起始與終止3. 真核生物的DNA復(fù)制:真核細(xì)胞DNA復(fù)制的起始點(diǎn);真核細(xì)胞DNA復(fù)制的過(guò)程;真核細(xì)胞DNA復(fù)制的終止;真核細(xì)胞端粒復(fù)制過(guò)程4. 線粒體DNA復(fù)制:線粒體DNA結(jié)構(gòu);線粒體DNA復(fù)制過(guò)程;線粒體基因與疾病5. 噬菌體和病毒 DNA 的復(fù)制:?jiǎn)捂湱h(huán)狀DNA的復(fù)制;線狀DNA的復(fù)制;逆轉(zhuǎn)錄病毒第二節(jié) 基因突變 1. 突變概念和類型:突變概念;突變類型 2. 突變

15、原因:自發(fā)突變;誘發(fā)突變;基因的人工誘變;適應(yīng)性突變3. 突變體的分離與分析 第三節(jié) DNA的修復(fù)系統(tǒng)1. 復(fù)制修復(fù)2. 損傷修復(fù)3. 復(fù)制后修復(fù)4. 限制與修飾5. DNA損傷修復(fù)系統(tǒng)與疾病三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)DNA的復(fù)制(二)基因突變(三)DNA的修復(fù)系統(tǒng) 四、考核要求(一)DNA的復(fù)制識(shí)記:半保留復(fù)制、復(fù)制子、復(fù)制叉、雙向復(fù)制的概念;領(lǐng)會(huì):DNA復(fù)制的一般特征;大腸桿菌基因組復(fù)制的起始與終止應(yīng)用: DNA復(fù)制叉蛋白的種類及其功能; 真核細(xì)胞端粒的復(fù)制機(jī)制; 逆轉(zhuǎn)錄酶的生物學(xué)功能。(二)基因突變識(shí)記:突變概念和類型領(lǐng)會(huì):突變?cè)颍ㄗ园l(fā)突變;誘發(fā)突變;基因的人工誘變;適應(yīng)性突變)應(yīng)用:DNA

16、突變與疾病有何關(guān)系。(三)DNA的修復(fù)系統(tǒng) 識(shí)記:DNA的修復(fù)系統(tǒng)的類型。第五章 轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述原核與真核生物的轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后加工的機(jī)制,重點(diǎn)是轉(zhuǎn)錄的起始與終止的機(jī)制、真核生物轉(zhuǎn)錄后加工類型及機(jī)制。學(xué)習(xí)本章要求掌握轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同、RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)、原核生物啟動(dòng)子和終止子結(jié)構(gòu)、原核生物轉(zhuǎn)錄的起始和終止、mRNA的前體加工;熟悉真核生物RNA聚合酶II的啟動(dòng)子、RNA催化活性、RNA編輯;了解RNA 生物合成抑制劑、rRNA的前體加工、tRNA的前體加工。二、課程內(nèi)容第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄的基本原理1. 基本概念 2. 轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同 第二節(jié) DNA指導(dǎo)下的RNA聚合酶1.

17、原核生物 RNA 聚合酶2. 真核生物 RNA 聚合酶 第三節(jié) 與轉(zhuǎn)錄起始和終止有關(guān)的 DNA 結(jié)構(gòu)1. 原核生物啟動(dòng)子和終止子:?jiǎn)?dòng)子結(jié)構(gòu);終止子結(jié)構(gòu) 2. 真核生物啟動(dòng)子:RNA聚合酶I的啟動(dòng)子;RNA聚合酶II的啟動(dòng)子;RNA聚合酶III的啟動(dòng)子 3. 原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)差異 第四節(jié) 原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄及抑制劑 1. 原核生物轉(zhuǎn)錄的起始2. 原核生物轉(zhuǎn)錄的延長(zhǎng)3. 原核生物轉(zhuǎn)錄的終止和新合成RNA鏈的釋放:依賴于因子的終止;不依賴于因子的終止 4. 真核生物的轉(zhuǎn)錄 5. RNA 生物合成抑制劑 第五節(jié) 轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程及其機(jī)制 1. mRNA的前體加工:5端加帽;3末

18、端的產(chǎn)生和多聚腺昔酸化;mRNA 的甲基化2. rRNA的前體加工3. tRNA的前體加工4. RNA 的剪接和RNA催化活性:第I類內(nèi)含子和第II類內(nèi)含子的自我剪接特征;rRNA的自我剪接;RNA 的催化功能;tRNA 的剪接;mRNA 的自我剪接;順式和反式剪接 5. RNA 編輯三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)轉(zhuǎn)錄的基本原理(二)DNA 指導(dǎo)下的 RNA 聚合酶(三)與轉(zhuǎn)錄起始和終止有關(guān)的 DNA 結(jié)構(gòu)(四)原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄及抑制劑 (五)轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程及其機(jī)制 四、考核要求(一)轉(zhuǎn)錄的基本原理識(shí)記:轉(zhuǎn)錄、不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄的概念領(lǐng)會(huì):轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同點(diǎn)。(二)DNA 指導(dǎo)下的 RNA 聚合酶識(shí)記:R

19、NA聚合酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。(三)與轉(zhuǎn)錄起始和終止有關(guān)的 DNA 結(jié)構(gòu)識(shí)記:原核生物啟動(dòng)子和終止子的結(jié)構(gòu);真核生物RNA聚合酶II的啟動(dòng)子領(lǐng)會(huì):?jiǎn)?dòng)子和終止子的作用機(jī)制。應(yīng)用:原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)差異。(四)原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄及抑制劑 領(lǐng)會(huì):原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄的機(jī)制。應(yīng)用: 原核生物基因的轉(zhuǎn)錄是如何啟動(dòng)的,與真核生物基因有何差別; 試述原核生物終止子的結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)錄終止的機(jī)制。(五)轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程及其機(jī)制 識(shí)記:外顯子、內(nèi)含子、核酶的概念;加帽、加尾和剪接的具體過(guò)程領(lǐng)會(huì):轉(zhuǎn)錄后加工的機(jī)制。應(yīng)用:試述真核生物轉(zhuǎn)錄后加工的生物學(xué)意義。第六章 蛋白質(zhì)生物合成翻譯一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡

20、述蛋白質(zhì)合成的機(jī)制,重點(diǎn)是參與翻譯成分的組成及其生物學(xué)功能。學(xué)習(xí)本章要求掌握遺傳密碼的性質(zhì)、蛋白質(zhì)的生物合成所需的成分、蛋白質(zhì)生物合成的過(guò)程、蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工類型;熟悉蛋白質(zhì)生物合成的調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的理論;了解蛋白質(zhì)工程的概念及技術(shù)路線。二、課程內(nèi)容第一節(jié) 遺傳密碼 1. 遺傳密碼及密碼的破譯 2. 遺傳密碼的性質(zhì):遺傳密碼的簡(jiǎn)并性和擺動(dòng)性;遺傳密碼的通用性;遺傳密碼的偏愛(ài)性;線粒體密碼 3. 閱讀框架 第二節(jié) 蛋白質(zhì)的生物合成 1. 生物合成的模板mRNA:原核生物 mRNA 的特點(diǎn);真核生物 mRNA 的特點(diǎn)2. 蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所核糖體:核糖體RNA;核糖體蛋白質(zhì) 3.

21、蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)制:合成元件tRNA、rRNA和蛋白質(zhì)因子;合成過(guò)程起始、延伸、終止 4. 蛋白質(zhì)生物合成的調(diào)節(jié):閱讀框架的漂移、重疊和5 AUG 的作用;翻譯錯(cuò)誤;poly(A)尾;蛋白質(zhì)生物合成的阻斷劑第三節(jié) 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn) 1. 蛋白質(zhì)分泌運(yùn)輸?shù)募?xì)胞學(xué)過(guò)程2. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)理論:信號(hào)肽假設(shè);導(dǎo)肽假設(shè);分子伴侶 3. 原核和真核生物的蛋白質(zhì)跨膜運(yùn)輸:分泌蛋白的運(yùn)輸;細(xì)胞質(zhì)膜蛋白的類型和轉(zhuǎn)運(yùn);內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn);溶酶體蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn);線粒體蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn);核蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn) 第四節(jié) 蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工 1. 蛋白質(zhì)合成后的正確折疊是其行使功能的基礎(chǔ) 2. 翻譯后修飾對(duì)功能蛋白質(zhì)產(chǎn)物的重要性 3. 二

22、硫鍵的形成和正確配對(duì)4. N端fMet或Met的切除5. 前體加工 6. 剪切和剪接:剪切;剪接7. 化學(xué)編輯:化學(xué)編輯概況;蛋白質(zhì)的糖基化第五節(jié) 功能蛋白質(zhì)研究進(jìn)展 1. 蛋白質(zhì)工程的概念及技術(shù)路線:蛋白質(zhì)工程研究的一般規(guī)律;蛋白質(zhì)工程和基因誘變2. 蛋白質(zhì)的功能域及其模擬肽:功能蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)特點(diǎn);噬菌體表面展示肽庫(kù)一隨機(jī)多肽文庫(kù);噬菌體抗原決定簇文庫(kù)3. 蛋白質(zhì)組學(xué)和藥物蛋白質(zhì)組學(xué):后基因組時(shí)代和蛋白質(zhì)組學(xué);藥物蛋白質(zhì)組學(xué) 三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)遺傳密碼 (二)蛋白質(zhì)的生物合成 (三)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn) (四)蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工 (五)功能蛋白質(zhì)研究進(jìn)展 四、考核要求(一)遺傳密碼 識(shí)記:遺

23、傳密碼、閱讀框架的定義。領(lǐng)會(huì):遺傳密碼的性質(zhì)。(二)蛋白質(zhì)的生物合成 識(shí)記:原核生物 mRNA 的特點(diǎn);真核生物 mRNA 的特點(diǎn);領(lǐng)會(huì):蛋白質(zhì)合成過(guò)程起始、延伸、終止的機(jī)制應(yīng)用:有哪些物質(zhì)參與了蛋白質(zhì)的合成,它們?cè)诘鞍踪|(zhì)合成中主要起什么作用?(三)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)識(shí)記:蛋白質(zhì)分泌運(yùn)輸?shù)募?xì)胞學(xué)過(guò)程;信號(hào)肽假設(shè);導(dǎo)肽假設(shè);分子伴侶領(lǐng)會(huì):原核和真核生物的蛋白質(zhì)跨膜運(yùn)輸機(jī)制、分泌蛋白的運(yùn)輸機(jī)制。(四)蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工 識(shí)記:蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工的機(jī)制應(yīng)用:為什么說(shuō)蛋白質(zhì)合成后的折疊與修飾加工在基因表達(dá)過(guò)程中有特別重要的意義?(五)功能蛋白質(zhì)研究進(jìn)展 識(shí)記:蛋白質(zhì)工程、蛋白質(zhì)組學(xué)、蛋白質(zhì)

24、功能域與模擬肽的概念第七章 基因表達(dá)的調(diào)控一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述原核生物和真核生物基因表達(dá)的調(diào)控過(guò)程,重點(diǎn)是真核生物基因表達(dá)的調(diào)控過(guò)程等。學(xué)習(xí)本章要求了解基因表達(dá)調(diào)控的元件和作用方式;原核生物與真核生物的基因調(diào)控策略;掌握乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)與功能及正負(fù)調(diào)控;了解色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)與功能;熟悉原核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控;熟悉原核生物翻譯水平的調(diào)控;了解鏈霉菌的基因表達(dá)調(diào)控系統(tǒng);熟悉真核生物染色體重排的調(diào)控、染色質(zhì)水平的調(diào)控、DNA水平的調(diào)控;掌握真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控、轉(zhuǎn)錄起始與加工調(diào)節(jié)、翻譯水平的調(diào)控。二、課程內(nèi)容第一節(jié) 概述1. 基因表達(dá)調(diào)控的元件和作用方式:基因表達(dá)、基因表達(dá)的調(diào)控、順式作用

25、元件、反式作用因子、阻遏蛋白和激活蛋白的概念。2. 原核生物與真核生物的基因調(diào)控策略:操縱子的概念;原核生物的基因調(diào)控策略;真核生物的基因調(diào)控策略。第二節(jié) 原核生物的基因表達(dá)調(diào)控1. 可誘導(dǎo)操縱子、可阻遏操縱子、誘導(dǎo)和阻遏的概念。2. 乳糖操縱子:乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)與功能;乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控和正調(diào)控;乳糖操縱子調(diào)控區(qū)的突變效應(yīng)。3. 色氨酸操縱子:色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)與功能;色氨酸操縱子的阻遏調(diào)節(jié)系統(tǒng)。4. 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控;轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控。5. 翻譯水平的調(diào)控:翻譯起始的調(diào)控;翻譯延伸的調(diào)控;翻譯水平的終止調(diào)控。6. 鏈霉菌的基因表達(dá)調(diào)控系統(tǒng):鏈霉菌的調(diào)控元件;鏈霉菌基

26、因轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控。第三節(jié) 真核生物的基因表達(dá)調(diào)控1. 染色體重排的調(diào)控:酵母接合型的轉(zhuǎn)變;接合型轉(zhuǎn)變的模型;MATa和MATa基因編碼的調(diào)節(jié)蛋白。2. 染色質(zhì)水平的調(diào)控:活性染色質(zhì);組蛋白的修飾。3. DNA水平的調(diào)控:基因的丟失、擴(kuò)增與重排;DNA的甲基化和去甲基化。4. 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:順式作用元件的種類;反式作用因子DNA結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄激活域。5. 轉(zhuǎn)錄起始與加工調(diào)節(jié):轉(zhuǎn)錄起始的不同選擇;轉(zhuǎn)錄后加工的不同調(diào)節(jié)。6. 翻譯水平的調(diào)控:5UTR結(jié)構(gòu)與翻譯起始調(diào)控;蛋白因子磷酸化與翻譯起始調(diào)控;3UTR結(jié)構(gòu)與mRNA穩(wěn)定性調(diào)控;蛋白質(zhì)的加工成熟。三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)概述(二)原核生物的基因表達(dá)

27、調(diào)控(三)真核生物的基因表達(dá)調(diào)控四、考核要求(一)概述識(shí)記:基因表達(dá)、基因表達(dá)的調(diào)控、順式作用元件、反式作用因子、阻遏蛋白和激活蛋白的概念,操縱子的概念; 領(lǐng)會(huì):基因表達(dá)調(diào)控的作用方式,原核生物的基因調(diào)控策略;真核生物的基因調(diào)控策略。(二)原核生物的基因表達(dá)調(diào)控識(shí)記:可誘導(dǎo)操縱子、可阻遏操縱子、誘導(dǎo)和阻遏的概念。乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)與功能;乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控和正調(diào)控; 領(lǐng)會(huì):乳糖操縱子調(diào)控區(qū)的突變效應(yīng)。色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)與功能;色氨酸操縱子的阻遏調(diào)節(jié)系統(tǒng)。RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控;轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控。翻譯起始的調(diào)控;翻譯延伸的調(diào)控;翻譯水平的終止調(diào)控。鏈霉菌調(diào)控元件及基因轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控。應(yīng)用:以乳

28、糖操縱子為例,解釋分解代謝產(chǎn)物是如何進(jìn)行阻遏調(diào)節(jié)的?(三)真核生物的基因表達(dá)調(diào)控識(shí)記:染色體重排的調(diào)控;染色質(zhì)水平的調(diào)控;DNA水平的調(diào)控;轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控;順式作用元件的種類;反式作用因子DNA結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄激活域。轉(zhuǎn)錄起始與加工調(diào)節(jié);轉(zhuǎn)錄起始的不同選擇;轉(zhuǎn)錄后加工的不同調(diào)節(jié)。翻譯水平的調(diào)控;5UTR結(jié)構(gòu)與翻譯起始調(diào)控;蛋白因子磷酸化與翻譯起始調(diào)控;3UTR結(jié)構(gòu)與mRNA穩(wěn)定性調(diào)控;蛋白質(zhì)的加工成熟。領(lǐng)會(huì):酵母接合型的轉(zhuǎn)變;接合型轉(zhuǎn)變的模型;MATa和MATa基因編碼的調(diào)節(jié)蛋白。活性染色質(zhì);組蛋白的修飾。基因的丟失、擴(kuò)增與重排;DNA的甲基化和去甲基化。應(yīng)用:真核生物是如何在不同水平進(jìn)行精確的轉(zhuǎn)

29、錄調(diào)控的?反式作用因子DNA結(jié)合域有哪些典型的DNA結(jié)合基序?第八章 基因工程及其在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用一、學(xué)習(xí)目的與要求本章闡述基因工程相關(guān)的酶學(xué)、載體以及基因工程的流程,重點(diǎn)是重要工具酶和載體、重組DNA的流程等。學(xué)習(xí)本章要求掌握基因工程相關(guān)的酶學(xué)、基因工程的載體、目的基因制備和常用分離方法、載體DNA與目的基因的連接、重組分子引入受體細(xì)胞、重組細(xì)胞的篩選鑒定、克隆基因在大腸桿菌的表達(dá);熟悉克隆目的基因在酵母中表達(dá)、重組原核微生物生產(chǎn)藥物;了解基因工程的誕生、原理和發(fā)展。二、課程內(nèi)容第一節(jié) 基因工程的誕生、原理和發(fā)展第二節(jié) 基因工程相關(guān)的酶學(xué)1. 核酸限制性內(nèi)切酶與 DNA 分子體外切割:宿主

30、控制的限制與修飾現(xiàn)象細(xì)菌自我保護(hù)機(jī)制;核酸內(nèi)切酶的命名與類型;II型核酸限制性內(nèi)切酶的基本特性2. DNA 連接酶:大腸桿菌 DNA 連接酶;T4 DNA連接酶3. 聚合酶:大腸桿菌 DNA 聚合酶I(E.coli pol I);Klenow 聚合酶;T4噬菌體DNA多聚酶;經(jīng)修飾的 T7 噬菌體 DNA 聚合酶(測(cè)序酶);Taq DNA 聚合酶;逆轉(zhuǎn)錄酶4. DNA 和 RNA 的修飾酶:末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶與同聚物加尾;T4 多核昔酸激酶與 DNA 分子 5末端標(biāo)記;堿性磷酸酶與 DNA 脫磷酸作用5. 核酸酶:核酸酶S1 與 RNA 分子定位;BAL31核酸酶與確定限制位點(diǎn);外切核酸酶

31、III;脫氧核糖核酸酶I;核糖核酸酶A 第三節(jié) 基因工程的載體 1. 大腸桿菌載體:克隆載體;穿梭載體;表達(dá)載體2. 真核細(xì)胞載體:哺乳動(dòng)物細(xì)胞的病毒載體;酵母載體;桿狀病毒載體第四節(jié) 目的基因制備和常用分離方法1. 基因克隆和分離的基本步驟:選擇含目的基因?qū)嶒?yàn)材料的原則;選擇合適的載體制備目的 DNA 片段并克隆;選擇合適的檢測(cè)方法篩選目的基因2. 人工合成: DNA 的化學(xué)合成過(guò)程;化學(xué)合成寡聚核昔酸可通過(guò)以下幾種方法連接成完整的基因;化學(xué)合成寡聚核昔酸的應(yīng)用;采用化學(xué)酶促相結(jié)合的辦法;人工合成基因的基本程序;人工合成基因的局限性3. 基因文庫(kù)構(gòu)建(限制性內(nèi)切酶法):原核生物的目的基因直接

32、分離;鳥(niǎo)槍法克隆基因;真核生物基因文庫(kù)的建立4. cDNA文庫(kù)構(gòu)建(逆轉(zhuǎn)錄法):構(gòu)建理想的 cDNA 文庫(kù)需要考慮的因素;構(gòu)建 CDNA 文庫(kù)的步驟 5. PCR法:基本原理;PCR 反應(yīng)控制要點(diǎn);PCR擴(kuò)增的應(yīng)用;PCR 分類第五節(jié) 載體DNA與目的基因的連接1. DNA分子間連接策略:粘性末端DNA片段連接;平末端DNA片段連接;粘平末端DNA片段間連接2. 影響目的基因與載體之間連接效率的因素:DNA片段間的連接方式;目的基因與載體 DNA 的濃度和比例;連接溫度與時(shí)間;其他因素第六節(jié) 重組分子引入受體細(xì)胞 1. 重組 DNA 導(dǎo)入大腸桿菌:氯化鈣轉(zhuǎn)化法;轉(zhuǎn)染法2. 抗生素生物合成基因引

33、人鏈霉菌載體宿主系統(tǒng):抗生素生物合成基因引人的途徑;鏈霉菌的宿主轉(zhuǎn)化系統(tǒng)3. 酵母菌轉(zhuǎn)化:完整細(xì)胞轉(zhuǎn)化法;原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法 4. 重組 DNA 導(dǎo)人哺乳動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射法;DNA磷酸鈣轉(zhuǎn)染法;DEAE 葡聚糖轉(zhuǎn)染法;陽(yáng)性脂質(zhì)體及其介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染;電穿孔法;病毒感染法第七節(jié) 重組體的鑒定和分析1. 生物學(xué)方法:表型篩選法;噬菌斑形成篩選法;遺傳互補(bǔ)法利用遺傳選擇標(biāo)記篩選哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;利用報(bào)告基因篩選植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞2. 核酸分子雜交法:菌落原位雜交;DNA印跡分析;RNA印跡分析;斑點(diǎn)印跡雜交和狹線印跡雜交3. 免疫分析篩選4. 限制性內(nèi)切酶圖譜的鑒定5. 雙脫氧終止法測(cè)序(Sanger法)第

34、八節(jié) 克隆基因在大腸桿菌中表達(dá)策略1. 真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的特點(diǎn)2. 影響外源基因在大腸桿菌中高效表達(dá)的因素:優(yōu)化構(gòu)建表達(dá)載體;影響轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控;影響翻譯水平的因素;影響蛋白質(zhì)水平的因素;其他因素 3. 真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)類型:融合蛋白的表達(dá);非融合蛋白的表達(dá);蛋白分泌型表達(dá)4. 表達(dá)蛋白提取、純化和鑒定:提取;純化;真核基因在大腸桿菌中表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)與鑒定第九節(jié) 克隆目的基因在酵母中表達(dá)1. 常用宿主2. 酵母表達(dá)載體特點(diǎn)3. 在酵母中高效表達(dá)外源基因的策略4. 酵母表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用第十節(jié) 重組原核微生物生產(chǎn)藥物1. 生產(chǎn)小分子藥物:重組合成維生素C;重組合成抗生素2. 生產(chǎn)蛋

35、白類藥物3. 基因工程疫苗:乙肝病毒的結(jié)構(gòu);乙肝表面抗原的巴斯德畢赤酵母重組菌的構(gòu)建三、考核知識(shí)點(diǎn)(一)基因工程的誕生、原理和發(fā)展(二)基因工程相關(guān)的酶學(xué)(三)基因工程的載體 (四)目的基因制備和常用分離方法(五)載體DNA與目的基因的連接(六)重組分子引入受體細(xì)胞 (七)重組體的鑒定和分析(八)克隆基因在大腸桿菌中表達(dá)策略(九)克隆目的基因在酵母中表達(dá)(十)重組原核微生物生產(chǎn)藥物四、考核要求(一)基因工程的誕生、原理和發(fā)展(二)基因工程相關(guān)的酶學(xué)識(shí)記:基因工程各種工具酶的生物學(xué)特性領(lǐng)會(huì):II型核酸限制性內(nèi)切酶的基本特性應(yīng)用:基因工程中常用的工具酶有哪些?它們?cè)诨蚬こ讨械挠猛緸楹危浚ㄈ┗?/p>

36、工程的載體 識(shí)記:載體的概念和種類領(lǐng)會(huì):大腸桿菌克隆載體、表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)應(yīng)用:試述基因工程常用載體的種類和用途。(四)目的基因制備和常用分離方法識(shí)記:基因克隆和分離的基本步驟;基因文庫(kù)與cDNA文庫(kù)的構(gòu)建方法;PCR的原理。領(lǐng)會(huì):PCR 反應(yīng)控制要點(diǎn);PCR擴(kuò)增的應(yīng)用應(yīng)用: 目的基因制備方法有哪幾種,它們各自的優(yōu)缺點(diǎn)? 試述PCR的原理。(五)載體DNA與目的基因的連接識(shí)記:DNA分子間連接策略。領(lǐng)會(huì):影響目的基因與載體之間連接效率的因素。(六)重組分子引入受體細(xì)胞 識(shí)記:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)染的概念。領(lǐng)會(huì):重組分子引入受體細(xì)胞的常用方法。(七)重組體的鑒定和分析識(shí)記:重組體的鑒定的常用方法。領(lǐng)會(huì):

37、雙脫氧測(cè)序法的原理。(八)克隆基因在大腸桿菌中表達(dá)策略識(shí)記:真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的特點(diǎn)。領(lǐng)會(huì):表達(dá)蛋白提取、純化和鑒定的方法。應(yīng)用:影響外源基因在大腸桿菌中高效表達(dá)的因素有哪些?(九)克隆目的基因在酵母中表達(dá)識(shí)記:酵母表達(dá)載體特點(diǎn)。領(lǐng)會(huì):在酵母中高效表達(dá)外源基因的策略。應(yīng)用:酵母表達(dá)系統(tǒng)在基因工程中有哪些應(yīng)用?(十)重組原核微生物生產(chǎn)藥物第三部分 有關(guān)說(shuō)明與實(shí)施要求一、關(guān)于考核目標(biāo)為了使個(gè)人自學(xué)、社會(huì)助學(xué)和考試命題有統(tǒng)一而明確的考核目標(biāo)可遵循,本大綱在列出各章課程內(nèi)容的基礎(chǔ)上,對(duì)各章規(guī)定了學(xué)習(xí)目的和要求,并把考試內(nèi)容化解成具體的考核知識(shí)點(diǎn)和要求。對(duì)各考核知識(shí)點(diǎn)的能力程度要求,則大致按照識(shí)記、領(lǐng)會(huì)、應(yīng)用三個(gè)層次來(lái)酌定,其具體的含義是: 1

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