1、微波萃取柑橘皮黃酮類化合物1 實驗目的1.1掌握微波萃取原理，熟悉微波萃取操作過程。1.2探究從柑橘皮中提取黃酮類化合物的實驗機理。2 實驗原理黃酮類化合物是植物光合作用產生的一類重要的天然有機化合物，泛指由兩個苯環(A環和B環)通過三個碳鏈相互連接而成的一系列化合物(C6-C3-C6)。其大多存在于一些有色植物中，如在甘草油性提取物、洋蔥提取物、柑橘皮提取物、松樹提取物、綠茶提取物、銀杏葉提取物、紅花提取物中都發現黃酮類化合物的存在,許多藥食兩用的植物中也存在多種的黃酮類化合物。黃酮類化合物的羥基被糖苷化后，水溶性增加，脂溶性降低，易溶于熱水、甲醇 、乙醇和稀堿溶液中。黃酮類化合物中的3羥基

2、、4羥基、5羥基、4羰基或鄰位酚羥基，與鋁鹽進行絡合反應，在堿性條件下生成紅色絡合物，常用AlCl3和NaNO2-Al(NO3)3比色法，絡合物在一定的波長處有最大吸收峰。絡合物顏色的深淺與黃酮含量呈一定的比例關系，據此可以進行比色定量。黃酮類化合物現已成為藥學和保健食品學的研究熱點，柑橘皮中含有豐富的黃酮類化合物，它具有顯著的抗腫瘤1-2、抗菌活性和抗氧化活性3。微波是一種頻率為 300MHz300GHz 的電磁波。由于它是一種瞬時穿透式加熱方式，在微波場的作用下，原料中的水分吸收微波能，迅速蒸發膨脹，在其表面形成無數的細小孔隙，這些孔洞大大提高了原料內成分的滲出，從而加快了萃取的速度4。近

3、年來微波技術在植物有效成分的提取方面得到了廣泛的應用5。微波技術與傳統的方法比起來具有效率高、重現性好、節約時間、節省試劑、污染小等特點。3 實驗材料、試劑與儀器設備3.1 材料 柑橘皮3.2 試劑 蘆丁標準品 95.0%、無水乙醇、石油醚、亞硝酸鈉、硝酸鋁、鹽酸、鋅粉3.3 儀器設備 高速萬能粉碎機、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、分光光度計、電子天平、微波萃取機4 實驗方法4.1柑橘皮的前處理將柑橘皮清洗干凈，切絲，置于烘箱內(55)24h，充分干燥，將干燥后的柑橘皮粉碎，過 40 目篩，取 1 份（以質量計）柑橘皮粉，加入 10 份（以體積計）石油醚，熱水浴回流 2h，脫除脂溶性色素，通風櫥

4、內揮干石油醚，備用。4. 2 黃酮含量的測定方法標準曲線的制作6：稱取干燥至恒重的蘆丁對照品 10.0000mg，用 30%的乙醇超聲波下使其溶解，轉移至 100mL 容量瓶中定容，此溶液濃度為 0.1mg/mL，吸取 0.1mg/mL蘆丁標準液 0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0mL，分別置于 10mL 的比色管中，30%乙醇補足至 5mL，各加入 0.3mL 硝酸鋁，靜置 5min，加入 0.3mL 亞硝酸鈉，靜置 5min，加入 3mL 氫氧化鈉，30%乙醇定容至 10mL，搖勻，靜置 15min，以空白溶液作為對照，于 510nm 測其吸光度。

5、以吸光值（A）為縱坐標Y，蘆丁質量濃度為橫坐標（X），繪制標準曲線(見圖2-1)。得 到 蘆 丁 質 量 濃 度 X 與 吸 光 度 Y 關 系 曲 線 的 回 歸 方 程 為 ：Y=0.0113X+0.0032，R2=0.9992.4.3 微波提取法提取柑橘皮黃酮類物質稱取石油醚處理過的柑橘皮粉 1.000g ，加入 60%的乙醇溶液 20mL，微波作用時間為2min，微波功率為 460w 進行提取，過濾，4靜置 5h，離心。容量瓶定容至100mL，取 2mL 提取液經 NaNO2- Al(NO3)3顯色后，測 OD510，由公式計算相應的總黃酮含量。計算公式：W（%）= C×（1

6、0/2）×100×100%/1×106W柑橘皮總黃酮含量（%）C由標準曲線換算得的總黃酮濃度（g/mL）5 結果與分析6 參考文獻1趙妍妍,馬秀英,周黎明.川陳皮素對肝癌細胞的抑制作用J.華西藥學雜志,2007,22(2):149-151.2管曉琳,羅剛,朱玲,等.川陳皮素誘導非小細胞肺癌A549細胞凋亡的研究J.中國藥科大學學報,2006,37(5):443-446.3張瑞菊,邢桂麗,孫海波.陳皮中黃酮類化合物的抗氧化性J.食品與藥品,2007,9(11A):22-24.4陳源,余亞白,潘東明.柑橘黃酮類化合物提取純化方法的研究進展.福建農業學報,2012,27(2):211-215.5吳龍琴,李 克.微波萃取原理及