1、綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告研究藥物： 鹽酸普萘洛爾研究成員： 陳重均、朱俊峰、陳厚柳、王煥威 研究單位： 浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心 試驗(yàn)起止日期：2011.3.3 目錄一、鹽酸普萘洛爾藥學(xué)研究資料綜述（藥學(xué)資料7）二、鹽酸普萘洛爾生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料（藥學(xué)資料8）三、鹽酸普萘洛爾注射液處方及工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料（藥學(xué)資料8）四、鹽酸普萘洛爾質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料（藥學(xué)資料10）五、鹽酸普萘洛爾注射液質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料（藥學(xué)資料10）六、鹽酸普萘洛爾檢驗(yàn)報(bào)告書（藥學(xué)資料12）七、鹽酸普萘洛爾注射液檢驗(yàn)報(bào)告書（藥學(xué)資料12）八、鹽酸普萘洛爾主要藥效學(xué)試驗(yàn)資

2、料及文獻(xiàn)資料（藥理毒理研究資料17） 申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：7藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾資料項(xiàng)目名稱：藥學(xué)研究資料綜述研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：陳厚柳申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院藥學(xué)研究

3、資料綜述1. 品種概況藥品名稱：鹽酸普萘洛爾注射液 注冊(cè)分類：化學(xué)藥品6類 產(chǎn)品功效：普萘洛爾為腎上腺素受體阻斷藥，阻斷心肌的受體，減慢心率，抑制心臟收縮力與房室傳導(dǎo)，循環(huán)血流量減少，心肌氧耗量降低。臨床上用于治療多種原因所致的心律失常，如房性及室性早搏、竇性及室上性心動(dòng)過(guò)速，心房顫動(dòng)等，但室性心動(dòng)過(guò)速宜慎用。1.1產(chǎn)品研發(fā)狀況簡(jiǎn)介：1.2社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益分析：2. 主要研究成果總結(jié)2.1質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及起草說(shuō)明 鹽酸普萘洛爾質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)制訂 鹽酸普萘洛爾注射液的質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)制訂2.2劑型選擇依據(jù)2.3制備工藝及研究?jī)?nèi)容制備工藝制備工藝選擇3. 參考文獻(xiàn)申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二

4、部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：8藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾資料項(xiàng)目名稱：生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：陳重均申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料一、品種基本情況 通用名稱： 鹽酸普萘

5、洛爾 英文名稱：propranolol hydrochloride 漢語(yǔ)拼音：yansuan punailuoer 化學(xué)名稱：1-異丙氨基-3-(1-萘氧基)-丙醇鹽酸鹽 化學(xué)結(jié)構(gòu)式：分子式：C16H21NO2·HCl 分子量：295.81 基本的理化性質(zhì)：白色或類白色結(jié)晶性粉末，無(wú)臭，味微甜后苦，可溶于水或乙醇，微溶于氯仿。 二、合成工藝路線及選擇依據(jù) 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前普萘洛爾的合成路線有8條，但主要有只有以下 4 條，后幾種路線的原料均為較難獲得的的化合物，因而不做考慮: 1、合成路線一合成路線二合成路線三合成路線四路

6、線的確定：選擇路線時(shí)我們優(yōu)先選擇藥化實(shí)驗(yàn)室中已有的或容易合成的試劑為原料，一些操作后處理和反應(yīng)時(shí)間等相關(guān)因素也采取簡(jiǎn)便易行的。從反應(yīng)式里我們可以看到3這個(gè)化合物(環(huán)氧丙基醚)都是必不可少的。因而反應(yīng)路線一、三、四在原理上基本是相同的。而從3合成普奈洛爾,采用路線一據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道即可達(dá)到80%以上產(chǎn)率。相較后兩種少一步操作，因而采用路線一位反應(yīng)路線。三.反應(yīng)路線3.1工藝反應(yīng)路線四、工藝操作過(guò)程 4.1 合成路線一的反應(yīng) 工藝配比 名稱規(guī)格投料量a萘酚g25.017g氫氧化鈉g20g乙醇ml適量環(huán)氧氯丙烷ml68ml三乙胺ml1ml異丙胺ml42ml 操作過(guò)程 全流程實(shí)驗(yàn)方法：(1)取l一

7、萘酚25019g、環(huán)氧氯丙烷68ml(質(zhì)量比1：5)作為起始原料，加催化劑三乙胺20滴投入到裝有回流冷凝管250mL圓底燒瓶中，加熱，水浴控溫85，保持溫度反應(yīng)6h，薄層跟蹤至1-萘酚反應(yīng)完畢。降溫到40，加入100克20NaOH溶液，振蕩混勻，保持體系溫度為50，反應(yīng)20min左右。充分靜置分層，放掉堿層，有機(jī)層加入50mL去離子水充分?jǐn)嚢瑁尤胂←}酸(濃鹽酸：水=1：5)約05mL充分中和到pH為7。靜置分層，收集有機(jī)層，用50mL的去離子水再洗滌一次，靜置分層，收集有機(jī)層。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將有機(jī)層減壓蒸餾，徹底回收未反應(yīng)的氧氯丙烷(體系溫度不要超過(guò)80)。得到第一步反應(yīng)產(chǎn)物，稱得重量32

8、.81mg，然后計(jì)算產(chǎn)物收率為94.4%。(2)將上步反應(yīng)所得的3281g中間體全部用于下一步反應(yīng)，再加入異丙胺42ml。控制溫度404550，體系密封，按梯度溫度分別反應(yīng)422h，薄層層析跟蹤至反應(yīng)完畢。慢慢升溫，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾回收未反應(yīng)的異丙胺，徹底回收異丙胺。加入10ml甲苯充分?jǐn)嚢柚聊蹋鋮s過(guò)夜，加入酒精洗滌抽濾得白色固體，干燥后稱重得20.84g，則該步實(shí)際收率為43.0%。(3)將所得的白色色固體5.005g用于第三步反應(yīng)、酒精投入到裝有回流冷凝管的150mL的圓底燒瓶中，加入顆粒狀活性炭，體系密封，加熱回流，趁熱過(guò)濾，濾液慢慢滴加濃鹽酸至pH為2，冷卻結(jié)晶，過(guò)濾，晶體用適

9、量的酒精洗滌，得到白色的晶體，干燥得成品，稱量重量6.000g g，計(jì)算產(chǎn)物收率99.7%，已滿足純度要求因而不再做重結(jié)晶。 五實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 5.1  收率 m總=57.219g，m表面皿=36.378g，m產(chǎn)物=20.841g 產(chǎn)率 = 實(shí)際獲得質(zhì)量/理論產(chǎn)量=20.841g/51.437g=40.6%5.2 結(jié)構(gòu)確認(rèn)所需的資料、HPLC 純度等  TLC 檢查(現(xiàn)象及結(jié)果) 第一步合成點(diǎn)板結(jié)果  展開劑: 石油醚: 乙酸乙酯=8:1 顯色劑:  FeCl3加入NaOH重新環(huán)合后 展開劑:

10、石油醚: 乙酸乙酯=8:1第一步乙酸乙酯萃取結(jié)果第二步合成點(diǎn)板的結(jié)果熔點(diǎn)測(cè)定熔點(diǎn)測(cè)定為162.3163.4，熔程較短說(shuō)明樣品純度高。 HPLC的純度測(cè)定我們對(duì)樣品進(jìn)行了面積歸一化法的計(jì)算，得出了樣品的純度為99.7%>99%，但整個(gè)峰的峰型拖尾較嚴(yán)重，我們?cè)囍{(diào)整溶液的極性來(lái)改善這一現(xiàn)象(詳見藥分部分)。5.3  討論   文獻(xiàn)中，第一步合成中間產(chǎn)物 3(萘氧基)1,2環(huán)氧丙烷的較佳合成工藝條件: 萘酚(34g,0.24mol)、環(huán)氧氯丙烷(75ml,0.96mol)的投料比 1:4(摩爾比)，催化劑三乙胺與 萘酚的投料比 0.5mL:14.4g(

11、0.0035mol:0.1mol)，NaOH(20g,0.5mol)，反應(yīng)溫度 8085，反應(yīng)時(shí)間 6h。產(chǎn)品純度 91，產(chǎn)率 96.8。 為了保證我們產(chǎn)物產(chǎn)率，我們適當(dāng)?shù)脑黾恿谁h(huán)氧氯丙烷的比例改為(1:5)反應(yīng)，從點(diǎn)板我們可以看出環(huán)氧氯丙烷確實(shí)在高溫下易發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，在點(diǎn)板中出現(xiàn)了異于原料產(chǎn)物的點(diǎn)。從以往的實(shí)驗(yàn)中我們了解到低溫是可以減少這種開環(huán)的發(fā)生的但是會(huì)大大降低反應(yīng)速率，而開環(huán)的產(chǎn)物也可以通過(guò)加入NaOH重新環(huán)合，因而我們沒有采納低溫的方法。  實(shí)驗(yàn)中我們?cè)?jīng)將在鹽酸普萘洛爾落入水中，由于樣品的水溶性，使得相應(yīng)水溶性雜質(zhì)也混入，隨后我們采用酸溶堿沉法可用于提取堿性有機(jī)

12、物，普萘洛爾的二乙基胺基側(cè)鏈有堿性與鹽酸成鹽可在水中進(jìn)行溶解，加入強(qiáng)堿NaOH后重新反應(yīng)為普萘洛爾并析出。此時(shí)用乙酸乙酯萃取，收集有機(jī)相，并重復(fù)一次，抽濾掉溶劑后再次成鹽。從這一次教訓(xùn)中，我們學(xué)到了很多實(shí)驗(yàn)上的失誤是可以補(bǔ)救的，處理得當(dāng)可以節(jié)約較多工時(shí)以及成本。  合成的普萘洛爾有微紅色，洗滌成鹽后呈白色粉末狀，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可用活性炭進(jìn)行脫色，由于本身考慮合成的量較大，在抽濾洗滌環(huán)節(jié)我們較注重樣品的純度，洗脫次數(shù)以及要求較高。這可能是我們實(shí)驗(yàn)最終產(chǎn)率較低的重要原因之一。  熔點(diǎn)測(cè)定文獻(xiàn)上的范圍為162164，顯然我們所測(cè)的落在該范圍內(nèi)，且熔程只有1.1由此我們實(shí)驗(yàn)中

13、沒有再對(duì)樣品進(jìn)行重結(jié)晶而直接用HPLC進(jìn)行測(cè)定而測(cè)定的結(jié)果也符合了我們的預(yù)期。  實(shí)驗(yàn)操作的(2)中溫度階梯反應(yīng)后，回收異丙胺后用二甲苯凝固，考慮實(shí)驗(yàn)室中無(wú)二甲苯相當(dāng)難獲得，而其與甲苯的性質(zhì)對(duì)于該反應(yīng)影響不大，參考了學(xué)長(zhǎng)學(xué)姐意見后選用甲苯為凝固劑。5.3.6 鹽酸鹽易吸潮，需真空干燥，密閉保存，可考慮置入密閉盒中并放入干燥劑。 六.參考文獻(xiàn)張英  鹽酸普萘洛爾的合成工藝研究  浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 2008 年 朱寶泉等  新編藥物合成手冊(cè)  化學(xué)工業(yè)出版社 2003 年版 李安良  藥物化學(xué)

14、0; 高等教育出版社(第二版) 申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：8藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾注射液資料項(xiàng)目名稱：處方及工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：陳厚柳申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）：

15、 浙江大學(xué)藥學(xué)院目 錄1處方組成與制備工藝1.1 處方組成1.2 制備工藝2工藝流程3處方依據(jù)4原輔料在處方中的作用5原輔料來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)鹽酸普萘洛爾注射液生產(chǎn)工藝的研究資料及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1處方組成與制備工藝1.1 處方組成 原輔料 用量 鹽酸普萘洛爾 1g 枸櫞酸 適量（調(diào)節(jié)PH至3.5左右） 注射用水 加至1000ml 共制成 5ml鹽酸普萘洛爾注射液200支1.2制備工藝稱取鹽酸普萘洛爾1.0029g于燒杯，加注射用水一定量攪拌至溶解，再加注射用水至接近總量（900ml左右），用10%的枸櫞酸調(diào)節(jié)PH至3.5左右，添加注射用水至總量，加入活性炭，然后粗慮。過(guò)濾（022um濾膜過(guò)濾），灌封。用

16、100攝氏度滅菌30分鐘即得。然后對(duì)灌封好的安瓿瓶進(jìn)行檢漏，然后取一定量去進(jìn)行質(zhì)量檢查至符合藥典要求。2.工藝流程3.處方依據(jù) 對(duì)于小體積溶液型注射液輔料方面主藥需要增溶劑、助溶劑、PH調(diào)節(jié)劑、防腐劑、抗氧劑、等滲調(diào)節(jié)劑等。主藥鹽酸普萘洛爾能溶解于水中，且制備的鹽酸普萘洛爾的注射液濃度較小，故不需要加增加溶解度的增溶劑和助溶劑。鹽酸普萘洛爾在酸性條件下穩(wěn)定性較好，故不需要增加抗氧劑，同時(shí)由于制備的注射液不用于人體故不需要進(jìn)行等滲調(diào)節(jié)。與偶遇鹽酸普萘洛爾在中性和堿性條件下易分解，不穩(wěn)定故增加PH調(diào)節(jié)劑枸櫞酸來(lái)調(diào)節(jié)PH至3.5左右（藥典要求3-4）。4 原輔料在處方中的作用 鹽酸普萘洛爾 主藥 枸

17、櫞酸 PH調(diào)節(jié)劑 注射用水 溶劑 5原輔料來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 原料由本組成員自行合成，輔料（枸櫞酸）由藥劑實(shí)驗(yàn)室提供，質(zhì)量均符合藥典規(guī)定。 主要參考文獻(xiàn) 1 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：10藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾資料項(xiàng)目名稱：質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起

18、止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：王煥威申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料1 樣品來(lái)源鹽酸普萘洛爾的原料藥在浙江大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中心合成，批號(hào)為20110315。2 含量限度本品含C16H21NO2·HCl應(yīng)不少于標(biāo)示量的99.0%。3 性狀本品為白色的結(jié)晶狀粉末；無(wú)臭。在水或乙醇中溶解，在三氯甲烷中微溶。4 鑒別 紫外吸收光譜法：取本品，用甲醇溶解制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可見分光光度法測(cè)定，按藥典規(guī)定在290nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，測(cè)得本品在292

19、nm有最大吸收。見圖10-1。5 檢查本品的有關(guān)物質(zhì)與分解產(chǎn)物檢查選用高效液相色譜法測(cè)定。5.1 儀器和色譜條件儀器：Agilent Technologies 高效液相色譜儀；UV檢測(cè)器。色譜條件：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠Agilent (150×4.6mm,5mm)；流動(dòng)相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（50：50）；流速：1ml/min ；柱溫：20.8；檢測(cè)波長(zhǎng)：292nm；進(jìn)樣量：20ml。5.2 流動(dòng)相的選擇參考部分文獻(xiàn)后，流動(dòng)相可以選擇：乙腈-水-硫酸（55:45:0.1）；甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（50：50）。經(jīng)流動(dòng)相比例調(diào)整試驗(yàn)和多種

20、因素綜合考慮，最終決定采用甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（50：50）為本品的有關(guān)物質(zhì)檢查和含量測(cè)定的流動(dòng)相較為適宜。5.3方法的專屬性：取空白溶劑（即流動(dòng)相）、合成中間體甲萘酚和普萘洛爾溶液各20l，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。另取鹽酸普萘洛爾樣品適量，配成2mg/ml、3mg/ml溶液，按上述色譜條件進(jìn)行HPLC測(cè)定。另取鹽酸普萘洛爾樣品適量采用堿破壞性實(shí)驗(yàn)，然后進(jìn)行HPLC測(cè)定。以上各溶液所得色譜圖見圖10-2（A-F）。5.4有關(guān)物質(zhì)的檢查5.4.1方法：取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品(對(duì)照品為樣品經(jīng)試驗(yàn)室重結(jié)晶所得)和樣品適量，精密稱定，用流動(dòng)相配成1mg/ml的溶液。20m

21、L注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的7倍, 樣品測(cè)定液如顯示雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰峰面積，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得超過(guò)對(duì)照液主峰面積的0.5倍(<1.0%),各雜質(zhì)峰面積之和應(yīng)不得大于對(duì)照液色譜圖中主成分峰面積2倍(<1.5%)。5.4.2樣品測(cè)定：取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品與樣品上述方法進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定，記錄圖譜，測(cè)定結(jié)果見圖10-3（A-B）和表10-1。表10-1 有關(guān)物質(zhì)的HPLC法檢查結(jié)果樣品批號(hào)總雜質(zhì)（%）最大雜質(zhì)（%）201103150.100.035.5 結(jié)論在上述色譜條件下本品中有關(guān)物質(zhì)可達(dá)到良好的分離，且專屬性符合要求，本法可用于鹽酸普萘洛爾原料藥中有關(guān)物

22、質(zhì)檢查。6 含量測(cè)定6.1方法的篩選根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)查詢，原料藥含量測(cè)定方法研究結(jié)果采用HPLC法測(cè)定。6.2色譜條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠Agilent (150×4.6mm,5mm)；流動(dòng)相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（50：50）；流速：1ml/min ；柱溫：20.8；檢測(cè)波長(zhǎng)：292nm；進(jìn)樣量：20ml；理論塔板數(shù)按鹽酸普萘洛爾峰計(jì)算不低于500，鹽酸普萘洛爾峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。6.3重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品約10mg置10ml容量瓶中，加入流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，濾過(guò)后連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD為1.89%。表10-2 鹽酸普

23、萘洛爾重復(fù)性實(shí)驗(yàn)次數(shù)123456RSD(%)峰面積24492.924938.724039.924325.125167.624166.81.89%6.4線性關(guān)系考察取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相稀釋成10mg/ml的對(duì)照溶液。用移液管取對(duì)照溶液0.80、0.90、1.00、1.10、1.20ml，分別置于10ml容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻。取20l進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果表明，鹽酸普萘洛爾在0.81.2mg/ml濃度范圍內(nèi)面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，回歸方程為y = 22640x + 821.86，r = 0.9996。表10-3 鹽酸普萘洛爾線性關(guān)系考察C(mg/mL)0

24、.80.911.11.2A標(biāo)/ A內(nèi)18945.521115.223576.125696.127974.9圖10-4 鹽酸鹽酸普萘洛爾線性關(guān)系曲線6.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取含量測(cè)定項(xiàng)下同一份溶液，分別在0，2，4，6，8h測(cè)定，記錄峰面積，RSD為1.56%。表10-4 鹽酸普萘洛爾穩(wěn)定性試驗(yàn)時(shí)間（h）02468RSD(%)峰面積23669.424020.724202.423676.823240.51.56%6.6含量測(cè)定取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品和樣品適量，精密稱定，用流動(dòng)相配成1mg/ml的溶液。按外標(biāo)法計(jì)算即得，結(jié)果見表1。表10-5 樣品含量測(cè)定結(jié)果（%）批號(hào)含量/（%）RSD/（%）2011031

25、5105.21.13參考文獻(xiàn)1 曾蘇，藥物分析學(xué)（第五版），高等教育出版社，p362-365；2 中國(guó)藥典委員會(huì)，中國(guó)藥典（2010版），化學(xué)工業(yè)出版社；3 李發(fā)美，分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，人民衛(wèi)生出版社；4 馬春燕，高效液相法測(cè)定鹽酸普萘洛爾含量，中國(guó)藥師2005年第8卷第8期；5 李發(fā)美，分析化學(xué)（第六版），人民衛(wèi)生出版社。附：色譜圖圖10-1 鹽酸普萘洛爾紫外光譜掃描曲線A BC DE FA 空白溶劑 B 合成中間體甲萘酚 C 合成中間體普萘洛爾D 2mg/ml樣品 E 3mg/ml樣品 F 堿破壞圖10-2 鹽酸普萘洛爾的有關(guān)物質(zhì)檢查的專屬性考察A BA 對(duì)照品 B 樣品圖10-3 鹽酸普萘

26、洛爾的有關(guān)物質(zhì)檢查的樣品測(cè)定申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：10藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾注射液資料項(xiàng)目名稱：質(zhì)量研究工作的試驗(yàn)資料研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：王煥威申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院質(zhì)量

27、研究工作的試驗(yàn)資料1 樣品來(lái)源制備鹽酸普萘洛爾注射液的原料藥由浙江大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中心合成，注射液在浙江大學(xué)藥學(xué)院藥物制劑實(shí)驗(yàn)中心制備，批號(hào)為20110419。2 含量限度本品含C16H21NO2·HCl應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%-110.0%。3 性狀本品為無(wú)色的澄明液體。4 鑒別 紫外吸收光譜法：取含量測(cè)定本品，照紫外-可見分光光度法測(cè)定，按藥典規(guī)定在290nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，測(cè)得本品在290nm有最大吸收。見圖10-5。5 檢查5.1 pH值，應(yīng)為3.04.0。結(jié)果見表10-6。表10-6 鹽酸普萘洛爾注射液pH值測(cè)定次數(shù)123pH3.623.673.695.2 可見異物

28、在燈檢下，有小白點(diǎn)、毛屑等異物。5.3 不溶微粒符合要求6 含量測(cè)定6.1方法的篩選根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)查詢，鹽酸普萘洛爾的含量測(cè)定方法研究結(jié)果采用紫外分光光度法測(cè)定。6.2儀器北京普析通用1901紫外分光光度計(jì)6.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇精密量取本品適量，加甲醇定量稀釋制成每1ml中約含20g的溶液，搖勻，照紫外-可見分光光度法，以水為空白，在400200nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描得到鹽酸普萘洛爾注射液的紫外吸收光譜圖，見圖10-5。鹽酸普萘洛爾注射液在290nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而輔料在此波長(zhǎng)處無(wú)干擾，見圖10-6，故選取用290nm波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)。6.4回收率實(shí)驗(yàn)精密量取1.0mg樣品，置于10mL容量瓶中，加

29、入約1.0mg普萘洛爾原料藥混合，加水適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1.0mL置于10mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，照紫外分光光度法測(cè)量于290nm處得吸光度，按照吸光系數(shù)為207計(jì)算，測(cè)得平均回收率為100.35%，RSD為1.35%。見表10-7。表10-7 鹽酸普萘洛爾注射液的回收率實(shí)驗(yàn)（n=9）次數(shù)加入量（mg）測(cè)得量（mg）回收率平均回收率RSD10.8080.809100.15%100.35%1.35%20.8080.80199.19%30.8080.79998.89%41.0100.99998.87%51.0101.014100.40%61.0101.032102.21%

30、71.2141.240102.08%81.2141.236101.76%91.2141.20999.57%6.5吸光系數(shù)法含量測(cè)定結(jié)果取樣品10支，將其內(nèi)容物混勻，精密量取2.0mL（約相當(dāng)于鹽酸普萘洛爾2.0mg）置于10mL量瓶中，加水至刻度。從中精密量取1.0mL置于10mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，以水為空白，測(cè)定吸光度，測(cè)得結(jié)果如下表10-8。表10-8 鹽酸普萘洛爾注射液的含量測(cè)定結(jié)果次數(shù)吸光度（A）相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量平均值10.370689.5%20.371089.6%89.6%30.370889.6%7 規(guī)格5mL：5mg參考文獻(xiàn)1 曾蘇，藥物分析學(xué)（第五版），高等教育出版

31、社，p362-365；2 中國(guó)藥典委員會(huì)，中國(guó)藥典（2010版），化學(xué)工業(yè)出版社；3 李發(fā)美，分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，人民衛(wèi)生出版社；4 馬春燕，高效液相法測(cè)定鹽酸普萘洛爾含量，中國(guó)藥師2005年第8卷第8期；5 李發(fā)美，分析化學(xué)（第六版），人民衛(wèi)生出版社。附：光譜圖圖10-5 鹽酸普萘洛爾注射液紫外光譜掃描曲線圖10-6 輔料枸櫞酸的紫外光譜掃描曲線申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：12藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾資料項(xiàng)目名稱：檢驗(yàn)報(bào)告書研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：31005

32、8研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：王煥威申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院藥品檢驗(yàn)報(bào)告單品名鹽酸普萘洛爾批號(hào)20110315包裝塑料袋裝數(shù)量1份送樣單位浙大藥學(xué)院送樣日期2011.4檢驗(yàn)?zāi)康氖欠穹现袊?guó)藥典檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)量檢查檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典報(bào)告日期20檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案要求實(shí)際測(cè)定結(jié)果性狀白色結(jié)晶性粉末白色結(jié)晶性粉末鑒別UV法290nm處有最大吸收292nm處有最大吸收檢查

33、HPLC法單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得超過(guò)對(duì)照液主峰面積的0.5倍(<1.0%),各雜質(zhì)峰面積之和應(yīng)不得大于對(duì)照液色譜圖中主成分峰面積2倍(<1.5%)最大雜質(zhì)峰面積為對(duì)照液主峰面積的0.03%，總雜質(zhì)峰面積為對(duì)照液主峰面積的0.10%。含量測(cè)定HPLC法鹽酸普萘洛爾含量不得低于99.0%鹽酸普萘洛爾含量為105.2%檢驗(yàn)項(xiàng)目與結(jié)果檢驗(yàn)結(jié)論: 符合中國(guó)藥典規(guī)定檢驗(yàn)單位: 浙江大學(xué)藥學(xué)院檢驗(yàn)者：陳厚柳、陳重均 復(fù)核者：朱俊峰 負(fù)責(zé)人：王煥威 申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥學(xué)研究資料 編號(hào)：12藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾注射液資料項(xiàng)目名稱：檢驗(yàn)報(bào)告書研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）

34、：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：王煥威申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院藥品檢驗(yàn)報(bào)告單品名鹽酸普萘洛爾注射液批號(hào)20110419包裝塑料袋裝數(shù)量200支送樣單位浙大藥學(xué)院送樣日期2011.6檢驗(yàn)?zāi)康氖欠穹现袊?guó)藥典檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)量檢查檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典報(bào)告日期20檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)量

35、標(biāo)準(zhǔn)草案要求實(shí)際測(cè)定結(jié)果性狀無(wú)色的澄明液體無(wú)色的澄明液體鑒別UV法在290nm處有最大吸收在290nm處有最大吸收檢查pH值3.04.03.66可見異物無(wú)可見異物有可見異物含量測(cè)定UV法鹽酸普萘洛爾注射液含量應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%-110.0%鹽酸普萘洛爾注射液含量為89.6%檢驗(yàn)項(xiàng)目與結(jié)果檢驗(yàn)結(jié)論: 不符合中國(guó)藥典規(guī)定檢驗(yàn)單位: 浙江大學(xué)藥學(xué)院檢驗(yàn)者：陳厚柳、陳重均 復(fù)核者：朱俊峰 負(fù)責(zé)人：王煥威 申請(qǐng)分類：新藥申報(bào)臨床試驗(yàn)注冊(cè)分類： 第二部分 藥理毒理研究資料 編號(hào)：17藥 品 名 稱：鹽酸普萘洛爾資料項(xiàng)目名稱：主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料研究機(jī)構(gòu)名稱（加蓋公章）：浙江大學(xué)藥學(xué)院本科教學(xué)實(shí)

36、驗(yàn)中心研究機(jī)構(gòu)地址：浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路388號(hào)研究機(jī)構(gòu)郵編：310058研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名（簽字）：姚彤煒試驗(yàn)者姓名： 王煥威、陳重均、朱俊峰、陳厚柳試驗(yàn)起止日期：原始資料保存地點(diǎn)：浙江大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人姓名：朱俊峰申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人電話：申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)聯(lián)系人E-mail:申請(qǐng)人機(jī)構(gòu)名稱（公章）： 浙江大學(xué)藥學(xué)院鹽酸普萘洛爾對(duì)氯仿誘發(fā)小鼠心律失常模型的拮抗作用研究目的構(gòu)建氯仿誘發(fā)小鼠心律失常的模型，觀測(cè)小鼠心電圖變化，統(tǒng)計(jì)其室顫發(fā)生率，研究鹽酸普萘洛爾對(duì)小鼠心率失常的影響。材料藥品和試劑：生理鹽水 氯仿 自制鹽酸普萘洛爾注射液（0.

37、05%，0.2%） 標(biāo)準(zhǔn)鹽酸普萘洛爾（0.1%）-來(lái)源、批號(hào)儀器和設(shè)備：500ml燒杯 手術(shù)器械 心電圖機(jī) 天平 棉球?qū)嶒?yàn)動(dòng)物：小鼠40只（雌雄等量，2330g）-來(lái)源、動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)方法1將小鼠隨機(jī)分為甲、乙、丙、丁、戊5組，分別為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)高劑量組、實(shí)驗(yàn)中劑量組、實(shí)驗(yàn)低劑量組，每組10只，標(biāo)記稱重。2陰性對(duì)照組：腹腔注射生理鹽水，0.1ml/10g； 陽(yáng)性對(duì)照組：腹腔注射0.1%標(biāo)準(zhǔn)鹽酸普萘洛爾，0.1ml/10g；實(shí)驗(yàn)高劑量組：腹腔注射0.2%鹽酸普萘洛爾，0.1ml/10g；實(shí)驗(yàn)低劑量組：腹腔注射0.05%鹽酸普萘洛爾，0.1ml/10g。3. 給藥20min后,逐

38、一將小鼠放入含34ml氯仿棉球的倒置燒杯內(nèi)，至出現(xiàn)呼吸停止時(shí)立即取出，記錄心電圖，也可剖開胸腔，肉眼觀察室顫發(fā)生率；對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。4. 實(shí)驗(yàn)記錄儀器采用生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)時(shí)采集與顯示，儀器參數(shù)選擇時(shí)間常數(shù)為0.02s，濾波30Hz，掃描速度80msdiv，增益為0.5mvdiv，信號(hào)輸入連接方法是用針形電極插人小鼠（或大鼠）右上肢及雙側(cè)下肢，連續(xù)地實(shí)時(shí)記錄觀察心電圖。結(jié)果記錄小鼠心電圖，觀察其室顫發(fā)生狀況。將小鼠心電情況分為以下三等并打分： 基本正常：指小鼠未發(fā)生室顫，心率正常，記為0分，心電圖如下：圖1.正常小鼠心電圖 部分心率失常：指小鼠發(fā)生心室纖顫，但保持正常心臟節(jié)律，記

39、為1分，心電圖如下：圖2.小鼠輕度室顫心電圖 室顫：指小鼠發(fā)生重度室顫，無(wú)心臟節(jié)律，記為2分，心電圖如下：圖3.小鼠室顫心電圖也就是說(shuō)，室顫越明顯，心率失常越嚴(yán)重，所得分?jǐn)?shù)越高。統(tǒng)計(jì)各組小鼠所得分?jǐn)?shù)，結(jié)果如下：表1. 小鼠心率失常得分結(jié)果編號(hào)陰性對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組高劑量組低劑量組112022211132111422215200062111721208211091220102121平均1.81.21.20.7t檢驗(yàn)，陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組比較，P=0.0220.05；高劑量組與陰性對(duì)照組比較，P=0.0480.05；低劑量組與陰性對(duì)照組比較，P=0.00小于0.05。說(shuō)明：陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低

40、劑量組與陰性對(duì)照組結(jié)果有顯著差異。t檢驗(yàn)，陽(yáng)性對(duì)照組與高劑量組比較，P=10.05；陽(yáng)性對(duì)照組與低劑量組比較，P=0.1050.05；高劑量組與低劑量組比較，P=0.1450.05。說(shuō)明：陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低劑量組之間結(jié)果無(wú)顯著差異。討論 1. 開胸腔觀察室顫，對(duì)小鼠影響比較大，所得結(jié)果不準(zhǔn)確，所以通過(guò)心電圖判斷室顫的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)中關(guān)鍵的一點(diǎn)是判斷小鼠呼吸停止，需要謹(jǐn)慎小心，小鼠暈厥后，觀察到其胸腹腔起伏不明顯至停止，即取出小鼠，記錄心電圖。 2. 為了區(qū)分鹽酸普萘洛爾的作用效果，本實(shí)驗(yàn)沒有采用單純的記錄小鼠是否發(fā)生室顫來(lái)評(píng)價(jià)藥物的作用效果。一些現(xiàn)象如心室纖顫，心律失常無(wú)室顫那么強(qiáng)烈，說(shuō)明藥

41、物也發(fā)生了一定的作用。因此評(píng)分可以體現(xiàn)藥物的輕度作用，打分越高，說(shuō)明小鼠室顫越明顯，心率失常越嚴(yán)重。3. t檢驗(yàn)結(jié)果顯示，陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低劑量組與陰性對(duì)照組結(jié)果有顯著差異，說(shuō)明各劑量的鹽酸普萘洛爾均發(fā)揮了抗心律失常作用。陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低劑量組之間結(jié)果無(wú)顯著差異，說(shuō)明各劑量的鹽酸普萘洛爾發(fā)揮抗心律失常作用的差別不大，可以調(diào)節(jié)劑量差以區(qū)分最佳劑量的范圍。推測(cè)低劑量的鹽酸普萘洛爾抗心律失常作用更好。結(jié)論陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低劑量組的鹽酸普萘洛爾均具有抗心律失常作用，但各劑量組之間抗心律失常作用差別不明顯。參考文獻(xiàn)鹽酸普萘洛爾對(duì)烏頭堿誘發(fā)大鼠心律失常模型的保護(hù)作用研究目的構(gòu)建烏頭堿誘

42、發(fā)大鼠心律失常模型，觀測(cè)給藥后大鼠心電圖變化，統(tǒng)計(jì)誘發(fā)大鼠心率失常所需時(shí)間，研究鹽酸普萘洛爾對(duì)大鼠心率失常的影響。材料藥品和試劑：20%烏拉坦溶液 鹽酸普萘洛爾注射液（0.05%，0.2%） 標(biāo)準(zhǔn)鹽酸普萘洛爾（0.1%） 6ug/ml烏頭堿溶液 生理鹽水-來(lái)源儀器和設(shè)備：心電圖機(jī) 心電圖示波器 大鼠固定臺(tái) 手術(shù)刀 止血鉗 眼科鑷 頭皮靜脈注射針頭 注射器 天平實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠20只（雌雄等量，體重175-200g）-來(lái)源方法 1將大鼠隨機(jī)分為甲、乙、丙、丁4組，分別為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)高劑量組、實(shí)驗(yàn)低劑量組，每組5只，標(biāo)記稱重。2各鼠均用烏拉坦1.2g/kg(20%溶液0.6ml/10

43、0g)腹腔注射麻醉，背位固定。在四肢皮下插入心電圖機(jī)的針形電極，作描記心電圖的準(zhǔn)備。3實(shí)驗(yàn)記錄儀器采用生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)時(shí)采集與顯示，儀器參數(shù)選擇時(shí)間常數(shù)為0.02s，濾波30Hz，掃描速度80msdiv，增益為0.5mvdiv，信號(hào)輸入連接方法是用針形電極插人小鼠（或大鼠）右上肢及雙側(cè)下肢，連續(xù)地實(shí)時(shí)記錄觀察心電圖。4各鼠均于一側(cè)腹股溝部剪毛，沿股靜脈走向剪開皮膚約1.5cm，暴露股靜脈，插入與注射器相連的頭皮靜脈注射針頭，以備注射藥物。5陰性對(duì)照組：股靜脈注射生理鹽水，0.1ml/100g； 陽(yáng)性對(duì)照組：股靜脈注射0.1%標(biāo)準(zhǔn)鹽酸普萘洛爾，0.1ml/100g；實(shí)驗(yàn)高劑量組：股靜脈注射

44、0.2%鹽酸普萘洛爾，0.1ml/100g；實(shí)驗(yàn)低劑量組：股靜脈注射0.05%鹽酸普萘洛爾，0.1ml/100g。 6各鼠均于給藥后10min，靜注烏頭堿30ug/kg(6ug/ml溶液，0.5ml/100g，1min注完)。各鼠均于注完烏頭堿后開始計(jì)算時(shí)間，用心電圖示波器監(jiān)視心電圖的變化，必要時(shí)描記心電圖。密切注意異常心率（包括室性早搏、室性心動(dòng)過(guò)速、室顫等）的出現(xiàn)時(shí)間。比較4組大鼠誘發(fā)心律失常所需的時(shí)間（從注完烏頭堿至出現(xiàn)心律失常所經(jīng)時(shí)間）的長(zhǎng)短。對(duì)照鼠的誘發(fā)心律失常所需時(shí)間一般為23min。結(jié)果實(shí)驗(yàn)過(guò)程中由于手術(shù)難度很大，本批大鼠對(duì)于實(shí)驗(yàn)室提供的烏頭堿不敏感，因此成功的個(gè)例很少，結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)小組成員討論通過(guò)，取出其中四只大鼠分別設(shè)為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組、低劑量組，改用5水合氯醛0.5mL/100g誘發(fā)大鼠心律失常，考察水合氯醛是否適合作為誘發(fā)大鼠心律失常藥物。以下為分組和造模情況：表1. 鹽酸普萘洛爾對(duì)大鼠心律失常模型的保護(hù)作用分組及造模情