1、羅紅霉素含量的荷移光譜法測定    【關鍵詞】  羅紅霉素 7 7 8 8?菜那杌?對二次甲基苯醌 荷移反應 分光光度法    Spectrophotometric determination of roxithromycin     ABSTRACT  The charge transfer interactions between roxithromycin and 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ) were inv

2、estigated by spectrophotometry. The apparent molar absorptivity of TCNQ complex is 1.57×104 L/(mol?cm) at 743nm, and 2.93×104 L/(mol?cm) at 844 nm; the result obeys Beers law in the concentration range of 055 mg/L. The relative standard deviation of the method is 1.0% (n=6). The compositio

3、n of complex of roxithromycin with 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane is 12. This proposed method has been applied to the determination of roxithromycin in tablets with satisfactory results.    KEY WORDS  Roxithromycin;  7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ);  Charge?tr

4、ansfer reaction;  Spectrophotometry     荷移反應是指由富電子和缺電子物質形成電荷轉移絡合物的反應，基于某些物質生成的荷移絡合物具有特定的顏色、最大吸收波長等特性，可測定物質的含量。利用荷移光譜法可測定藥物19、尼古丁10、有機溶劑中微量水11，12含量等，由于此法簡便、快速，試劑穩定，重現性好，因此在藥物分析上有廣泛的應用前景。羅紅霉素為大環內酯類抗生素，主要作用于革蘭陽性菌、厭氧菌、衣原體等。目前測定羅紅霉素的方法有效價法13、伏安法14、SP法15、HPLC法16等， 但未見文獻報道以7，7，8，8?

5、菜那杌?對二次甲基苯醌(TCNQ)為荷移試劑測定羅紅霉素。本文應用分光光度法研究了TCNQ與羅紅霉素的荷移反應，確定了利用該反應測定羅紅霉素含量的分析方法，并成功地用于藥物中羅紅霉素含量的測定，與藥典法對照，測定結果準確。    1  實驗部分    1.1  主要試劑與儀器    TCNQ(Sigma公司產品)丙酮溶液： 5.0×10-3mol/L；標準羅紅霉素(羅紅霉素對照品，購自中國藥物生物制品檢定所)：1.0×10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、無水乙醇、丙酮

6、、氯仿等有機試劑均為分析純。羅紅霉素片(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，批號05011251；江蘇亞邦愛普森藥業有限公司，批號0411129)。實驗用水均為二次蒸餾水。    UV?2401PC型紫外可見分光光度計(日本島津)；HHS?21?Ni型恒溫水浴(北京靖衛科學儀器廠)。    1.2  實驗方法    準確移取一定量羅紅霉素(1.0×10-4mol/L丙酮溶液)于10ml比色管中，加入5.0×10-3mol/L TCNQ丙酮溶液2.00ml。用丙酮稀釋至刻度，搖勻后于30

7、反應20min，冷卻至室溫，用對應試劑空白為參比，用1cm比色皿分別在743和842nm處測吸光度。    2  結果與討論    2.1  羅紅霉素吸收光譜    按1.2實驗方法配制溶液，以相應的試劑空白為參比，繪制吸收光譜。試驗表明，羅紅霉素與TCNQ形成的絡合物分別在波長743、844nm處有兩個吸收峰，試劑在此波長范圍內吸收較小，羅紅霉素在此波長范圍內無吸收(Fig.1)。    2.2  反應溫度的影響  

8、0; 分別在1060恒溫一定時間后測量荷移絡合物的吸光度，研究溫度對荷移反應的影響。試驗表明，反應的最佳溫度為30。    2.3  反應時間的影響    控制反應溫度為30，分別選擇反應時間為1050min，測定溶液吸光度，研究反應時間對生成絡合物的影響。試驗表明，最佳時間為20min。絡合物在室溫下放置，120min內溶液的吸光度穩定。    2.4  試劑用量的影響    改變試劑用量，研究試劑用量對反應的影響。實驗表明，隨著試劑用量的增加，荷移絡合

9、物的吸光度增大，當試劑用量達到一定時，溶液的吸光度基本保持不變，說明荷移反應趨于完全。適宜試劑用量為2.00ml。    2.5  溶劑的影響    分別用甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等作溶劑，研究溶劑對反應的影響。實驗表明，以丙酮作溶劑為好，其荷移絡合物吸光度最大且穩定。    2.6  方法的重現性    移取6份羅紅霉素進行測定，測定結果的相對標準偏差為1.0%，說明方法重現性較好。    2.7  絡合物組成的

10、測定    應用等摩爾連續變化法和平衡移動法測得羅紅霉素與TCNQ反應生成的荷移絡合物的組成比均為12(Fig.2，Fig.3)。    2.8  反應機理    TCNQ是缺電子試劑，羅紅霉素是一種富電子物質，其氮原子上的孤對電子能夠與7，7，8，8?菜那杌?對二次甲基苯醌形成n?撥行禿梢坡綰銜錚?根據測得絡合物組成比為12，推測其形成機理見Fig.4。百事通     C (Roxithromycin)+(TCNQ)=1.0×10-3mol/L 

11、;   Fig.2    The determination of the comples formation by    the continous variation method of equivalent mole    C (Roxithromycin)=1.0×10-4mol/L;    C (TCNQ)=1.0×10-3mol/L    Fig.3    The

12、determination of the comples formation by    the equilibrium movement methodFig.4           2.9  標準曲線    按實驗確定的最佳條件配制溶液并進行反應，在各自的最大吸收波長下測定荷移絡合物的吸光度，將測得的數據作統計處理，繪制工作曲線，得到回歸方程及線性范圍，結果見Tab.1。    3 

13、樣品的測定    3.1  樣品的準備    取不同廠家生產的羅紅霉素各10片(標示量均為每片150mg)，精確稱量后研磨混勻，然后準確稱取總量的十分之一，用丙酮溶解，過濾，棄去不溶物。濾液于100ml容量瓶中定容備用。    3.2  樣品的測定    取適量上述制備好的樣品試液于10ml比色管中，按實驗方法在max處進行測定，另按藥典方法測定相同藥物制劑含量，并用標準加入法作回收率實驗。結果表明制劑中輔料對測定基本無影響(Tab.2)。 【參

14、考文獻】  1 Feng Y, Zhao F L, Tong S Y. The charge transfer reaction between chlorpheniraminum and 7,7,8,8?tetracyanoquinodemethane J. Chin J Anal Chem(分析化學),2003,31(11):13272 Wang M, Liu Z Y, Cui C Y. Determination of pipemidic acid by charge?transferred spectral method J. Chin J Anal Chem(分析化學),2

15、001,29(8):9863 Zhao F L, Xu B Z, Tong S Y. Spectrophotometric determination of ofloxacin based on charge?transfer reaction J. Chin J Anal Chem(分析化學),1998,26(7):8404 Wang S Y, Cheng X M, Hou Z. Spectrophotometric determination of enoxac in tablet based on charge?transfer reaction J. Chin J Antibiot(中

16、國抗生素雜志),2005，30(3):1765 Tian S X, Jiang Y, Xie Z, et al. Spectrophotometric determ ination of azithromyc in tablets dissolution by charge?transfer complex with alizar in red J. Chin J Antibiot(中國抗生素雜志),2005，30(9):5336 Zhao Y Q, Li H K, Zhao G Z. Spectrophotometric determination of erythromycin ethyl

17、succinate based on the charge transfer reaction between erythromycin ethylsuccinate and quinalizarin J. Chin J Modern App Pharm(中國現代應用藥學),2005,22(3):2297 Li H K, Zhao Y Q，Wang Y H, et al. Spectrophotometric determination of azithromycin based on the charge transfer reaction between azithromycin and

18、alizarin J. Chin J Anal Chem(分析化學),2004,32(5):5988 Huang W, Liu X J, Zhang Y Y. Study on the spectral determination of amoxicillin with charge transfer reaction J. Chin J Spec Lab(光譜實驗室),2005,22(1):219 Huang W, Liu X J, Zhao F L. Spectrophotometric determination of azithromycinbase by charge transfer reaction J. Spect Spectral Anal(光譜學與光譜分析),2006,26(5):91310 Huang W. Determination of nicotine tobacco by charge?transferred spectral method J. J Jilin University(Physics)(吉林大學學報(理學版),2004,42(2):28711 Liu X J, Li N, Zhao F L, et al. Spectrophotometric determination of micro