1、阿維菌素類藥物殘留分析技術(shù)提取方法 21.1.4.1 前處理辦法 動物源食品基質(zhì)主要包括動物組織、牛奶、水產(chǎn)品等，成分復(fù)雜，在對殘留avms舉行分析測定前，普通需要舉行樣品前處理，將痕量avms從復(fù)雜基質(zhì)中富集出來。 (1)提取辦法 在樣品提取前，必需舉行充分的均一化，以保證樣品的代表性。在加入溶劑提取時，多數(shù)是用法均質(zhì)器舉行提取，以保證提取效率。avms常用的提取辦法主要有液液萃取(lle)、加壓溶劑萃取(ple)、簇擁液液微萃取(dllme)和超臨界流體萃取(sfe)。 1)液液萃取(liquid liquid extraction，lle) 鑒于avms的高脂溶性，可用多種有機溶劑舉行提

2、取，水溶性的有機溶劑如、，與基質(zhì)的互溶性較好；、也有采納。 楊君宏等采納乙腈振蕩提取牛肌肉組織中的avm、ivm和epr，酶聯(lián)免疫(elisa)試劑盒測定。空白牛肌肉組織中以5ng/g、10ng/g和20ng/g濃度添加時，avms回收率為70.9%108.6%，變異系數(shù)(cv)為3.7%17.1%。王亮用乙腈高速(10000r/min)勻漿提取牛肉中ivm殘留，沉淀物用乙腈重復(fù)提取，經(jīng)固相萃取凈化后，高效液相色譜法(hplc)測定。辦法檢出限(lod)為0.05g/ml，在1100g/ml范圍內(nèi)，回收率在75.9%96.3%之間。鄭衛(wèi)東等建立了豬肝臟中avm和ivm殘留量的檢測辦法。豬肝樣品

3、均質(zhì)后用乙腈提取，固相萃取柱凈化后，采納液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(lc-ms/ms)檢測。該辦法lod均為2.0ug/kg，定量限(loq)為5.0ug/l；在添加水平220g/kg范圍，avm和ivm的平均回收率分離為77.0%83.3%和76.9%79.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(rsd)分離小于12.1%和13.0%。盧志曉等采納乙腈提取凍蝦中avm、ivm、dor和epr殘留，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(uplc-ms/ms)測定。4種分析物在2g/kg、10g/kg、20g/kg加標(biāo)水平的平均回收率為75.1%92.5%，rsd為6.78%9.89%；四種avms的lod均可達到0.5g/kg。賈

4、方等用乙腈提取牛筋樣品中的avm和ivm，經(jīng)固相萃取柱凈化和衍生化后，用hplc分析。avm和ivm的lod分離為2.54.0ng/g；在3個加標(biāo)濃度水平下，avm和ivm的回收率在81.6%101.0%和101.5%102.4%之間，rsd均不大于2.0%。 程林麗等用乙腈提取牛奶中殘留的avm、ivm、dor和epr，加水和微量稀釋，固相萃取柱凈化，氮氣吹干并衍生化后，用hplc測定。在21000ug/kg添加范圍，各藥物的回收率為70.2%110.4%，批內(nèi)cv為3.9%8.2%，批間為5.1%8.2%；epr、avm、dor和ivm的lod依次為0.5g/kg、0.5g/kg、0.4g

5、/kg和0.2g/kg，loq依次為1.8g/kg、1.6ug/kg、1.3g/kg和0.8g/kg。石鮮艷等用乙腈作為血漿中蛋白質(zhì)的沉淀劑和dor的提取劑，離心后上清液旋轉(zhuǎn)蒸干，固相萃取凈化后，hplc測定。辦法lod為0.1ng/ml；樣品的回收率為89.5%95.67%，不同濃度水平的日內(nèi)cv和日間cv分離小于4%和5%。汪芳等建立了犬血漿中sel含量的檢測辦法。用乙腈作為血漿蛋白沉淀劑，固相萃取柱舉行凈化，hplc檢測。辦法的lod為0.25ng/ml，cv為1.47%3.31%，樣品平均回收率為94.0%。 張文娟等建立了10種食品基質(zhì)中avm、ivm、dor、epr、mox和sel

6、的殘留分析辦法。采納乙腈提取，經(jīng)固相萃取凈化后，uplc-ms/ms測定。3個添加水平下，6種藥物的回收率在60%99%之間，rsd為0.2%8.9%；6種藥物的loq均達5.0g/kg。張睿等建立了同時檢測動物源性食品中的avm、ivm、dor、mox殘留量的辦法。樣品經(jīng)乙腈提取，固相萃取小柱凈化和衍生后，再用hplc舉行檢測。辦法lod達到0.001mg/kg，回收率在92%101%之間。 楊君宏等采納甲醇震蕩提取牛肝中的avm、ivm和epr，elisa試劑盒測定。空白牛肝臟組織中以20ng/g、50ng/g和100ng/g濃度添加時，avms回收率為53.8%80.4%，cv為3.4%

7、17.9%。massarollo等建立了蜂蜜中avm的測定辦法，采納甲醇-乙酸乙酯-正已烷提取，固相萃取凈化后，hplc測定。辦法回收率為73.4%97.45%，rsd在0.91%13.7%之間；lod和loq分離為0.002和0.007mg/kg。 徐英江等討論了水產(chǎn)品中ivm、avm、epr、dpr的分析辦法。樣品用異辛烷舉行提取，經(jīng)液液萃取凈化和衍生后，hplc檢測。全部藥物的lod均能達到1.0g/kg。在添加150g/kg濃度范圍，平均回收率為78.9%106%，rsd為5.8%11.2%。hino等采納異辛烷提取牛組織中的avm及其代謝物、ivm、epr、dor和mox殘留，lc-

8、ms/ms測定，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。辦法回收率在87.9%99.8%之間，日內(nèi)精密度為1.5%7.4%，日間為1.5%8.4%。 2)加壓溶劑萃取(pressurized liquid extraction，ple) ple是指在較高的溫度(50200)和壓力(10003000psi或10.320.6mpa)下，用溶劑萃取固體或半固體樣品的新額的樣品前處理辦法。與傳統(tǒng)提取方式相比，ple速度快、溶劑用量少、萃取效率高、待測組分回收率好，可實現(xiàn)全自動平安操作。xia等采納加壓溶劑萃取(ple)提取牛組織中的4種avms。以乙腈-水(40+60，v/v)為提取溶劑，在100、10mpa下兩個靜態(tài)

9、周期提取3分鐘，提取液經(jīng)固相萃取凈化和衍生后，hplc檢測。該辦法回收率為84.8%101.8%，rsd小于10.8%；lod和loq分離為0.10.2g/kg和0.50.6g/kg。 3)簇擁液液微萃取(dispersive liquid liquid microextraction，dllme) dllme是2006年才問世的一種新型微萃取技術(shù)。它基于用法微量注射器將微升級萃取劑迅速注入樣液內(nèi)，在簇擁劑-水相內(nèi)形成萃取劑微珠，很大地擴展了有機萃取劑和水樣之間相接觸面，大大加快了萃取平衡的速度，使目標(biāo)化合物快速萃入萃取劑微珠內(nèi)，提高了萃取效率和富集倍數(shù)。campillo等采納dllme提取奶

10、中的epr、avm、dor、mox和ivm。樣品采納溶液沉淀蛋白，再用2ml乙腈-氯仿(9+1，v/v)提取，hplc和lc-ms/ms測定hplc辦法的loq為1.04.7ng/g，lc-ms/ms為0.12.4ng/g；在0.550ng/g添加濃度范圍，辦法回收率為89.5%105%，rsd小于9%。 4)超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction，sfe) sfe是20世紀(jì)70年月末進展起來的一種新型物質(zhì)分別技術(shù)，它是-種利用超臨界狀態(tài)下的流體作為提取劑舉行萃取的辦法，與傳統(tǒng)萃取法相比離效率高，可通過轉(zhuǎn)變溫度、壓力或添加少量的有機溶劑，優(yōu)化萃取過程，提高

11、提取效率。超臨界流體co2的用法相對較多，具有低毒、低成本、易處理、化學(xué)穩(wěn)定性好、易于達到臨界參數(shù)(臨界溫度31，臨界壓力74bar)等特點。sfe能同時完成萃取和分別，其分別效率高，操作周期短，傳質(zhì)速度快，溶解力強，挑選性高，且不污染環(huán)境。danaher等報道了采納sfe技術(shù)提取凈化動物肝臟中avm、ivm、epr、dor和mox殘留的分析辦法。將2.5g勻漿后的樣品與4g硅藻土混勻，脫水干燥后，放入兩端封有聚丙烯棉和2g堿性的萃取池。在100、300bar下用超臨界co2萃取，流速5l/min、avms被在線堿性氧化鋁阱吸附，再用4ml甲酸-乙酸乙酯(70+30，v/v)洗脫，60下氮氣濃縮，衍生后，用hplc測定。在4g/kg和20g/kg添加濃度，該辦法平均