1、肝膽病醫院 尿素氮測定（速率法）程序1. 概述尿素是人體內蛋白氮代謝的終產物，它構成了血液中絕大部 分的非蛋白氮。尿素產生于肝臟，經過腎臟排泄至尿中，因 此尿素的含量取決于蛋白質的攝入量，蛋白質分解代謝和腎 功能。2. 標本的手收集新鮮無溶血標本， 血清或血漿樣本均不溶血。 血漿樣本只 能采用肝素或 EDTA 抗凝。樣本在 4 攝氏度可穩定 7 天。采 血前病人應禁食 12 小時，采集靜脈 3ml, 待凝固后（最好放 在 37 攝氏度水浴箱內 45 分鐘）通常為加抗凝劑的血液在 30-60 分鐘凝血析出血清。 3000r/min 離心 5-10 分鐘， 分離出 血清備用。不建議采用血漿標本。3

2、. 方法原理 樣品中的尿素在試劑中脲酶的催化下與水反應生成氨和二 氧化碳，生成的氨與試劑中的酮戊二酸在谷氨酸脫氫酶的催 化下產生谷氨酸， 同時 NADH 被氧化為 NAD+ ，從而使 340nm處的光吸收值下降。通過監測 340nm 處光吸收值下降的速 率，可計算出樣品中尿素的濃度。4. 劑來源，配置及儲存試劑來源： 試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使 用。啟用后在 2-8 度可穩定 30 天。 若試劑混濁， 或以蒸餾水 為空白在 340nm 處的光吸收值低于 1.0A, 應予丟棄。試劑儲存：試劑避光儲存 2-8 攝氏度可穩定至標簽所 示失效期。5. 分析儀器CS-600B 全自動

3、生化分析儀分析參數：樣品量 3u/l 試劑量：第一試劑 240 u/l （R1）； 第二試劑 60 u/l測光點 2126 測定模式：兩點速率法 負反 應分析波長：340nm/405nm（主波長/副波長）6. 計算方法樣本濃度（mmol/L ）=樣本管吸光度的變化x校準液濃度（mmol/L ）校正管吸光度的變化7. 線性范圍：本實驗的線性范圍：0-35mmol/L8. 參考范圍：2.82-8.2 mmol/L9. 失控控理1:立即重測同一質控品，如重測后結果仍不再允許范圍， 請進行下一步。2:新開一瓶質控品，重測失控項目，如新開的質控血清結 果正常，那么原來質控血清可能過期或在室溫防止時間過長

4、 而變質，如結果仍不再允許范圍，則進行下一步。3：進行儀器維護，重測失控項目。檢查儀器狀態，查明光源是否更換，比色杯是否需要清洗或更換？對儀器進行清洗等維護。另外還要檢查試劑，此時可更換試劑已查明原因。 如果結果仍不再允許范圍內，則進行下一步。4：重新校準。重測失控項目。用新的校準液校準儀器，排 除校準液的原因。5：請專家幫助。如果前五步都為能得到在控結果，那可能 是儀器或試劑已查明原因，只有和儀器或試劑廠家聯系請求 他們的技術支援。10. 注意事項1：試劑和樣本用量可根據不同儀器要求按比例改變。2：如測試結果超出線性范圍，樣本應稀釋后測試，調 整因子數或將結果乘以稀釋倍數。3：結果的準確性儀

5、器校正和測定溫度，時間的控制。4：由醫生根據臨床癥狀和其他實驗結果做出臨床診斷。11. 臨床意義血尿素氮增高：（1）腎性增高見于急性腎炎、慢性腎炎、中毒性腎炎、 嚴重腎盂腎炎、腎結核、腎 血管硬化癥、先天性多囊腎和 腎腫瘤等引起的腎功能障礙。 血尿素氮高，尤其對尿毒癥 的診斷有特殊價值，其增高程度與病情嚴重性成正比，如腎 功能不全氮質血癥期血尿素氮超過 9mmol/L ，至尿毒癥期 B 血尿素氮（ BUN ）可超過 20mmol/L ，有助于病情的估計。（ 2）腎前性增高見于充血性心力衰竭、 重度燒傷、 休克、 消化道大出血、脫水、嚴重感染、糖尿病酸中毒、腎上腺皮 質功能減退、肝腎綜合征等。（3）腎后性增高見于因尿路梗阻增加腎組織壓力，使腎 小球濾過壓