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1、抗凝 : 用化學(xué)或物理的方法,抑制或除掉血液中某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。抗凝劑 :能夠阻止血液凝固的物質(zhì)。血細(xì)胞比容 HCT :一定體積的全血中紅細(xì)胞所占體積的相比照例。血沉 ESR :又稱紅細(xì)胞沉降率,在規(guī)定條件下,離體抗凝全血中的紅細(xì)胞自然下沉的速率。網(wǎng)織紅細(xì)胞 Ret, RET :介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡階段細(xì)胞,略大于成熟紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)核糖核酸,源自有核紅細(xì)胞,RNA是嗜堿性物質(zhì),經(jīng)堿性染粒活體染色后,形成藍(lán)色或紫色的點(diǎn)粒狀或絲網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)沉淀物。核左移 :外周血液的中性桿狀粒細(xì)胞增多或和出現(xiàn)晚幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞,甚至早幼 粒細(xì)胞的現(xiàn)象。核右移 :外
2、周血中性分葉核粒細(xì)胞增多,并且五葉核以上的中性粒細(xì)胞超過(guò)3%的現(xiàn)象。中毒顆粒 :在嚴(yán)重感染與大面積燒傷等情況下, 中性粒細(xì)胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)比正常中性顆粒粗 大、大小不等、 分布不均的紫黑色或深紫褐色顆粒,有時(shí)顆粒很粗大, 與嗜堿性粒細(xì)胞易混 淆,有時(shí)又小而稀少,散雜在正常中性顆粒中。異型淋巴細(xì)胞 :在病毒、原蟲感染,藥物反響,結(jié)締組織疾病、應(yīng)激狀態(tài)或過(guò)敏原等因素刺 激下,淋巴細(xì)胞增生并發(fā)生形態(tài)上的變化,表現(xiàn)為胞體增大、胞質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng)、細(xì)胞 核母細(xì)胞化。出血時(shí)間BT:皮膚小血管被刺破后,血液自行流出到自然停止的時(shí)間凝血酶原時(shí)間 PT :在體外模擬體外源性凝血的全部條件,測(cè)定血漿凝固所用時(shí)間。
3、 活化局部凝血活酶時(shí)間 APTT :在體外模擬體源性凝血的全部條件,測(cè)定血漿凝固所用 時(shí)間。凝血酶時(shí)間 TT :反響血漿中纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)榍袄w維蛋白的篩檢指標(biāo)之一。D-二聚體D-D:交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物之一。一期止血缺陷:血管壁和血小板缺陷所致的出血性疾病,常用篩檢試驗(yàn)有BT和PLT。二期止血缺陷 :凝血因子缺陷或存在病理性抗凝物質(zhì)所致的出性疾病,常用篩檢指標(biāo)有 PT、APTT。纖溶亢進(jìn)性出血 :纖維蛋白 原等被纖溶酶降解所引起的出血, 常用篩檢指標(biāo)有 FPD、D-D。 血型 :血液各種成分抗原的遺傳性狀正定型 :用的特異性標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞的未知血型抗原稱為反定型 :用血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查
4、標(biāo)本中的未知血型抗體稱為Rh陽(yáng)性:臨床上將表達(dá)D抗原的紅細(xì)胞稱為交叉配血試驗(yàn) :在血型鑒定的根底上, 進(jìn)一步檢查受血者和供血者血液中是否含有不相配的 抗原和抗體成分的試驗(yàn)。主側(cè) :交叉配血試驗(yàn)中,受血者血清與供血者紅細(xì)胞的反響管稱為次側(cè) :交叉配血試驗(yàn)中,受血者紅細(xì)胞與供血者血清的反響管稱為紅細(xì)胞體積分布寬度 RDW :紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),即反響紅細(xì)胞大小不均的客觀指 標(biāo)。多采用RDW-CV和RDW-SDI示。乙二胺四乙酸鹽EDTA :用途:全血細(xì)胞計(jì)數(shù),離心法HCT測(cè)定作用:與血液中Ca2+ 結(jié)合成螯合物,凝血過(guò)程中斷注意:抗凝劑用量和血液比例,采血后須立即混勻枸櫞酸鹽:血沉、凝血試驗(yàn)、
5、血液保養(yǎng)液與血液中Ca2+吉合抗凝能力相對(duì)較弱,抗凝劑濃度、體積和血液比例非常重要肝素:可用于血漿的生化、免疫工程,如血?dú)夥治觯桓嗡劁囘m用于紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)、 微量離心法HCT測(cè)定加強(qiáng)抗凝血酶滅活絲氨酸蛋白酶,阻止凝血酶形成電極法測(cè)血鉀與血清結(jié)果有差異;不是和血常規(guī)檢查Wright 染色原理 : 1 物理吸附與化學(xué)親和作用 堿性物質(zhì):與伊紅結(jié)合染成紅色,該物質(zhì)稱為嗜酸性物質(zhì),如血紅蛋白與嗜酸性顆粒 酸性物質(zhì): 與亞甲藍(lán)結(jié)合染成藍(lán)紫色, 該物質(zhì)稱為嗜堿性物質(zhì), 如淋巴細(xì)胞質(zhì)與嗜堿性顆粒中性顆粒:呈等電狀態(tài),與伊紅、亞甲藍(lán)均結(jié)合,染成淡紫紅色,為中性物質(zhì)細(xì)胞核:主要由DNA和堿性強(qiáng)的組蛋白等組成
6、, 后者與伊紅結(jié)合染成紅色, 但因細(xì)胞核中含 有少量弱酸性物質(zhì), 與亞甲藍(lán)作用染成藍(lán)色, 因含量太少,藍(lán)色反響極弱, 故細(xì)胞核被染成 紫紅色紅細(xì)胞:原始紅細(xì)胞和早幼紅細(xì)胞胞質(zhì)含有較多酸性物質(zhì),與亞甲藍(lán)親和力強(qiáng), 故染成較濃厚藍(lán)色晚幼紅細(xì)胞和 Ret含有堿性物質(zhì)和酸性物質(zhì), 能與伊紅、亞甲藍(lán)結(jié)合,故染成紅 藍(lán)色或灰紅色成熟紅細(xì)胞的酸性物質(zhì)完全消失,只與伊紅結(jié)合,染成橙紅色2pH影響:血細(xì)胞多種成分屬于蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液pH而定。因此,血細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感。染色時(shí)常用緩沖液pH6.46.8 來(lái)調(diào)節(jié)染色時(shí)的pH,以到達(dá)滿意的染色結(jié)果紅細(xì)胞平均指數(shù):紅細(xì)胞平均體積
7、MCV、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量MCH、紅細(xì)胞平均血 紅蛋白濃度MCHCMCV紅細(xì)胞群體中單個(gè)紅細(xì)胞體積的平均值MCH細(xì)胞群體中單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白含量的平均值MCHC全部紅細(xì)胞血紅蛋白濃度的平均值庫(kù)爾特原理電阻抗原理:懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞相對(duì)于電解質(zhì)溶液為非導(dǎo)電顆粒, 當(dāng)體積不同的血細(xì)胞或類似顆粒通過(guò)計(jì)數(shù)孔時(shí),可引起小孔管、外兩電流或電壓的變化, 形成與血細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)、 體積大小相應(yīng)的脈沖電壓,從而間接區(qū)分出血細(xì)胞群,并分別進(jìn)行計(jì)數(shù)。光化學(xué)檢測(cè)原理激光散射法:將稀釋、染色化學(xué)染色或核酸熒光染色、球形化的細(xì)胞懸液注入鞘液流中央,單個(gè)細(xì)胞沿著懸液和鞘液流兩股液流整齊排列,以恒定流速定向通過(guò)石英毛
8、細(xì)管。當(dāng)細(xì)胞或顆粒通過(guò)激光束被照射時(shí),因其本身的特性體積、染色程度、細(xì)胞容物大小與含 量。細(xì)胞和密集度等,可阻擋或改變激光束的方向,產(chǎn)生與其特征相應(yīng)的各種角度的散射光。放置在石英毛細(xì)管周圍不同角度的信號(hào)檢測(cè)器光電倍增管可接收特征各異的散射光。白細(xì)胞五分類計(jì)數(shù)原理:1多角度激光散射法前向散射光:反響細(xì)胞體積大小WBC/BAS通道側(cè)向散射光:反響細(xì)胞含物的多少和性質(zhì),特別是細(xì)胞核/質(zhì)復(fù)雜程度和顆粒DIFF與WBC/BAS通 道側(cè)向熒光強(qiáng)度:與細(xì)胞 DNA和RNA的含量有關(guān)DIFF通道2容量、電導(dǎo)、光散射VCS分類法V:利用電阻抗法測(cè)量細(xì)胞體積C:電導(dǎo)性測(cè)量細(xì)胞核、核質(zhì)比、細(xì)胞顆粒大小和密度S:光散
9、射區(qū)別細(xì)胞顆粒的構(gòu)型和顆粒質(zhì)量3阻抗和射頻法 Neu:溶解、萎縮Neu以外的所有細(xì)胞,然后計(jì)數(shù) Bas:溶解、萎縮其他細(xì)胞得到 Bas數(shù)量 Lym Mon粒細(xì)胞包括N、E、B:采用電阻抗和射頻聯(lián)合檢測(cè) 幼稚細(xì)胞:基于幼稚細(xì)胞膜上脂質(zhì)比成熟細(xì)胞少的特征檢測(cè)4多角度偏振光散射分類法MAPS 0前角光散射,粗略測(cè)定細(xì)胞大小 7°狹角光散射,測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與其復(fù)雜性相對(duì)指征 90°垂直光散射,主要對(duì)細(xì)胞部顆粒和細(xì)胞分葉進(jìn)行測(cè)量 90°偏振光散射,將嗜酸性粒細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和其他細(xì)胞中別離出來(lái)5光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合分類法 過(guò)氧化物酶染色:過(guò)氧化物酶活性依次為E> N>
10、; M> L、B 無(wú)酶活性 光散射:細(xì)胞體積大小 特殊的嗜堿性粒細(xì)胞稀釋液處理,計(jì)數(shù)嗜堿性粒細(xì)胞鎢光源散射與細(xì)胞化學(xué)方法 POX染色通道:過(guò)氧化物酶活性依次為 E> N> L、B 無(wú)酶活性,可計(jì)算過(guò) 氧化物酶平均指數(shù)MPXI得到E、N、M的相對(duì)POX舌性,形成以POX分布強(qiáng)度為 X軸、以細(xì)胞體積為Y軸的散點(diǎn)圖,進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類 嗜堿性粒細(xì)胞/核分葉性通道:苯二酸完全破壞紅細(xì)胞和血小板,除嗜堿性粒 細(xì)胞外,其他白細(xì)胞膜溶解外,胞質(zhì)溢出,僅剩裸核。完整嗜堿性粒細(xì)胞呈高角 度散射,位于散點(diǎn)圖上部,裸核位于下部,可進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì) 數(shù)。根據(jù)不同細(xì)胞裸核進(jìn)行分類,根據(jù)
11、分葉核PMN和單個(gè)核MN的比例, 可計(jì)算出核左移指數(shù)。 未染色大細(xì)胞計(jì)數(shù)LUC檢測(cè):在POX®道,可檢測(cè)到無(wú)POX活性、體積大 于正常淋巴細(xì)胞體積平均值2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的細(xì)胞,如異型淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、毛細(xì) 胞、幼稚淋巴細(xì)胞和原始細(xì)胞。白細(xì)胞直方圖:電阻抗型血液分析儀,在35450fl圍將白細(xì)胞分為三群。正常 白細(xì)胞直方圖左側(cè)高陡,通道在 3595fl為細(xì)胞群峰主要是淋巴細(xì)胞;最右 側(cè)峰低寬,通道在160450fl為大細(xì)胞群峰主要是中性粒細(xì)胞,包含中性桿狀 核細(xì)胞和中性晚幼粒細(xì)胞;左右兩峰之間較平坦區(qū)有一個(gè)小峰,為中間細(xì)胞群主要是單個(gè)核細(xì)胞,以單核細(xì)胞為主,也含有嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞等第
12、四章尿液標(biāo)本采集與處理晨尿:是指清晨起床后、未進(jìn)早餐和做運(yùn)動(dòng)之前第一次排出的尿液。表7-2臨床常用尿液標(biāo)本的種類與用途標(biāo)本定義特點(diǎn)用途晨尿清晨起床后的第1次尿標(biāo)濃縮、酸化,有形成分多,hCG尿液有形成分、化學(xué)成分的檢本濃度高驗(yàn)隨機(jī)尿任意時(shí)間的尿標(biāo)本標(biāo)本易得、新鮮、成分不穩(wěn)定門診、急診檢驗(yàn)餐后尿午餐后2h尿標(biāo)本尿膽原、尿糖、蛋白質(zhì)成分高檢驗(yàn)蛋白尿、尿膽原和糖尿3h尿上午6 9時(shí)尿標(biāo)本有形成分排泄率檢驗(yàn)12h尿晚8時(shí)次晨8時(shí)尿標(biāo)本12h有形成分計(jì)數(shù)24h尿晨8時(shí)次晨8時(shí)尿標(biāo)本化學(xué)成分定量培養(yǎng)尿標(biāo)本用無(wú)菌容器只留取中間時(shí)無(wú)菌操作采集病原生物學(xué)培養(yǎng)、鑒定與藥物段的尿液敏感試驗(yàn)恥骨上穿刺采用恥骨上穿刺術(shù)
13、采集的無(wú)菌術(shù)采集尿液標(biāo)本病原生物學(xué)培養(yǎng)、鑒定與藥物尿標(biāo)本標(biāo)本敏感試驗(yàn)第五早尿液一般檢查尿液理學(xué)選擇和判斷1.尿量p137參考值成年人:1-2L24h即1mlh kg,兒童按體重計(jì)算尿量,大約為成人的3-4倍_2.顏色和透明度參考值:淡黃色、清晰透明。P1373 臨床意義1 生理變化:大量飲水、寒冷時(shí)尿量增多那么尿色淡;飲水少、運(yùn)動(dòng)、岀汗等時(shí)尿量少而尿色深。 食用大量胡蘿卜、木瓜等可使尿液呈深黃色,食用蘆薈那么尿液呈紅色。女性月經(jīng)血污染也可使尿液呈紅 色。藥物對(duì)尿液顏色也有一定的影響,其影響見表2病理變化:主要有:血尿:尿液含有一定量的紅細(xì)胞時(shí)稱血尿。由于出血量不同可呈淡紅色云霧狀、洗肉水樣或混
14、有血凝塊。每升尿含血量超過(guò) 1mL即可出現(xiàn)淡紅色,稱肉眼血尿。血紅蛋白尿:血管溶血時(shí)血漿游離血紅蛋白增多,超過(guò)肝珠蛋白結(jié)合能力約1.3g/L ,因其分子量較小,可通過(guò)腎小球?yàn)V岀而形成血紅蛋白尿。血紅蛋白尿需要與血尿以與卟啉尿、藥物、食物引起的紅色 尿液鑒別表8-4 表8-4血紅蛋白尿、血尿、假性血尿的鑒別工程血紅蛋白尿血尿假性血尿原因血管溶血泌尿生殖系統(tǒng)疾病、全身性疾病劇烈運(yùn)卟啉、藥物、食物動(dòng)后一過(guò)性顏色暗紅色、棕紅色甚至醬油色淡紅色云霧狀、洗肉水樣或混有血凝塊紅葡萄酒色、紅色顯微鏡檢驗(yàn)無(wú)紅細(xì)胞大量紅細(xì)胞無(wú)紅細(xì)胞離心上清液紅色清或微紅紅色隱血試驗(yàn)陽(yáng)性陽(yáng)性陰性尿蛋白定性試驗(yàn)陽(yáng)性弱陽(yáng)性或陰性陰性3
15、.氣味正常尿液有來(lái)自尿的揮發(fā)性酸的氣味。尿液長(zhǎng)時(shí)間放置后可岀現(xiàn)氨臭味。生理情況下,進(jìn)食太多的蘆 筍有燃燒硫磺的氣味,進(jìn)食蒜、蔥、韭菜或飲酒過(guò)多、服二巰丙醇艾類藥物亦可使尿液呈特殊氣味。新鮮 尿液出現(xiàn)異常氣味的原因見表 8-8。表8-8新鮮尿液出現(xiàn)異常氣味的原因尿液氣味原因氨味慢性膀胱炎與慢性尿潴留腐臭味泌尿系感染或晚期膀胱癌大蒜臭味有機(jī)磷中毒鼠臭味苯丙酮尿癥蘋果樣氣味糖尿病酮癥酸中毒4. 比重p139尿液比重是指在 4C條件下尿液與同體積純水的重量之比,尿比重又稱為尿比密,常用比重計(jì)檢測(cè)。 尿比重與尿液的溶質(zhì)成正比,受年齡、飲水量、排尿量、岀汗量與飲食、氣溫的影響。1檢測(cè)方法:測(cè)定尿比重方法有
16、:浮標(biāo)法尿比重計(jì)法、化學(xué)試帶法、折射計(jì)法、稱量法、超聲波法等。4參考值:晨尿或通常飲食條件下:1.0151.025。隨機(jī)尿:成人 1.0031.035 至少有1次在1.023或以上,1次在1.003或以下;新生兒1.0021.004。5. 尿滲量 尿滲量又稱尿滲透量,是指尿液中具有滲透活性的全部溶質(zhì)顆粒分子或離子等的總數(shù)量,主要與尿液中粒子大小與所帶電荷有關(guān),是評(píng)價(jià)腎臟濃縮功能較好的指標(biāo)。3參考值:尿滲量: 6001000mmol/kg H2O相當(dāng)于 SG1.0151.025 。尿滲量/血漿滲量之 比為3.0 4.5 : 1。第二節(jié)尿液化學(xué)檢查和第四節(jié)尿液干化學(xué)分析儀1 .試劑帶 1結(jié)構(gòu):第一
17、層尼龍膜:起保護(hù)作用,防止大分子物質(zhì)對(duì)反響的污染。第二層絨制層:它包括碘酸鹽層和試劑層, 碘酸鹽層可破壞維生素 C等干擾物質(zhì),試劑層 含有試劑成分,主要與尿液中所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反響,產(chǎn)生顏色變化。第三層吸水層:可使尿液均勻快速地浸入,并能抑制尿液流到相臨反響區(qū)。第四層:尿液不浸潤(rùn)的塑料片作為支持體。2.測(cè)量原理把試劑帶浸入尿液后,除了空白塊外,其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了化學(xué)反響而產(chǎn)生了顏色變化。試劑塊的顏色深淺與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中個(gè)種成分的濃度成比例關(guān)系。只要測(cè)得光的反射率即可求得尿液中各種成分的濃度。一般采用微電腦控制,采用球面積分儀承受雙波長(zhǎng)反射光的方式測(cè)定試
18、劑帶上的顏色變化進(jìn)行半定量測(cè)定。測(cè)定波長(zhǎng)是被測(cè)試劑塊的敏感特征波長(zhǎng),另一種為參比波長(zhǎng), 被測(cè)試劑塊的不敏感波長(zhǎng),用于消除背景光和其他雜散光的影響。R試紙=Tm (試紙塊對(duì)測(cè)量波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度)/Ts (試紙塊對(duì)參考波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度)X100%R空白=Cm(空白塊對(duì)測(cè)量波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度)/Cs (空白塊對(duì)參考波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度)X100%R總= R試紙/ R空白= Tm Cs/ Ts CmX 100%3試帶模塊反響原理各模塊反響的原理、參考圍、常見干擾工程等見表5-10。表5-10尿液干化學(xué)分析儀檢查工程、原理、參考圍與主要干擾因素膽紅素偶氮法5mg/L陰性吩噻嗪類藥物VitC、亞硝酸鹽、檢測(cè)工程尿膽原酸
19、堿度 亞硝酸鹽(NIT)蛋白質(zhì)(PRO)反響原理偶氮法或酸堿指示劑法偶氮法pH指示劑蛋白質(zhì)誤差法葡萄糖(GLU/)葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法靈敏度參考圍10mg/L陰性或弱4.59.0隨機(jī)0.50.6mg/L尿:陰58.0對(duì)白蛋白敏感陰性(70100mg/L),對(duì)球蛋白、粘蛋白、本周蛋白敏感性差250mg/L陰性性干擾因素光照吩噻嗪類藥性膽色素本、久膽紅素、細(xì)吲哚I舊殖或亞硝酸鹽或偶H氮試劑污染、食物硝pH酸鹽含奎量豐富磺胺嘧啶、聚乙烯吡咯酮等藥物,季銨類消毒劑過(guò)氧化氧化劑氧化劑素、呋污喃類藥亞硝酸鹽陰f光照、試帶浸氮藥物間過(guò)pH<:、,尿量過(guò)多、食物硝酸鹽含量過(guò)H5? 3尿在膀胱停霉素
20、,h、鹽含硝I蛋鹽復(fù)原酶蛋白等非染、電解質(zhì)蛋白肖酸鹽高海巴C或單核乙胞為主-多蛋代物慶高比密低pH尿酮體亞硝基鐵氰化乙酰乙酸:50陰性苯丙酮、L-多巴代酮體以B -羥丁(KET)鈉法100mg/L;丙酮:400700mg/L ;與B-羥丁酸不反響物、酸為主,舊尿隱血或紅細(xì)胞(BLD)血紅蛋白亞鐵血紅素過(guò)氧化物酶法Hb0.30.5mg/L ;RB= 10/ 卩 l陰性VitC、蛋白尿、糖尿WBC)比重(SG)多聚電解質(zhì)離子解離法1.0101.0301.0151.025電解質(zhì)性尿蛋白致SGt大霉素堿性尿致SGJ維生素C吲哚酚法50 mg/L陰性巰基化合物、胱氨堿性尿(VitC)酸、源性酚HCG的概
21、念和檢測(cè)方法 p158人絨毛膜促性腺激素hCG,是由胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的一種具有促進(jìn) 性腺發(fā)育的糖蛋白激素,相對(duì)分子量為47000,存在于孕婦的血液、尿液、初乳、 羊水和胎兒體。在受精后第6天受精卵滋養(yǎng)層形成時(shí),開始分泌微量的 hCG受 精卵著床后,采用特異性B -hCG抗血清能在母體血液中檢測(cè)出hCG在妊娠早期 hCG分泌量增高極快,至妊娠 810周時(shí)血清濃度到達(dá)頂峰,持續(xù) 12周后迅 速減低,妊娠晚期血清hCG濃度僅為峰值的10%,持續(xù)至分娩。分娩后假設(shè)無(wú)胎 盤殘留,約于產(chǎn)后2周消失。hCG是唯一不隨胎盤重量增加而分泌增多的胎盤激 素,分泌后直接進(jìn)人母血,幾乎不進(jìn)入胎血循環(huán)。hCG可通過(guò)
22、孕婦血液循環(huán)而排泄到尿液中,血清hCG濃度略高于尿液,且呈平行關(guān)系。.檢測(cè)方法:1單克隆免疫膠體金法1檢測(cè)原理:臨床上常采用免疫學(xué)單克隆抗體膠體金方法。檢測(cè)時(shí)試帶上顯示兩條紫紅色線條為陽(yáng)性,只 顯示一條紫紅色線為陰性。此方法操作簡(jiǎn)單、快速,靈敏度高。2 參考值:定性:陰性。半定量:<2ng/ L。3 臨床意義:hCG檢測(cè)主要用于早期妊娠診斷, 一般在妊娠后3540d時(shí),hCG水平在200ng/ L以上, 6070d出現(xiàn)頂峰,常用的檢查方法即能顯示陽(yáng)性結(jié)果;流產(chǎn)診斷和監(jiān)察;異位妊娠的診斷;妊娠 滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的診斷與病情觀察。2,其他elisa 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、eclia電化學(xué)發(fā)光免疫法、
23、微粒子化學(xué)發(fā)光法、放射免 疫法與檢孕卡法第三節(jié)尿液有形成分顯微鏡檢查 尿液管型有哪些?有何臨床意義? 答:尿液管型是指蛋白質(zhì)、細(xì)胞與其崩解物在腎小管、集合管凝固而形成的圓柱形蛋白凝聚體,是尿沉渣中最有診斷價(jià)值的成分。尿液管型的種類與其臨床意義如下:表9-3常見管型的組成成分與意義管型組成成分臨床意義透明管型T-H蛋白、清蛋白、少量氯化物正常人偶見,腎實(shí)質(zhì)性病變時(shí)增多紅細(xì)胞管型管型基質(zhì)+紅細(xì)胞急性腎小球病變、腎小球?qū)缪准?xì)胞管型腎臟感染性病變或免疫性反響上皮細(xì)胞管型管型基質(zhì)+白細(xì)胞腎小管壞死顆粒管型管型基質(zhì)+變性細(xì)胞分解產(chǎn)物腎實(shí)質(zhì)性病變伴有腎單位淤滯臘樣管型細(xì)顆粒管型衍化而來(lái)腎單位長(zhǎng)期阻塞、腎小
24、管有嚴(yán)重病變、預(yù)后差脂肪管型細(xì)顆粒管型衍化而來(lái)腎小管損傷、腎小管上皮細(xì)胞脂肪變性腎衰管型顆粒管型、臘樣管型演變而來(lái)急性腎衰竭多尿期,慢性腎衰竭岀現(xiàn)提示預(yù)后不良細(xì)菌管型管型基質(zhì)+細(xì)菌腎臟有細(xì)菌感染、腎膿毒性疾病真菌管型管型基質(zhì)+真菌腎臟真菌感染結(jié)晶管型管型基質(zhì)+尿酸鹽、草酸鹽結(jié)晶腎小管結(jié)晶伴有腎衰竭、隱匿性腎炎膽紅素管型管型基質(zhì)+膽紅素顆粒重癥黃疸混合細(xì)胞管型管型基質(zhì)+不同細(xì)胞與其他有形成分腎炎反復(fù)發(fā)作、出血、血管壞死(1) 細(xì)胞管型:紅細(xì)胞管型屬病理性,說(shuō)明血尿的來(lái)源在腎小管或腎小球,常見于急性腎小球腎炎、急性 腎盂腎炎或急性腎功能衰竭。白細(xì)胞管型屬病理性,是診斷腎盂腎炎與間質(zhì)性腎炎的重要證據(jù)
25、。假設(shè)尿有 較多此類管型時(shí),更具有診斷價(jià)值,可作為區(qū)別腎盂腎炎與下尿路感染的依據(jù)。上皮細(xì)胞管型在尿大量 岀現(xiàn),說(shuō)明腎小管有活動(dòng)性病變。這種情況可岀現(xiàn)于腎小球腎炎,常與顆粒、透明或紅、白細(xì)胞管型并存。(2) 顆粒管型:顆粒管型是由上皮細(xì)胞管型退化而來(lái),或是由已崩解的上皮細(xì)胞的原漿粘合形成。顆粒管型意味著在蛋白尿的同時(shí)有腎小管上皮細(xì)胞的退變、壞死,多見于各種腎小球疾病與腎小管的毒性損傷。有時(shí)也可岀現(xiàn)于正常人尿中,特別是劇烈運(yùn)動(dòng)之后,如經(jīng)常反復(fù)岀現(xiàn),那么屬異常。(3)蠟樣和脂肪管型:蠟樣和脂肪管型是細(xì)胞顆粒管型再度退化后形成的,常反映腎小管有萎縮、擴(kuò)。多見于慢性腎病尿量減少的情 況下,或是腎病綜合征
26、存在脂肪尿時(shí)。(4)透明管型:透明管型可以岀現(xiàn)于正常尿液中,有蛋白尿時(shí)透明管型那么會(huì)增多,見于各種腎小球疾病 。尿液管型形成有哪些條件?答:1.原尿中有清蛋白、T-H蛋白,這是構(gòu)成慣性的基質(zhì)和首要條件,其中T H蛋白最易形成管型的核心;2腎小管有濃縮和酸化尿液的能力:濃縮可使形成管型的蛋白質(zhì)與鹽類濃度增高,而酸化那么促進(jìn)蛋白質(zhì)進(jìn)一步變形凝聚和沉淀;3腎臟具有可供交替使用的腎單位 :有利于管型的形成與排泄,有休息狀態(tài)腎單位尿液淤積,有足夠時(shí)間形成管型,當(dāng)該腎 單位得到修復(fù),恢復(fù)功能排尿時(shí),已成形的管型可隨尿液排出。(3)結(jié)晶1) 酸性尿液中結(jié)晶草酸鈣結(jié)晶尿酸結(jié)晶非結(jié)晶性尿酸鹽草酸鈣結(jié)晶:為無(wú)色方
27、形閃爍發(fā)光的八面體或信封樣,有2條對(duì)角線互相交叉,有時(shí)呈菱形等多種形態(tài),還可偶見形態(tài)為啞鈴形或餅狀。尿酸結(jié)晶:在尿液中呈黃色、暗棕色,有時(shí)被黏液黏附一起形成類似管型。尿酸結(jié)晶的形狀有三棱形、亞鈴形、蝴蝶形與不規(guī)那么形。非結(jié)晶性尿酸鹽:主要是尿酸鈉、尿酸鉀、尿酸鈣等的混合物,外觀呈黃色的非晶形顆粒狀沉淀物。在淡色尿液中無(wú)色,在低溫、濃縮或酸性較強(qiáng)的尿液中容易析岀沉淀。馬尿酸結(jié)晶:結(jié)晶形態(tài)與結(jié)晶形成速度有關(guān),有針狀、板狀、斜方柱狀或三棱狀。磷酸鹽類結(jié)晶:包括非晶型磷酸鹽、磷酸銨鎂結(jié)晶、磷酸鈣結(jié)晶等,常可在堿性或近中性尿液中見到,來(lái)源于食物、機(jī)體代和組織分解,為尿液的正常成分。非晶型磷酸鹽:為白色顆
28、粒,屬于正常代產(chǎn)物,一般無(wú)臨床意義磷酸銨鎂結(jié)晶:呈無(wú)色的方柱形,信封狀或羽毛狀。一般無(wú)臨床意義,感染引起結(jié)石時(shí),尿液中常 出現(xiàn)磷酸銨鎂結(jié)晶 磷酸鈣結(jié)晶有非晶型、粒狀、三棱形,排列成星狀或束狀,可溶于乙酸。如果長(zhǎng)期在尿液中見到磷 酸鈣結(jié)晶。那么應(yīng)排除甲狀旁腺功能亢進(jìn),腎小管性酸中毒或因長(zhǎng)期臥床引起的骨質(zhì)脫鈣。 其他結(jié)晶:尿液中常見病理性結(jié)晶的形狀與意義見表 9-4 。表 9-4 尿液中常見病理性結(jié)晶的形狀與意義結(jié)晶 顏色 形狀 臨床意義膽紅素結(jié)晶 黃紅色 成束的針狀或小塊狀 堵塞性黃疸、急性肝壞死、肝硬化、肝癌、急性磷中毒亮氨酸結(jié)晶 黃褐色 小球狀,具有輻射狀和同心紋 急性肝壞死、急性磷中毒、氯
29、仿中毒、肝硬化酪氨酸結(jié)晶 略帶黑色 細(xì)針狀,成束狀或羽毛狀排列 急性肝壞死、急性磷中毒、氯仿中毒、肝硬化膽固醇結(jié)晶 無(wú)色 缺角的方形薄片狀 腎淀粉樣變、脂肪變性,偶見膀胱炎、腎盂腎炎胱氨酸結(jié)晶 無(wú)色 六邊形片狀,常重疊排列腎結(jié)石、膀胱結(jié)石磺胺嘧啶結(jié)晶 棕黃色 不對(duì)稱麥秸束狀或球狀伴有紅細(xì)胞出現(xiàn)提示藥物性損傷,甚至尿閉磺胺甲基異惡唑結(jié)晶 無(wú)色透明 長(zhǎng)方形的六面體 伴有紅細(xì)胞出現(xiàn)提示藥物性損傷,甚至尿閉第六章 糞便檢驗(yàn)糞便標(biāo)本采集須知:標(biāo)本采集與送檢正確與否直接影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性 。1. 標(biāo)本采集和處理1標(biāo)本容器:應(yīng)選用一次性、枯燥、清潔、有蓋、無(wú)滲漏的容器。細(xì)菌學(xué)檢查時(shí),糞便標(biāo)本應(yīng)采集 于滅菌、
30、有蓋的容器。2標(biāo)本采集1常規(guī)檢查:囑病人收集有陽(yáng)性指征粘液、膿、血、寄生蟲體等的糞便成分,或根據(jù)臨床檢查指導(dǎo)病人正確留取標(biāo)本。如糞便外觀無(wú)異常時(shí),須從糞便的外表、深處與糞端多處取材,取35克糞便送檢。灌腸或服油類瀉劑、便盆或坐便的糞便不宜送檢。防止混有尿液、消毒劑與污水等雜物。2寄生蟲檢查: 血吸蟲孵化毛蚴:標(biāo)本應(yīng)多于 30g,必要時(shí)取整份送檢。如檢查蟲體與作蟲卵計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)送24h糞便。連續(xù)送檢:腸道寄生蟲和某些蠕蟲有周期性排卵現(xiàn)象,未查到寄生蟲和蟲卵時(shí),應(yīng)連送檢3天,防漏診。檢查蟯蟲卵:需用透明薄膜拭子或玻璃紙?jiān)囎釉谏钜?2時(shí)或清晨排便前,從肛門周圍皺襞處試取糞便,并立即送檢。檢查痢疾阿米巴滋
31、養(yǎng)體:從膿血和稀軟局部取材,并立即送檢,轉(zhuǎn)送與檢查 時(shí)均需保溫,以免滋養(yǎng)體失去活力而檢出困難。3化學(xué)法隱血試驗(yàn);需于試驗(yàn)前3天禁食某些蔬菜和含動(dòng)物血的食物與肉類,并禁服維生素C和鐵劑等干擾試驗(yàn)的藥物。4 脂肪定量試驗(yàn):定量服用脂肪膳食,50150g/日,連續(xù)6天,從第3天起開始采集72h的糞便,混合稱重,從中取出 60g 左右送檢。如用簡(jiǎn)易法,那么取正常膳食情況下的 24h 糞便標(biāo)本。5 糞膽原定量試驗(yàn):需連續(xù)收集 3 天糞便,每天收糞便混合稱重后取出約20g 送檢。6無(wú)糞便排出而又需要檢查時(shí),可以經(jīng)直腸指診或采便管試取標(biāo)本。 3標(biāo)本檢查后處理:糞便檢查后,需將朔塑料、紙類等容器投入焚化爐中燃
32、燒。載玻片、搪瓷容器等應(yīng)浸泡于消毒液中 24h,棄消毒液,煮沸后流水沖洗烘干備用。3. 化學(xué)檢查1酸堿度檢查:正常人糞便為中性、弱酸或弱堿性PH6.97.2 。肉食者呈堿性、高度腐敗為強(qiáng)堿性;食脂肪或糖為酸性、異常發(fā)酵為強(qiáng)酸性。阿米巴痢疾便為酸性;菌痢便為堿性;血吸蟲患者便為堿 性。2隱血試驗(yàn):隱血指消化道出血量較少5mL/d且少量紅細(xì)胞因被消化分解、肉 眼不見便改變顏色, 涂片顯微鏡檢查見不到紅細(xì)胞, 需要用間接方法證實(shí)出血。 有化學(xué)法和 免疫法兩種。1檢測(cè)原理:化學(xué)法:血紅蛋白中含鐵血紅素具有弱過(guò)氧化物酶的活性,能分解過(guò)氧化物,催化色原物質(zhì)呈色。呈色的深淺反映了血紅蛋白的含量,即出血量的多
33、少。免疫膠體金法: 將膠體金技術(shù)與單克隆技術(shù)結(jié)合, 利用抗人紅細(xì)胞基質(zhì)或抗人血紅蛋白的單克隆 抗體,與人紅細(xì)胞或人血紅蛋白有高度特異性的特點(diǎn)檢測(cè)糞便隱血。2方法學(xué)評(píng)價(jià):化學(xué)法:方法較多,其設(shè)計(jì)原理根本相同。最靈敏的方法為鄰聯(lián)甲苯胺法、鄰甲苯胺法,復(fù)原酚酞法,檢測(cè)出靈敏度可達(dá)0.21mg/L的血紅蛋白,鄰聯(lián)甲苯胺法為 1983 年中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)臨床檢驗(yàn)方法學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)推薦的方法,但易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié) 果;中等靈敏的方法為聯(lián)苯胺法、匹拉米洞法、無(wú)色孔雀綠法,可檢出15mg/L的血紅蛋白,消化道有 510 mL 出血即為陽(yáng)性,通常采用中等靈敏的實(shí)驗(yàn)方法如匹拉米洞法來(lái) 檢測(cè)便隱血;靈敏度差的方法為愈創(chuàng)木酯
34、法,需610mg/L的血紅蛋白才能檢出,此時(shí)消化道出血可達(dá)20 mL,靈敏度差,假陽(yáng)性很少,特異性較高,如此法為陽(yáng)性,根本可確定消化 道出血。 聯(lián)苯胺致癌、 復(fù)原酚酞法試劑不穩(wěn)定均已以被淘汰。 試帶法目前國(guó)外生產(chǎn)應(yīng)用愈創(chuàng) 木酯和四甲基聯(lián)苯胺為顯色基質(zhì)檢測(cè)隱血, 較為方便, 但未從根本上解決隱血試驗(yàn)方法中存 在的問(wèn)題,如食物因素的干擾 。免疫膠體金法: 目前利用免疫學(xué)原理檢測(cè)隱血的方法較 多,如免疫單擴(kuò)法,放免擴(kuò)散法,對(duì)流免疫電泳,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),反向間接血凝法等, 這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)。目前,國(guó)外檢查隱血的方法多采用免疫膠體金技術(shù)。不必控制飲食, 且敏感性和特異性都高于化學(xué)法, 而且可作為定性
35、和半定量測(cè)定試驗(yàn), 其操作簡(jiǎn)便, 判斷結(jié)果準(zhǔn)確。3 質(zhì)量控制影響因素:化學(xué)法:防止食物因素引起的假陽(yáng)性和假陰性。動(dòng)物的血、 肉中的血紅素可使試驗(yàn)呈假陽(yáng)性,蔬菜、水果具有植物過(guò)氧化物酶活性,也可出現(xiàn)假陽(yáng)性; 患者服用大量維生素 C或其它具有復(fù)原作用的藥物, 使隱血試驗(yàn)呈假陰性, 細(xì)菌分解血紅蛋 白引起假陰性。 目前國(guó)外尚無(wú)統(tǒng)一公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)法隱血試驗(yàn)。 免疫膠體金法: 防“后 帶現(xiàn)象,必要時(shí)稀釋便,重做實(shí)驗(yàn)或用化學(xué)法重檢;防止靈敏過(guò)高造成假陽(yáng)性,因而,有人認(rèn)為免疫學(xué)法不宜用于日常篩檢,應(yīng)密切結(jié)合臨床,正確診斷。 與時(shí)送檢標(biāo)本:采集后1h檢查完。應(yīng)做陰性和陽(yáng)性的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。保證試劑質(zhì)量:防止試劑
36、失效造成假陰性。4臨床意義:隱血試驗(yàn)陽(yáng)性:見于消化道出血、藥物致胃黏膜損傷、胃病、腸結(jié)核、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病與消化道惡性腫瘤等。消化性潰瘍與腫瘤出血鑒別:消化道潰瘍時(shí)隱血試驗(yàn)陽(yáng)性診斷率為40%- 70%呈間斷性陽(yáng)性;而消化道惡性腫瘤診斷陽(yáng)性率可達(dá)95%且呈持續(xù)性陽(yáng)性。消化道惡性腫瘤診斷的篩檢指標(biāo):大腸癌,早期大腸癌病 灶僅限于黏膜層或黏膜下層時(shí), 往往無(wú)病癥, 糞便中帶有微量的出血是早期診斷大腸癌唯一 可查出的異常指標(biāo),美國(guó)消化病協(xié)會(huì)提出:篩檢結(jié)腸癌、直腸癌的順序?yàn)槟挲g50歲者所有無(wú)病癥和無(wú)結(jié)、直腸癌危險(xiǎn)因素的人, 每年作 1 次糞便隱血檢查,如果試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性,即 推薦做全結(jié)腸和直
37、腸鏡檢查, 或作雙重比照鋇劑灌腸或纖維乙狀結(jié)腸鏡檢查; 有建議, 將隱 血試驗(yàn)作為胃癌篩檢的首選方法,對(duì) 50歲以上的無(wú)病癥者,每年做 1 次糞便隱血試驗(yàn),對(duì) 早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要的價(jià)值。3脂肪檢查1檢測(cè)原理:稱量法:將糞標(biāo)本經(jīng)鹽酸處理后,使結(jié)合脂肪酸變?yōu)橛坞x脂肪酸,再用乙醚萃取中性脂肪與游離脂肪,經(jīng)蒸發(fā)除去乙醚后,在分析天平上精確稱其重量。滴定法:將糞便中脂肪與氫氧化鉀 乙醇溶液一起煮沸皂化, 冷卻后參加過(guò)量的煙酸使脂皂變成脂酸, 再以石油提取脂酸, 取 1 份提取液蒸干, 其殘?jiān)灾行砸掖既芙猓詺溲趸c滴定,計(jì)算總脂肪含量。2方法學(xué)評(píng)價(jià): 常用糞便脂肪檢查方法有顯微鏡檢查法、 稱量法和滴定法等。 顯微鏡檢查法簡(jiǎn)單易行, 但準(zhǔn)確率低,只能作篩檢試驗(yàn),不能作為診斷的依據(jù);稱量法和滴定法為定量法,但代表的是總脂肪酸, 不包含中性脂肪中的甘油局部。利用脂肪定量也可以計(jì)算脂肪吸收率,用以估計(jì)消化吸收功能。脂肪吸收率=膳食總量-糞便總量X 100%/膳食總脂量3參考值:成人或兒童:?95%4 臨床意義:
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