1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn) 鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛作用【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)化學(xué)刺激法，觀察鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛作用，并聯(lián)系其臨床用途。【原理】疼痛概念系傷害性刺激所引起的情緒反應(yīng)、行為反應(yīng)以及生理功能障礙，是許多疾病的癥狀，是機(jī)體受到不良刺激或損害的一種信號(hào)和反應(yīng)。根據(jù)疼痛所表現(xiàn)出的行為反應(yīng)，目前應(yīng)用的疼痛模型有：1熱刺激法輻射熱刺激法：用一定強(qiáng)度的溫度來(lái)刺激動(dòng)物軀體的某一部分使其產(chǎn)生疼痛反應(yīng)。大白鼠以甩尾反應(yīng)時(shí)間為痛反應(yīng)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，用秒表計(jì)時(shí)，從照射開始到甩尾的時(shí)間作為痛閾。 熱板法：實(shí)驗(yàn)時(shí)，把小白鼠放在預(yù)先加熱到55金屬板上，以舔后足為常用痛反應(yīng)指標(biāo)。給藥后痛反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)一倍以上者作為有效鎮(zhèn)痛藥物。 注意事項(xiàng)： 反復(fù)

2、連續(xù)測(cè)定應(yīng)注意防止局部燙傷而影響結(jié)果。注意正常鼠體溫應(yīng)與室溫相近，室溫應(yīng)在20左右。給藥前測(cè)試痛閾時(shí)，注意反應(yīng)時(shí)間少于2s（10s，熱板法）或大于10s（30s，熱板法）表示該動(dòng)物反應(yīng)過(guò)敏或遲鈍，則剔除不用。熱板法要求必須用雌性動(dòng)物。方法評(píng)價(jià)：儀器裝置簡(jiǎn)單，反應(yīng)靈敏，指標(biāo)明確。 對(duì)組織損傷小，可反復(fù)利用動(dòng)物。 痛反應(yīng)潛伏期長(zhǎng)，利于比較藥物鎮(zhèn)痛作用的強(qiáng)弱、快慢、持續(xù)時(shí)間。可用于篩選麻醉性和非麻醉性鎮(zhèn)痛藥。但由于輻射熱刺激法甩尾反應(yīng)純粹是一種脊髓反射，因此骨骼肌松弛藥也會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)加以注意。2機(jī)械刺激法大白鼠尾尖壓痛法用鈍刀口用力壓大白鼠尾，以產(chǎn)生嘶叫作為痛閾值。此法與大白鼠的年齡關(guān)系很大，

3、以100150g體重為宜。壓痛部位以大白鼠尾尖1/3處敏感性較高。 3電刺激法齒髓刺激法目前公認(rèn)牙髓神經(jīng)是對(duì)痛頗敏感的刺激部位，其痛反應(yīng)近似臨床病理性疼痛。因此齒髓刺激法是評(píng)價(jià)鎮(zhèn)痛藥的標(biāo)準(zhǔn)而可靠的方法。此法適用于狗、貓、家兔、大白鼠等，其中以家兔應(yīng)用最多。動(dòng)物在麻醉下用電鉆在牙齒上鉆孔后，將電極插入齒髓作慢性埋藏電極。電刺激時(shí)，動(dòng)物因疼痛會(huì)出現(xiàn)咀嚼運(yùn)動(dòng)與擺頭等反應(yīng)，這些反應(yīng)可視為痛閾的指標(biāo)。 方法評(píng)價(jià)：反應(yīng)靈敏、穩(wěn)定，電刺激引起的舔舌/咀嚼反應(yīng)比較一致。 鼠尾刺激法以串脈沖方波刺激大白鼠尾尖1/3處，以引起甩尾和嘶叫反應(yīng)的電流強(qiáng)度作為痛反應(yīng)指標(biāo)。 4化學(xué)刺激法許多化學(xué)物質(zhì)如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、鉀離子、

4、緩激肽等，接觸到完整的皮膚和粘膜時(shí)，即引起疼痛反應(yīng)。因此，將某些化學(xué)物質(zhì)給入動(dòng)物體內(nèi)可產(chǎn)生疼痛，造成疼痛模型，作為研究疼痛生理及篩選鎮(zhèn)痛藥物的方法。小白鼠扭體法是篩選鎮(zhèn)痛藥的常用方法之一，采用一些化學(xué)刺激物注入小鼠腹腔內(nèi)，引起深部的、大面積而較持久的疼痛刺激，致使小白鼠產(chǎn)生“扭體”反應(yīng)（腹部?jī)?nèi)凹、軀干與后腿伸張、臀部高起）。觀察給予化學(xué)刺激藥物15分鐘內(nèi)發(fā)生“扭體”反應(yīng)的小白鼠或各小白鼠發(fā)生的“扭體”次數(shù)，將給藥組與對(duì)照組相比，若使扭體反應(yīng)發(fā)生率減少50%以上的，可認(rèn)為有鎮(zhèn)痛作用。常用致痛劑如：酒石酸蒂鉀、醋酸等。化學(xué)刺激法是篩選非麻醉性鎮(zhèn)痛藥的常用方法。【實(shí)驗(yàn)材料】器材：架盤天平、注射器、5

5、#針頭、玻璃鐘罩。藥品：1%醋酸溶液、0.2%鹽酸哌替啶溶液、0.2%顱痛定溶液、生理鹽水。動(dòng)物：小白鼠。【實(shí)驗(yàn)方法】取小白鼠3只，稱體重，編號(hào)，置于玻璃鐘罩中觀察小鼠正常活動(dòng)。分別給小白鼠腹腔注射0.2%鹽酸哌替啶溶液0.2ml/10g、0.2%顱痛定溶液0.2ml/10g及等容量生理鹽水。30min后，每鼠再由腹腔注射%醋酸溶液0.2ml/10g，觀察各組出現(xiàn)扭體反應(yīng)的小白鼠數(shù)量。【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】將結(jié)果記錄于下表中，綜合全實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛百分率。           

6、60;   實(shí)驗(yàn)組無(wú)扭體反應(yīng)動(dòng)物數(shù)對(duì)照組無(wú)扭體反應(yīng)動(dòng)物數(shù)藥物鎮(zhèn)痛百分率X100%對(duì)照組扭體反應(yīng)動(dòng)物數(shù)鼠號(hào)體重() 劑量(ml)給藥扭體反應(yīng)的鼠數(shù)(只)發(fā)生扭體反應(yīng)百分率1  0.2%鹽酸哌替啶溶液+%醋酸溶液  2  0.2%顱痛定溶液+%醋酸溶液  3  生理鹽水+%醋酸溶液  【注意事項(xiàng)】1腹腔注射在小白鼠下腹部，切勿進(jìn)針過(guò)深損傷內(nèi)臟，否則內(nèi)臟出血小白鼠而死，影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。2結(jié)果可以班統(tǒng)計(jì)，當(dāng)給藥組比對(duì)照組的扭體發(fā)生率減少50%以上時(shí)，才能認(rèn)為有鎮(zhèn)痛效力。3小鼠體重輕，扭體反