1、聚六亞甲基弧消毒液殺菌效果及奶牛場應用觀察2016-04-22張 弦，張崢臻，張瑞華,張克春，上海市奶牛研究所【摘要】為了解聚六亞甲基呱的殺菌及奶牛場應用效果，采用瓊脂殺菌試驗選擇奶牛場最低使用濃 度，微量肉湯稀釋法測定消毒液最低抑菌濃度（mtc），現場帶畜消毒試驗，奶牛粘膜刺激 試驗和消毒液抗生素殘留檢測試驗。結果表明聚六業甲基弧在實驗室針對奶牛場所分離的人 腸桿菌和葡萄球菌的最低抑菌劑量分別為0. 125%和0. 0625%,因而推薦奶牛場最低使用濃度 為0.2%；帶畜消毒時動物并無排斥行為；將推薦最低使用濃度的消毒液涂抹于奶牛鼻粘膜、 陰道粘膜、乳房，并無過験等界常反應發生；當聚六亞甲基

2、弧濃度大于0.02%時，抗生素檢 測為陽性；當其濃度小于0. 002%時，抗生素檢測為陰性。【關鍵字】聚六亞甲基脈；殺菌效果；mtc：帶畜消毒聚六亞甲基脈（phmg）,為一類環保型高分子聚合物殺菌劑，其性能優越，具有高效、安全、 穩定、無刺激性等特點。聚六亞甲基脈中的呱基溶于水后帶正電荷，易吸附在帶負電荷的微 生物表面，并幾能滲透到微生物休內，破壞微生物體的細胞結構和能量物質代謝，使細菌和 病毒喪火了活性。同時，聚合物形成的薄膜將會堵塞微生物的呼吸通道，使微生物迅速窒息 而死廣，從而起到殺菌的作用。基于這一作用機理，病原微牛物不易產生耐藥性，因此，聚 六亞甲基弧在紡織、水產養殖、洗手液等行業應

3、用較為廣泛，但在畜禽養殖業方而的應用較 少。為觀察該消毒液殺菌效果和奶牛場應用效果，在實驗室和奶牛場分別進行了試驗觀察。 本試驗所使用的聚六亞甲基脈溶液的含量為25%o一、材料與方法1.1消毒劑和試驗菌本試驗所用消毒液由上海特龍牛物科技發展有限公司提供，聚六亞甲基脈的含量為25%。 本次試驗所用菌種為從上海地區某奶牛場采集的人腸桿菌和葡萄球菌，經稀釋液配制成試驗 菌懸液備用。12瓊脂殺菌（抑菌試驗）用去離子滅菌水將消毒液稀釋成不同的濃度（1%、0.5%、0.25%、0.125%、0.063%、0.031%、 0.016%） 0取兩塊血平板用接種環挑取人腸桿菌和葡萄球菌分別作致密劃線。將不同濃度

4、的 消毒液滴加10u 1于瓊脂表而,不同濃度的消毒液排布方式參考藥敏試驗不同的藥敏紙片排 布。置37°c培養24h后觀察消毒液覆蓋范用內細菌生長悄況，完全無細菌生長的最低濃度 推薦為最低使用濃度。1.3微量肉湯稀釋法測定mic試驗取一塊96孔板，在每孔中加入含ttc的滅菌營養肉湯1 oou lo在a/b/c/d/e/f六排 的第一孔內加入有效濃度為5%的消毒液looul,然后對消毒液進行二倍稀釋。即第一孔屮 加入消壽液后用移液槍充分吹打（至少5次以上）使消壽液與肉湯充分混勻，然后吸取100 p 1加入第二孔再吹打使z與肉湯充分混勻，照此重復直至最后一孔，吸取1 oop 1棄去； 此時

5、前六排每孔消毒液有效成分稀釋度從左至右依次1： 40, 1： 80, 1： 160, 1： 320, 1： 640, 1： 1280, 1： 2560, 1： 5120, 1： 10240, 1 : 20480, 1： 40960, 1： 81920。在 a/b /c三排屮每孔加入5p 1大腸桿菌懸液，在d/e/f三排中加入5卩1葡萄球菌懸液。在g 排前六孔加入5»1人腸桿菌懸液，后六孔加入5p1葡萄球菌懸液，作為陽性對照。h排不 加肉湯以外其他任何物質，作為陰性對照。置37°c恒溫培養箱培養1824h后觀察，若有細 菌生長ttc會顯示紅色；若沒有細菌生長ttc則不變色。前

6、六排中耒變紅色的戢后一孔所對 應的濃度便為消毒液的mtc值。2. 4奶牛場帶畜消毒試驗隨機選樣奶牛場奶牛的一個區（每個區平均分為兩塊區域，兩個區域z間牛只可以h由活 動），選擇其中一個區域，進行噴灑消毒（消毒液濃度為以上試驗所得推薦最低使用濃度）, 消毒范圍包括空氣、臥床和欄桿。觀察奶牛行為有無異常，是否愿意在這一區域內活動，有 無排斥反應。2. 5粘膜刺激試驗在奶牛場隨機選擇8頭奶牛，保定后用棉簽蘸取推薦使用濃度的消壽液,涂抹于奶牛鼻粘膜、 陰道粘膜以及乳頭表而，五分鐘后觀察奶牛有無過敏或其他界常反應。2. 6消毒液抗生素殘留檢測取6個ecltpse50（e50）抗生素檢測試劑單孔，使用牛奶

7、將消毒液稀釋到0. 2%、0. 02%、0. 002%、 0. 0002%的有效濃度,取50»1加入到檢測孔中,剩下兩孔分別做陰性對照（加入無抗奶） 和陽性對照（loppb青霉素樣品）o密封后將檢測孔放入65°c水浴鍋中，培養2小時30分 鐘。反應結束后取出檢測孔從側而觀測孔中顏色，記錄結果。判讀標準：黃色到淺黃色包插綠色為陰性結果范圍；藍綠色到紫色為陽性結果范圍。二、結果2. 1瓊脂殺菌（抑菌試驗）結果消毒液在稀釋到0. 125%時，其覆蓋范圍內大腸桿菌完全不牛:長，在0. 0625%范圍內有少量生長，之后的稀釋度牛長良好。結果表明該消毒液對大腸桿菌的有效殺滅濃度應在0.

8、 125%以消毒液在稀釋到0. 0625%時，其覆蓋范圍內葡萄球菌完全不生長，在z后的稀釋度生長良好。結果衣明該消毒液対葡萄球菌的有效殺滅濃度應在0. 0625%以上。綜合該消毒液對人腸桿菌和葡萄球菌的有效殺滅濃度，推薦實際使用的最低濃度為0. 2%。2. 2 mic試驗結果試驗結果顯示，5%消毒液在稀釋到笫10孔時，指示劑ttc變紅，大腸桿菌及葡萄球菌開始 大量生長，這表明消毒液在稀釋到第9孔以后即0.01%以下時，消毒液殺菌效果不佳。即消 毒液對人腸桿菌和匍萄球菌的最低抑菌濃度低于0. lg/lo2. 3奶牛場帶畜消毒實驗結果奶牛表現正常，對消毒區域并無明顯排斥行為。表明該消毒液可進行帶畜消毒，消毒不會影 響奶牛正常活動。2. 4奶牛粘膜刺激試驗結果8頭奶牛粘膜在涂抹0.2%聚六亞甲基脈消毒液后并無明顯、紅腫、發癢等過敏癥狀，奶牛表 現正常。表明該消毒液對奶牛粘膜的刺激指數為0,屬于無刺激性，因而可在奶牛場內放心 使用。2. 5消毒液抗生素殘留檢測結果結果表明消毒液冇效濃度在0. 02%以匕時抗生素檢測為陽性；當冇效濃度低于0. 002%時抗生 素檢測為陰性。在奶牛場實際生產中，若是乳頭上攜帶有消毒液，經擠奶前清洗、藥浴和擦 t后，其殘留量一般為使用劑量的1/10001/10000,所以，0.2%的聚六亞甲基脈即使接觸 到了奶牛乳房，也