1、會(huì)計(jì)學(xué)1第一頁(yè)，共59頁(yè)。第1頁(yè)/共59頁(yè)第二頁(yè)，共59頁(yè)。舉例舉例(j l)(j l)定量分析定量分析(dnglingfnx)(dnglingfnx)定性分析定性分析定義、分布、性質(zhì)定義、分布、性質(zhì)第2頁(yè)/共59頁(yè)第三頁(yè)，共59頁(yè)。OHCOOH-H2OOO12345678第3頁(yè)/共59頁(yè)第四頁(yè)，共59頁(yè)。 簡(jiǎn)單香豆素只在苯環(huán)上有取代基的呋喃(fnn)香豆素 線型（6、7）； 角型（7、8）吡喃香豆素線型（6、7）； 角型（7、8）其他香豆素 吡喃酮環(huán)上有取代基的第4頁(yè)/共59頁(yè)第五頁(yè)，共59頁(yè)。OOHOOOHOROOOCH3OCH3O傘形花內(nèi)酯傘形花內(nèi)酯 七葉七葉(q y)(q y)內(nèi)酯內(nèi)酯

2、 R = H R = H 濱蒿內(nèi)酯濱蒿內(nèi)酯 七葉七葉(q y)(q y)苷苷 R = glc R = glc 第5頁(yè)/共59頁(yè)第六頁(yè)，共59頁(yè)。第6頁(yè)/共59頁(yè)第七頁(yè)，共59頁(yè)。OOOOOOOCH3OOOH3CCH3HO 補(bǔ)骨脂內(nèi)酯補(bǔ)骨脂內(nèi)酯 花椒花椒(hujio)(hujio)毒內(nèi)酯毒內(nèi)酯 紫花前胡內(nèi)酯紫花前胡內(nèi)酯 第7頁(yè)/共59頁(yè)第八頁(yè)，共59頁(yè)。 異補(bǔ)骨脂內(nèi)酯異補(bǔ)骨脂內(nèi)酯 茴芹內(nèi)酯茴芹內(nèi)酯 異佛手異佛手(fshu)(fshu)內(nèi)內(nèi)酯酯 OOOOOOOCH3CH3O OOOOCH3第8頁(yè)/共59頁(yè)第九頁(yè)，共59頁(yè)。第9頁(yè)/共59頁(yè)第十頁(yè)，共59頁(yè)。 花椒(hujio)內(nèi)酯 OOO OOOO

3、CH3美花椒美花椒(hujio)內(nèi)酯內(nèi)酯第10頁(yè)/共59頁(yè)第十一頁(yè)，共59頁(yè)。 邪蒿內(nèi)酯邪蒿內(nèi)酯 OOO OOOOOOCH3黃曲霉素黃曲霉素B1第11頁(yè)/共59頁(yè)第十二頁(yè)，共59頁(yè)。OOOHOHO O 紫苜蓿(m xu)酚 OO茵陳炔茵陳炔第12頁(yè)/共59頁(yè)第十三頁(yè)，共59頁(yè)。第13頁(yè)/共59頁(yè)第十四頁(yè)，共59頁(yè)。第14頁(yè)/共59頁(yè)第十五頁(yè)，共59頁(yè)。第15頁(yè)/共59頁(yè)第十六頁(yè)，共59頁(yè)。1234第16頁(yè)/共59頁(yè)第十七頁(yè)，共59頁(yè)。 多具芳香氣，能隨水蒸氣揮發(fā)或升華。多具芳香氣，能隨水蒸氣揮發(fā)或升華。 不溶于水或難溶于水，可溶于石油醚、苯不溶于水或難溶于水，可溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿或乙醇

4、等溶劑中；一般含氧、乙醚、氯仿或乙醇等溶劑中；一般含氧取代基的香豆素衍生物，在石油醚中的溶取代基的香豆素衍生物，在石油醚中的溶解度比較解度比較(bjio)(bjio)小，冷的情況下更小。小，冷的情況下更小。 在定量測(cè)定時(shí)，多用氯仿和乙醇來(lái)提取。在定量測(cè)定時(shí)，多用氯仿和乙醇來(lái)提取。 1第17頁(yè)/共59頁(yè)第十八頁(yè)，共59頁(yè)。2n香豆素類(lèi)化合物分子中具香豆素類(lèi)化合物分子中具,-,-不飽和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，具有不飽和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，具有內(nèi)酯化合物的通性。如在稀堿性條件下加熱可水解開(kāi)內(nèi)酯化合物的通性。如在稀堿性條件下加熱可水解開(kāi)環(huán)，生成易溶于水的順式鄰羥基桂皮酸鹽。酸化后又環(huán)，生成易溶于水的順式鄰羥基桂皮酸鹽。酸化后

5、又閉環(huán)恢復(fù)為親脂性?xún)?nèi)酯結(jié)構(gòu)。閉環(huán)恢復(fù)為親脂性?xún)?nèi)酯結(jié)構(gòu)。n與堿液長(zhǎng)時(shí)間加熱，順式鄰羥基桂皮酸鹽則發(fā)生與堿液長(zhǎng)時(shí)間加熱，順式鄰羥基桂皮酸鹽則發(fā)生(fshng)(fshng)雙鍵構(gòu)型的異構(gòu)化，轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的反式鄰羥雙鍵構(gòu)型的異構(gòu)化，轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的反式鄰羥基桂皮酸鹽，此時(shí)，再經(jīng)酸化也不能環(huán)合為內(nèi)酯。基桂皮酸鹽，此時(shí)，再經(jīng)酸化也不能環(huán)合為內(nèi)酯。 順式鄰羥基順式鄰羥基(qingj)(qingj)桂皮酸桂皮酸 反式鄰羥基反式鄰羥基(qingj)(qingj)桂皮酸桂皮酸OOOH-H+COO-O-OH-O-COO-第18頁(yè)/共59頁(yè)第十九頁(yè)，共59頁(yè)。3 3（1 1）異羥基）異羥基(qingj)(qingj)肟酸

6、鐵反應(yīng)：肟酸鐵反應(yīng)： 因香豆素具有內(nèi)酯環(huán)，所以能與異羥基因香豆素具有內(nèi)酯環(huán)，所以能與異羥基(qingj)(qingj)肟酸肟酸鐵反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色，可被用來(lái)鑒別和比色測(cè)定，其鐵反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色，可被用來(lái)鑒別和比色測(cè)定，其反應(yīng)如下：反應(yīng)如下： OONH2OHNaOHONaNHOHOFe3+, H+ONaNHOOFe13第19頁(yè)/共59頁(yè)第二十頁(yè)，共59頁(yè)。（2 2）酚類(lèi)試劑反應(yīng)：）酚類(lèi)試劑反應(yīng)： 因該類(lèi)化合物多具酚羥基，能和常規(guī)酚類(lèi)試劑反因該類(lèi)化合物多具酚羥基，能和常規(guī)酚類(lèi)試劑反應(yīng)，如三氯化鐵、硝酸銀的氨溶液、三氯化鐵應(yīng)，如三氯化鐵、硝酸銀的氨溶液、三氯化鐵- - 鐵氰鐵氰化鉀。化鉀。 如果如果(

7、rgu)(rgu)香豆素化合物的香豆素化合物的C6C6位上（即酚羥基的對(duì)位上（即酚羥基的對(duì)位）沒(méi)有取代基，則能和位）沒(méi)有取代基，則能和 Emerson Emerson試劑反應(yīng)現(xiàn)橙試劑反應(yīng)現(xiàn)橙 紅紅色；與色；與GibbsGibbs試劑反應(yīng)現(xiàn)藍(lán)色。試劑反應(yīng)現(xiàn)藍(lán)色。 Emerson Emerson反應(yīng)是將香豆素類(lèi)化合物溶于堿性溶液中反應(yīng)是將香豆素類(lèi)化合物溶于堿性溶液中，加入，加入2% 4- 2% 4- 氨基安替比林溶液數(shù)滴及氨基安替比林溶液數(shù)滴及8%8%鐵氰化鉀鐵氰化鉀溶液溶液2323滴即可顯色，其反應(yīng)如下：滴即可顯色，其反應(yīng)如下： OOCOO-OHOH-+NNC6H5OCH3NCOO-OHNNC6

8、H5OCH3NH2CH3CH3第20頁(yè)/共59頁(yè)第二十一頁(yè)，共59頁(yè)。4 4（1 1）香豆素類(lèi)化合物在紫外光的照射下顯藍(lán)色熒光，）香豆素類(lèi)化合物在紫外光的照射下顯藍(lán)色熒光，不但作為定性鑒別，而且作為定量測(cè)定依據(jù)不但作為定性鑒別，而且作為定量測(cè)定依據(jù)(yj)(yj)。 但具有熒光的化合物不一定都是香豆素，如咖啡酸、但具有熒光的化合物不一定都是香豆素，如咖啡酸、綠原酸等在綠原酸等在UVUV下也能呈現(xiàn)藍(lán)色熒光，二氫黃酮?jiǎng)t呈天下也能呈現(xiàn)藍(lán)色熒光，二氫黃酮?jiǎng)t呈天藍(lán)色熒光。藍(lán)色熒光。 此外，個(gè)別的香豆素類(lèi)化合物（如雙香豆素）不產(chǎn)此外，個(gè)別的香豆素類(lèi)化合物（如雙香豆素）不產(chǎn)生熒光。生熒光。 第21頁(yè)/共59

9、頁(yè)第二十二頁(yè)，共59頁(yè)。（2 2）羥基）羥基(qingj)(qingj)香豆素在紫外光下有強(qiáng)的熒光，不難辨香豆素在紫外光下有強(qiáng)的熒光，不難辨認(rèn)；呋喃香豆素較弱，但也能在紫外光下顯示藍(lán)、紫、棕認(rèn)；呋喃香豆素較弱，但也能在紫外光下顯示藍(lán)、紫、棕、綠、黃等色。必要時(shí)可噴、綠、黃等色。必要時(shí)可噴10% KOH10% KOH醇液，或醇液，或20% SbCl320% SbCl3氯仿液以顯色。氯仿液以顯色。 （3 3）香豆素類(lèi)化合物羥基）香豆素類(lèi)化合物羥基(qingj)(qingj)和芳環(huán)形成的共軛體系和芳環(huán)形成的共軛體系具較強(qiáng)的紫外特征吸收，不同的香豆素化合物在不同具較強(qiáng)的紫外特征吸收，不同的香豆素化合物

10、在不同pHpH條件下表現(xiàn)不同的光譜特性，對(duì)該類(lèi)成分的分析具重要意條件下表現(xiàn)不同的光譜特性，對(duì)該類(lèi)成分的分析具重要意義。義。 第22頁(yè)/共59頁(yè)第二十三頁(yè)，共59頁(yè)。 化學(xué)化學(xué)(huxu)(huxu)定性分析：定性分析： 熒光法熒光法 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 色譜色譜(s p)定性分析：定性分析： 薄層色譜薄層色譜(s p)法法 高效液相法高效液相法 氣相色譜氣相色譜(s p)法法第23頁(yè)/共59頁(yè)第二十四頁(yè)，共59頁(yè)。色熒光加強(qiáng)，避光者不顯熒光。色熒光加強(qiáng)，避光者不顯熒光。第24頁(yè)/共59頁(yè)第二十五頁(yè)，共59頁(yè)。第25頁(yè)/共59頁(yè)第二十六頁(yè)，共59頁(yè)。第26頁(yè)/共59頁(yè)第二十七頁(yè)，共59頁(yè)。 1 1

11、應(yīng)用特點(diǎn)應(yīng)用特點(diǎn) 薄層色譜法可用于含多類(lèi)成分的中藥的鑒別，可用標(biāo)薄層色譜法可用于含多類(lèi)成分的中藥的鑒別，可用標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)藥材對(duì)照，再與上述熒光反應(yīng)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)藥材對(duì)照，再與上述熒光反應(yīng)(fnyng)(fnyng)、顏色反應(yīng)、顏色反應(yīng)(fnyng)(fnyng)配合，即可方配合，即可方便、快速鑒別含香豆素類(lèi)化合物的中藥。便、快速鑒別含香豆素類(lèi)化合物的中藥。 因香豆素類(lèi)成分大都具熒光，含香豆素類(lèi)中藥提取因香豆素類(lèi)成分大都具熒光，含香豆素類(lèi)中藥提取物，在硅膠板上的色譜指紋圖具一定的鑒別意義，物，在硅膠板上的色譜指紋圖具一定的鑒別意義，可用化學(xué)對(duì)照品對(duì)照；可用化學(xué)對(duì)照品對(duì)照；可以使用經(jīng)準(zhǔn)確鑒定學(xué)名的標(biāo)準(zhǔn)

12、藥材做對(duì)照品；可以使用經(jīng)準(zhǔn)確鑒定學(xué)名的標(biāo)準(zhǔn)藥材做對(duì)照品；第27頁(yè)/共59頁(yè)第二十八頁(yè)，共59頁(yè)。29第28頁(yè)/共59頁(yè)第二十九頁(yè)，共59頁(yè)。30第29頁(yè)/共59頁(yè)第三十頁(yè)，共59頁(yè)。 含香豆素成分的中藥定量測(cè)定方法有比色法、熒光法、含香豆素成分的中藥定量測(cè)定方法有比色法、熒光法、極譜法、紫外分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法極譜法、紫外分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法等。、氣相色譜法等。 每種方法都有其特點(diǎn)，有的簡(jiǎn)單，有的操作麻煩，有的每種方法都有其特點(diǎn)，有的簡(jiǎn)單，有的操作麻煩，有的則需要一定的儀器設(shè)備。則需要一定的儀器設(shè)備。 相比之下，因該類(lèi)成分多具有相比之下，因該類(lèi)成

13、分多具有(jyu)(jyu)較強(qiáng)的熒光，故可較強(qiáng)的熒光，故可熒光分光光度法進(jìn)行定量分析；薄層掃描法測(cè)其紫外吸收熒光分光光度法進(jìn)行定量分析；薄層掃描法測(cè)其紫外吸收或熒光的方法較簡(jiǎn)便快速，兼有分離功能，應(yīng)用日趨普遍或熒光的方法較簡(jiǎn)便快速，兼有分離功能，應(yīng)用日趨普遍；近年來(lái)又有了分離效率較高的高效液相色譜技術(shù)，對(duì)復(fù)；近年來(lái)又有了分離效率較高的高效液相色譜技術(shù)，對(duì)復(fù)雜的中藥樣品更為合適。雜的中藥樣品更為合適。 第30頁(yè)/共59頁(yè)第三十一頁(yè)，共59頁(yè)。321 1、應(yīng)用、應(yīng)用(yngyng)(yngyng)概況概況第31頁(yè)/共59頁(yè)第三十二頁(yè)，共59頁(yè)。33第32頁(yè)/共59頁(yè)第三十三頁(yè)，共59頁(yè)。34第3

14、3頁(yè)/共59頁(yè)第三十四頁(yè)，共59頁(yè)。352 2紫外光區(qū)掃描法測(cè)定獨(dú)活中蛇床子素含量紫外光區(qū)掃描法測(cè)定獨(dú)活中蛇床子素含量 取獨(dú)活粗粉約取獨(dú)活粗粉約1g1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加乙醇，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加乙醇20ml20ml，超聲處理，超聲處理30min30min，放冷，濾過(guò)，濾液置，放冷，濾過(guò)，濾液置25ml25ml量瓶中，量瓶中，用少量乙醇分次洗殘?jiān)匆翰⑷胪涣科恐校右掖贾劣蒙倭恳掖挤执蜗礆堅(jiān)匆翰⑷胪涣科恐校右掖贾量潭龋瑩u勻，作為供試品溶液。另取蛇床子素對(duì)照品適量刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取蛇床子素對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加乙醇制成每，精密稱(chēng)定，加乙醇制成每1m

15、l1ml含含1mg1mg的溶液，作為對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液。溶液。 精密吸取供試品溶液精密吸取供試品溶液2l2l、對(duì)照品溶液、對(duì)照品溶液1l1l與與2l2l，分別交，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠叉點(diǎn)于同一硅膠G G薄層板上，以苯薄層板上，以苯- -乙酸乙酯（乙酸乙酯（3030：1 1）為展）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm365nm）下檢視）下檢視定位，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，定位，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，s322nms322nm，R370nmR370nm，測(cè)量，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分

16、值，計(jì)算(j sun)(j sun)，即得。，即得。 本品含蛇床子素（本品含蛇床子素（C15H16O3C15H16O3）不得少于）不得少于0.30%0.30%。 第34頁(yè)/共59頁(yè)第三十五頁(yè)，共59頁(yè)。液、，均用乙酸乙酯液、，均用乙酸乙酯定容至定容至10m110m1，制得，制得 6 6個(gè)不同濃個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。第35頁(yè)/共59頁(yè)第三十六頁(yè)，共59頁(yè)。 按下述條件進(jìn)行HPLC分析：以-Bondapak C18柱為色譜分離柱，加預(yù)柱以防樣品污染分析柱，流動(dòng)相為甲醇- 水（70：30），流速min，UV 254nm檢測(cè)各組分峰，進(jìn)樣10l，以峰面積為縱坐標(biāo)，各成分濃度為橫坐標(biāo)，得3

17、條通過(guò)原點(diǎn)的直線，線性范圍ml，其回歸方程如下： 氧化前胡素 ， 歐前胡素 ， 異歐前胡素 ， 精密稱(chēng)取白芷粉（40目）2g，置索氏提取器中，用乙醚提取9h，回收乙醚，真空干燥，殘?jiān)苡谝宜嵋阴ゲ⒍ㄈ莩?5ml，經(jīng)Millipore樣品過(guò)濾(gul)器過(guò)濾(gul)，同上色譜條件測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)品與樣品分離情況（見(jiàn)圖 13-1）較好。 第36頁(yè)/共59頁(yè)第三十七頁(yè)，共59頁(yè)。第37頁(yè)/共59頁(yè)第三十八頁(yè)，共59頁(yè)。39第38頁(yè)/共59頁(yè)第三十九頁(yè)，共59頁(yè)。40OOOH3CO+N NSO3HOH-COOHOH3COOHN NSO3H第39頁(yè)/共59頁(yè)第四十頁(yè)，共59頁(yè)。41OH-OOOHCOO-+N

18、ClOClClOClClNO-OOC第40頁(yè)/共59頁(yè)第四十一頁(yè)，共59頁(yè)。42第41頁(yè)/共59頁(yè)第四十二頁(yè)，共59頁(yè)。（3 3）呋喃香豆素的吸收峰向紫位移，它的）呋喃香豆素的吸收峰向紫位移，它的maxmax在在 220 230nm 220 230nm及及250nm250nm。 （4 4）pHpH影響：在堿性影響：在堿性(jin xn)(jin xn)溶液中香豆溶液中香豆素的最大吸收峰位置較其在中性或酸性溶液素的最大吸收峰位置較其在中性或酸性溶液中多數(shù)有顯著地向紅位移現(xiàn)象，且吸收系數(shù)中多數(shù)有顯著地向紅位移現(xiàn)象，且吸收系數(shù)也有所增大。例如傘形花內(nèi)酯也有所增大。例如傘形花內(nèi)酯max325nmmax

19、325nm（）（），但在堿性，但在堿性(jin xn)(jin xn)溶液中，其溶液中，其max 372nmmax 372nm（）。（）。 第42頁(yè)/共59頁(yè)第四十三頁(yè)，共59頁(yè)。 秦皮(qn p)為木犀科植物白蠟樹(shù)Fraxinus chinensis Roxb.、苦栃白蠟樹(shù)F. rhynchophylla Hance、尖葉白蠟樹(shù)F. chinensis Roxb. var. acuminata Lingelsh.、宿柱白蠟樹(shù)F. stylosa Ungelsh .等的干燥樹(shù)皮或干皮。具清熱燥濕、收澀明目之功效。第43頁(yè)/共59頁(yè)第四十四頁(yè)，共59頁(yè)。45第44頁(yè)/共59頁(yè)第四十五頁(yè)，共59頁(yè)。第45頁(yè)/共59頁(yè)第四