1、楓香樹葉抗菌活性分析論文【摘要】目的探討楓香樹葉的體外抗菌活性。方法采用瓊脂擴散法和試管連續稀釋法測定楓香樹葉對常見致病菌和條件致病菌的體外抗菌活性及最低抑菌濃度(MIC)。結果楓香樹葉對大腸埃希菌、白假絲酵母菌無抗菌作用；楓香樹葉對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌皆有抗菌作用，抑菌圈直徑在1325mm之間。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差別，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用最好，對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度分別為0.5，1，0.5，0.5，0.25g/ml。結論楓香樹葉對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌

2、、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌有較好的抗菌作用。 【關鍵詞】楓香樹葉；抗菌活性；最低抑菌濃度 Abstract：ObjectiveToresearchantimicrobialactivityofLiquidambarformosanaHancesleaf.MethodsBymethodsofagarplatediffusionsandtubecontinuousdilution,tomeasureantimicrobialactivityandminimalinhibitoryconcentration(MIC)ofLiquidambarformosanaHancesleafag

3、ainstpathogenandconditionedpathogen.Results(1)LiquidambarformosanaHancesleafhadnotantimicrobialactivityonE.coli,S.albicans.(2)LiquidambarformosanaHancesleafhadantimicrobialactivityagainstS.aureus,S.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphi,P.aeruginosa,thediameterofbacteriostaticcirclewasbetween13and25

4、millimetre.Theantimicrobialactivitywassignificantdifferentindifferentextracteddrugliquid,amongwhichtheantimicrobialactivityofwaterextractionofLiquidambarformosanaHancesleafwasthebest,theminimalinhibitoryconcentrationagainstS.aureusS.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphi,P.aeruginosa,is0.5，1，0.5，0.5

5、，0.25g/ml,respectively.ConclusionLiquidambarformosanaHancesleafhasgoodantimicrobialactivityagainstS.aureus,S.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphiandP.aeruginosa. Keywords：LiquidambarformosanaHancesleaf；Antimicrobialactivity；Minimalinhibitoryconcentration 隨著抗生素的廣泛應用，耐藥菌株逐年增多，目前金黃色葡萄球菌對青霉素G的耐藥菌株高達90

6、%以上1，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA）已經成為醫院內感染最常見的致病菌2。有些細菌甚至產生多重耐藥，如致病性大腸埃希菌約40%的菌株對鏈霉素、氯霉素、四環素、青霉素等多種抗生素產生耐藥性3；銅綠假單胞菌對許多抗生素具有天然或獲得耐藥性4，這給臨床治療帶來極大的困難，如何有效防治細菌感染及控制細菌耐藥性的產生與散播是一項長期、復雜、艱巨的任務，因而尋找和研制有效的抗菌藥物非常必要。本文采用瓊脂擴散法和試管連續稀釋法進行體外抗菌實驗及最低抑菌濃度（MIC）的測定，以探討楓香樹葉對常見致病菌和條件致病菌

7、的體外抗菌活性?，F報道如下。 1材枓與方法 1.1菌株來源金黃色葡萄球菌（ATCC25923），白色葡萄球菌（ATCC12228），大腸埃希菌（ATCC25922），福氏志賀氏菌（ATCC27891），傷寒沙門氏菌（ATCC14028），銅綠假單胞菌（ATCC27853），購于北京生物制品鑒定所。白假絲酵母菌（ATCC14053），北大醫院真菌菌種保藏中心（北京）提供。 1.2楓香樹葉采自江西贛南山區，采藥時間在56月之間。 1.3藥液的制備 1.3.150%乙醇煎液取楓香樹葉（生藥）40g，洗凈，加適量50%乙醇溶液浸泡30min，加熱至10030min，過濾。藥渣再加適量50%乙醇溶液，加

8、熱10030min，過濾。將兩次濾液合并，用文火濃縮至10ml（即每毫升藥液含4g生藥）。 1.3.2水煎液用蒸餾水代替50%乙醇溶液按上述方法制備藥液。 1.3.350%乙醇浸液取楓香樹葉（生藥）40g，洗凈搗碎，與蒸餾水10ml混勻浸泡2h，過濾，再經濾菌器濾過除菌，制成4g/ml的生藥。 1.3.4水浸液用蒸餾水代替50%乙醇溶液按上述方法制備藥液。 1.4方法 1.4.1菌液的制備將金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大腸埃希菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌接種于普通瓊脂平板上，置37溫箱中培養18h，用無菌生理鹽水配成每毫升相當于3億的菌濃度（金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌配成每

9、毫升相當于9億的菌濃度）。將白假絲酵母菌接種于沙氏瓊脂平板上，置37溫箱中培養48h，用無菌生理鹽水配成1108CFU/ml。 1.4.2瓊脂擴散法用無菌棉簽沾取菌液在普通瓊脂平板上（白假絲酵母菌用沙氏瓊脂平板）作均勻密集劃線，待菌液干燥后，用外徑5mm的打孔器打孔，每孔加藥液200l，平放在37溫箱中培養24h（白假絲酵母菌培養48h）觀察結果，測量抑菌圈直徑。抑菌圈直徑取兩次實驗結果的平均值。 1.4.3試管連續稀釋法5根據抑菌實驗的結果，選取敏感菌測定楓香樹葉水煎液對其的最低抑菌濃度。取小號試管7支，編號。第1步每支管各加1ml肉湯培養基。然后在第1管加1ml藥液，用吸管在第1管吹吸數次

10、，使藥液與肉湯培養基混勻，取出1ml加于第2管，混均取出1ml加于第3管，如此稀釋至第6管棄去1ml，第7管不加藥液作為對照。第3步每管加菌液50l，混勻，置37溫箱中培養24h。然后從每管中取出一接種環接種于普通瓊脂平板上，再繼續培養24h，觀察結果。以無細菌生長的最高稀釋濃度為該藥液的最低抑菌濃度。 2結果 2.1楓香樹葉的各種提取液對大腸埃希菌、白假絲酵母菌無抗菌作用。 2.2楓香樹葉的各種提取液對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌皆有抗菌作用，抑菌圈直徑在1325mm之間。結果見表1。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差別，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用

11、最好，50%乙醇煎液次之，50%乙醇浸液較差。 2.3楓香樹葉水煎液對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度（MIC）分別為0.5，1，0.5，0.5，0.25g/ml。結果見表2。 表1楓香樹葉幾種藥液的抑菌圈直徑（略） 表2各試管楓香樹葉水煎液的最低抑菌濃度（略） 表示無細菌生長；表示有少量細菌生長；表示有較多細菌生長；表示有大量細菌生長 3討論 楓香樹葉為金縷梅科植物楓香樹LiquidambarformosanaHance的樹葉6，7。中藥大辭典記載楓香樹葉有止血、治疔瘡、治痢疾、治產后風和小兒臍風之功效7。民間有用楓香樹葉治風濕，治中暑，治

12、痢疾；文獻8報道楓香樹葉中含有人體必需10種無機元素并有治療糖尿病和降血壓的作用；但楓香樹葉在抗菌作用方面國內外未見文獻報道。本研究為楓香樹葉作為抗菌新藥的開發提供了可靠的實驗依據。 實驗結果表明，楓香樹葉對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌均有明顯的抗菌作用。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差異，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用最好，50%乙醇煎液次之，50%乙醇浸液較差，這可能與不同方法提取的藥液的有效成分不同有關。由于中藥粗提物中含有多種化學成分，成分與藥理作用復雜，并且受多種因素的影響。本文只做了楓香樹葉的粗提液，有關楓香樹葉有效成分的提取與分析有待進一步研究。 【參考文獻】 1陸德源醫學微生物學，第5版M.北京：人民衛生出版社，2000：64. 2AppelbaumPCTheemergenceofvancomycin-intermediateandVancomycin-resistantStaphylococcusattreuslJClinMicrobiolInfect,2006,3(12)Suppl1：16. 3聞玉梅.現代醫學微生物學M.上海：上海醫科大學出版社，1999：205. 4李紅霞，李從