ABO正/反定型和RhD血型檢測卡操作規程樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白物殘余干擾反應結果。樣本準備：5%樣本紅細胞制備：壓積紅細胞25 l或全血50 l懸浮于0.5 ml達亞美2號稀釋液中。配套試劑：ABO正/反定型和RhD血型檢測卡 2號稀釋液標準紅細胞A1和B操作步驟：1) 取50l A1,B 標準細胞（0.8%）分別加入A1,B管中。2) 取50l 血清或血漿加入A1,B管中。3) 取10l 5% 樣本紅細胞加入A, B, D, Ctl管中。4) 離心10 分鐘。判讀結果。記錄。結果解釋：1、陽性（）：細胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中。陰性（）：細胞沉積在管底。雙相（d.p.）：既有陽性結果，同時也有陰性結果。溶血（Hemo）：紅細胞溶解，作為陽性結果對待。2、ABO血型判斷血型抗原與抗血清反應與A1、B細胞反應抗-A抗-BA1BAA+/+BB+/+ABA，B，AB+0H+/+/+3、 Rh D血型判斷+陰性Rh D陽性Rh D弱陽性Rh D陰性抗 體 篩 選 操 作 程 序 操 作 規 程（間 接 抗 人 球 法IAT）樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白物殘余干擾反應結果。配套試劑：低離子抗人球蛋白卡 2號稀釋液 抗體篩選標準紅細胞 抗原格局圖操作步驟：1) 取50 l試劑紅細胞懸液至低離子/抗人球卡各微管中。2) 取25 l待檢血漿/血清加入各管中。3) 37孵育15 min。4) 離心10 分鐘。判讀結果。記錄。結果解釋：1、陽性（）：細胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中。陰性（）：細胞沉積在管底。雙相（d.p.）：既有陽性結果，同時也有陰性結果。溶血（Hemo）：紅細胞溶解，作為陽性結果對待。2、抗體篩選結果：陰性表示被檢血漿/血清未發現不規則抗體；陽性表示有不規則抗體。將結果與試劑紅細胞的抗原格局圖比對，初步確定抗體類型，并進一步檢測以鑒定抗體。交 叉 配 血 操 作 程 序 操 作 規 程樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白殘余干擾反應結果。樣本準備：0.8樣本紅細胞制備：取10l壓積紅細胞至1ml達亞美2號稀釋液中。配套試劑：低離子抗人球蛋白卡 2號稀釋液 操作步驟：1) 取0.8供體紅細胞懸液50 l至低離子/抗人球卡主側管中；取0.8病人紅細胞懸液50 l至低離子/抗人球卡次側管中。2) 取25 l病人血漿/血清加入主側管中；取25 l供體血漿/血清加入次側管中。3) 37孵育15 min。4) 離心10 分鐘。判讀結果。記錄。結果解釋：1、陽性（）：細胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中。陰性（）：細胞沉積在管底。雙相（d.p.）：既有陽性結果，同時也有陰性結果。溶血（Hemo）：紅細胞溶解，作為陽性結果對待。2、交叉配血結果：陰性表示配血成功；陽性表示配血不成功，需進一步檢測。 新生兒溶血癥的“三項試驗”操作規程樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白殘余干擾反應結果。樣本準備：0.8樣本紅細胞制備：取10l壓積紅細胞至1ml達亞美2號稀釋液中。配套試劑：低離子/抗人球卡，2號稀釋液，A1、B標準紅細胞，抗體篩選標準紅細胞，DiaCidel洗滌液（用前以蒸餾水1：10稀釋），DiaCidel放散液，DiaCidel緩沖液操作步驟：紅細胞直接抗球蛋白試驗(DAT)1 取新生兒臍帶血，用達亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）配0.8%的紅細胞懸液。2 在低離子/抗人球卡中加入50l上述紅細胞懸液。3 離心10分鐘，判讀結果。記錄。游 離 試 驗(IAT)1 取新生兒臍帶血，離心，取血漿。2 在低離子/抗人球卡中分別加入50l 0.8%的標準紅細胞。3 各孔均加入25l新生兒臍帶血清。4 37孵育15分鐘，離心10分鐘。判讀結果。記錄。 釋 放 試 驗(IAT)1 用等滲生理鹽水洗滌紅細胞一次，至少需要壓積紅細胞1ml。2 用DiaCidel洗滌液（工作濃度）洗紅細胞4次。3 最后一次洗滌后，小心傾除上清液。可另用試管保留部分上清液，以檢測是否存在不規則抗體。4 將1ml DiaCidel放散液加至紅細胞中，充分混勻。5 立即離心1分鐘，轉速900g（3000 rpm）。6 將放散液移入干凈試管。7 加5滴（250l）DiaCidel緩沖液于放散液中，混勻。若有蘭色出現，表明達到中性，即pH 6.57.5；如為出現蘭色，則需再加入更多DiaCidel緩沖液（每次一滴，邊加邊搖勻）。8 將放散液再次離心1分鐘，轉速900g（3000 rpm）。以完全清除殘存細胞。9 現在放散液可用于檢測了（可以根據臨床實際情況用A1、B標準紅細胞和/或抗體篩選標準紅細胞）。10 在低離子/抗人球卡中分別加入50l 0.8%的標準紅細胞。11 各孔均加入25l放散液。12 37孵育15分鐘，離心10分鐘。判讀結果。記錄。結果解釋：1、 紅細胞直接抗球蛋白試驗(DAT)陽性：紅細胞被致敏。 陰性：紅細胞未被致敏。2、游離試驗(IAT)陽性：血漿中有游離抗體。 陰性：血漿中無游離抗體。3、釋放試驗(IAT)陽性：紅細胞表面有抗體包被。 陰性：紅細胞表面無抗體包被。孕婦血清IgG抗體水平檢測操作規程樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白殘余干擾反應結果。配套試劑：低離子/抗人球卡，2號稀釋液，標準紅細胞（A1、B和/或抗體篩選），0.2 M二巰基乙醇液（17 l 2-Me原液加入1ml 2號稀釋液中，混勻）操作步驟：1 配制中和血漿：取母親血漿與0.2 M二巰基乙醇液（2-Me）各100 l，充分混勻。置37水浴30分鐘，以充分破壞血清中的IgM類抗體。2把孕婦的中和血漿用生理鹽水倍比稀釋效 價1：321：641：1281：256中和血漿（l）10200200200生理鹽水（l）3102002002002 取50 l的標準紅細胞（用何種細胞取決于父方血型）加入低離子/抗人球卡。3 再分別加入25 l不同效價的稀釋血漿（一般為1：64、1：128、1：256三種）。4 37孵育15分鐘。5 離心10分鐘，判讀結果。記錄。結果解釋：1ABO新生兒溶血病：美國血庫協會（AABB）認為1:128滴度為有臨床意義；根據P.L.Mollison所著教材臨床醫學中的輸血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）,將1:512或更高滴度作為有臨床意義抗體。2Rh新生兒溶血病：根據現代血庫和輸血實踐第20章427頁,各實驗室應建立自己的滴度決定水平。18-20周檢測RhD滴度，如：（1）如RhD滴度為1:32或更高，應重復檢測，在20-24周行羊膜穿刺或抽臍帶血進行檢測。（2）如RhD滴度為1:16或更低，應在妊娠第4-6個月，每月檢測一次，第7個月至預產期前，每2周檢測一次RhD滴度。新生兒ABO血型和Rh血型鑒定操作規程樣本要求：血樣最好用枸櫞酸、EDTA或CPD-A抗凝。 若需要用血清替代血漿進行檢測時，應在用前離心，1500g10min，以免纖維蛋白殘余干擾反應結果。樣本準備：0.8樣本紅細胞制備：取10l壓積紅細胞至1ml達亞美2號稀釋液中。配套試劑：達亞美新生兒血型卡 2號稀釋液操作步驟：1 取新生兒臍帶血或靜脈血，用達亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）配0.8%的紅細胞懸液。2 在達亞美新生兒血型卡所有6根微管中，均分別加入50l上述紅細胞懸液。3 離心10分鐘。判讀并記錄結果。結果解釋：1、陽性（）：細胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中。陰性（）：細胞沉積在管底。雙相（d.p.）：既有陽性結果，同時也有陰性結果。溶血（Hemo）：紅細胞溶解，作為陽性結果對待。2、 新生兒由于免疫系統的發育不完全，體內尚不能自主形成相應的抗體。此時體內抗體多來自母親，反定型沒有臨床意義。因此，在達亞美新生兒血型卡中去掉了反定型檢測，增加了抗-AB孔和AHG孔。抗AB可作為對抗-A和抗-B的對照監測；AHG則可進行直接抗人球檢測，初步進行新生兒溶血癥的篩查。達亞美離心機(ID-Centrifuge 12S II)操作規程1. 打開機器電源開關(開關在機箱后部、電源插頭上方)。2. 屏幕出現如下字幕，表示機器進入可使用狀態： Ready3. 按面板上的 STOP/OPEN 鍵，打開機器蓋子。4. 將達亞美卡對稱放入離心機轉頭內，關上機器蓋子。5. 按面板左側的 START 鍵，機器開始運轉。6. 當屏幕出現如下字幕，機器自動進入10分鐘倒計時：1030rpm 10:007. 機器發出警報聲，并同時自動開啟蓋子。8. 取出達亞美卡。達亞美孵育器(ID-Incubator 37S I)操作規程1. 打開機器電源開關(開關在機箱后部、電源插頭上方)。2. 待機：預熱15-30分鐘，溫度自動上升到372(注意在此過程中溫度會有回降)。3. 當屏幕出現如下字幕，表示機器進入可使用狀態：（