生物制藥學試題3一、名詞解釋（每題2分，共20分）1、 生物制藥2、 tPA3、 McAb4、 IFN5、 rHu CSF6、 細胞因子7、 IL8、 脫分化9、 佐劑10、CDR二、填空題（每題2分，共20分）1、 生物藥物包括 、 和 。2、 按學科領域的不同，生物制藥可分為 、 、 和 。3、 植物培養基中含有 、 、 、 、 、 等成分。4、 植物激素包括 、 、 、 、 等五類。5、 農桿菌包括 和 兩類。6、 體外培養的動物細胞根據其生長方式可分為 、 和 三類。7、根據復制的方式（拷貝數）的不同，質粒可分為兩大類型 和 ，其中 是基因工程中常用的類型。8、原核表達載體可分為 、 和 三種類型。9、篩選單克隆抗體陽性克隆的方法有 、 和 。10、抗體的恒定區與 有關，而抗體的可變區與 有關。三、單項選擇題（每題1分，共10分）1、 基因工程制藥中常用的限制性內切酶是（）。A、I型 B、II型C、III型 D、IV型2、 Klenow酶與DNA聚合酶I相比不具有()的活性。A、53核酸內切酶活性B、35核酸內切酶活性C、53核酸外切酶活性D、35核酸外切酶活性3、 下列何種激素不屬于生長素？A、2,4DB、IBAC、NAAD、6BA4、 植物激素（ ）是從經過高壓滅菌處理的鯡魚精細胞DNA中發現的。A、腺嘌呤 B、玉米素C、6芐基腺嘌呤D、激動素5、下列何種DNA聚合酶是不依賴模板的DNA聚合酶？（）A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶I大片段C、逆轉錄酶D、末端轉移酶6、在下列酵母克隆載體中（）不能在染色體外自主復制。A、YIp質粒 B、YRp質粒C、YEp質粒D、YCp質粒7、（）在動物免疫時需要添加佐劑。A、顆粒性抗原 B、細胞性抗原C、可溶性抗原D、半抗原8、人鼠嵌合抗體是由（）組成的？A、人源抗體的V區+鼠源抗體的C區 B、人源抗體的Fab區+鼠源抗體的Fc區C、人源抗體的C區+鼠源抗體的V區 D、人源抗體的Fv區+鼠源抗體的Fc區9、下列何種藥物不屬于人工牛黃的成分？（ ）A、膽酸 B、膽紅素C、膽堿D、膽固醇10、能使肝素失去活性的藥物是（ ）。A、魚精蛋白 B、硫酸軟骨素C、透明質酸D、彈性蛋白酶四、簡答題（每題5分，共20分）1 用于工業生產的動物細胞有哪幾類？各有何特點？2 與克隆載體相比表達載體應具備哪些條件？3 試述溶血和凝血的過程，并請說明抗凝血藥物是如何發揮作用的？4請列舉第二代抗體藥物單克隆抗體藥物的優缺點。五、論述題（每題10分，共30分）1、 試列舉蛋白質類藥物分離純化的方法。2、 試述研制單克隆抗體的工藝流程。3、 請說明HAT選擇培養基篩選脾瘤雜交瘤細胞的機理。答案3一、名詞解釋1、 生物制藥是指利用生物體、生物組織及其代謝產物或生物過程生產藥物的技術。2、 組織型纖溶酶原激活劑，抗凝血藥，抑制纖溶酶的產生。3、 單克隆抗體，針對一個抗原決定簇產生的抗體，由一個B淋巴細胞產生。4、 干擾素(Interferon)是人體細胞分泌的一類活性蛋白質，可以抗病毒、抗腫瘤、提高人體的免疫功能。5、 重組人集落刺激因子，是一組控制粒細胞、單核巨噬細胞及造血細胞增殖和分化的糖蛋白。6、 細胞因子是由免疫細胞或相關細胞分泌的高活性的多肽或蛋白質，能調節機體的生理功能，參與各種細胞的生長、增殖、分化、凋亡。包括細胞生長因子和細胞生長抑制因子。7、 白細胞介素，由白細胞或其它體細胞產生又在白細胞和其它細胞間起調節和介導作用，是一類重要的免疫調節劑，能刺激淋巴細胞的增殖，抗腫瘤。8、 在離體條件下，外植體分化的細胞轉變成分生狀態，形成胚性細胞團（胚性愈傷組織）的現象。9、 佐劑定義：又稱免疫增強劑，伴隨抗原物質注射機體，可增強抗原的免疫原性，佐劑可使弱抗原物質成為有效的抗原。10、 互補決定區，在抗原V區上有三個，決定了抗體和抗原的特異結合。二、填空題11、 天然生化藥物、生物制品和生物技術藥物。12、 發酵工程制藥、基因工程制藥、細胞工程制藥和酶工程制藥13、 大量元素、微量元素、鐵鹽、碳源、維生素、氨基酸14、 生長素、細胞分裂素、赤霉素、脫落酸和乙烯。15、 根癌農桿菌、發根農桿菌16、 貼壁依賴型、非貼壁依賴型和兼性貼壁細胞17、 嚴謹型質粒和松弛型質粒，松弛型質粒18、 融合型表達載體、非融合型表達載體和分泌型表達載體19、 放射免疫、酶聯免疫、免疫熒光技術10、異種抗原性、與抗原的特異結合三、選擇題1、B； 2、C； 3、D； 4、C； 5、D； 6、A； 7、C； 8、C； 9、C ； 10、A 四、簡答題1、原代細胞：組織、器官粉碎消化獲得，很難保證細胞一致性，含多種細胞，費時費力，獲得數目有限二倍體細胞：原代細胞經傳代、篩選、克隆化后得到了純化的單形細胞。可傳代擴增，但壽命有限轉化細胞：染色體異倍化，細胞具有無限增殖的能力，更適于工業化生產，但有致癌的危險。2、1. 具有強啟動子，能為RNA聚合酶所識別 2具有強終止子，使RNA聚合酶只轉錄目的基因而不轉錄其它無關基因。3所產生的mRNA 必須具有翻譯起始信號（原核細胞須有起始密碼AUG和SD序列），以便轉錄后能順利翻譯。4具有阻遏子，使啟動子受到控制，只有當誘導時才能進行轉錄，以獲得外源蛋白質表達合成的最佳時機。3、抗血栓藥包括凝血因子抑制劑（肝素抑制凝血酶原激活劑的產生）和纖溶酶原激活劑 (尿激酶、tPA)4、具有良好的均一性和高度的特異性，單克隆抗體在疾病的診斷中得到廣泛應用。但用于治療時有缺陷：（1） 是鼠源性的，在人體內反復應用會引起人抗鼠抗體（HAMA）反應，發生排斥，從而降低療效，甚至可引起過敏反應。（2） 分子量大，難以進入相關組織發揮藥效。五、論述題1、（1）按溶解度不同進行分離的方法 蛋白質、酶的初步純化往往用沉淀法。蛋白質形成膠體的穩定因素：水化層和同種電荷，打破即沉淀。常用的有鹽析法、有機溶劑沉淀法、等電點沉淀法、與靶物質結合沉淀法（如抗體抗原）等。（2）按分子大小分離的方法 這類方法有超濾法和透析法、分子篩層析法、密度梯度離心法等。其中透析法可用于生物大分子物質的濃縮、分級和脫鹽。（3）按所帶電荷不同進行分離的方法 氨基酸、多肽、蛋白質、酶均為兩性電解質，它們具有等電點，在離開等電點的pH時不同蛋白便會帶不同的電荷。利用帶電性質進行分離。利用電學性質進行分離的方法有離子交換柱層析法、電泳法（醋酸纖維薄膜電泳、PAGE、等電聚焦）等。（4）親和層析法 大部分生物活性物質都有其作用的靶物質（配基 ），如酶與底物（或抑制劑）、抗原與抗體、激素與受體等，利用化合物的之間的特異的親合作用設計的層析分離技術稱為親和層析。蛋白質能與配基特異結合，親和層析分離專一性強，操作簡便。2、以研究的Ag對鼠進行免疫，取脾細胞培養骨髓瘤細胞細胞融合（PEG 融合）選擇培養基篩選融合細胞針對融合細胞產生的抗體進行篩選克隆培養，分離，再克隆培養對單克隆抗體進一步鑒定，大量制備3、細胞融合后可以產生脾脾、脾瘤、瘤瘤雜交細胞以及未融合的細胞，故需采用HAT選擇培養基篩選出脾瘤雜交細胞。HAT選擇培養基的成份H：次黃嘌