PAGE23-分解纖維素的微生物的分別1.纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶等組分。2．纖維素酶的作用：1.纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶等組分。2．纖維素酶的作用：eq\x(纖維素)eq\o(――→,\s\up7(C1酶、CX酶),\s\do5())eq\x(纖維二糖)eq\o(――→,\s\up7(葡萄糖苷酶),\s\do5())eq\x(葡萄糖)3．剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培育基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。4．以纖維素為主要碳源的選擇培育基培育可以增加纖維素分解菌的濃度。5．分別后，為確定得到的是纖維素分解菌，還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗(yàn)。一、纖維素與纖維素酶1．纖維素(1)化學(xué)組成：(2)含量：是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。(3)分布：棉花是自然界中纖維素含量最高的自然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。2．纖維素酶(1)組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)作用：纖維素C1酶、CX酶,纖維二糖葡萄糖苷酶,葡萄糖二、纖維素分解菌的篩選1．原理：纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能分解剛果紅和纖維素形成的紅色復(fù)合物，使培育基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。2．方法：剛果紅染色法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(方法一：先培育微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅))三、試驗(yàn)流程四、纖維素分解菌的進(jìn)一步鑒定1．為確定得到的透亮圈中的菌落是纖維素分解菌，須要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗(yàn)，發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。2．纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采納對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。1．找尋纖維素分解菌應(yīng)到()A．潮濕的環(huán)境中B．富含纖維素的環(huán)境中C．富含無機(jī)鹽的環(huán)境中D．池塘中解析：選B在找尋目的菌株時(shí)，要依據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋，因此找尋纖維素分解菌應(yīng)到富含纖維素的環(huán)境中找尋。2．在加入剛果紅的培育基中出現(xiàn)透亮圈的菌落是()A．分解尿素的細(xì)菌B．硝化細(xì)菌C．分解纖維素的細(xì)菌D．乳酸菌解析：選C分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培育基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。3．微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是()A．C1酶和CX酶B．C1酶和葡萄糖苷酶C．CX酶和葡萄糖苷酶D．C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶解析：選A纖維素酶屬于復(fù)合酶，至少包含C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分。其中C1酶和CX酶能將纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶則將纖維二糖分解成葡萄糖。4．篩選出纖維素分解菌后還須要用下列哪項(xiàng)試驗(yàn)來確定()A．發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶B．發(fā)酵產(chǎn)纖維素C．纖維素酶分解濾紙D．纖維素分解產(chǎn)生葡萄糖解析：選A為確定得到的透亮圈中的菌落是否是纖維素分解菌，須要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。5．下列關(guān)于從土壤中篩選纖維素分解菌的試驗(yàn)步驟的排列依次，正確的是()A．土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→選擇菌落B．土壤取樣→選擇培育→稀釋涂布平板→選擇菌落C．土壤取樣→梯度稀釋→選擇培育→選擇菌落D．土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→選擇培育解析：選B從土壤中篩選纖維素分解菌的試驗(yàn)流程是“土壤取樣→選擇培育→稀釋涂布平板→選擇菌落”，其中選擇培育的目的是增加纖維素分解菌的濃度，因此須要在稀釋涂布平板之前進(jìn)行，最終依據(jù)菌落的特征選擇纖維素分解菌的菌落。eq\a\vs4\al(核心要點(diǎn)一)eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,))eq\a\vs4\al(纖維素酶及纖維素分解菌的篩選)1．纖維素酶(1)纖維素酶的組成及作用：(2)纖維素酶作用的試驗(yàn)驗(yàn)證：試管12濾紙條1cm×6cm1cm×6cm緩沖液(pH＝4.8)10mL11mL纖維素酶(70～80u/mL)1mL—條件將試管固定在50mL的錐形瓶中，在揺床上以140r/min的轉(zhuǎn)速振蕩反應(yīng)1h結(jié)果濾紙條被完全分解濾紙條基本無變更2．纖維素分解菌的篩選——?jiǎng)偣t染色法(1)原理：(2)染色方法：方法一：培育基經(jīng)涂布培育長(zhǎng)出菌落→覆蓋質(zhì)量濃度為1mg/mL的CR溶液10～15min后,倒去CR溶液→加入物質(zhì)的量濃度為1mol/L的NaCl溶液eq\o(→,\s\up7(15min后))倒掉NaCl溶液→出現(xiàn)透亮圈。方法二：配制質(zhì)量濃度為10mg/mL的CR溶液→滅菌→依據(jù)每200mL培育基加入1mL的比例加入CR溶液→混勻→倒平板→接種后培育→出現(xiàn)透亮圈。(3)兩種剛果紅染色法的比較：方法一方法二區(qū)分先培育微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)倒平板時(shí)就加入剛果紅優(yōu)點(diǎn)顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問題缺點(diǎn)操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜簡(jiǎn)單出現(xiàn)假陽性反應(yīng)[名師點(diǎn)撥]在倒平板時(shí)就加入剛果紅簡(jiǎn)單出現(xiàn)假陽性反應(yīng)的緣由：(1)由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。(2)有些微生物具有降解色素的實(shí)力，長(zhǎng)時(shí)間培育會(huì)降解剛果紅，從而形成明顯的透亮圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分。[題組沖關(guān)]1．下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，錯(cuò)誤的是()A．剛果紅可以在倒平板時(shí)加入B．剛果紅可以在菌落形成后加入C．剛果紅在菌落形成前倒平板時(shí)加入，加入的剛果紅不須要滅菌D．在菌落形成后加入剛果紅時(shí)，剛果紅不須要滅菌解析：選C在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入剛果紅，則所加剛果紅要進(jìn)行滅菌，以防雜菌污染，影響纖維素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入，則剛果紅不須要滅菌。2．(全國(guó)卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。(2)在含纖維素的培育基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培育基培育纖維素分解菌時(shí)，培育基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。(3)為從富含纖維素的土壤中分別獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培育基(成分見下表)：酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培育基甲＋＋＋＋－＋＋培育基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示無。據(jù)表推斷，培育基甲________(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌，緣由是__________________；培育基乙________(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌，緣由是___________________________________________________。解析：(1)纖維素酶包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，C1酶、CX酶催化纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)CR能與培育基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，CR-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培育基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌的菌落為中心的透亮圈。(3)培育基甲中未添加瓊脂，為液體培育基，液體培育基上不能形成單菌落，故不能用于分別和鑒別纖維素分解菌。培育基乙中未添加纖維素，不能和CR形成紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定為纖維素分解菌。答案：(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透亮圈(3)不能液體培育基不能用于分別單菌落不能培育基中沒有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌eq\a\vs4\al(核心要點(diǎn)二)eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,))eq\a\vs4\al(分別纖維素分解菌的試驗(yàn)流程及操作)1．試驗(yàn)流程2．選擇培育的操作步驟[名師點(diǎn)撥]纖維素分解菌的篩選與鑒別所用的培育基(1)纖維素分解菌的選擇培育基為液體培育基，利用液體培育基能使養(yǎng)分成分充分消耗，以增加纖維素分解菌的濃度。纖維素分解菌的鑒別培育基為固體培育基，因?yàn)轫氁谂嘤闲纬晌覀內(nèi)庋劭梢姷木洹?2)在上述選擇培育基中能以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)；而在上述鑒別培育基中，絕大多數(shù)微生物都可以正常生長(zhǎng)。(3)選擇培育基的目的是選擇出某種微生物并通過培育增加數(shù)量，而鑒別培育基的目的是鑒別微生物種類。(4)在運(yùn)用依次上，一般先運(yùn)用選擇培育基培育，梯度稀釋后再用鑒別培育基鑒別。3．纖維素分解菌與尿素分解菌的分別與鑒定比較纖維素分解菌的分別與鑒定尿素分解菌的分別與鑒定分別條件纖維素為主要碳源尿素作為唯一氮源鑒定方法在以纖維素為主要碳源的培育基上，利用剛果紅染色法，出現(xiàn)透亮圈培育基中加入酚紅指示劑，變紅色鑒定原理分解纖維素的微生物產(chǎn)生纖維素酶，將纖維素分解為纖維二糖或葡萄糖，使纖維素—?jiǎng)偣t復(fù)合物降解而出現(xiàn)透亮圈分解尿素的微生物合成脲酶，將尿素分解產(chǎn)生NH3，使pH上升，加入酚紅變紅色步驟土壤取樣→制備培育基→選擇培育→富集培育→梯度稀釋→涂布培育→剛果紅染色法→挑取菌落→進(jìn)一步鑒定土壤取樣→制備培育基→樣品梯度稀釋→涂布平板→培育視察→進(jìn)一步鑒定[題組沖關(guān)]3．下列關(guān)于分別纖維素分解菌的試驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．經(jīng)選擇培育后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上B．選擇培育這一步可省略，但得到的纖維素分解菌會(huì)較少C．可通過定時(shí)測(cè)定葡萄糖產(chǎn)量的變更來衡量纖維素分解菌培育液中的纖維素酶產(chǎn)量D．比照組可用等量的纖維素分解菌培育液涂布到不含纖維素的培育基上解析：選A經(jīng)選擇培育后，需經(jīng)稀釋后才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上。4．運(yùn)用液體選擇培育基培育纖維素分解菌的目的是()①用液體選擇培育基可獲得大量纖維素分解菌②用液體培育基便于稀釋涂布平板③纖維素分解菌只能在液體培育基中生長(zhǎng)④用液體培育基可鑒別纖維素分解菌A．①②B．①③C．②④D．③④解析：選A運(yùn)用液體選擇培育基培育纖維素分解菌，一方面可以獲得大量纖維素分解菌，另一方面便于稀釋涂布平板。纖維素分解菌也可以在固體培育基上生長(zhǎng)；鑒別纖維素分解菌運(yùn)用的是固體培育基。eq\a\vs4\al(核心要點(diǎn)三)eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,))eq\a\vs4\al(培育基與微生物的分別和鑒定)1．培育基的類型及應(yīng)用劃分標(biāo)準(zhǔn)培育基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培育基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培育半固體培育基加凝固劑，如瓊脂視察微生物的運(yùn)動(dòng)、對(duì)微生物進(jìn)行分類及鑒定固體培育基對(duì)微生物進(jìn)行分別、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分自然培育基含化學(xué)成分不明確的自然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培育基培育基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)對(duì)微生物進(jìn)行分類、鑒別用途選擇培育基添加(或缺少)某種化學(xué)成分培育、分別出特定微生物鑒別培育基在培育基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物2．選擇培育基和鑒別培育基的應(yīng)用實(shí)例類型實(shí)例選擇培育基培育基中加入青霉素分別得到酵母菌和霉菌培育基中加入高濃度的食鹽用于分別得到金黃色葡萄球菌以尿素作為唯一氮源的培育基用于分別分解尿素的細(xì)菌不添加氮源的培育基用于分別固氮微生物石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分別能消退石油污染的微生物的目的培育基放在高溫環(huán)境中培育可得到耐高溫的微生物鑒別培育基添加伊紅和美藍(lán)的培育基可以鑒別大腸桿菌(菌落呈深紫色并帶金屬光澤)[題組沖關(guān)]5．下列有關(guān)細(xì)菌培育的敘述，正確的是()A．在瓊脂固體培育基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B．在培育基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C．向液體培育基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D．在半固體培育基中接種細(xì)菌培育后可以視察其運(yùn)動(dòng)解析：選D菌落是指單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培育基上大量繁殖時(shí)，形成的一個(gè)肉眼可見的、具有確定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，所以單個(gè)菌落中通常只有一種細(xì)菌；青霉素培育基往往是真菌選擇培育基，加青霉素的培育基能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)而促進(jìn)真菌生長(zhǎng)；破傷風(fēng)桿菌的代謝類型屬于異養(yǎng)厭氧型，向培育基中通入氧氣會(huì)抑制其生長(zhǎng)。6．大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。下面是其培育基配方：成分蛋白胨乳糖eq\o(\s\up7(磷酸),\s\do5(二氫鉀))瓊脂蒸餾水eq\o(\s\up7(2%伊紅),\s\do5(水溶液))eq\o(\s\up7(0.5%美藍(lán)),\s\do5(水溶液))含量10g10g2g20～30g1000mL20mL13mL回答下列問題：(1)該培育基中，蛋白胨為大腸桿菌供應(yīng)的主要養(yǎng)分有________________和維生素。從物理性質(zhì)來看，該培育基屬于________________培育基。(2)對(duì)該培育基進(jìn)行滅菌時(shí)，可采納________________法。在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培育基放在恒溫箱中培育一段時(shí)間，視察是否有菌落生成，其目的是________________________________。(3)為檢測(cè)嚴(yán)峻污染水體中大腸桿菌的數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培育基中，應(yīng)選擇顏色為________________的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推想樣品中的活菌數(shù)，其原理是______________________________________________。解析：微生物培育基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。鑒別、培育大腸桿菌可運(yùn)用伊紅美藍(lán)培育基，菌落呈黑色或紫黑色且有金屬光澤。(1)該培育基中，蛋白胨為大腸桿菌供應(yīng)的主要養(yǎng)分有碳源、氮源和維生素。從物理性質(zhì)來看，該培育基加入瓊脂作為凝固劑，因此屬于固體培育基。(2)對(duì)該培育基進(jìn)行滅菌時(shí)，可采納高壓蒸汽滅菌法。在接種大腸桿菌前，需先將滅菌后的空白培育基放在恒溫箱中培育一段時(shí)間，視察是否有菌落生成，其目的是檢測(cè)培育基制備是否合格(滅菌是否徹底)。(3)大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。為檢測(cè)嚴(yán)峻污染水體中大腸桿菌的數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培育基中，應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推想樣品中的活菌數(shù)的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。答案：(1)碳源、氮源固體(2)高壓蒸汽滅菌檢測(cè)培育基制備是否合格(滅菌是否徹底)(3)黑色當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌7．(全國(guó)卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下，可以確定程度地沉降。某探討小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布狀況。試驗(yàn)步驟如下：①配制培育基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設(shè)置空白比照組和若干試驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培育一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：(1)該培育基中微生物所需的氮來源于______________。若要完成步驟②，該培育基中的成分X通常是_____________________________________________。(2)步驟③中，試驗(yàn)組的操作是____________________________________________。(3)若在某次調(diào)查中，某一試驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白比照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法____________(填“正確”或“不正確”)。解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟②，須要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培育基，所以培育基中要有瓊脂。(2)該試驗(yàn)的空白比照組為不進(jìn)行處理的無菌平板，試驗(yàn)組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時(shí)間。(3)若空白比照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明試驗(yàn)過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻妆日战M的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致試驗(yàn)變量不唯一，不能確定試驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出試驗(yàn)組的菌落平均值。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各試驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間(3)污染不正確[隨堂基礎(chǔ)鞏固]1．下列關(guān)于纖維素的敘述，錯(cuò)誤的是()A．纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物B．纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，是因?yàn)檫@些微生物能產(chǎn)生纖維素酶C．植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素D．自然界中的各種生物均能把纖維素分解成葡萄糖，從而作為生物體的能量來源解析：選D自然界中很多生物都不能分解纖維素，只有能合成纖維素酶的生物才能分解纖維素。2．下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是()A．纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分B．纖維素酶可以把纖維素分解成葡萄糖C．纖維素酶可用于去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁D．葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖解析：選D纖維素酶是一種可以把纖維素分解為葡萄糖的酶，它是一種復(fù)合酶，至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分。前兩種酶將纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。3．要將能分解纖維素的細(xì)菌從土壤中分別出來，應(yīng)將它們接種在()A．含有蛋白胨的固體培育基上B．加入指示劑的鑒別培育基上C．只含纖維素粉而無其他碳源的選擇培育基上D．含四大養(yǎng)分要素的培育基上解析：選C將細(xì)菌接種在以纖維素為唯一碳源的培育基上，據(jù)此可將能分解纖維素的細(xì)菌分別出來。能產(chǎn)生纖維素酶的細(xì)菌能夠以纖維素作為碳源和能源，不能分解纖維素的細(xì)菌由于缺乏碳源而不能正常生長(zhǎng)繁殖。4．在加入剛果紅的培育基中會(huì)出現(xiàn)透亮圈，產(chǎn)生的透亮圈是()A．剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物B．剛果紅與纖維二糖形成的復(fù)合物C．纖維素分解后形成的葡萄糖導(dǎo)致的D．以纖維素分解菌為中心形成的解析：選D剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅與纖維素的復(fù)合物就無法形成，培育基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。5．運(yùn)用剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅應(yīng)在()①制備培育基時(shí)②梯度稀釋時(shí)③倒平板時(shí)④涂布時(shí)⑤長(zhǎng)出菌落時(shí)A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤解析：選C常用的剛果紅染色法有兩種：一種是先培育微生物，長(zhǎng)出菌落后再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅，最終，兩種染色法都可以在培育基上視察到以纖維素分解菌為中心的透亮圈。6．(江蘇高考)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分別、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是()A．生活污水中含有大量微生物，是分別產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B．篩選培育基中須要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，只能通過劃線進(jìn)一步純化D．斜面培育基中含有大量養(yǎng)分物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株解析：選B生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對(duì)較少，產(chǎn)漆酶菌株也較少，不宜作為分別產(chǎn)漆酶菌株的樣品；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素，在篩選培育基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時(shí)可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落；在涂布平板上生長(zhǎng)的菌落可通過平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)一步純化；對(duì)于須要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采納甘油管藏的方法，即在－20℃的冷凍箱中保存。7．分析下面纖維素分解菌的鑒別培育基的配方，回答問題：成分含量CMC-Na5～10g酵母膏1gKH2PO40.25g瓊脂15g土豆汁100mL將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL(1)此培育基配方中為微生物供應(yīng)碳源的是________________________。(2)此配方為________培育基(依據(jù)物理狀態(tài)劃分)。(3)若用此培育基鑒別纖維素分解菌，還應(yīng)加入________染料。(4)纖維素分解菌能否在不含纖維素但富含其他有機(jī)質(zhì)的環(huán)境中生存？________。(5)若通過試驗(yàn)測(cè)定該培育基用于鑒定纖維素分解菌的最適pH，僅憑一次試驗(yàn)?zāi)芊窬_測(cè)出？________。緣由是_____________________________________________________。解析：(1)培育基中能夠供應(yīng)碳元素的物質(zhì)稱為碳源，該培育基中含有碳元素的物質(zhì)有CMC-Na、酵母膏、土豆汁。(2)該培育基含有凝固劑成分，因此依據(jù)物理狀態(tài)劃分屬于固體培育基。(3)該培育基含有CMC，可以與剛果紅結(jié)合形成紅色復(fù)合物，若培育基中含有纖維素分解菌，則會(huì)形成以其為中心的透亮圈。(4)纖維素分解菌為異養(yǎng)型生物，也可生活在其他富含有機(jī)質(zhì)的環(huán)境中，只是數(shù)量不如富含纖維素的環(huán)境中多。(5)由于所限制的pH不是連續(xù)的，試驗(yàn)中也可能存在誤差等，因此僅憑一次試驗(yàn)是不能精確測(cè)出其最適pH的。答案：(1)CMC-Na、酵母膏、土豆汁(2)固體(3)剛果紅(4)能(5)不能所限制的pH不是連續(xù)的，試驗(yàn)存在誤差[課時(shí)跟蹤檢測(cè)]一、選擇題1．剛果紅是一種酸性染料，能將下列哪些物質(zhì)染色()①纖維二糖②葡萄糖③纖維素④彈性纖維A．①③B．①②C．②③D．③④解析：選D剛果紅是一種酸性染料，可與纖維素類的多糖反應(yīng)形成紅色復(fù)合物。2．下列有關(guān)纖維素酶作用的驗(yàn)證明驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．可用報(bào)紙、復(fù)印紙來代替濾紙條B．兩支試管中所加緩沖液的量相等C．在確定范圍內(nèi)，濾紙條的分解速度會(huì)隨著纖維素酶含量的增加而加快D．振蕩會(huì)加快濾紙條的分解解析：選B在驗(yàn)證纖維素酶作用的試驗(yàn)中，兩支試管所加緩沖液的量分別為10mL和11mL，加入10mL緩沖液的試管中還需滴加1mL的纖維素酶，而另一支試管則不加。3．下列對(duì)剛果紅染色法的敘述，錯(cuò)誤的是()A．可以先培育微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)B．可以在倒平板時(shí)就加入剛果紅C．既可以先培育微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，也可以在倒平板時(shí)就加入剛果紅D．可以將剛果紅與培育基中的其他物質(zhì)混合后再滅菌倒平板解析：選D剛果紅染色法一般有兩種，一種是先培育微生物長(zhǎng)出菌落后，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)；一種是配制好培育基滅菌后，倒平板時(shí)加入經(jīng)滅菌處理的剛果紅，再接種微生物培育，直至產(chǎn)生透亮圈。4．加工橘子罐頭時(shí)采納酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)峻污染。目前運(yùn)用酶解法去除橘絡(luò)可削減污染。下列生長(zhǎng)在特定環(huán)境中的4類微生物，不能產(chǎn)生所用酶的是()A．生長(zhǎng)在麥麩上的黑曲霉B．生長(zhǎng)在酸奶中的乳酸菌C．生長(zhǎng)在棉籽殼上的平菇D．生長(zhǎng)在木屑上的木霉解析：選B依據(jù)題目分析可知須要的酶為纖維素酶，黑曲霉、平菇、木霉分別以分解麥麩、棉籽殼、木屑為生，故能產(chǎn)生纖維素酶，生長(zhǎng)在酸奶中的乳酸菌不能合成纖維素酶。5．若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起采納下列哪組培育基可將它們分別()A．加食鹽的培育基和蛋白胨培育基B．伊紅和美藍(lán)培育基和無氮培育基C．斜面培育基和液體培育基D．加青霉素的培育基和液體培育基解析：選B大腸桿菌的代謝產(chǎn)物可與伊紅和美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈黑色并帶金屬光澤；圓褐固氮菌能自行固氮，可用無氮培育基選擇。6．下列關(guān)于纖維素分解菌分別試驗(yàn)的說法，錯(cuò)誤的是()A．通常采納剛果紅染色法篩選纖維素分解菌B．從土壤中分別含量較多的微生物時(shí)，選擇培育可以省略C．該試驗(yàn)用到選擇和鑒別培育基D．在用剛果紅染色法中，若將微生物培育在事先加入剛果紅的培育基上，出現(xiàn)透亮圈的菌落確定為所需菌種解析：選D剛果紅能鑒別纖維素，可采納剛果紅染色法篩選纖維素分解菌；從土壤中分別含量較多的微生物時(shí)，選擇培育可以省略，但須要進(jìn)行鑒別培育；有些微生物具有降解色素的實(shí)力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培育過程中會(huì)降解剛果紅而形成明顯的透亮圈，故出現(xiàn)透亮圈的菌落不確定為所需菌種。7．在從土壤中分別出分解纖維素的微生物的試驗(yàn)中，先進(jìn)行選擇培育，再進(jìn)行剛果紅染色法篩選。先進(jìn)行選擇培育的目的是()A．增加纖維素分解菌的濃度B．除去雜菌，獲得能分解纖維素的純菌種C．殺滅不須要的微生物D．在形成的菌落上獲得纖維素分解菌種解析：選A在選擇培育的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物得到快速繁殖，而那些不適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物的繁殖被抑制，因此選擇培育可以起到增加纖維素分解菌濃度的作用，但是不能得到單一菌種；該試驗(yàn)所用的選擇培育基中的化學(xué)成分不能起到殺滅不須要的微生物的作用；該試驗(yàn)的選擇培育基是液體培育基，微生物在培育液中繁殖，不能獲得目標(biāo)菌落。8．纖維素酶的測(cè)定方法一般是()A．對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定B．對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定C．對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定D．對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定解析：選B測(cè)定纖維素酶的方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。9．下列有關(guān)培育基和菌種鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是()A．在培育基中加入較高濃度的氯化鈉，可篩選出抗鹽突變體植物B．可利用固體培育基上菌落的特征來推斷和鑒別細(xì)菌的類型C．利用剛果紅培育基上是否形成透亮圈來篩選纖維素分解菌D．在無氮培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌解析：選D在只含有尿素作為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。10.試驗(yàn)測(cè)定鏈霉素對(duì)3種細(xì)菌的抗生素效應(yīng)，用3種細(xì)菌在事先打算好的瓊脂塊平板上劃3條等長(zhǎng)的平行線(3條線均與圖中的鏈霉素帶接觸)，將平板置于37℃條件下恒溫培育3d，結(jié)果如圖所示。依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果分析，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．鏈霉素能抑制結(jié)核桿菌的生長(zhǎng)B．鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌比對(duì)霍亂弧菌更有效C．鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌比對(duì)傷寒桿菌更有效D．鏈霉素可以用于治療傷寒解析：選D依據(jù)圖示對(duì)試驗(yàn)過程和結(jié)果進(jìn)行分析，鏈霉素對(duì)霍亂弧菌和結(jié)核桿菌均有抑制作用，且對(duì)結(jié)核桿菌更有效，而對(duì)傷寒桿菌則不起作用。二、非選擇題11．當(dāng)今世界，能源和資源危機(jī)日趨嚴(yán)峻，人們希望能借助纖維素酶將地球上最豐富(占全球總生物量80%)、最廉價(jià)的可再生資源纖維素轉(zhuǎn)化為能干脆利用的能源和資源。纖維素酶可以從能分解纖維素的細(xì)菌培育液中提取。某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下分別土壤中纖維素分解菌的試驗(yàn)流程：土壤取樣→選擇培育→()→鑒別培育(1)請(qǐng)補(bǔ)充試驗(yàn)流程：_________________________________________________；找不到合適的取樣環(huán)境，可實(shí)行的方法是_________________________________________________。(2)選擇培育的目的是______________________________________________；探討人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培育基進(jìn)行選擇培育，該培育基為________(填“液體”或“固體”)培育基，其中加入的化合物A是______，為微生物的生長(zhǎng)供應(yīng)________。(3)為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以在鑒別培育基上加入________染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用____________法接種到鑒別培育基上，然后選擇產(chǎn)生____________的菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培育。解析：(1)經(jīng)選擇培育后，需經(jīng)稀釋后才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上。(2)可用含纖維素的液體培育基進(jìn)行選擇培育來增加纖維素分解菌的濃度。(3)剛果紅是一種染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物；培育基中有分解纖維素微生物存在的區(qū)域，纖維素會(huì)被分解，將出現(xiàn)透亮圈。答案：(1)梯度稀釋將富含纖維素的物質(zhì)埋在土壤中(2)增加纖維素分解菌的濃度液體纖維素碳源(3)剛果紅涂布平板透亮圈12．如圖為利用農(nóng)作物廢棄物——秸稈代替糧食作為原料生產(chǎn)燃料乙醇的主要技術(shù)及廢棄物利用的流程圖。請(qǐng)回答下列問題：(1)圖中①所需微生物可從土壤中獲得，獲得該微生物的過程稱為微生物的______________，選擇培育基應(yīng)以____________為唯一碳源。純化菌種時(shí)，將篩選獲得的菌液稀釋后用________________法接種到培育基上。在篩選纖維素分解菌的過程中，常采納______________法，________能與培育基上的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物就無法形成，培育基上就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的__________，可以此來篩選纖維素分解菌。(2)圖中②酒精發(fā)酵階段接種的微生物是__________，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度限制在________℃。在培育微生物的過程中，對(duì)培育基和接種環(huán)采納的滅菌方法分別是________________、__________________。(3)圖中③產(chǎn)生的農(nóng)作物廢棄物，主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素，但是酵母菌無法干脆利用農(nóng)作物廢棄物，緣由是其______________________________________________。(4)若要利用圖示中的發(fā)酵產(chǎn)物生產(chǎn)醋酸，常用的菌種為__________，則下一階段的發(fā)酵過程中應(yīng)通入______________，溫度嚴(yán)格限制在____________℃。解析：(1)過程①加入了微生物，其作用是使固體的秸稈顆粒分解，從土壤中獲得①所需微生物的過程稱為微生物的分別；由于分別的微生物能分解纖維素，故選擇培育基應(yīng)以纖維素為唯一碳源；純化菌種時(shí)，將菌液稀釋后用稀釋涂布平板法接種到培育基上；在篩選纖維素分解菌時(shí)，常利用剛果紅染色法，可通過是否產(chǎn)生透亮圈來篩選纖維素分解菌。(2)酒精發(fā)酵階段接種的微生物是酵母菌，20℃左右最適合酵母菌繁殖，故酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度限制在18～25℃。在培育微生物的過程中，對(duì)培育基和接種環(huán)采納的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。(3)由于酵母菌細(xì)胞缺乏能分解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的酶系統(tǒng)，故農(nóng)作物廢棄物無法被酵母菌干脆利用。(4)酵母菌發(fā)酵產(chǎn)物主要為乙醇，以乙醇為原料生產(chǎn)乙酸的過程為醋酸發(fā)酵，醋酸菌代謝類型為異養(yǎng)需氧型，故發(fā)酵過程中應(yīng)通入無菌空氣，并將溫度限制在30～35℃之間。答案：(1)分別纖維素稀釋涂布平板剛果紅染色剛果紅透亮圈(2)酵母菌18～25高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌(3)缺乏相應(yīng)分解酶系(或缺乏能分解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的酶)(4)醋酸菌無菌空氣30～3513．(江蘇高考)人工瘤胃仿照了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的養(yǎng)分價(jià)值。為了增加發(fā)酵效果，探討人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素實(shí)力進(jìn)行了探討。請(qǐng)回答下列問題：(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不須要的是________(填序號(hào))。①酒精燈②培育皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時(shí)，滴加到培育基表面的菌懸液量不宜過多的緣由是________________________________________________________________________。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培育基時(shí)，若試管口粘附有培育基，須要用酒精棉球擦凈的緣由是________________________________。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。探討人員在剛果紅培育基平板上，篩到了幾株有透亮降解圈的菌落(如圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的______________有關(guān)。圖中降解纖維素實(shí)力最強(qiáng)的菌株是______(填圖中序號(hào))。(5)探討人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖，推想菌株__________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是________________________________________________________________________。解析：(1)在樣品稀釋和涂布平板過程中，須要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行操作，培育皿用于盛放培育基并培育細(xì)菌，無菌水作稀釋的溶劑，此處唯一用不到的是顯微鏡。(2)在涂布平板時(shí)，要取少量菌懸液滴加到培育基表面，因?yàn)榧偃绲渭泳鷳乙毫窟^多，菌懸液就會(huì)積累在培育基表面影響分別效果。(3)在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培育基時(shí)，假如試管口粘附有培育基，就很簡(jiǎn)單使棉塞受到污染，因此，須要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛簟?4)因?yàn)閯偣t可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，且不與纖維素降解產(chǎn)物反應(yīng)。所以在剛果紅培育基平板上，菌落四周有透亮降解圈是纖維素被降解的結(jié)果，降解圈大小由纖維素酶的活性和量確定。圖中菌落①四周的降解圈最大，因此其降解纖維素的實(shí)力最強(qiáng)。(5)考慮到人工瘤胃的發(fā)酵過程會(huì)使發(fā)酵液酸性增加，溫度上升，在這個(gè)前提下，視察不同溫度和pH條件下測(cè)得的發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果圖，從圖中可以看出，在高溫柔低pH條件下都是J4菌株中的纖維素酶的活性較高，因而該菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。答案：(1)③(2)培育基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體積累，影響分別效果(3)避開培育基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高(時(shí)間：45分鐘滿分：100分)一、選擇題(每小題4分，共48分)1．下列關(guān)于配制培育基的敘述，正確的是()A．配制固體培育基必需加入瓊脂B．pH調(diào)至6.5～7.5的培育基可培育放線菌C．培育自生固氮菌的培育基中不需添加氮源D．發(fā)酵工程一般用半固體培育基或液體培育基解析：選C在配制固體培育基時(shí)，可加入瓊脂作為凝固劑，但瓊脂并不是唯一的凝固劑；放線菌生長(zhǎng)相宜的pH為7.5～8.5，細(xì)菌生長(zhǎng)相宜的pH為6.5～7.5；發(fā)酵工程應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐一般用液體發(fā)酵，可以連續(xù)培育，提高產(chǎn)量；自生固氮菌能夠?qū)⒖諝庵械腘2還原為NH3，因此培育基中不需加氮源。2．某同學(xué)用牛肉膏蛋白胨固體培育基進(jìn)行大腸桿菌純化培育，下列說法錯(cuò)誤的是()A．蛋白胨可為大腸桿菌的生長(zhǎng)供應(yīng)氮源和維生素等養(yǎng)分B．牛肉膏蛋白胨培育基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后調(diào)整pHC．倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置D．大腸桿菌純化培育可以采納平板劃線法或稀釋涂布平板法解析：選B培育基應(yīng)先調(diào)整pH后滅菌，若先滅菌后調(diào)整pH，調(diào)整pH時(shí)會(huì)污染培育基。3．微生物培育是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)，下列相關(guān)敘述正確的是()A．病毒和細(xì)菌的培育基成分相同B．平板劃線法中的“線”是連續(xù)的、不分區(qū)域的C．微生物培育基中并不是都必需添加碳源或氮源D．在微生物培育操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培育基和培育皿進(jìn)行消毒解析：選C病毒必需寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行生命活動(dòng)，如可用活雞胚培育病毒；平板劃線法每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，劃線是分區(qū)域的；微生物種類不同，對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的需求不同，應(yīng)依據(jù)所培育微生物的須要確定培育基的成分；對(duì)培育基和培育皿要進(jìn)行滅菌，而不是消毒。4．稀釋涂布平板法是微生物培育中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．操作中須要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B．需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培育基表面C．不同濃度的菌液均可在培育基表面形成單個(gè)的菌落D．對(duì)培育基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理解析：選C只有菌液稀釋到確定程度后，在固體培育基表面才能形成單個(gè)的菌落，否則可能會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)菌共同形成一個(gè)菌落，或菌落出現(xiàn)重疊。5．某學(xué)者欲探討被石油污染過的土壤中細(xì)菌的數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是()A．利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B．用以石油為唯一碳源的培育基篩選C．采納稀釋涂布平板法分別菌種D．稱取和稀釋土壤樣品時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰旁解析：選A分別細(xì)菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，但平板劃線法不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌，要以石油作為培育基中唯一的碳源；篩選細(xì)菌的整個(gè)操作過程都須要在無菌條件下進(jìn)行，所以稱取、稀釋土壤樣品應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行。6．下表為某培育基的配方，有關(guān)敘述正確的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.從物理性質(zhì)看該培育基屬于液體培育基，從用途看該培育基屬于選擇培育基B．培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C．該培育基缺少供應(yīng)生長(zhǎng)因子的物質(zhì)D．該培育基調(diào)整合適的pH后就可以用于接種菌種解析：選B此培育基中沒有瓊脂等凝固劑，因此為液體培育基；伊紅、美藍(lán)能對(duì)大腸桿菌起鑒別作用。糖類(尤其是葡萄糖)是最常用的碳源；蛋白胨主要用作氮源，也供應(yīng)生長(zhǎng)因子，或作為異養(yǎng)型微生物的碳源。該培育基調(diào)整pH并滅菌后才能接種運(yùn)用。7．下列關(guān)于微生物培育和利用的敘述，錯(cuò)誤的是()A．利用稀釋涂布平板法既能分別微生物也能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B．接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步分散獲得單個(gè)菌落C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培育基可選擇和鑒別尿素分解菌D．選擇培育基作用的原理是顯現(xiàn)某微生物的特征，以區(qū)分于其他微生物解析：選D稀釋涂布平板法能分別純化微生物也能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)；連續(xù)劃線是將聚集的菌種逐步分散，以獲得單菌落；尿素分解菌的分別可以選用以尿素為唯一氮源，且含酚紅的培育基；選擇培育基是在培育基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或變更某一理化性質(zhì)，使某一微生物正常生長(zhǎng)，而其他微生物則被殺滅或生長(zhǎng)受到抑制，從而選出所須要的微生物。8．下列有關(guān)分解纖維素的微生物分別的敘述，錯(cuò)誤的是()A．在加入剛果紅的培育基中，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌釋放的纖維素酶分解后會(huì)出現(xiàn)透亮圈B．在用剛果紅染色時(shí)只能先培育微生物再加入剛果紅，不能在倒平板時(shí)加入C．纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法D．纖維素酶的測(cè)定方法，一般是對(duì)所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定解析：選B剛果紅染色有兩種方法，一種是先培育微生物再加入剛果紅，另一種是在倒平板時(shí)就將剛果紅染液加入培育基中，然后再培育微生物，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，但都可以應(yīng)用。9．微生物(除病毒外)須要從外界汲取養(yǎng)分物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列有關(guān)微生物養(yǎng)分的說法，正確的是()A．乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B．微生物生長(zhǎng)中不行缺少的一些微量的無機(jī)物稱為生長(zhǎng)因子C．培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的增殖越有利D．生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的組成成分，微生物本身合成這些生長(zhǎng)因子的實(shí)力往往不足解析：選D微生物的養(yǎng)分物質(zhì)包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子。乳酸菌的碳源是有機(jī)物，而硝化細(xì)菌可以利用無機(jī)物作為碳源；生長(zhǎng)因子是微生物體內(nèi)不能合成的，須要量很小的一些有機(jī)物；培育基中養(yǎng)分物質(zhì)濃度過高會(huì)造成微生物細(xì)胞失水，不利于微生物的生長(zhǎng)、繁殖。10．農(nóng)田土壤的表層，自生固氮菌的含量比較多，將用表層土制成的稀泥漿，接種到特制的培育基上培育，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開，對(duì)培育基的要求是()①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒溫箱培育⑧28～30℃溫度下培育A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．②④⑤⑧D．①④⑥⑦解析：選C自生固氮菌是異養(yǎng)菌，生長(zhǎng)繁殖須要有機(jī)碳源；自生固氮菌能利用空氣中的氮?dú)?，培育基中不須要加氮源，固氮菌能生長(zhǎng)繁殖，不能固氮的菌不能生長(zhǎng)繁殖；自生固氮菌生長(zhǎng)繁殖的最適溫度是28～30℃；自生固氮菌對(duì)抗生素敏感，培育基中不能加抗生素，所以從土壤浸出液中分別出自生固氮菌對(duì)培育基的要求是②不加抗生素、④不加氮素、⑤加葡萄糖、⑧28～30℃溫度下培育。11．下表表示在不同培育基中細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖狀況(A、B、C、H、I、J、K、M為培育基的成分，“＋”表示生長(zhǎng)，“－”表示不生長(zhǎng))，請(qǐng)分析細(xì)菌不能合成下列哪種物質(zhì)()培育基成分A、B、CA、B、CI、MA、B、CH、KA、B、CM、JA、B、CI、KA、B、CH、JA、B、CK、M生長(zhǎng)狀態(tài)－－＋－＋－＋A．HB．IC．KD．M解析：選C凡添加了物質(zhì)K的培育基，細(xì)菌都能生長(zhǎng)，反之則不能生長(zhǎng)，說明物質(zhì)K是細(xì)菌不能合成的。12．現(xiàn)有兩種固體培育基，已知其配制時(shí)所加的成分和含量如下表，用這兩種培育基分別去分別土壤中的兩種微生物，你認(rèn)為它們適于分別()成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培育基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培育基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%——A.甲培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌B．甲培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌C．甲培育基適于分別酵母菌；乙培育基適于分別真菌D．甲培育基適于分別自養(yǎng)型共生細(xì)菌；乙培育基適于分別異養(yǎng)型共生固氮菌解析：選B固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生固氮菌，需和其他生物結(jié)合在一起才能生存的是共生固氮菌，甲培育基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物，由此推出該培育基適于分別異養(yǎng)型的自生固氮菌；乙培育基中不含有機(jī)碳源，所以可用來分別培育自養(yǎng)型的自生固氮菌。二、非選擇題(共52分)13．(17分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某探討小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分別等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采納稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時(shí)間，這樣做的目的是________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培育后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________個(gè)。(2)該小組采納平板劃線法分別水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過________滅菌，在其次次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端起先劃線，這樣做的目的是________________________________________________________________________。(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培育，另一部分進(jìn)行振蕩培育。結(jié)果發(fā)覺：振蕩培育的細(xì)菌比靜置培育的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其緣由是：振蕩培育能提高培育液中____________的含量，同時(shí)可使菌體與培育液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。解析：(1)為了檢測(cè)培育基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培育一段時(shí)間。0.1mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38(個(gè))活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380(個(gè))，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104(個(gè))，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1000＝3.8×107(個(gè))。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到快速?gòu)氐诇缇哪康摹Ｔ谄浯未渭耙院蟮膭澗€時(shí)，總是從上一次劃線的末端起先劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培育基中細(xì)菌的分布呈線形，是用平板劃線法接種培育后得到的結(jié)果；B培育基中細(xì)菌勻稱分布，是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。(4)振蕩培育可以提高培育液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培育液充分接觸，提高了養(yǎng)分物質(zhì)的利用率，因此振蕩培