質量控制培訓1可編輯ppt質量控制簡述質量控制關鍵點詳解實驗室質量控制的實施2可編輯ppt質量控制簡述

質量控制（qualitycontrol）是指為達到質量要求所采取的作業技術和活動。

質量控制的目的——控制樣品檢測的各個環節和服務產生、形成或實現過程中的各個程序并使它們達到規定的要求，把不符合控制在其形成的早期并加以消除。檢測實驗室的質量控制應嚴格執行實驗室的各項程序文件的規定和檢測工作的作業指導書。不僅要控制檢測過程的結果，而且應控制影響檢測結果產生過程質量的各種因素，尤其是要控制其中的關鍵因素，如人員的能力、環境的條件、設備的準確度、外部采購供應的材料等。對于分析檢測實驗室而言，質量控制的措施應當體現在：管理要素：組織結構、文件控制、記錄控制、檢測和校準的控制等……技術要素：人員、設施、材料、方法、環境等……可執行性：接受度/適用性/管理可控/效果易于評估3可編輯ppt質量控制的分類及手段外部質量控制內部質量控制內部質量控制——技術質量控制和工作質量控制。技術質量控制包括：測定方法、操作水平、儀器設備校準、材料核查、實驗環境等。工作質量控制包括：遵守實驗室程序文件規定、下一道工序對上一道工序的檢查、及時糾錯、預防措施、最終檢測報告質量控制等。實驗室間比對試驗根據預定規定的條件，由兩個或多個實驗室對相同或類似被測物品進行校準/檢測的組織、實施和評價。能力驗證利用實驗室間比對確定實驗室的檢測能力。

本質：實驗室間比對試驗，能力驗證的組織和實施要經過考核。測量審核實驗室對被測物品進行實際測試，將測試結果與參考值進行比較的活動。（對一個參加者進行一對一能力評價的能力驗證計劃）統計過程控制（SPC）樣品復測相關性檢查內部比對(人員/儀器/方法)

4可編輯pptCNAS-CL01:20187.7確保結果有效性7.7.1實驗室應有監控結果有效性的程序。記錄結果數據的方式應便于發現其發展趨勢，如可行，應采用統計技術審查結果。實驗室應對監控進行策劃和審查，適當時，監控應包括但不限于以下方式：a)使用標準物質或質量控制物質；b)使用其他已校準能夠提供可溯源結果的儀器；c)測量和檢測設備的功能核查；d)適用時，使用核查或工作標準，并制作控制圖；e)測量設備的期間核查；f)使用相同或不同方法重復檢測或校準；g)留存樣品的重復檢測或重復校準；h)物品不同特性結果之間的相關性；i)審查報告的結果；j)實驗室內比對；k)盲樣測試。7.7.2可行和適當時，實驗室應通過與其他實驗室的結果比對監控能力水平。監控應予以策劃和審查，包括但不限于以下一種或兩種措施：a)參加能力驗證；注：GB/T27043包含能力驗證和能力驗證提供者的詳細信息。滿足GB/T27043要求的能力驗證提供者被認為是有能力的。b)參加除能力驗證之外的實驗室間比對。7.7.3實驗室應分析監控活動的數據用于控制實驗室活動，適用時實施改進。如果發現監控活動數據分析結果超出預定的準則時，應采取適當措施防止報告不正確的結果。5可編輯pptCNAS-CL01-G0017.7確保結果的有效性7.7.1a)實驗室對結果的監控應覆蓋到認可范圍內的所有檢測或校準（包括內部校準）項目，確保檢測或校準結果的準確性和穩定性。當檢測或校準方法中規定了質量監控制要求時，實驗室應符合該要求。適用時，實驗室應在檢測方法中或其他文件中規定對應檢測或校準方法的質量監控方案。實驗室制定內部質量監控方案時應考慮以下因素：?檢測或校準業務量；?檢測或校準結果的用途；?檢測或校準方法本身的穩定性與復雜性；?對技術人員經驗的依賴程度；?參加外部比對（包含能力驗證）的頻次與結果；?人員的能力和經驗、人員數量及變動情況；?新采用的方法或變更的方法等。注：實驗室可以采取多種適用的質量監控手段，如：?定期使用標準物質、核查標準或工作標準來監控結果的準確性；?通過使用質量控制物質制作質控圖持續監控精密度；?通過獲得足夠的標準物質，評估在不同濃度下檢測結果的準確性；6可編輯ppt?定期留樣再測或重復測量以及實驗室內比對，監控同一操作人員的精密度或不同操作人員間的精密度；?采用不同的檢測方法或設備測試同一樣品，監控方法之間的一致性；?通過分析一個物品不同特性結果的相關性，以識別錯誤；?進行盲樣測試，監控實驗室日常檢測的準確度或精密度水平。b)適用時，實驗室應使用質量控制圖來監控檢測或校準結果的準確性和精密度。c)一些特殊的檢測活動，檢測結果無法復現，難以按照7.7.1a)進行質量控制，實驗室應關注人員的能力、培訓、監督以及與同行的技術交流。7.7.2外部質量監控方案不僅包括CNAS-RL02《能力驗證規則》中要求參加的能力驗證計劃，適當時，還應包含實驗室間比對計劃。實驗室制定外部質量監控計劃除應考慮7.7.1a)中描述的因素外，還應考慮以下因素：?內部質量監控結果；?實驗室間比對（包含能力驗證）的可獲得性，對沒有能力驗證的領域，實驗室應有其他措施來確保結果的準確性和可靠性；?CNAS、客戶和管理機構對實驗室間比對（包含能力驗證）的要求。注：CNAS-RL02《能力驗證規則》要求參加的能力驗證領域和頻次只是CNAS對能力驗證的最低要求。實驗室應關注對于沒有能力驗證的領域，可以采取有何措施確保結果的準確性和可靠性。7可編輯pptCNAS-CL01-A0017.7確保結果的有效性7.7.1實驗室應制訂質量控制計劃，對內部質量控制活動的實施內容、方式、責任人作出明確的規定；對內部質量控制活動，計劃中還應給出結果評價依據。質量控制計劃應盡可能覆蓋實驗室的所有檢測項目和所有檢測人員。7.7.1a）針對微生物定量檢測項目，應定期使用有證標準物質/標準樣品（如菌落總數標準物質、大腸菌群標準物質等）進行監控，或使用質控樣品開展內部質量控制活動。針對微生物定性檢測項目，應定期使用標準物質/標準樣品、質控樣品或用標準菌種人工污染的樣品開展內部質量控制。實驗室應根據工作量、人員水平、能力驗證結果、外部評審等情況對定期做出明確規定，如：定量檢測項目6次/年，定性檢測項目4次/年等。7.7.1f）在實施人員比對、設備比對和方法比對時，要選取均勻性和穩定性符合要求的樣品進行。8可編輯pptCNAS-CL01-A0027.7確保結果的有效性7.7.1實驗室應對檢測結果有效性進行監控監控應覆蓋到申請認可或已獲認可的所有檢測技術和方法，以確保并證明檢測過程受控以及檢測結果的準確性和可靠性。內部質量控制方法應包括但不限于空白分析、重復檢測、比對、加標和控制樣品的分析中的一種或幾種。內部質控實施時還應考慮內部質量控制頻率、規定限值和超出規定限值時采取的措施。如果檢測方法中規定了內部質量控制計劃和程序，包括規定限值，實驗室應嚴格執行。如果檢測方法中無此類計劃，適用時，實驗室應采取以下方法：（1）空白注：試劑空白一般每制備批樣品或每20個樣品做一次，樣品的檢測結果應消除空白造成的影響。高于接受限的試劑空白表示與空白同時分析的這批樣品可能受到污染，檢測結果不能被接受。當經過實驗證明試劑空白處于穩定水平時，可適當減少空白試驗的頻次。當檢測方法對空白有具體規定時,應滿足方法要求。（2）實驗室控制樣品注：實驗室控制樣品(LCS)可每制備批樣品或每20個樣品做一次。LCS應按通常遇到的基體和含量水平準備，其測定結果可建立質量控制圖進行分析評價。當經過LCS測試實驗證明檢測水平處于穩定和可控制狀態下，可適當減少LCS的測試頻率。（3）加標注：應在分析樣品前加標，基體加標應至少每制備批樣品或每個基體類型或每20個樣品做一次，且添加物濃度水平應接近分析物濃度或在校準曲線中間范圍濃度內，加入的添加物總量不應顯著改變樣品基體。9可編輯ppt（4）重復檢測注：重復樣品一般至少每制備批樣品或每個基體類型或每20個樣品做一次。當經過試驗表明檢測水平處于穩定和可控制狀態下，可適當地減少重復檢測頻率。適用時，實驗室應使用控制圖監控實驗室能力。質量控制圖和警戒限應基于統計原理。實驗室也應觀察和分析控制圖顯示的異常趨勢，必要時采取處理措施。注：適用時，實驗室可參考ISO5725《測試方法與結果的準確度(正確度與精密度)》第6部分和國際理論和應用化學協會(IUPAC)“分析化學實驗室內部質量控制協調指南”中給出的指南。對于非常規檢測項目，應加強內部質量控制措施，必要時進行全面的分析系統驗證，包括使用標準物質或已知被分析物濃度的控制樣品，然后進行樣品或加標樣品重復分析，確保檢測結果的可靠性和準確性。7.7.2實驗室應盡可能參加能力驗證或實驗室間比對以驗證其能力，其頻次應與所承擔的工作量相匹配。注：CNAS公布的CNAS-RL02《能力驗證規則》中規定的實驗室參加能力驗證活動的頻次是實驗室獲得或維持認可的最低要求。實驗室應根據檢測工作量、檢測方法的穩定性、內部質量控制情況、人員、設施、設備等變化情況確定參加能力驗證和實驗室間比對的頻率。10可編輯pptCNAS-CL01-A0167.7確保結果的有效性7.7.1實驗室制定的質量控制計劃應考慮樣品的類型、檢驗的特性和檢驗的頻率。質量控制水平的設定，應足以證明結果的正確性。注：檢驗樣品的質量控制水平一般在5%~10%之間，對更復雜的程序可以加大百分比。質量控制計劃可包括（但不限于）下列內容：a)使用標準物質或有固定特性的樣品進行監控；b)可能時，實驗室應參加能力驗證；c)按固定比例取樣品進行重復測試；d)在適當的時間間隔內，隨機取重復樣品加入到實驗室常規樣本分析系統中。11可編輯ppt質量控制關鍵點詳解當檢測實驗室確認法人地位和資源保障后,應明確檢測質量控制的關鍵點人—人員機—設備料—樣品和消耗材料法—檢測方法環—設施和環境條件以上五個方面的控制效果通過測試的實施來體現《年度質量控制計劃》（包含了能力驗證計劃）12可編輯ppt測試結果有效性

人機料法環13可編輯ppt一、人員質量控制方法

在ISO/IEC17025標準《檢測和校準實驗室認可準則》中在“技術要素”中將“人員”歸結為決定實驗室檢測的正確性和可靠性的第一個因素，對檢測實驗室的人員從教育、資格、培訓、技術知識、技能、經驗和公正性等提出了嚴格的要求。CNASCL-016.2.5：實驗室應有以下活動的程序，并保存相關記錄：a)確定能力要求；b)人員選擇；c)人員培訓；d)人員監督；e)人員授權；f)人員能力監控。14可編輯ppt1、人員的選擇、能力確認及授權重點關注——教育、資格、培訓、技術知識、技能和經驗、現任崗位授權；確認證據——技術檔案、資格確認、上崗考核和授權、各種記錄。特殊崗位的授權——感官評定、特種鍋爐容器、特殊設備、生物安全操作等。15可編輯ppt2、人員的培訓重點關注——培訓計劃的可行性、實施記錄、培訓效果的評價。確認證據——全面的培訓計劃（包括各個崗位、各類人員、再教育）、培訓記錄（培訓鑒定、小結、現場考核）等。注：G0016.2.5c：有程序對新進技術人員和現有技術人員、新的技術活動進行培訓；識別持續培訓需求；適當安排，并保留培訓記錄。《人員培訓計劃》16可編輯ppt制訂培訓計劃需要注意——計劃合理性、前瞻性、統一性。——明確需要培訓的崗位、項目、時段、實施機構、結果評價依據。——所有人員應有文件證明其對工作及實驗室全部設施中潛在的風險受過培訓；——應要求所有人員根據可能接觸的生物接受免疫以預防感染，應保存免疫記錄。17可編輯ppt3、人員的監督及能力監控重點關注——監督人員資質和授權、監督計劃（選擇重點區域和人員）、被監督人員、監督記錄。確認證據——監督計劃、監督記錄、監督結果的評價。注：G0016.2.5d：監督模式：授權之前、在培人員、新人、新項目。人人都要受到監督。《人員監督計劃》18可編輯ppt監督是否充分？——不同專業和領域均有監督員；——監督人員比例恰當；——監督過程和方法確定，有相應的文件；——監督記錄完整，是管理評審的輸入。監督人員的條件：——熟悉檢測技術、經驗豐富、有責任心、細致公正。——避免不懂專業的行政領導擔任監督員，以免發生外行走過場。19可編輯ppt實驗室對人員進行監督時應考慮：針對不同類型不同專業范圍應配備符合資質條件、有能力的監督人員；應有足夠比例的監督人員；對監督的內容、方式、頻率有文件化的規定，每次監督后應對被監督的人員或崗位的工作質量做出評價。對監督后表現不滿意的人員應采取相應的有效處理措施；監督結果應輸入管理評審。20可編輯ppt監督目的——對各類人員的能力確認手段之一、保證持續改進。監督方式——盲樣測試、實驗室內比對、能力驗證和實驗室間比對結果、現場監督實際操作過程、核查記錄、現場提問、留樣復測、質量控制圖、崗位輪換等。監督記錄——真實、全面、發現問題和優點。通過各種監督方式的執行達到人員能力監控的目的。21可編輯ppt二、儀器設備的質量控制

實驗室的儀器設備應側重于日常管理、維護保養、狀態確認和安全防護。配備儀器設備應考慮：實驗室應配備的基本設備；根據實驗室開展項目的需要配備的特殊設備，如需要進行確證試驗，避免“假陽性”和“假陰性”結果的出現，所需的設備如質譜、三維光譜和紅外光譜等。22可編輯ppt1、設備的日常使用和管理重點關注——設備唯一性標識（管理標識和校準標識）、設備檔案、操作人員能力、使用維護、設備（計量）溯源性。確認證據——檔案信息完整性、操作人員培訓和授權、維護保養作業指導書和實施記錄、維修記錄和狀態確認、期間核查計劃和記錄、校準證書等。易忽視——相同型號設備的識別、測試樣品追溯、校準證書有效性的確認、故障設備處理和結果追溯。《儀器設備維護保養計劃表》23可編輯ppt2、設備的校準重點關注——校準機構的選擇（資質和能力、校準報告的信息）、校準計劃、校準證書確認、自校準規程和記錄、校準狀態標識。確認證據——校準計劃、外部合格供應方評價和選擇、自校準規程、校準標識等。《計量器具檢定校準計劃表》24可編輯ppt測量儀器應根據儀器的性能情況,加貼儀器狀態標志。合格標志——經計量檢定或校準、驗證合格，確認其符合檢測技術規范規定的使用要求。準用標志——設備存在部分缺陷或部分功能喪失，但可在限定范圍內使用；設備某一量程準確度不夠，但檢測所用量程合格，可降級使用。停用標志——設備目前狀態不能使用（故障、經檢定校準不合格、性能無法確定、超過周期未檢定校準、不符合技術規范規定的使用要求等），但經檢定校準或修復后可以使用。25可編輯ppt3、設備的期間核查（《期間核查計劃》）設備的檢定/校準與期間核查的差異：執行的主體不同——設備檢定/校準是由國家法定機構授權的校準機構或授權部門來執行，可以是計量院或是某個機構內的計量實驗室。而設備期間核查是由實驗室人員來完成，不需要經過國家法定機構的授權，只需實驗室授權。執行的標準依據不同——設備檢定/校準依據的是國家已經頒布的檢定/校準規程或經過法定計量管理機構備案批準的校準程序。設備期間核查依據的是實驗室自己制訂的設備期間核查作業指導書，不需要報法定計量部門備案。26可編輯ppt執行的周期頻率不同——設備檢定的間隔周期執行的是國家法定頒布的設備檢定周期，或是當設備經過故障修復后需要送檢定/校準機構重新檢定，帶有強制性質。設備期間核查的周期頻率可以由實驗室根據設備的使用頻率、數據爭議程度、設備的新舊和穩定水平自行確定，不帶有強制性。執行的內容覆蓋面不同——設備檢定/校準是對需檢定/校準的設備進行系統性檢查，對設備的穩定性、精密度、靈敏度等整體功能或技術指標進行檢定或校準，在可能的情況下，還需要給出不確定度評定，出具檢定報告或校準證書。設備期間核查可以在某次核查過程中只對設備的個別或部分的功能或技術指標進行核查，并不一定需要給出不確定度的評定，也不需要出具校準報告。27可編輯ppt是否所有設備都需要經過期間核查？應關注——設備的新舊和穩定程度、使用頻率、操作人員熟練程度、所產生檢測結果的爭議程度、設備所處環境條件的優劣等。G0016.4.10實驗室應根據設備的穩定性和使用情況來確定是否需要進行期間核查。實驗室應確定期間核查的方法與周期，并保存記錄。注：并不是所有設備均需要進行期間核查。判斷設備是否需要期間核查至少需考慮以下因素：?設備校準周期；?歷次校準結果；?質量控制結果；?設備使用頻率和性能穩定性；?設備維護情況；?設備操作人員及環境的變化；?設備使用范圍的變化等。---核查的方式可以標準物質比對，設備穩定性試驗、設備特征值偏離試驗和檢測靈敏度測試等。28可編輯ppt儀器設備的期間核查應選擇國家計量檢定規程中的主要檢定項目，一般選擇以下合適項目：零點檢查；靈敏度；準確度；分辨率；測量重復性；標準曲線線性；儀器內置自校檢查；標準物質或參考物質測試比對；儀器說明書列明的技術指標。29可編輯ppt微生物實驗室應注意以下設備的交叉污染：a）一次性設備和重復使用的玻璃器皿應潔凈，必要時應消毒滅菌b)建議實驗室使用專門處理污染物的高壓滅菌鍋。以下設備需要清潔、維護，定期進行損壞檢驗，必要時進行滅菌：a)一般設備：濾器、玻璃和塑料容器（瓶子、試管）、玻璃或塑料的帶蓋培養皿、取樣器具、鎳/鉻/鉑及一次性接種針或接種環等；b)測量器具：溫度計、計時器、天平、酸度計、菌落計數器等；c)定容設備：吸管、自動分液器、微量移液器等；d)其他設備：水浴鍋、培養箱、超凈工作臺或生物安全柜、高壓滅菌鍋、均質器、冷藏箱、冷凍柜等。(A001實驗室應有程序和措施以保證標準菌種/菌株的安全，防止污染、丟失或損壞，確保其完整性。對設備的維護要考慮生物安全，避免生物危害和交叉污染。6.4.13c）應定期使用生物指示物檢查滅菌設備的效果并記錄，指示物應放在不易達到滅菌的部位。日常監控可以采用物理或化學方式進行。)30可編輯ppt化學實驗室應注意以下設備的交叉污染：a）一次性設備和重復使用的玻璃器皿應潔凈，必要時應進行浸泡清洗；b)檢出高濃度樣品或存放標準物質的儲液瓶若不易清洗處理，應用后丟棄；c)高、低濃度的樣品測試設備應盡量分開；d)易串味樣品的存放容器應有良好的密封性能，注意及時從測試工作區或樣品儲存區域撤離。（A002對于化學檢測，有必要防止實驗室器皿對檢測樣品或標準溶液的污染。必要時，實驗室應對用于不同檢測的器皿使用不同的清洗、儲存和隔離程序并形成文件。如果檢測方法中規定了器皿的清洗方法或注意事項，實驗室應遵守或予以關注。從事痕量分析的實驗室應配備一套專用的器皿，以避免可能的交叉污染；將用于痕量金屬分析的器皿浸泡于酸液中以去除痕量金屬。對互不相容的檢測，實驗室應使用不同的器皿。應關注清洗劑中可能存在的分析物。）31可編輯ppt三、樣品和消耗材料的質量控制1、樣品的控制關注重點——數量代表性、方法適用性、制備有效性、傳遞可溯性。數量代表性——樣品抽取階段必須制定合適的抽樣方案，明確抽樣的數量和抽樣方式。方法適用性——檢測方法對檢測樣品的特殊要求。制備有效性——采用適當的制備方法，避免被測物的分解和樣品遭受污染，注意環境條件、制樣工器具的影響。傳遞可溯性——有效的包裝、標識、傳遞、儲存方式。32可編輯ppt確認證據——合同評審記錄、樣品標識系統、樣品狀態、保存設施的監控、樣品處理設施和記錄。易忽視——檢畢物品的處理、樣品的群組細分。化學實驗室采樣需要注意——抽樣依據、抽樣所代表的樣品總量、抽樣方案、抽樣環境條件和空間情況、抽樣器具溯源和標識、樣品包裝容器等（可參照A0027.3抽樣）33可編輯ppt微生物檢驗采樣原則

代表性原則：所采的樣本能真正反映被采樣的總體水平。

典型性原則:

例：應根據中毒癥狀，可疑中毒物性質采集可能含毒量最多的樣本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。

適時性原則：及時采樣，盡快送檢。

適量性原則：采樣數量應根據檢驗項目和目的而定，但每份樣本不少于檢驗需要量的三倍，以便供檢驗和留樣備用。

程序原則：采樣、送檢、留樣和出具報告必須按規定的程序進行，各階段都要有完整的手續，責任分明。（可參照A0017.3抽樣）34可編輯ppt2、消耗材料的控制關注重點——外部供應商的評價和控制、采購驗收（符合性檢查）、標準物質的保管和期間核查。確認證據——外部供應商的評價記錄、采購控制記錄、符合性檢查記錄、標準物質確認記錄和配制記錄、期間核查作業指導書和核查記錄。易忽視——用數量清點代替符合性檢查、標準物質配制溯源過程、期間核查。35可編輯ppt一些重要消耗材料，如標準品、試劑盒、預處理小柱、層析填料、培養基等，可根據供貨商提供的性能指標進行初步驗證，作出進一步評價，并根據評價結果采取適當的措施。技術性驗證可采用色譜、光譜、質譜、化學常規分析、生化鑒定等多種方法，具體可采用與原有標準物質比對、濃度檢測、保留時間驗證、峰純度鑒別、官能團鑒別、分子離子峰檢索、血清學特征鑒別等技術。36可編輯ppt

對檢測結果有重要影響的消耗品、使用頻率高的或有疑慮的標準物質要用適當的方法進行符合性檢查。符合性檢查手段——與另一標準物質進行比對試驗；——用色譜、質譜、光譜的特征峰、特征離子、特征譜圖進行確證；——利用化學特征反應進行驗證。必要的儀器分析；——生化傳代、血清鑒別等。37可編輯ppt標準物質一級標準物質（GBW）——由國家計量部門批準、頒布并授權生產，采用絕對測量法或兩種以上不同原理的準確可靠的方法定值，也可由多個實驗室采用同一種方法協同定值，計量準確度達到國內最高水平，穩定性在一年以上。二級標準物質（GBW（E））——由國家計量部門批準、頒布并授權生產，采用與一級標準物質相比較的方法或一級標準物質的定值方法定值，計量準確度能滿足一般測量的需要，穩定性在半年以上。38可編輯ppt

標準物質證書應給出標準物質的名稱、編號、定值日期、定值方法、特性值、測量不確定度、有效期和貯存要求。當只能使用不具有溯源性的標準物質時，應獲取由生產廠商出具的能說明其特性的有效證明，并進行必要的驗證試驗或比對試驗。需要時，標準物質在使用期間應按計劃進行期間核查，核查可根據檢測工作的實際，從標準物質的性狀是否有異常變化、儲存環境是否符合要求等方面著手。

標準溶液的配制——注意信息可追溯；——按標準規定配制；GB/T601-2016《化學試劑標準滴定溶液的制備》；GB/T602-2002《化學試劑雜質測定用標準溶液的制備》——雙人八平行、極差分析。——有效期限。39可編輯ppt培養基制備和質量控制購置驗收要求(CNAS-CL01-A001：6.6.2a/c)儲存、使用、棄置要求（CNAS-CL01：6.4/7.4/7.7)成品的質量控制(重點為菌株)物理指標:培養基外觀微生物指標:重點提到對測試菌株的要求SN/T1538.1-2016培養基制備指南第1部分實驗室培養基制備質量保證通則

40可編輯ppt常規質量控制要求物理指標:外觀控制微生物指標:污染;生長率;選擇性;特異性(CNAS-CL01:20186.6.2;CNAS-CL01-A001：2018)性能測試方法舉例對質量控制要求的補充說明和詳細實例參考SN/T1538.2-2016培養基制備指南第2部分:培養基性能測試實用指南

GB/T27405-2008實驗室質量控制規范

食品微生物檢測41可編輯ppt四、檢測方法的質量控制1、關注重點——檢測方法的現行有效、方法確認、非標方法的建立、方法的偏離、驗證和審批。確認證據——方法查新和跟蹤、方法確認記錄、非標方法確認記錄、方法偏離的技術驗證、作業指導書。2、方法選擇關注——對檢測樣品的適用性、準確性和靈敏性。SOP（作業指導書）——當缺少指導書可能影響檢測和/或校準結果，實驗室可對所有相關設備的使用和操作、檢測和/或校準樣品的準備（或者二者兼有）、關鍵性操作步驟編制指導書。42可編輯ppt方法的選擇（a）選擇測試方法和制定分析方案時應考慮：*滿足客戶的需求；*相應標準、規范的要求；*適用于被檢樣品；*方法質量參數如準確度、精密度、檢出限、檢出率和不確定度等符合要求；*優先選擇制備一份試料溶液中可同時測定多組分的分析方法；*本實驗室人員技術能力、設備配置條件和環境條件；*安全、成本、周期和效率等。

（b）應首選國際標準、國家標準、行業標準分析方法，其次是通過確認的非標準方法。

非標準方法的確認：化學檢測方法確認可參考：EURACHEM《分析方法目的適宜性-方法確認指南》國際理論和應用化學協會(IUPAC)技術報告“一個實驗室進行分析方法確認的統一指南”（Pure&Appl.Chem.,Vol.67No.41995）GB/T27417-2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》

微生物檢驗非標方法的確認，可以參照AS/NZS4659、AOACINTERNATIONALMethodsCommitteeGuidelinesforValidationofQualitativeandQuantitativeFoodMicrobiologicalOfficialMethodsofAnalysis、ISO16140或SN/T3266-2012。（c）對選用的測試方法，要了解其特性和適用性，正確掌握實驗條件。首次使用的測試方法，應進行方法確認。可使用標準樣品或已知樣品進行方法操作實驗，直至熟練掌握。

（d）所有被選用的測試方法，應進行準確度、精密度、檢出限和不確定度等質量參數的測試，質量參數滿足要求的測試方法，方可用于樣品的檢測。43可編輯ppt3、方法查新應由專人定期對檢測標準進行有效性查詢，及時更新作廢標準。國內國家標準、行業標準、國外標準查詢：國家標準化管理委員會；中國標準信息網，食品伙伴網www.F;4、SOP的建立當因檢測時效、試劑、設備、檢測靈敏度等原因，需要對標準方法進行改進，以滿足檢測需求時，應對標準方法做偏離性確認，經過批準并形成SOP。

SOP應經過審核批準并列入受控范疇。44可編輯ppt實驗室編制SOP的內容應滿足5W1H原則：What——此項作業的名稱及內容是什么；Why——此項作業的目的是干什么；Where——即在哪里使用該作業指導書；Who——什么樣的人使用該作業指導書；When——此項作業什么時候做；How——如何按步驟完成作業。45可編輯ppt實驗室應關注以下四個方面SOP的編制：1．方法類：包括食品檢驗方法中不詳細或不完善部分的補充，期間核查、方法確認及比對等；2．設備類：重要或復雜設備的使用、操作規范（如設備制造商提供的技術說明書不夠明細等）；3．樣品類：取樣、制樣和樣品處置的“實施細則”等；4．數據類：定量檢測結果的表達、異常數據的剔除、測量結果不確定度的評定等等。注：實驗室SOP的編制格式和內容應符合GB/T1.1-2009《標準化工作導則第一部分標準的結構和編寫規則》和GB/T20001.4-2015《標準編寫規則第4部分試驗方法標準》的規定。避免以論文和規章制度的形式書寫。46可編輯ppt5、方法驗證與方法確認正確理解方法的驗證和確認驗證verification——針對的是標準方法。——驗證實驗室人員、設備、材料和樣品、方法文本環境等資源和條件滿足標準要求的能力，以及操作標準的實際能力。確認confirmation——針對非標準方法、實驗室設計（制定）的方法、超出其預定范圍使用的標準方法、擴充和修改過的標準方法。——確認實驗室制定的非標準方法、實驗室設計（制定）的方法、超出其預定范圍使用的標準方法、擴充和修改過的標準方法是否具有方法的科學性、有效性和適用性。47可編輯ppt方法驗證——文本評價——關鍵性技術能力重現。方法確認——實驗——技術參數確立——與經典方法比較或實驗比對——形成SOP。方法確認的技術性確認

涉及安全、衛生、環保等低含量檢測項目時，要考慮檢測方法的最低檢出限（LOD值）是否能夠達到該物質的最高殘留限量值（MRL值），如方法的LOD值>MRL值，則不能將該方法作為檢測方法使用，必須重新選擇檢測靈敏度更高的方法。方法確認試驗——做方法的標準曲線、添加標準回收率試驗、最低檢出限試驗和精密度試驗等，并考慮方法的特異性和耐用性，如果可能，還應進行不確定度評估。應用實驗數據真實地證明方法的適用性、準確性和靈敏性。48可編輯ppt化學分析方法確認的具體技術指標校準曲線——數學方程以及校準曲線的工作范圍，濃度范圍盡可能覆蓋一個數量級，至少作5個點（不包括空白）。對于篩選方法，線性回歸方程的相關系數不應低于0.98，對于確證方法，相關系數不應低于0.99。測試溶液中被測組分濃度必須在校準曲線的線性范圍內。回收率試驗——對于禁用物質，回收率應在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進行三水平試驗；對已制定最高殘留限量MRL的，回收率應在方法測定低限、MRL、選一合適點進行三水平試驗；對于未制定MRL的，回收率應在方法測定低限、常見限量指標、選一合適點進行三水平試驗。<GB/T27404附錄F>49可編輯ppt（GB/T27417附錄<GB/T27404>）被測組分含量回收率范圍（mg/kg）（%）＞10095～1051～10090～1100.1～180～110

＜0.160～12050可編輯ppt精密度試驗——對于禁用物質，精密度試驗應在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三個水平進行；對于已制定MRL的，精密度試驗應在方法測定低限、MRL、選一合適點三個水平進行；對于未制定MRL的，精密度試驗應在方法測定低限、常見限量指標、選一合適點三個水平進行。重復測定次數>6。注：標準偏差s除以平均值后的百分率即得到測試結果變異系數。（GB/T27417-2017）51可編輯ppt被測組分含量室內變異系數（CV，%）

0.1μg/kg43

1μg/kg3010μg/kg21100μg/kg151mg/kg1110mg/kg7.5100mg/kg5.31000mg/kg3.81%2.710%2.0100%1.352可編輯ppt測定低限——方法的測定低限按下式計算：

CL=3Sb/b

式中：CL

——方法的測定低限；Sb

——空白值標準偏差（一般平行測定20次得到）；b——方法校準曲線的斜率。也可采用標準加入試驗法確定。53可編輯ppt準確度——重復分析標準物質（實物標樣）或水平測試樣品，測定含量（經回收率校正后），得出平均值與真值的偏差（變異系數）。真值含量（mg/kg）變異系數（%）＜0.001-50～+200.001～0.01-30～+100.010～10-20～+1010～1000＜151000～10000＜10

＞10000＜554可編輯ppt特異性試驗——對于檢測篩選方法和確證方法特異性必須予以規定，尤其對于確證方法必須盡可能清楚地提供待測物的化學結構信息，僅基于色譜分析而沒有使用分子光譜測定的方法，不能用于確證方法。

確證方法：（1）氣相色譜-質譜；（2）液相色譜-質譜；（3）免疫親和色譜/氣相色譜-質譜；（4）氣相色譜-紅外光譜；（5）液相色譜-免疫層析；（6）標準菌株；（7）特征生化鑒別。55可編輯ppt用于驗證和確認微生物檢驗方法性能的試驗技術包括：

①使用標準/參考菌株進行核實；

②與其他方法所得的結果進行比較；

③實驗室間比對；

④對影響結果的因素作系統性評審；

⑤根據對方法的理論原理和實踐經驗的科學理解，對所得結果不確定度進行評定。以上驗證和確認微生物檢驗方法性能的試驗技術，可概略分為兩大類：實驗室間驗證/確認試驗（協作試驗）和實驗室內驗證/確認試驗（單一試驗）。

實驗室間驗證/確認試驗是指在若干實驗室內由不同操作者進行的驗證/確認試驗，而實驗室內確認試驗是僅在特定的實驗室內進行的驗證/確認試驗。

56可編輯ppt微生物檢驗方法的驗證建議實驗室在以下情況下對檢驗方法進行嚴格的驗證：

1.擬用經過完整確認的標準方法以及經過嚴格確認的并被審批的非標準方法時；

2.培養基供應商、人員、設備、儀器/試劑盒等發生變動時。

57可編輯ppt6、非標方法的控制和使用下列情況時，需要制訂非標準方法：——經檢索無發布的標準方法和經批準使用的非標準方法可供選用；——對現有的標準方法作較大改動；——需要制定快速測試方法。7、正確掌握不確定度評估的方法實驗室應識別測量不確定度的貢獻。測量不確定度的評定與表示方法按《JJF1059.1-2012測量不確定度評定與表示》進行。（CNAS-GL05：2011《測量不確定度要求的實施指南》）58可編輯ppt什么時候需要進行不確定評估，并在檢測報告中給出不確定度值——：（GB/T27404：）檢測方法有要求；測量不確定度與檢測結果的有效性或應用領域有關；客戶提出要求；當測試結果處于規定指標臨界值附近時，測量不確定度對判斷結果符合性會產生影響。

59可編輯ppt五、設施和環境條件的質量控制1、設施和環境條件的評價重點關注——檢測標準對環境的要求、監控設施和使用記錄、區域隔離和進入。(CL016.3.1:設施和環境條件應適合實驗室活動，不應對結果有效性產生不利影響。6.3.3當相關規范、方法或程序對環境條件有要求時，或環境條件影響結果的有效性時，實驗室應監測、控制和記錄環境條件。6.3.4實驗室應實施、監控并定期評審控制設施的措施，這些措施應包括但不限于：a)進入和使用影響實驗室活動區域的控制；b)預防對實驗室活動的污染、干擾或不利影響；c)有效隔離不相容的實驗室活動區域。)確認證據——現場檢查、監控記錄。實驗室的設施及環境條件的控制主要應考慮足夠的空間、合理的布局、條件的控制和安全低風險等。（G001/A001/A002/A016:6.3）易忽視——區域隔離、限制進入、監控設施有效性確認和使用記錄。60可編輯ppt實驗室應具有進行微生物和化學檢測所需的適宜、充分的設施條件。1、典型的實驗室應有檢測設施（專用于微生物、化學檢測和相關活動）及輔助設施（大門、走廊、管理區、樣品室、清潔間、儲存室、試劑室、