基于全癌標志物檢測評價細胞治療產品制備質量安全及臨床應用效果標準的起草說明食藥監管科學的初衷2024年8月，中國食品藥品企業質量安全促進會干細胞與再生醫學專業委員會正式成立。專業委員會聯合高校及科研院所聚焦干細胞生產制備環節的質量安全問題。近半年來，基于應用全癌標志物TAGMe?DNA甲基化檢測，評價細胞質量安全控制的標準研究；通過科學規范、可操作性強的TAGMe?DNA甲基化檢測標準質控監測評價體系，確保細胞產品的安全性和有效性。同時也探討全癌標志物TAGMe?DNA甲基化檢測技術在食品、藥品、化妝品及植入性醫療器械致瘤性安全評價等領域的創新應用，多家科研院所和細胞生產企業參與標準制定工作，取得了非常滿意的預期成果。細胞技術是健康中國戰略的重大驅動力；細胞質量安全是細胞技術研發應用的生命線；普惠人民大眾是細胞技術研發應用的最終目的。中國食品藥品企業質量安全促進會干細胞與再生醫學專業委員會，旨在凝聚各方共識，共同促進我國細胞科學與大健康產業發展。帶領和指導細胞科研及生產機構積極探索加快細胞科學新理論、新方法的應用，尤其在細胞本身的質量監控、長期致瘤性風險評估、臨床受試者選擇及臨床應用有效性評估方面，搶占干細胞與再生醫學新高地，不斷滿足人民群眾多層次、多樣化的健康需求，不斷增進人民健康福祉。細胞與基因治療行業的需求人源細胞治療產品是醫藥發展史上最為復雜、亦是既有醫藥產品無法比擬的醫藥產品，其具有多樣性、異質性、復雜性、變異性的特征，無論對研發與監管均構成了巨大挑戰。因此，細胞治療產品質量控制及安全問題就成為各種挑戰中最核心、最本質的內容。1.人源細胞治療產品及其長期安全性風險人源細胞治療產品是指用于治療人的疾病，來源、體外操作和臨床試驗過程符合倫理要求，按照藥品管理相關法規進行研發、生產制備和注冊申報的人體來源的活細胞產品。包括起源于人的干細胞、免疫細胞及基因修飾細胞等。長時間的體外培養條件下可能會引導細胞惡性轉化（包括但不限于成瘤性、促/致瘤性等），生產制備的細胞產品中的細胞有發生細胞惡性轉化的可能性，且目前現有的檢測方法難以及時排除和驗證。人源細胞治療產品成瘤性/致瘤性風險已經成為質量安全的重大隱患。干細胞產品相關的風險因素比如：=1\*GB3①干細胞復雜的制備工藝、長時間的細胞傳代和離體操作；=2\*GB3②干細胞產品中可能殘留未分化細胞、非預期分化細胞、惡性轉化細胞、基因突變；=3\*GB3③細胞培養過程中的遺傳和表觀遺傳變異/不穩定性；=4\*GB3④基因修飾可能引入的高風險基因元件以及基因/病毒載體插入所導致的致癌基因活化或抑癌基因失活等。為了控制上述風險，應進行評估和控制干細胞產品的成瘤性/致瘤性。ESCs/iPSCs衍生細胞治療產品也可能因少量殘留的多能干細胞以及持續增殖的分化子代細胞，導致出現畸胎瘤、其他錯誤模式腫瘤或癌前病變等風險。2.當前，人源細胞治療產品的一般質量控制檢測策略人源細胞治療產品的質量控制策略，是基于cGMP等原則的質量保障體系和質量評價體系構成，包括物料質量控制、生產工藝過程控制、中間樣品質量檢驗、終產品放行檢驗以及留樣檢驗等。如干細胞質量評價體系包括基本生物學屬性、微生物學安全性、生物學安全性、及生物學有效性等質量屬性，其中，基本生物學屬性包括細胞鑒別、活性及純度；微生物學安全性指與各類微生物（如細菌、真菌、病毒）及其代謝產物（如內毒素）污染相關的安全性；生物安全性包括異常免疫反應、成瘤性和/或促瘤性、異常分化及異位遷移等；生物學有效性包括分化潛能、免疫調控及組織再生功能。2024年4月，FDA向六款已上市的CAR-T療法發送安全標簽變更函，要求其添加T細胞腫瘤風險的黑框警告，并強調治療病人需進行終生隨訪。可見，人源細胞治療產品成瘤性/致瘤性風險評估及生產質控，已經成為制約細胞產業高質量發展的難點、痛點與瓶頸因素。當前，我國細胞治療產品質量評價標準化體系和監管體系還不健全，尤其是缺乏連續性、統一性的安全和有效的品質評價指標；細胞治療產品的質量標準化評價及檢測是制約細胞治療技術和產業健康穩定與可持續發展的瓶頸。因此，建立針對不同的細胞治療產品、針對細胞生產及使用全生命周期的質量質控與成/致瘤性風險評價，同時具有連續性、一致性、針對性檢測評價的金標準十分必要。三、全癌標志物TAGMe?的技術突破與成熟1.“一對多”的檢測邏輯與傳統的泛癌標志物（需多個標志物組合檢測不同癌癥）不同，TAGMe?基于DNA甲基化的共性特征，通過單一標志物即可覆蓋多種癌癥的檢測，實現“一對多”的篩查模式。例如，其在25+種腫瘤類型和13種樣本類型（如血液、尿液、宮頸刮片等）的臨床驗證中，組織樣本符合率達90%。技術基礎：依托于文強教授團隊開發的GPS（GuidePositioningSequencing）技術，覆蓋96%的基因組甲基化區域，解決了傳統全基因組甲基化測序（WGBS）比對率低的問題，并繪制了首個單堿基精度的全基因組甲基化圖譜。2.“全或無”的生物學特性TAGMe?僅在惡性腫瘤中呈現高甲基化，而在正常組織中無此特征。這種“全或無”的特性使其能精準區分癌前病變和健康組織，甚至在病理形態學變化前即可捕捉腫瘤信號。例如，在宮頸癌的鱗狀上皮內病變階段即可檢測到PCDHGB7等全癌標志物的甲基化異常，將篩查提前至“前癌”階段。3.創新檢測平臺Me-qPCR于文強教授團隊自主研發的Me-qPCR技術無需亞硫酸鹽處理，簡化了甲基化檢測流程，檢測時間縮短50%以上，且成本更低。該技術通過百分制量化甲基化水平（0-100分），支持結果分層（如陰性、弱陽性、強陽性），為臨床提供動態監測依據。例如，尿路上皮癌檢測產品“滂奕清?”的敏感性達87.8%，特異性92.3%，優于傳統膀胱鏡檢測。4.臨床應用價值：覆蓋腫瘤全流程管理早期篩查：在宮頸癌、子宮內膜癌等癌種中，TAGMe?的敏感性達80%-90%，特異性超82%，在宮頸癌中可達95.09%，顯著優于HPV篩查的假陽性率。輔助診斷與療效監測：例如，在膀胱癌術后復發監測中，TAGMe?可較影像學提前3～15個月發現腫瘤進展。手術切緣判定：通過檢測手術切緣樣本的甲基化水平（如胃癌中的SIX6標志物），提供更精準的腫瘤切除指導。5.全癌標志物TAGMe?技術也已成熟并獲國際認可目前已鑒定62個全癌標志物（如HIST1H4F、PCDHGB7、SIX6等），進一步豐富了檢測靶標。隨著更多標志物的開發與臨床驗證，TAGMe?或將成為癌癥早篩領域的“游戲規則改變者”。通過全癌標志物TAGMe?及其配套技術，將癌癥篩查從“被動治療”轉向“主動預防”，尤其在高危人群早篩、術后監測及基層醫療普及中展現獨特價值。其技術不僅填補了國內甲基化檢測領域的空白，更以“中國原創”身份獲得國際認可，為全球癌癥防控提供了新范式。TAGMe?相關產品已獲美國FDA“突破性醫療器械”認定及歐盟CE認證。四、致瘤性、成瘤性與促瘤性定義1.致瘤性（Oncogenicity）：指細胞裂解物中的化學物質、病毒、病毒核酸或基因以及細胞成分接種動物后，導致被接種動物的正常細胞形成腫瘤的能力。即接種物（細胞和/或裂解物）促使正常細胞轉變為腫瘤細胞的能力。評價場景：干細胞產品中殘留未分化細胞的風險；免疫細胞（如CAR-T）基因編輯導致的插入突變風險。檢測標準：體內實驗：NOD/SCID小鼠致瘤試驗（金標準，但耗時6-12個月）。體外替代：TAGMe?甲基化檢測（PM值≥80提示高風險）。2.成瘤性（Tumorigenicity）：指細胞接種動物后在注射部分和（或）轉移部位由接種細胞本身形成腫瘤的能力。即接種的細胞自身形成腫瘤的能力。核心機制：DNA甲基化異常（如PCDHGB7高甲基化）；基因突變（如KRAS、TP53突變）。檢測指標：甲基化標志物：TAGMe?評分（PM值）；突變分析：全外顯子測序（WES）。3.促瘤性（Tumor-PromotingActivity）：指細胞治療產品通過旁分泌、免疫抑制或物理接觸等方式間接促進宿主已有腫瘤生長或轉移的風險。其核心機制是通過影響腫瘤微環境或促進腫瘤細胞的增殖和侵襲來實現的。包括：分泌促瘤因子：如VEGF（血管生成）、IL-10（免疫抑制）、MMP9（轉移侵襲）。外泌體傳遞致癌信號：攜帶PD-L1、miRNA等調控微環境。機械巢效應：與宿主腫瘤細胞直接接觸激活促增殖通路。傳統管控局限：依賴動物模型（耗時長、成本高）和有限因子檢測（如ELISA），難以全面評估動態風險。4.