檢驗科PCR組授權考試題一、選擇題1.實時熒光定量PCR（qPCR）的基本原理是:（）。[單選題]*A.通過電泳分離DNA片段B.通過熒光信號實時監測DNA擴增√C.通過測序分析DNA序列D.通過雜交檢測DNA片段2.qPCR中Ct值的含義是:（）。[單選題]*A.熒光信號達到閾值時的循環數√B.DNA擴增的總循環數C.熒光信號的最大強度D.DNA片段的長度3.以下哪種熒光染料常用于qPCR（）。[單選題]*A.溴化乙錠（EB）B.SYBRGreenI√C.考馬斯亮藍D.蘇丹紅4.qPCR與普通PCR的主要區別在于:（）。[單選題]*A.qPCR不需要引物B.qPCR可以實時監測擴增過程√C.qPCR不需要DNA模板D.qPCR只能在低溫下進行5.在qPCR實驗中，內參基因的作用是:（）。[單選題]*A.提高熒光信號強度B.作為實驗的陰性對照C.校正樣本間的差異√D.增加DNA模板量6.qPCR引物設計的關鍵點不包括:（）。[單選題]*A.引物長度一般為18-22bpB.引物應避免形成二聚體C.引物的GC含量應低于20%√D.引物應具有較高的特異性7.qPCR實驗中，以下哪種對照是必需的?（）。[單選題]*A.陽性對照B.陰性對照C.無模板對照（NTC）D.以上都是√8.qPCR實驗中，防止污染的最有效方法是:（）。[單選題]*A.使用一次性耗材B.在超凈臺中操作C.使用UNG酶防污染系統D.以上都是√9.qPCR反應體系中，以下哪種成分是必需的?（）。[單選題]*A.DNA模板B.引物C.熒光染料D.以上都是√10.qPCR實驗中，以下哪種操作會導致假陽性結果?（）。[單選題]*A.樣本污染√B.引物二聚體C.反應體系不完整D.以上都是11.qPCR數據分析中，Ct值與模板量的關系是:（）。[單選題]*A.Ct值越小，模板量越多√B.Ct值越大，模板量越多C.Ct值與模板量無關D.Ct值越大，熒光信號越強12.以下哪種方法可以用于qPCR數據的標準化?（）。[單選題]*A.使用內參基因B.使用標準曲線C.使用陰性對照D.以上都是√13.qPCR在臨床診斷中最常用于:（）。[單選題]*A.病原體檢測√B.蛋白質定量C.細胞計數D.組織切片分析14.qPCR在腫瘤標志物檢測中的優勢是:（）。[單選題]*A.高靈敏度B.高特異性C.快速檢測D.以上都是√15.qPCR在遺傳病診斷中的應用主要是:（）。[單選題]*A.檢測基因突變√B.檢測蛋白質表達C.檢測細胞形態D.檢測代謝產物16.qPCR實驗中的質量控制措施不包括:（）。[單選題]*A.使用內參基因B.使用標準曲線C.忽略陰性對照√D.重復實驗17.qPCR實驗的靈敏度通常是指:（）。[單選題]*A.檢測到最低模板量的能力√B.檢測到最高模板量的能力C.檢測到熒光信號的能力D.檢測到引物二聚體的能力18.PCR產物長期儲存最好置于:（）。[單選題]*A.4℃B.常溫C.16℃D.-20℃√19.qPCR實驗的重復性是指:（）。[單選題]*A.同一實驗在不同時間的結果一致性√B.同一實驗在同一時間的結果一致性C.不同實驗在不同時間的結果一致性D.以上都不是20.數字PCR（dPCR）與qPCR的主要區別是:（）。[單選題]*A.dPCR不需要熒光信號B.dPCR可以絕對定量DNA拷貝數√C.dPCR不需要DNA模板D.dPCR只能在低溫下進行21.多重qPCR技術的優勢是:（）。[單選題]*A.同時檢測多個目標基因√B.提高熒光信號強度C.減少實驗時間D.以上都是22.qPCR在臨床應用中涉及的倫理問題主要是:（）。[單選題]*A.數據隱私保護B.實驗操作規范C.試劑質量控制D.以上都是√23.qPCR技術在臨床實驗室中的法規要求包括:（）。[單選題]*A.實驗人員資質B.實驗室認證C.數據記錄與保存D.以上都是√24．根指衛生部第45號令《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規定》的要求，下列屬于提交申請辦理準運證審批范圍的是:1）第一類病原微生物菌（毒）種或樣本。2）第二類病原微生物菌（毒）種或樣本3）第一類病原微生物運輸包裝分類為A類的病原微生物的菌（毒）種或樣本4）疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本（）。[單選題]*A1）2）3）B.1）2）4）C.1）2）3）4）√D.1）3）4）25.申請跨省、自治區、直轄市運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的，應當將申請材料提交何單位進行初審（）。[單選題]*A、國家衛生健康委員會B.中國疾病預防控制中心C.出發地省級衛生行政部門√D.目的地省級衛生行政部門26.下列可以鑒別PCR過程是否發生污染的措施是:（）。[單選題]*A.增加PCR反應的循環數B.設置陰性對照√C.設置陽性對照D.設置內參照27.關于新冠核酸檢測實驗過程中的質量控制，以下說法錯誤的是（）。[單選題]*A.每批檢測至少有1份弱陽性質控和3份陰性質控(通常2份為試劑）自帶陰性質控品，1份為生理鹽水）B.質控沒有必要每批次都做√C.質控品應隨機放在臨床標本中間參與從提取到擴增檢測的全過程D.弱陽性質控測定應為陽性，3份陰性質控應全部為陰性，視為在控。反之，則為失控,不可發出報告，應及時分析原因，必要時重新檢測樣本。28.以下不是新冠病毒結構蛋白的是（）。[單選題]*A.N蛋白B.S蛋白C.M蛋白D.T蛋白√29.在基因擴增檢驗中，要使用帶濾芯吸頭吸加液體，主要是為了（）。[單選題]*A.防止吸液時產生的氣溶膠對加樣器前端的污染B.控制吸液量C.防止吸液時液體對加樣器前端的污染D.以上全是√30.PCR技術的操作步驟依次是（）。[單選題]*A.高溫變性、中溫延伸、低溫復性B．高溫變性、低溫復性、中溫延伸√C．中溫延伸、高溫變性、低溫復性D.中溫延伸、低溫復性、高溫變性31.標準的PCR過程一般分為變性、復性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是（）。[單選題]*A.94°√C,55°C,72°CB.72°C,50°C,92°CC.50°C,92°C，72°CD.80°C,50°C,72°C32.新型冠狀病毒核酸檢測采用哪兩個基因為特異性檢測靶標（）。[單選題]*A.ORFlab和S基因B.ORFlab和N基因√C.S基因和N基因D.M基因和N基因33.PCR反應正確過程應為（）。[單選題]*A.退火一變性一一延伸B.變性一退火一延伸√C.退火一延伸一變性D.變性一延伸一退火34.二代測序平臺構建文庫的順序為（）。[單選題]*A.片段化-末端修復-連接-PCR√B.片段化-連接-末端修復-PCRC.連接-片段化-末端修復-PCRD.連接-片段化-PCR-末端修復35.PCR技術的本質是（）。[單選題]*A.核酸雜交技術B.核酸重組技術C.核酸擴增技木√D.核酸變任技術36.PCR反應的最大特點是強大的擴增能力與極高的靈敏性但最大問題是（）。[單選題]*A.費用高B.操作繁雜C.易污染√D.速度饅37．實時熒光定量PCR利用（）對未知模板進行核酸的定性和定量的分析方法。[單選題]*A.同位素B.蘇丹紅染料C.伊紅染粒D.熒光信號√38.—代測序中，加入的帶熒光的堿基為（）。[單選題]*A.NTPB.INTPC.ddNTP√D.dddNTP39.下列哪項不是PCR技術應用領域（）。[單選題]*A.基因工程B.血清IgG檢測√C.克隆D.DNA序列測定40.熒光閾值是指3-15個循環之間的基線熒光信號均值的標準差的（）倍，高于閾值的熒光信號被認為是真是信號，用于定義樣本閾值循環數。[單選題]*A.5B.10√C.15D.2041.關于核酸擴增結果的判讀，下列描述正確的是（）。[多選題]*A.ORFlab和N基因同時陽性時，判定為陽性√B.若僅ORFlab或N基因其中之一檢測結果陽性時，需重新提取原標本的核酸進行復查，復查后ORFlab或N基因仍為陽性時，判定為陽性√C.2個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間或其中1個位點判讀為陽性，另1個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間，判定為可疑陽性。√D.2個位點中的1個位點為陰性，另1個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間，判讀為可疑陽性√42.性能驗證的時機正確的是（）。[多選題]*A.每年應進行性能驗證B.任何影響檢驗程序分析性能的情況發生后，應在檢驗程序重新啟用前對受影響性能進行驗證。√C.現用檢驗程序任一要素變更，如試劑升級、校準品溯源性改變等應重新進行驗證。√D.檢驗程序常規應用前√43.熒光定量結果中無CT值出現，其可能的原因為（）。[多選題]*A.PCR參數設置錯誤，在設計循環參數時沒有設置熒光信號采集√B.模板降解√C.反應體系錯誤或酶失效或引物探針降解√D.電腦設置了自動休眠√44.PCR擴增曲線基線期起始熒光信號波動不穩定，哪些不是造成該現象的原因（）。[多選題]*A.反應體系配置未充分混勻B.擴增試劑/耗材批間差導致非特異性擴增√C.反應液配置后保存不當√D.可能有污染√45.PCR擴增曲線樣本內標未起或熒光強度低可能是哪些原因引起的（）。[多選題]*A.樣本采樣欠佳，沒有刮取到足夠細胞√B.樣本保存不當，核酸降解√C.樣本加錯位或漏加√D.提取失敗√46.qPCR實驗中，Ct值越小，表示目標基因的