獸藥中非法添加藥物快速篩查法

（液相色譜一二極管陣列法）

1適用范圍

1.1本方法適用于獸藥及其原料與輔料中紫外光譜圖庫中所列非法添加藥

物的篩查。

1.2用于紫外光譜圖庫之外的具有紫外吸收的非法添加藥物的篩查時，需進(jìn)

行空白試驗和檢測限測定，并測定對照品溶液的紫外光譜圖。

2檢查方法

照高效液相色譜法（《中國獸藥典》一部附錄0512）測定。

2.1超高效液相色譜一二極管陣列法

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑

（ACQUITYUPLCHSST3,1.8pm,2.1x100mm）；以水-lmol/L醋酸鍍?nèi)芤海ㄈ?/p>

醋酸鉉77g,加水至1000ml,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.0）（99：I）為流動相A,

甲醇-Imol/L醋酸鏤溶液（99：1）為流動相B,按下表進(jìn)行梯度洗脫；流速

0.45ml/min；二極管陣列檢測器，采集波長范圍為200nm?400nm,分辨率為

1.2nm,提取波長按需設(shè)定（如230nm、270nm、最大值圖等）。

時間(min)流動相A（%）流動相B（%）

0.00982

0.25982

12.25199

13.00199

13.01982

17.00982

供試品溶液的配制

中藥固體制劑取50mg,力口甲醇10ml,超聲處理10分鐘（必要時可調(diào)整）;

中藥液體制劑取10觀?203，加甲醇10mL搖勻;

化藥液體制劑取20期，加甲醇10ml,搖勻；

其他化藥制劑取50mg,加甲醇10ml,超聲處理約10分鐘（必要時可調(diào)

整），用甲酹:稀釋成含有效成分50Hg?100|jg/ml的溶液。

對照品溶液的配制（紫外光譜圖庫外品種）用卬醉制成50~100Rg/ml的

溶液，溶解性差的對照品，可加適量鹽酸或氫氧化鉀溶液，使其溶解。

測定法取供試品溶液2可注入液相色譜儀，同時記錄色譜圖與光譜圖。

通過與紫外光譜圖庫中對照光譜圖最大吸收波長和圖形的比對，確定供試品中是

否含有相應(yīng)非法添加藥物。

可根據(jù)實驗結(jié)果調(diào)整進(jìn)樣量或濃度，使紫外光譜圖光滑、特征清晰。

結(jié)果判定

兩者光譜圖無明顯差異，判為可疑陽性結(jié)果。

篩查結(jié)果呈可疑陽性的樣品，需按農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的非法添加檢查方法標(biāo)準(zhǔn)

進(jìn)一步檢驗。

2.2液相色譜一二極管陣列法

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用卜八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Alllima

Cis,5pm,4.6x250mm）；以磷酸二氫鈉溶液（取磷酸二氫鈉3.0g,加水1000mL

加三乙胺0.5ml,用飽和氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7.0）:甲醇（70：30）為流動

相;流速l.Oml/min；二極管陣列檢測器,采集波長范圍為200nm~400nm,分

辨率為1.2nm,提取波長按需設(shè)定。

供試品溶液的配制同2.1。

對照品溶液的配制同2.1。

測定法取供試品溶液10|41?203注入液相色譜儀，其他同2.1。

結(jié)果判定同2.1。

2.3液相色譜一二極管陣列法（磺胺類）

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Alllima

T3,5pm,4.6x250mm）：0.2%冰醋酸溶液:乙晴（70：30）為流動相:流速

l.Oml/min：二極管陣列檢測器，采集波長范圍為200nm~400nm,分辨率為1.2

nm,提取波長按需設(shè)定。

供試品溶液的配制同2.1。

對照品溶液的配制同2.1。

測定法取供試品溶液?203注入液相色譜儀，其他同2.1。

結(jié)果判定同2.1。

2.4液相色譜一二極管陣列法（氟喳諾酮類）

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(AUanlis

Cis,5pm,4.6x250mm)；以磷酸溶液(取磷酸3ml,加水1000mL用三乙胺調(diào)

節(jié)pH值至3.0±0.1,加乙晴53ml,搖勻)為流動相A,乙晴為流動相B,甲醇

為流動相C,按下表進(jìn)行嘴度洗脫；流速l.Oml/min；二極管陣列檢測器，采集

波長范圍為200nm?400nm,分辨率為1.2nm,提取波長按需設(shè)定。

時間(分鐘)流動相A%流動相B%流動相C%

089.66.24.2

30.0089.66.24.2

30.2090100

55.0090100

55.2089.66.24.2

65.0089.66.24.2

供試品溶液的配制同2.1。

對照品溶液的配制同2.1。

測定法取供試品溶液1()可~2()惘注入液相色譜儀，其他同2.1。

結(jié)果判定同2.1。

附：紫外光譜圖庫

紫外光譜圖庫

是指方法2.3,-4是指方法2.4,對應(yīng)譜圖為該方法條件下所得。

216.4

005-1

264.0

煙酰

胺

213.3

005-2

261.7

204.5

006-1241.3

262.8

喳乙

醇

238.1

006-2

260.5

242.5

007-1

259.2

乙酰

甲瞳

239.2

007-2

255.8

234.2

008-1261.6

316.7

瞳烯

酮

008-2不出峰

012-2

226.4

012-4

293.9

288.7

013-1

319.1

環(huán)丙

沙星

17852FED呈

271.2

013-2

323.6

??7丹丙”?

0030-2785

0000-

0070-

0060

278.50050

013-470040-

315.42076/\

0030*

0020

OO1O-

0000-

220X)0240002COOO2000030000320003400036000300004000C

5.418

八洛美沙星

0.80-

0.60-

212.8212.8/\

014-1289.1a

0.40-

323.9

020-

0.00-

,.0025o',002oo'.oo350'.00

20C

12714洛35力息

0.08

0.062004/

洛美280.7M0.04

014-2

沙星326.0

0.02

0.00

200.0025000300'00350.00400

00

郴

>IS播犬tUK

2BBC

OOGO-

0055

OOSO-

OD4S

0040

288.0OOM-

014-420030-

320.1ox>?

OQ2O?

OOIS-

OOIO

oxx?-

oooo

?OOO240002COOO2BOOOXX)OO32000340003COOO3000040000

018-2120分鐘以后出峰

二氟

沙星019-260分鐘不出峰

279.7

019-4

316.6

023-1271.1

磺胺

對甲

氧喀

咤

023-2242.8

磺胺

氯噠0247270.0

嗪

磺胺

甲嗯025-1270.0

哩

水楊

酸

水楊

酸鎂

呵深

美辛

對乙

酰氨

基酚

氨基

比林

036-2

MA

A（安

乃近201.0

037-1

降解249.7

產(chǎn)

物）

204.5

038-1

260.4

酮洛

芬

199.2

038-2

258.2

水相:有機(jī)相40:60

富馬

204.5

酸酮039-1

301.1

替芬

204.5

040-1

286.7

芬布

芬

199.2

040-2

283.1

水相:有機(jī)相40:60

202.2

布洛

041-1223.5

分

266.4

196.8

041-2221.5

264.1

水相:有機(jī)相40:60

氟比209.3

042-1

洛芬249.7

043-260分鐘不出峰

甲芬

那酸

茶普

生

204.5

頭抱

053-1237.8

毗后

259.2

203.4

頭電

054-1231.8

丙烯

281.9

頭抱225.9

055-1

地尼289.1

204.5

頭先

056-1235.4

地嗪

262.8

頭抱203.4

057~1

噗咻274.7

頭抱203.4

058-1

西丁237.8

頭抱204.5

059-1

替哇274.7

頭抱203.4

060-1

映辛275.9

204.5

頭抱

065-1236.6

瞳后

268.8

203.4

頭抱

066-1264.0

拉定

344.1

頭抱211.7

067-1

硫瞇334.7

頭先

203.4

美他068-1

236.6

酯

203.4

頭抱

069-1241.3

美喋

274.7

頭抱204.5

孟多070T271.1

酯348.7

頭狗203.7

071-1

尼西270.0

202.2

頭抱

072-1230.6

哌酮

270.0

頭抱212.8

073-1

匹胺275.9

203.4

頭抱

231.8

羥氨074-1

265.2

甘卜

341.8

203.4

頭抱

075-1239.0

睡吩

329.9

204.5

頭抱

076-1236.6

嚏吠

268.8

頭抱0777204.5

哩歷237.8

頭抱203.4

078-1

他噬258.0

頭抱203.4

079-1

替安261.6

二甲

204.5

氧節(jié)080-1

279.5

咤

194.5

084-2260.5

376.0

5.445

211.7

085-1246.1

299.9

克倫

特羅

209.8

085-2242.8

296.1

萊克

224.7

多巴086-1

277.1

胺

5.443

，010

0.40-鹽酸氯丙那林

0.30-

201.0

089-1W0.20-

264.0

0.10-

I___

0.00-

鹽酸00250.0030o'.0035o1.00

200.

氯丙

那林33.572計9ft氧內(nèi)娜能

0.050-

0.040-

u

210.90.030-

089-2260.5

0.020-

328.3

0.010-

3283

0.000-

inn9^nnnwinnavn'nn4nnn

7.7971

0.20-

產(chǎn)2

\鹽酸班布特羅

0.15-

鹽酸

布

班202.2

090-120.10-

羅

特266.4

O.OS-

\266.4_______________________

0.00.

.00250.00300.0035o'.OO

200

5.1661

R2616鹽酸丙卡特羅

206.90.60-

鹽酸

卡235.4

丙

己

羅091-1261.60.40-

特

一

298.7

0.20-u\298.7

341.8

341,8

0.00-

20().00250.00300.00350.00

尼美203.4

092-1

舒利302.3

228.3

266.4

093-1

292.7

329.9

鹽酸

二氧

丙嗪

223.9

268.8

093-2

295.0

333.1

水相:有機(jī)相40:60

227.1

氫氯

094-1273.5

睡嗪

319.1

210.5

097-1250.9

309.5

鹽酸

'嗅己

立仁

097-2不出峰

205.7

228.3

273.5

316.7

長春

西汀

98-2不出峰

依他的1205.7

尼酸281.9

206.9

100-1239.0

鹽酸

尼

卡357.1

地

平

100-2不出峰

204.5

101-1240.1

莫

尼359.5

地

平

101-2不出峰

204.5

102-1258.0

鹽酸

309.5

氯丙

嗪

102-2不出峰

異丙

202.2

托漠103-1

260.4

校

阿昔203.4

104-1

洛韋254.4

4.4971

恩替203.4

105~1

卡韋255.6

200.00250.00300.00350.00

泛昔223.5

106-1

洛韋310.7

磷酸

奧司

.4

203

他韋107-1

酷酸

倍他

.0

201

米松108-1

5

242.

二丙

酸倍

他米

.3

241

109-1

本公

倍他

米松

118461

戊酸

倍他

米松

丙酸

倍氯

米松

倍氯203.4

米松243.7

酸

丁

倍

氯141201.0

A-1

松

他239.0

地塞

米松

醋酸

地塞

.0

201

米松116-1

.5

242

地塞

.0

米松201

117-1

.5

磷酸242

117-2