細胞培養技術學習通超星期末考試章節答案2024年動物細胞培養

答案:從動物活體體內取出相關的組織，用機械或消化的方法分散成單細胞懸液，在體外模擬體內環境下,使之生長和生存，并維持其結構和功能的方法。動物組織培養

答案:從生物體內取出活的組織（多指組織塊）在體外進行培養的方法。組織培養的對象在體外可發生分化并保持組織的結構和功能，但不具備器官的結構與功能。為什么在細胞培養過程中要保證最大程度的無菌？

答案:有害物侵入人體內或代謝產物積累時，由于體內存在著強大的免疫系統和解毒器官（肝臟等），對它們可進行抵抗和消除，使細胞不受危害。當細胞被置于體外培養后，便失去了對微生物和有害物質的抵抗能力，一旦被污染或自身代謝物積累等，可導致細胞死亡。因此，培養環境無毒和無菌是培養細胞的首要條件。在卡氏瓶原理的啟發下,出現了試管培養,繼而又出現了多種類型的（

）、培養皿和（

）的培養。從20世紀40年代開始，大多數培養工作都過渡到用（

）培養。

答案:培養瓶;多孔培養板;瓶子體外培養（或組織培養）主要包括（

）、（

）、（

）三種類型

答案:細胞培養;組織培養;器官培養5.早期細胞培養采用（

）培養基，現在廣泛采用添加（

）的（

）培養基，近二十年來，動物細胞培養基朝著（

）培養基的方向發展。

答案:天然;血清;人工合成;無血清在（）原理的啟發下，出現了多種類型培養瓶、多孔培養板的培養。

答案:卡式瓶Harrison開創了動物組織和細胞培養的先河并建立（）。

答案:單玻片懸滴培養法細胞周期

答案:即一個母細胞分裂結束后形成的細胞至其下一次再分裂結束形成兩個子細胞的這段時期。貼壁型細胞

答案:在體外動物細胞培養過程中，必須貼附于支持物表面才能生長的細胞。什么是培養細胞的一代生存期？培養細胞的一代生存期可分為哪幾個階段？各有何特點？

答案:指的是從細胞接種到下一次再傳代接種的一段時間。每代細胞一般要經過三個生長階段：潛伏期、指數生長期和停滯期（平頂期）。潛伏期：有代謝活動，基本沒有細胞分裂，時間6~24小時。指數生長期：細胞數量成倍增長，代謝活動旺盛，最適合實驗研究階段，持續時間3~5天，培養基營養物質被消化，顏色變黃。停滯期：細胞不增殖，但仍有代謝活動，需要進行傳代挽救。細胞培養的平臺期與衰退期是否一樣，若不一樣，主要的區別在哪？

答案:不一樣。平臺期：當細胞長滿瓶壁后，細胞數量達到飽和密度，會產生接觸抑制和密度抑制，細胞就會停止增殖，進入停滯期。此時細胞數量持平，也稱平頂期。衰退期：傳代到一定代數，細胞的生命活動明顯減弱，但增殖很慢或不增殖，難長滿培養面，即使換液也無濟于事，直至衰退，死亡。貼壁型細胞主要的形態分類有（

）、（

）、（

）和（

）。

答案:成纖維細胞型;上皮細胞型;游走細胞型;多形細胞型體外培養的動物細胞其生長方式主要有（

）和（

）兩種，分別稱為（

）和（

）。

答案:貼壁生長;懸浮生長;貼壁型細胞;懸浮型細胞細胞在體外生長時具有一些特點，其中主要是（

）、（

）和（

）。

答案:細胞貼附;接觸抑制;密度依賴性細胞培養操作間經紫外線照射消毒和化學消毒后要開窗通風，減小對操作員的危害。

答案:錯無菌操作間專用于無菌操作、細胞培養,要求清潔、干燥、無菌、不通風，局部空氣潔凈度要達到百級以下。

答案:對動物細胞體外培養的營養要求有（

）①氨基酸②碳水化合物③無毒、無菌④

無機鹽⑤適宜溫度

⑥維生素⑦促生長因子

⑧微生物次級代謝產物⑨微量元素⑩氧氣和二氧化碳

答案:①②④⑥⑦⑨體外動物細胞培養過程中，下列那個物質常作為必含的能量物質（

）

答案:葡萄糖人體細胞培養的標準溫度為（

）

答案:36.5℃±0.5℃細胞培養中塑料制品主要采用（

）方法進行滅菌，人工合成培養基采用（

）方式進行滅菌

答案:紫外線消毒;膜過濾消毒細胞培養用品的包裝主要包括（

）和（

）兩種類型。

答案:局部包裝;全包裝玻璃器皿的清洗程序主要包括（

）、（

）、（

）和（

）

答案:浸泡;刷洗;浸酸;沖洗培養細胞的傳代培養

答案:將原細胞培養瓶中的細胞從培養瓶中取出，配制成細胞懸液，分裝到兩個或兩個以上的培養瓶中繼續培養，稱為傳代培養。下列屬于培養細胞污染的類型有（

）

答案:微生物的污染;病毒的污染;化學物質的污染;不同細胞交叉污染消化法進行傳代細胞操作時最需要關注的是（

）

答案:傳代時機;消化時間;接種數量

動物細胞原代培養主要的兩種方法是（

）

答案:組織塊法;消化法微生物污染的主要途徑（

）

答案:空氣;器材和試劑;操作;組織樣本細胞凍存與復蘇的原則：（

）

答案:慢凍快融培養細胞的凍存液長利用二甲基亞砜作為凍存保護劑，其使用濃度范圍為（

）

答案:5%~15%真菌污染培養細胞的現象不包括（

）

答案:肉眼可見培養液渾濁下列注意事項是原代培養操作中不需要注意的（

）

答案:保證二氧化碳培養箱的快拿快放，快速翻轉細胞培養瓶下面不可能引起細胞發生化學污染的物品是：（

）

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸細胞培養的常規觀察不包括：（）

答案:細胞亞顯微結構什么是CHO細胞，CHO表達系統的主要特點是什么？

答案:CHO細胞又稱中國倉鼠細胞。①表達的蛋白質在分子結構、理化特性和生物學功能等方面最接近于天然蛋白分子；②細胞既可以貼壁生長，又可以懸浮生長，且有較高地耐受剪切力和滲透壓能力；③具有重組基因的高效擴增和表達能力，外源蛋白的整合穩定；④具有產物胞外分泌功能，便于下游產物分離純化，并且很少分泌自身的內源蛋白。氣升式生物反應器必須有中央導流管才能使得液體和氣體循環。

答案:錯攪拌式生物反應器不適合懸浮細胞生長

答案:錯懸浮細胞培養工藝中的核心技術是細胞的懸浮馴化

答案:對單克隆抗體是專門識別某一特定抗原表位的抗體。

答案:對動物細胞大規模培養的一般流程不包括最后的產品的分離純化

答案:錯根據動物細胞的培養特性不同，可采用（

）、（

）、（

）等三種培養方法進行大規模培養。

答案:貼壁培養;懸浮培養;固定化培養動物細胞大規模培養技術是指在人工條件下（除滿足培養過程的必需的營養要求外，還要進行pH和溶氧的最佳控制），在（

）中（

）大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。

答案:細胞生物反應器；生物反應器;高密度下列關于中空纖維培養法敘述錯誤的是（

）

答案:為細胞提供二維的生長空間抗原決定簇

答案:抗原上可以引起機體產生抗體的分子結構。單克隆抗體

答案:僅由一種B淋巴細胞克隆產生的，理化性狀高度均一、組成均一、只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子，稱單克隆抗體。下列不是細胞融合常用的方法是（

）

答案:細胞培養牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養液中加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進行移植，以利用乳腺生物反應器進行生物制藥。下列相關敘述正確的是（

）

答案:用H-Y抗原免疫母牛可獲得相應抗體在HAT培養系統中能夠穩定生長的細胞有（

）

答案:骨髓瘤細胞與淋巴細胞融合細胞用于制備單克隆抗體的骨髓瘤細胞不具有以下哪一特點（

）

答案:自身可分泌免疫球蛋白單克隆抗體的特征表述不正確的是（

）

答案:針對多種抗原決定簇雜交瘤細胞的凍存均采用液氮保存的溫度是（

）

答案:-196℃葉酸的拮抗劑是（

）

答案:氨基蝶呤在HAT培養基中,()可利用培養基中的次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)在次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶和胸腺嘧啶核苷激酶的催化下通過補救合成途徑合成DNA。

答案:雜交瘤細胞;淋巴細胞雜交瘤技術中,細胞融合前,需要制備哪三種細胞?()

答案:脾細胞;骨髓瘤細胞;飼養細胞應用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應用于:()。

答案:病原微生物抗原、抗體的檢測;腫瘤抗原的檢測;免疫細胞及其亞群的的檢測;激素和細胞因子的測定為了防止制備好的雜交瘤細胞停止分泌抗體,需要做到:()。

答案:應用倒置顯微鏡經常檢查細胞的生長狀況;大量保持和補充液氮凍存的細胞原管;定期進行再克隆雜交瘤技術所使用的抗體檢測方法有()。

答案:酶聯免疫吸附法;間接免疫熒光法;放射免疫法;雙向擴散法用于單抗生產的骨髓瘤細胞株一般缺乏哪兩種酶,使其不能通過補救途徑合成DNA:()。

答案:TK;HGPRT由一種B細胞克隆所產生的只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子成為單克隆抗體,它相對于多克隆抗體具有以下哪些特點()。

答案:特異性強;靈敏度高;純度高下列屬于可大規模培養的動物細胞的有:()。

答案:人二倍體細胞;CHO細胞;BHK-21細胞;Vero細胞固定化培養常用的方法有()。

答案:吸附培養;微囊化培養;包埋培養下列屬于微載體選取要求的有:()。

答案:表面適于細胞附著、伸展和增值;材料無毒性,不與培養基中的化學成分反應;不吸收營養成分;直徑盡可能小,且盡可能均一動物細胞大規模培養時,需要人工控制的條件包括()。

答案:pH;溶氧;溫度;攪拌速度凍存細胞時要緩慢冷凍,主要原因有()。

答案:細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍時,細胞內外的水分會很快形成冰晶。;冰晶的形成會引起細胞脫水,從而使細胞局部電解質濃度增高,pH值發生改變,部分蛋白發生變性,導致細胞出現代謝障礙。;在冷凍中易破壞細胞膜上的類脂蛋白復合體,從而改變細胞膜的通透性,使細胞內容物流失。;冰晶體積膨脹易造成DNA的空間構型發生不可逆的損傷性變化,引起細胞死亡。造成細胞復蘇失敗的原因可能有:()。

答案:凍存時細胞數量少或生長狀態不良;細胞受細菌或支原體污染;液氮罐保管不善;復蘇方法不得當;復蘇時培養條件改變懸浮生長的細胞一般采用什么方法進行傳代?()

答案:直接吹打傳代;離心分離法傳代培養細胞的常規觀察項目有:()。

答案:培養液的變化;細胞生長情況;細胞形態;有無微生物污染微生物的污染可以通過下列哪些途徑發生:()。

答案:空氣;器材及試劑;實驗操作;組織樣本下列屬于消化培養法優點的有()。

答案:可以很快得到大量活細胞;可在短時間內生長成片;原代細胞產量高所謂培養細胞生命期,是指細胞在培養中持續增殖和生長的時間,大致可以分為哪三個階段:()。

答案:原代培養期;傳代培養期;衰退期下列屬于體外培養細胞的生長特點的是()。

答案:細胞貼附;接觸抑制;密度依賴性下列屬于優質血清的標準表現有()。

答案:透明清亮;土黃色或棕黃色;無沉淀或極少量沉淀,比較粘稠下列屬于物理滅菌法的有()。

答案:紫外線照射;干熱滅菌;濕熱滅菌;過濾除菌下列動物細胞培養用品,需要采用全包裝的有:()。

答案:膠塞;解剖剪動物細胞培養實驗室常用的設備有:()。

答案:消毒設備;無菌操作設備;細胞觀察設備;細胞和試劑存儲設備動物細胞培養技術的應用領域相當廣泛,下面屬于其應用領域的有:()。

答案:基礎研究;臨床醫學;動物育種;生物制品生產體外培養的三種類型包括:()。

答案:細胞培養;組織培養;器官培養單克隆抗體與多克隆抗體有何區別？

答案:單克隆抗體：由一個B細胞克隆所產生的針對一種它能識別的抗原決定簇的的單一性抗體。多克隆抗體：指抗原入侵機體（由于抗原包含多個抗原決定簇）后，刺激具有相應抗原受體的不同淋巴細胞增殖分化，而產生的多種抗體的混合物。可見單克隆抗體與多克隆抗體的主要區別在于其抗體種類是否單一，而不是抗體數量的多少。在選擇微載體中有何要求？

答案:首先是微載體表面性質要適于細胞附著、伸展和增殖，其次微載體材料要沒有毒性，且不會與培養基成分發生化學反應，也不會吸收培養基中的營養成分。其次，微載體的直徑最好控制在60-250nm之間，還要有良好的光學透明性，以便于觀察。除此之外還必須能夠承受120攝氏度的高溫，以便可以高壓蒸汽滅菌。細胞凍存時，如何實現慢凍？

答案:可以采用以下兩種方式：人工傳統降溫：凍存管置于4℃10min→-20℃30min→-80℃16-18小時（或過夜，最長放置時間不要超過一個月）→轉移至液氮長期儲存。

程序降溫盒降溫：這種降溫盒可實現每分鐘1℃自主梯度降溫，大大提高凍存細胞的存活率。凍存管置于細胞凍存盒（凍存盒需要提前預冷至4℃，需檢查其內異丙醇或其他液體是否足量）后放于-80℃冰箱16-18小時（或過夜，最長放置時間不要超過一個月）→轉移至液氮長期儲存。細胞培養的污染途徑主要有哪些？

答案:空氣

空氣是微生物傳播的最主要途徑。減少空氣流動是防止污染的重要環節。器材及試劑

器材清洗消毒不徹底或培養用液等滅菌不徹底使污物殘留或導致細菌污染。操作

無菌觀念不強、動作不準確、交叉使用吸管或培養液等導致細胞交叉污染。組織樣本

組織樣本如還有微生物或手術時消毒使用的碘酒等可造成污染或影響細胞生長，這也是原代培養失敗的主要原因之一。怎樣辨別培養的動物細胞生長情況是否良好？

答案:首先，我們可以通過肉眼觀察培養基的顏色變化及澄清度，若培養基溶液為淺黃色且澄清透明，此時我們可以初步斷定細胞沒有受到微生物的污染，進而我們可以使用倒置顯微鏡來觀察細胞生長情況，生長狀況良好的細胞會表現為明亮、均質、透明度大；而生長狀態不好或已經進入衰亡期的細胞，在胞質中常出現發暗、有黑色顆粒、脂滴、空泡、形態不整及邊緣不齊等現象。原代培養細胞首次傳代時一般要特別注意哪幾個方面？

答案:1．傳代時機：待細胞生長到足以覆蓋瓶底壁的大部分表面后再傳代。2．消化時間：傳代時，不同的細胞有不同的消化時間，因而要根據需要注意觀察并及時進行處理。原代培養的細胞較傳代培養的細胞消化時間相對較長。3．接種數量：首次傳代時細胞接種數量要多一些，使細胞能盡快適應新環境而利于細胞生存和增殖。請簡要說說如何判斷血清的好壞？

答案:好的血清應該是透明清亮，土黃色或棕黃色，無沉淀或極少量沉淀，比較粘稠。如發現血清渾濁、不透明、含許多沉淀物，說明血清污染或血清中的蛋白變性；若血清呈棕紅色，說明血清中的血紅蛋白含量太高，取材時有溶血現象；如果搖晃時感覺液體稀薄，說明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進一步了解血清的質量，則應連續培養某些細胞，觀察細胞的生長狀況。動物細胞培養用品的清洗和包裝要注意哪些事項？

答案:清洗注意事項：（1）沖洗時要流水振蕩沖洗，方法是：每瓶灌2/3容積的自來水，振蕩后倒掉，重復8-10次。（2）浸泡、酸泡的器皿內要充滿液體，不得有氣泡。包裝注意事項：（1）手指與器材接觸面積要小，手指不能觸及器材的使用端；（2）封閉器材使用端，標記器材手持端；（3）小包裝；（4）玻璃管道口（尖吸管、移液管手持端等）加棉花。超凈工作臺和二氧化碳培養箱在使用時需要注意什么？

答案:1.超凈工作臺使用超凈工作臺時應注意：（1）使用凈化工作臺前先以紫外線滅菌燈照射30～50min處理凈化工作區內積存的微生物，關閉滅菌燈后應啟動風機使之運轉兩分鐘后再進行無菌操作；（2）超凈工作臺內切勿放有機溶劑；（3）如試劑滴灑于超凈工作臺上，請及時清潔；（4）實驗結束請用75%乙醇清潔臺面。2.二氧化碳培養箱使用二氧化碳培養箱時應注意：（1）保持培養箱內空氣干凈，主要措施如下：存放于箱內的培養瓶先用酒精棉擦拭干凈；定期對培養箱內壁及其附件進行酒精消毒，酒精消毒后用無菌干紗布將內壁及附件酒精擦除干凈，待箱內酒精揮發干凈后，再開啟加熱開關；（2）培養液若灑在培養箱內要及時用75%酒精清潔，以防細菌污染；（3）培養箱內水盤每周消毒、換無菌蒸餾水一次；（4）隨時注意二氧化碳壓力表的刻度顯示，及時更換氣瓶。單克隆抗體是由一種（

）克隆所產生的只針對某一特定（

）的抗體分子。

答案:B細胞;抗原決定簇動物細胞大規模培養技術是指在人工條件（除滿足培養過程必需的營養要求外，還要進行pH和溶氧的最佳控制）下，在（

）中（

）大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。

答案:細胞生物反應器；動物細胞生物反應器;高密度貼壁依賴性細胞傳代時采用(

)傳代,而懸浮培養的細胞在傳代時采用(

)或直接傳代。

答案:酶消化法；消化法；消化；酶消化;離心法傳代；離心法;離心傳代；離心傳代法體外培養的細胞在貼附底物上(

)時,細胞會停止分裂增殖,這種現象稱為細胞的(

)。此時,瓶壁上形成的細胞層數是(

)。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是(

)。

答案:連接成片、相互接觸；相互接觸；連接成片;接觸抑制;單層;胰蛋白酶細胞培養實驗前實驗者的皮膚主要用1%的新潔爾滅或(

)來消毒滅菌,實驗室地面采用來蘇爾定期拖洗消毒,培養室空氣可以用乳酸蒸氣或(

)。

答案:75%酒精;紫外線照射消毒在利用超凈臺工作時,應著(

)的清潔工作服。進入原代培養室需徹底洗手還要戴(

)、著消毒衣帽。

答案:長袖;口罩體外培養主要包括(

)、(

)和(

)三種類型。

答案:細胞培養;組織培養;器官培養植物組織細胞培養基pH值常用（

）或（

）調節培養基pH至所定的數值。

答案:0.1-1mol/L

NaOH；0.1-1NNaOH;0.1-1mol/L

HCl；0.1-1NHCl對貼壁依賴性細胞來說,判斷是否需要傳代的主要指標就是培養物是否已基本(

)培養瓶(皿)的底壁。一般來說原代培養物未達到支持物(

)的表面積,不要急于傳代。

答案:長滿；覆蓋;80%一般培養液中均含有(

)作為指示成分,以此來顯示培養液的pH值。

答案:酚紅微生物的污染可通過多種途徑發生,主要包括(

)、器材及試劑、(

)、組織樣本等途徑。

答案:空氣;操作用B細胞雜交瘤技術制備單克隆抗體的主要過程包括：（

），（

），細胞融合和雜交瘤細胞的篩選，陽性雜交瘤細胞的篩選，陽性雜交瘤細胞的克隆及其檢測，雜交瘤細胞株的凍存和單克隆抗體的大量制備，要經過幾個月的一系列實驗。

答案:動物免疫;脾細胞、骨髓瘤細胞及飼養細胞的制備在細胞融合過程中瘤細胞株應用最多的是（

）

細胞株。

答案:SP2/0細胞融合過程中使用的促融劑主要是（

），其分子量為（

）均可用，工作濃度范圍通常為（

）。

答案:聚乙二醇；PEG;1000～6000;30％～50％制備單克隆抗體的融合是指將免疫小鼠的（

）和（

）融合。

答案:B淋巴細胞；脾細胞;骨髓瘤細胞細胞融合培養時加入（

）選擇培養基，目的是保證只有雜交瘤細胞的生長。

答案:HAT在動物細胞大規模培養技術中，能為細胞提供貼附表面的培養基質目前主要有轉瓶、（

）、（

）和（

）。

答案:微載體;中空纖維;細胞工廠無論何種動物細胞培養，就操作方式來講，大規模培養可分為：分批式、（

）、（

）、連續式和（

）。

答案:流加式;半連續式;灌流式染色法測定細胞活性時，（

）能阻止染料進入細胞內，而（

）沒有這種功能。所以，（

）不會被染色，（

）會被染色。請選擇下面的正確字母填入上述空白處：A.活細胞；B.死細胞。

答案:A;B;A;BMTT法檢測細胞活性時，（

）線粒體中的脫氫酶能使外源性的四唑鹽還原為難溶性的（

）色結晶物并沉積在細胞中，而（

）則沒有這種功能。在一定細胞數量范圍內，藍紫色結晶物形成的量與（

）數成正比。請選擇下面的正確字母填入上述空白處：A.活細胞；B.藍紫色；C.死細胞。

答案:A;B;C;A從其他實驗室購買的細胞株,經過(

)穩定傳代后,應該及時凍存。

答案:一至二次;1-2次；一到兩次；一至兩次細胞凍存時，常用的冷凍保護劑有（

）和甘油。（

）對大部分細胞無毒性作用，在細胞凍存液中被廣泛使用，其常用的最終濃度為（

）。

答案:DMSO；二甲基亞砜;DMSO；二甲基亞砜;0.1細胞凍存最常用的設備是（

）。

答案:液氮罐原代培養細胞一經傳代后便改稱做(

)。一般情況下當傳代(

)左右,細胞增殖逐漸緩慢,以至完全停止,細胞進入(

)。

答案:細胞系;10~50次;衰退期培養器皿中細胞過少或過密都會影響細胞的生長、增殖,這種現象稱為(

)。

答案:密度依賴性原代培養方法最基本和常用的有兩種:(

)培養法和(

)培養法。

答案:組織塊；組織塊培養法;消化；消化培養法從體內取出細胞或組織的第一次培養,稱為(

)。

答案:原代培養BSS中文名稱為(

),具有維持滲透壓、PH值等作用,常用作洗滌組織和細胞以及配制各種培養用液的基礎溶液。BSS種類很多,常用的有(

)、(

)

和PBS。

答案:平衡鹽溶液;Hanks液；Hanks溶液;D-Hanks液；D-Hanks溶液血清就是作為一種添加成分與合成培養基混合使用,最常用的濃度是(

)。

答案:10%動物細胞培養的合成培養基除需添加血清,為防止污染,培養基中還要添加抗生素,有的細胞(如上皮細胞)還要添加(

),添加了以上物質的動物細胞培養基稱為(

)。

答案:谷氨酰胺;完全培養基人工合成培養基和酶液采用(

)方式進行除菌。

答案:濾過消毒；濾過除菌；過濾消毒；過濾除菌超凈工作臺臺面先用(

)擦拭,用紫外線消毒至少(

)min,然后啟動超凈臺(

)和照明燈。

答案:75%酒精;30;風機二氧化碳培養箱通常使用條件為(

)

答案:37℃、5%

二氧化碳；37℃、5%CO2觀察培養瓶內的培養物,要用(

)顯微鏡。

答案:倒置在無菌操作時,首先要點燃(

)。

答案:酒精燈早期細胞培養采用(

)培養基,現在廣泛采用添加(

)的(

)培養基,近二十年來,動物細胞培養基朝著(

)培養基的方向發展。

答案:天然;血清;人工合成；合成;無血清Wave、NBS、Applikon等公司在原有的技術基礎上，推出了各種類型的一次性生物反應器。

答案:對動物細胞生物反應器與微生物生物反應器的攪拌器及通氣方式沒有區別。（

）

答案:錯下面哪種動物細胞生物反應器是模擬細胞在體內生長的三維狀態而建立的一種體外培養系統？

答案:中空纖維生物反應器下面哪種動物細胞生物反應器采用噴射空氣供氧，氧傳遞速率高？（

）

答案:氣升式生物反應器下面哪種動物細胞生物反應器既可以培養懸浮生長的細胞，又可以培養貼壁依賴性的細胞?（

）

答案:中空纖維生物反應器下面哪個不是動物細胞生物反應器？（

）

答案:光照生物反應器在籠式通氣攪拌式生物反應器的基礎上，開發出的動物細胞生物反應器是（

）

答案:籃式通氣攪拌式生物反應器下面哪種動物細胞生物反應器比較適合進行微載體培養？（

）

答案:籃式通氣攪拌式生物反應器下面與細胞的篩選馴化不相符的是：（

）

答案:提高目標生物制品的穩定性和表達量（

）一般用于小量培養到大規模培養的過渡階段，或作為生物反應器接種細胞準備的一條途徑。

答案:轉瓶培養（

）管壁表面有許多海綿狀多孔結構，細胞能在上面貼壁生長。

答案:中空纖維將貼壁培養和懸浮培養優點結合起來的動物細胞大規模培養方法是(

)：

答案:微載體培養固定化培養的適用對象：（

）

答案:貼壁依賴型細胞和非貼壁依賴型細胞選擇微載體時，應注意的是（

）:(1)微載體表面性質要適應于細胞吸附；(2)微載體材料本身無毒性

；(3)微載體直徑盡可能小；(4)能承受高溫，以便高溫滅菌

；(5)要有良好的透光性

答案:(1)(2)(3)(4)(5)下列不屬于動物細胞大規模培養中貼壁培養的是（

）。

答案:微囊化培養（

）的培養小室通過兩條垂直的管道（供應管）分別在兩個相鄰角處互相連接，所以培養液可在各小室間流動。

答案:細胞工廠下列關于中空纖維培養法敘述錯誤的是（

）。

答案:為細胞提供二維的生長空間轉瓶培養過程中，轉瓶不斷旋轉，使細胞交替接觸培養液和空氣，從而提供較好的傳質和傳熱條件。

答案:對動物細胞大規模培養技術是指在人工條件下，在細胞生物反應器中低密度大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。

答案:錯動物細胞大規模培養已成功應用于生產疫苗、蛋白質因子、免疫調節劑及單克隆抗體。（

）

答案:對能為細胞提供貼附表面的培養方式目前主要有旋轉瓶培養、中空纖維培養、微囊化培養、微載體等。（

）

答案:錯根據動物細胞的培養特性不同，可分為旋轉瓶培養、中空纖維培養、細胞工廠培養等。（

）

答案:錯/star3/origin/5004528fda9ae7d235f8d7884c380551.png

答案:原代培養和傳代培養轉瓶培養的優點不包括：（

）

答案:勞動強度小原代培養的細胞較傳代培養的細胞消化時間相對較短。

答案:錯上皮細胞型細胞彼此緊密相連,因為相互擁擠而呈現“鋪路石”狀。(

)

答案:對細胞培養瓶外的污染物,一般情況下無需處理。(

)

答案:錯細胞代謝旺盛,酸性物質積累,致營養液pH值下降,顏色變紫,需換液或傳代處理。

答案:錯處于停滯期的細胞可通過傳代進行挽救,但處于生命衰退期的細胞會不可逆的向死亡方向發展。(

)

答案:對液氮滲透性很弱,所以當人體皮膚接觸液氮時,不易受到嚴重凍傷。(

)

答案:錯細胞凍存時,常采用二甲基亞砜(DMSO)作保護劑。(

)

答案:對細胞活性檢測是了解不同藥物、生物活性物質等對細胞作用效果的一種簡單、直觀的手段。

答案:對體外培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,因此體外培養的細胞要在體外持續地培養就必須傳代。

答案:對細胞被微生物污染后,若鏡下觀察菌體形態呈卵形,散在細胞周邊和細胞之間生長,可判斷為細菌污染。(

)

答案:錯貼附生長的細胞在外形上一般與體內無明顯不同。(

)

答案:錯臺盼藍法鏡下計數時,遇見2個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算。

答案:對細胞復蘇應采用快速融化的方法,

這樣可以保證細胞內結晶在很短的時間內被融化,避免形成胞內再結晶,從而對細胞造成損害。(

)

答案:錯細胞復蘇失敗與液氮罐中液氮的容量保管沒有關系。(

)

答案:錯原代培養時,因小鼠毛中有很多微生物,應使用75%的酒精長時消毒。(

)

答案:錯有些貼壁依賴性細胞在體外進行培養時,細胞質常向外伸出2-3個長短不同的突起,細胞形態有梭形、扇形或不規則三角形,具有這種細胞形態的細胞歸入成纖維細胞型。(

)

答案:對原代培養最基本、最常用的方法有組織塊培養法和消化培養法兩種。(

)

答案:對原代培養時,常采用頸椎脫臼法處死小鼠。(

)

答案:對細胞系的維持是通過換液、傳代、再換液、再傳代實現的。

答案:錯常用的細胞計數法有血球計數板計數法和自動細胞計數儀計數法。(

)

答案:對WST-1溶液4℃避光只能保存一周,-20℃避光可以保存半年,建議使用時適當分裝,盡量避免反復凍融。

答案:對液氮溫度低達-196℃,能長時間保存細胞活力,理論上在液氮內細胞的儲存時間是無限的。(

)

答案:對原代培養物首次傳代時細胞接種數量要多一些,使細胞能盡快適應新環境而利于細胞生存和增殖

答案:對取材時要剔除脂肪、神經組織、壞死組織等等。(

)

答案:對一般來說,成熟個體較胚胎組織容易培養,正常組織較腫瘤組織容易培養。(

)

答案:錯因受支原體污染的培養液常不發生混濁,細胞病理變化多數情況下表現輕微或不顯著,所以支原體污染細胞后,不易察覺而被忽視。(

)

答案:對半懸浮生長細胞貼壁不牢,可用直接吹打法使細胞從瓶壁脫落下來,進行傳代。

答案:對生長狀況不好的細胞,用顯微鏡觀察時,折光性變強,輪廓不清,邊緣整齊,細胞發暗、胞質中常出現空泡、脂滴、顆粒樣物質,細胞之間空隙加大。(

)

答案:錯抗生素聯合使用比單獨使用效果好。預防性應用比污染后使用效果好。(

)

答案:對細胞培養實驗中,為防止交叉污染,實驗器材和培養用液不能混用。(

)

答案:對原代培養取材的基本要求只有無菌取材、器材鋒利兩個要點。(

)

答案:錯細胞復蘇整個操作都需在無菌條件下進行,嚴防污染。

答案:對將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養,使細胞恢復生長,這個過程就叫細胞復蘇。(

)

答案:對細菌和霉菌的污染多發生在傳代、換液或其它實驗操作之后,因而在進行上述操作后24~48

h要密切注意是否有污染發生。(

)

答案:對細胞凍存時,于4℃及-20℃可放置一個月。(

)

答案:錯已發生細菌污染,再使用抗生素,常難根除。有價值的細胞被污染后,可試用5~10倍常用劑量,作用24~28小時,再換入常規培養液中,有時可奏效。(

)

答案:對細胞復蘇時,要在1min內使凍存的細胞解凍。(

)

答案:對在電鏡下可觀察到污染物多分布在細胞周圍和細胞間隙,有的直接吸附在細胞表面膜上,但在細胞基質內未見,可判斷為支原體污染。(

)

答案:對臺盼藍法檢測細胞活性時,死細胞圓形透明,活細胞染成藍色,用活細胞占計數細胞中的百分比表示細胞活力。

答案:錯細胞體外培養,其生長方式可以分為貼壁生長、懸浮生長和兼性貼壁生長三種。(

)

答案:對鼠胚組織取材極為不便,不易培養,價格昂貴,實驗室不經常使用。(

)

答案:錯MTT在細胞活性檢測的實際應用中比WST-1、WST-8等更加簡單、快速、準確。

答案:錯在細胞培養過程中,加入培養瓶的細胞數量都應在一定的范圍內,細胞才能達到其最佳生長狀態。(

)

答案:對分離液體性原代細胞懸液時,可采用長時間高速離心。(

)

答案:錯細胞系指經多次傳代成功后所繁殖的細胞群體。

答案:錯從體內取出細胞或組織的第一次培養,稱為(

)。

答案:原代培養觀察培養瓶內的培養物,要用(

)顯微鏡。

答案:倒置細胞轉化的標志之一是細胞可能獲得(

),也稱不死性,即細胞獲持久性增殖能力,這樣的細胞群體稱(

)細胞系,也稱(

)細胞系。

答案:永生性;無限;連續下面不可能引起細胞發生化學污染的物品是:(

)

答案:浸泡玻璃器皿的酸缸下列關于培養細胞生命期說法正確的是:(

)

答案:所謂培養細胞生命期,是指細胞在培養中持續增殖和生長的時間。下列不屬于貼壁生長的體外培養細胞的形態類型是:(

)

答案:放射細胞型MTT法的檢測波長為(

)。

答案:570nm一般原代細胞傳代按(

)接種,細胞系傳代按(

)接種。

答案:1:2;1:4細胞凍存和復蘇的基本原則是:(

)

答案:慢凍快融為了除去漂浮的組織塊和殘留的血細胞,原代培養多少天后需換液一次:(

)

答案:3-5天應根據細胞對營養的要求選擇不同的培養液對細胞進行復蘇,一般細胞復蘇時常用(

)。

答案:DMEM培養液MTT經活細胞線粒體脫氫酶轉化成的有色物質不溶于水,對其進行定量分析時,需加入(

)溶解后方能測定。

答案:二甲基亞砜傳代和換液后,如果發現培養液很快變黃,不可能由以下哪個因素造成:

答案:培養器皿沒有洗干凈,有堿性殘留物細胞復蘇時,水浴溫度為:(

)

答案:38~40℃下面哪項不是消化法培養原代細胞的優點?(

)

答案:操作比較簡單正常新鮮的培養液為(

),這種顏色代表培養液的pH值大約為7.2~7.4。

答案:紅色或橙紅色細胞培養過程中,使用胰蛋白酶的目的是(

)

答案:使動物組織分散成單個細胞進行培養下列不屬于懸浮型細胞的是:(

)

答案:神經細胞WST-1溶液測定細胞活性時不需注意以下哪個事項?(

)

答案:酶標儀測定前,需加入二甲基亞砜溶解有色轉化物方能測定關于細胞系維持注意事項錯誤的是:(

)

答案:抹去原始編號,重新標記在組織塊培養時,下面哪種操作或方法不利使組織塊粘貼牢固?

答案:及時更換培養液下面哪項不是組織塊法培養原代細胞的優點?(

)

答案:細胞生長較快臺盼藍法檢測細胞活性時,細胞懸液和臺盼藍染液的添加比例為(

)。

答案:1:1各種細胞系都應在傳代期的(

)進行充足的凍存儲備。

答案:早期細胞復蘇次日,最好換液,目的是:(

)

答案:棄去漂浮的死亡細胞下面哪種試劑可用于終止胰蛋白酶的消化作用?(

)

答案:含小牛血清的培養液細胞經熒光染色劑Hoechst

33258染色后,在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之熒光小點,證明有(

)污染。

答案:支原體生長狀況良好的細胞,不具備下面哪項鏡下觀察特征?(

)

答案:折光性弱體外培養動物細胞的一代生長過程為

。(

)

答案:游離期

、貼壁期、潛伏期、指數生長期、停滯期細胞凍存的最佳濃度為(

)。

答案:5×

~

1

×個/ml下面哪個凍存液的配方是正確的?(

)

答案:90%血清+10%

DMSO細胞培養過程中由于細胞的代謝活動,酸性物質增多,pH值下降,培養液變成(

)

。

答案:黃色使用液氮凍存細胞時,應定期查看液氮余量,確保罐內液體高度沒過重要樣品,最少時,液氮不可少于罐體容積的(

)。

答案:三分之一細胞凍存的最佳時期為(

)。

答案:對數生長期快速檢驗細胞冷凍和復蘇效果的方法是(

)。

答案:細胞活性檢測細胞復蘇失敗的因素不包括(

)

答案:將細胞從液氮罐中拿出時,用鑷子挾持凍存管鏡下觀察細胞培養物,可見絲狀、管狀或樹枝狀菌絲,并懸浮飄蕩在培養液中,可判斷為(

)污染。

答案:真菌(

)污染的典型特征是細胞培養液短期內變黃且明顯渾濁。(

)

答案:細菌肉眼觀察細胞培養物,短期內未見培養液混濁,但在培養液中有白色或淺黃色漂浮物,可判斷為(

)污染。

答案:真菌一般來說原代培養物未達到支持物(

)的表面積,不要急于傳代。

答案:80%動物細胞培養所需的氣體中沒有二氧化碳。

答案:錯手或相對較臟的物品不能經過開放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液時如吸管尖碰到瓶口,則應將吸管丟掉。

答案:對動物細胞培養是指將動物活體體內取出的組織用機械或消化的方法分散成單細胞懸液，然后放在模擬體內生存環境的體外環境中，進行孵育培養，使其生存和生長的方法。

答案:錯體外培養動物細胞對營養要求很高,需要氨基酸、維生素、激素、生長因子等。

答案:對細胞培養在細胞生物學、遺傳學、藥理學、病毒學上都有廣泛應用

。

答案:對動物細胞培養操作簡便易于檢測實驗結果。

答案:對早期細胞培養常用天然培養基例如:胎汁、血漿、血清。

答案:對無菌操作間專用于無菌操作、細胞培養,

要求清潔、干燥、無菌、不通風,局部空氣潔凈度要達到百級以下。

答案:對浸泡、煮沸、酸泡的器皿內要充滿液體,不得有氣泡。

答案:對培養器材包裝時,手指與器材接觸面積要小,手指不能觸及器材的使用端。

答案:對配制消化液要用Hanks液。

答案:錯旋轉管培養法開創了細胞培養的先河。

答案:錯血清可以直接從-20℃放到室溫中解凍。

答案:錯動物細胞培養用水應使用在太陽光下晾曬四周的三蒸水。

答案:錯培養器材包裝時,玻璃管道口(尖吸管、移液管手持端等)加棉花。

答案:對細胞培養用到的每種試劑都要精確并且無細菌危害。

答案:錯合成培養基仍缺少某些成分，不能完全滿足體外細胞生長需要，只能維持細胞的基本生存需要，所以又稱為基礎培養基。

答案:對細胞培養操作間經紫外線照射消毒和化學消毒后要開窗通風,減小對操作員的危害。

答案:錯無菌操作時,開啟、關閉長有細胞的培養瓶時,火焰滅菌時間要長。

答案:錯射線消毒主要指使用X射線和高速粒子加速器等發出的輻射進行消毒,適用于消毒量大和不適做高壓或濾過等方法消毒的培養用品,如塑料制品等,由于一般實驗室不具備射線發射條件,故很少采用。

答案:對在培養動物細胞時需加入血清。

答案:對無菌操作時,不能用手觸及已消毒器皿。

答案:對一切培養用品都要有固定的存放地點。培養用品與非培養用品應嚴格分開;已消毒與未消毒品應嚴格分開存放。

答案:對D-Hanks液和PBS都不含鈣鎂離子,有利于細胞的分散,因此常用來配制胰蛋白酶等組織消化液。

答案:對準備室主要用于培養器皿的洗滌、消毒、培養物的準備和物資保存等。

答案:對沖洗器皿時不需要流水振蕩沖洗。

答案:錯二氧化碳培養箱內水盤每周消毒、換無菌蒸餾水一次。

答案:對目前在細胞培養中最常用的是將青霉素(常用濃度是100

U/ml)與鏈霉素(100μg/ml)混合使用,俗稱雙抗液,加入所用的培養基中。

答案:對無菌操作時的一切操作,如安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等,都需在火焰近處并經過燒灼進行。

答案:對各種培養用液后,試劑瓶上都要有標簽,標簽注上名稱、濃度和制備日期即可。

答案:錯由于動物細胞沒有細胞壁,所以對營養要求并不苛刻。

答案:錯細胞所需氣體主要是氧和二氧化碳，氧參與三羧酸循環，二氧化碳主要與維持培養基的pH有直接關系。

答案:對緩沖間常設于無菌室外,

3~5m2即可,要求清潔、干燥和不通風,

并設置紫外燈(距地面不超過3m)等必要的環境消毒設備。

答案:錯培養器材包裝時,封閉器材手持端,標記器材使用端。

答案:錯現今國內外都普遍使用市售商品干粉合成培養基,除專門從事培養基的研究者外,各實驗室已無必要再自己配制培養基。

答案:對培養室是進行細胞培養及各種無菌操作的區域,其位置最好設在陽面。

答案:錯無菌操作時,吸管使用前其使用端要火焰消毒,吸取過營養液后的吸管可再用火焰燒灼。

答案:錯天花板、地板和四周墻壁要光滑無死角不易在墻角堆積灰塵,以便定期清潔和消毒。

答案:對體外培養只有組織培養一種方法。

答案:錯在超凈工作臺的紫外燈開啟前,可將細胞培養的實驗器材移入,但(

)不能在紫外燈下直接照射,需在操作時隨手攜入。

答案:培養用液和培養細胞濕熱消毒所用設備是(

)

答案:高壓蒸汽滅菌鍋在動物細胞培養基中除必須的成份外,往往還需要加些液體,下列物質不能加的是(

)。

答案:氨水動物細胞培養玻璃器皿的清洗包括(

):(1)浸泡

(2)刷洗

(3)浸酸

(4)沖洗

答案:(1)(2)(3)(4)Hanks液在動物細胞培養操作中的作用是(

)。

答案:洗滌組織細胞在動物培養液中往往不需要加入的物質是(

)

答案:尿素要想使動物細胞更好地繁殖、生長,需在合成培養基中補加小牛血清,其濃度為(

)。

答案:5-20%下面哪種培養用液(

)可以不采用濾過除菌方式?

答案:D-Hanks液動物細胞培養中最常使用(

)孔徑的濾膜進行濾過除菌。

答案:0.22μm在(

)原理的啟發下,出現了多種類型培養瓶、多孔培養板的培養。

答案:卡式瓶若不使用二氧化碳培養箱,將會導致培養液(

)

。

答案:堿性增強動物細胞培養基(液)的除菌方法為(

)

答案:過濾除菌動物細胞培養液中一般都以(

)作為必含的能源物質。

答案:葡萄糖動物細胞培養中,抗生素消毒主要適用于(

)消毒。

答案:培養用液人體細胞培養的標準溫度為(

)

答案:36.5℃±0.5℃培養動物細胞無需加入的營養成分是(

)。

答案:腎上腺素安裝正壓除菌濾器時以下操作正確的是(

)

答案:濾膜在使用前需經三蒸水浸泡過夜動物細胞培養的