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文檔簡介
微生物學實驗診斷實驗診斷學微生物學實驗診斷一、微生物學檢驗:從樣本到報告二、主要的致病和條件致病微生物三、各系統感染病例及微生物學檢驗四、藥敏試驗五、進展和展望2023/11/72診斷學問診體檢病歷器械實驗診斷學思維最好的研究依據,個人專業技能和臨床經驗,病人的價值和愿望2023/11/73微生物學實驗診斷血液和體液檢驗免疫學檢驗生物化學檢驗微生物學檢驗實驗診斷2023/11/742023/11/75病原微生物感染性疾病的診斷臨床診斷:不同微生物、不同免疫狀態的宿主以及不同感染部位而不同。器械輔助:物理檢查一般實驗室檢查(如白細胞計數和分類計數)可以協助進行感染性疾病診斷。微生物學實驗室診斷是確診感染性疾病最重要的依據。一、微生物學檢驗:從樣本到報告一般實驗室檢查樣本采集樣本保存和運送增菌分離培養+涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢生化反應鑒定藥敏試驗結果解釋及報告2023/11/76采集原則:早期、無菌、方法、適量、安全標本處理1.對環境敏感的細菌保溫立即送檢,其他最好2h內2.適宜環境保存,一般不應超過24h3.注意安全防護4.標本切勿污染,容器必須包裝好5.烈性傳染病標本,必須按規定包裝,由專人運送6.厭氧性標本應放在專門的運送瓶或試管內運送,有時可直接用抽取標本的注射器運送
2023/11/77形態學檢查1.包括不染色標本檢查法和染色標本檢查法2.了解有無細菌及大致菌量3.形態、結構和染色有助初步識別和分類4.初步診斷,早期診斷和治療2023/11/78不染色標本1.直接鏡檢,檢查細菌的動力及運動狀況2.壓滴法和懸滴法有動力:自一處移至另一處,有明顯的方向性位移無動力:布朗運動,只在原地顫動而無位置的改變3.有些病原菌可作出初步鑒定疑似霍亂患者,鏡下觀察到來回穿梭似流星狀運動的細菌,制動試驗陽性,初步推斷為“疑似O1群霍亂弧菌”。2023/11/79染色標本1.革蘭染色(gramstain)革蘭陽性球菌革蘭陰性桿菌2023/11/7102.抗酸染色(acid-faststain)將細菌分為兩大類:即-抗酸性細菌-非抗酸性細菌3.熒光染色敏感性強,效率高。用于結核分枝桿菌、麻風分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及痢疾志賀菌等的檢測。4.鞭毛染色有無鞭毛、鞭毛的位置及數量5.異染顆粒染色用于白喉棒狀桿菌染色。6.芽胞染色:7.墨汁染色:2023/11/711分離培養和鑒定一、培養基的種類和選擇培養基的組成成分、培養基種類、培養基的選擇二、分離及培養細菌的分離、細菌培養方法三、生化反應和鑒定碳水化合物的代謝試驗蛋白質和氨基酸的代謝試驗碳源和氮源利用試驗2023/11/712培養基(culturemedium)人工方法配制,專供微生物生長繁殖使用的混合營養物制品。根據標本來源和可能存在的病原菌,確定選用各種分離培養基。伊紅美藍/麥康凱用于篩選革蘭陰性桿菌。2023/11/7131.平板劃線分離法2.斜面接種法3.液體接種法細菌的分離4.穿刺接種法5.傾注平板法6.涂布接種法2023/11/714細菌培養方法
1.需氧培養法
2.二氧化碳培養法
3.厭氧培養法
2023/11/715生化反應和鑒定(一)碳水化合物的代謝試驗
1.糖(醇、苷)類發酵試驗
2.氧化―發酵試驗(O/F試驗)(二)蛋白質和氨基酸的代謝試驗1.明膠液化試驗主要用于腸桿菌科細菌的鑒別。2.吲哚(靛基質)試驗主要用于腸桿菌科細菌的鑒定。3.硫化氫試驗培養基:醋酸鉛培養基應用:腸桿菌科中屬及種鑒別2023/11/716(三)碳源和氮源利用試驗1.枸櫞酸鹽利用試驗用于腸桿菌科中菌屬間的鑒定。2.丙二酸鹽利用試驗腸桿菌科中屬間及種的鑒別。(四)各種酶類試驗1.氧化酶試驗主要用于腸桿菌科細菌與假單胞菌的鑒別。2.過氧化氫酶試驗(觸酶試驗)用于革蘭陽性球菌的初步分群。2023/11/717非培養檢測方法一、免疫學檢測:抗原檢測、抗體檢測二、分子生物學:核酸雜交、PCR、生物芯片技術三、毒素:內毒素、外毒素四、動物實驗五、蛋白質組-質譜技術
2023/11/718樣本采集診斷疾病,獲得含有病原微生物的樣品。無菌采集樣品容器標有名字,號碼,日期,時間,藥物。立即送到實驗室培養。運送延遲最佳的環境條件選擇性培養基2023/11/719樣本采集接觸血液或其他體液。減少感染風險減少院內感染的傳播。戴手套,接觸血液和體液,黏膜膜,破損皮膚和處理的物品或表面。沾了病人的血液或體液。每一個病人換手套。立即徹底洗手和其他皮膚表面。2023/11/720樣本采集:傷口、膿汁1。消毒面積,用無菌棉簽蘸無菌生理鹽水。
2。70%乙醇或碘液消毒。
3。如果膿腫自發破裂,用無菌手術刀打開。
4。擦拭膿液。
5。無菌棉簽觸摸的膿液,注意不要污染
周圍組織。
6。容器正確標簽。2023/11/721樣本采集:血、尿血培養
1,無菌操作。
2。時間和部位。
3。采血量。尿液細菌培養
1,無菌容器。
2。清洗,中段尿。
3。冷藏4℃-6℃。2023/11/722樣本采集:糞便糞便培養細菌學檢查,少量樣本的。無菌拭子插入直腸或糞便。無菌管。
寄生蟲,蟲卵鏡檢。成蟲寄生。2023/11/723Forbacterialisolation,Thetrainedphysicianwillcollectonly3-5mlintoalabeledsterilecontainerForvirusisolation,collect0.5-1.0mlofCSFinadry,sterilecontainer樣本采集:腦脊液2023/11/724Throat/NasalSwabsSpecimensTakenunderdirectvisualizationwithgoodlightingAreasofexudation,membraneformationorinflammationarechoicesites,otherwiserubthetonsillarcryptsForBordetellapertussis,collectnasopharyngealorpernasalswab.Informlabinadvancetopreparefreshculturemediaforthisorganism2023/11/725二、主要的致病和條件致病微生物細菌病毒真菌正常存在于宿主體內的微生物在免疫功能低下、定居部位改變、宿主菌群失調等特定情況下引起感染。條件:正常微生物存在;免疫力下降條件。變化:寄生部位改變,原寄生部位微生物數量變化導致失調。導致機體的發病。2023/11/7262023/11/727微生物學實驗室診斷微生物學實驗室診斷2023/11/728微生物學實驗室診斷形態學:培養:沙氏瓊脂鑒定:形態學;生化;分子生物學;質譜;血清學;組織病理學2023/11/729各系統感染病例及微生物學檢驗呼吸道消化道泌尿道皮膚軟組織血液生殖道中樞神經系統2023/11/730病例16歲男童,既往健康。喉嚨痛,發燒38℃,頭痛頸部淋巴結腫大,咽紅,扁桃體炎性滲出。沒有其他癥狀。2023/11/731鑒別診斷急性咽炎,原因:細菌和病毒。分枝桿菌、真菌引起急性咽炎不常見。咽炎患者通常有喉嚨痛,發熱,吞咽疼痛,以及扁桃腺和頸部淋巴結。需要實驗室測試作出診斷。2023/11/732化膿性鏈球菌:最常見的細菌引起的咽炎病毒:腺病毒引起咽炎,結膜炎EB病毒,傳染性單核細胞增多,主要在15-25歲年齡組其他呼吸道病毒:鼻病毒,冠狀病毒,副流感病毒,流感病毒,柯薩奇病毒,巨細胞病毒病毒測試實驗室少做。鑒于患者情況,其他常規檢測同時,A群鏈球菌是最有可能的致病因子。應進行檢測。包括:快速鏈球菌測試。咽拭子培養:雙拭子。扁桃體和咽后壁區。注意避免接觸口咽,口腔,舌。2023/11/733結果快速檢測A鏈:基于特定碳水化合物的N-乙酰。測試敏感性差異很大,特異性達到95-100%(與培養法相比)。5-10分鐘,培養需要48小時,快速抗原測試廣泛使用。金標準:咽拭子培養,血平板(GAS)靈敏度達90-95%。18-24小時,35-37℃。檢查后,再培養24h。2023/11/734結果三種溶血類型:α-溶血是對紅細胞破壞不完整的綠色溶血環。β-溶血無色溶血環。γ-溶血實際上是沒有溶血。A組鏈球菌是β-溶血,但并非所有的β-溶血菌落是A鏈,β-溶血菌落必需進一步測試。其他細菌生長。2023/11/735過氧化氫酶試驗和革蘭染色鏡檢觸酶試驗。3%過氧化氫,出現氣泡+。鏈球菌是革蘭陽性球菌,觸酶陰性。葡萄球菌(顯示β-溶血)是團塊或集群和革蘭陽性球菌,過氧化氫酶陽性。進一步測試。桿菌肽敏感2023/11/736致病和相關疾病鏈球菌咽炎:氣溶膠或污染食物。重要的病原菌,外毒素,造成中毒性休克。激發免疫系統。與心臟交叉反應,導致心臟瓣膜損害。感染性心內膜炎病因。類/風濕性關節炎(RF)和急性腎小球腎炎多關節腫脹疼痛(遷移性關節炎)和心臟雜音(損壞的心臟肌肉和心臟瓣膜)。神經系統癥狀,抖動或抽搐(舞蹈癥)。腎功能障礙,眼瞼腳踝腫脹,高血壓,血液和尿液中的蛋白,尿量↓。2023/11/737治療和預防及時治療,防止并發癥,如扁桃體膿腫與急性風濕熱用抗生素可縮短癥狀持續時間。化膿性鏈球菌咽炎,可用青霉素治療。兒童用阿莫西林。完整療程。青霉素過敏-紅霉素。不進行治療,可能出現心臟瓣膜損害、RF或腎臟損害。2023/11/738其他學校,適齡兒童,5?14歲,最有可能。分子檢測A鏈:6小時提供結果,不進行培養確認,節省時間。急診部門和診所。
EB病毒傳染性單核細胞增多癥,皮疹,乏力,肝腫大和/或脾腫大伴隨咽炎。異型淋巴細胞。血清學確認以EB病毒抗體滴度的四倍增長、EB病毒抗體IgM。青少年和年輕成年人咽炎可能由溶血隱桿菌引起。年輕成年人,可能受感染與C組或G型鏈球菌??焖俚逆溓蚓?,因抗原每組不同。同樣抗生素治療。白喉很少出現在發達國家,足夠免疫接種。2023/11/739病例220歲大學生,排尿困難,燒灼感,無骨盆疼痛。沒有發燒,有中度恥骨上壓痛。無側翼疼痛。鑒別診斷
膀胱炎,癥狀—感染下泌尿道,涉及尿道膀胱。典型癥狀包括排尿疼痛(困難),尿頻,尿急,尿血。大約有50%的女性一生中發生尿路感染。2023/11/740鑒別診斷淋病奈瑟菌,沙眼衣原體,較普遍性傳播疾病。該患者:急性膀胱炎,尿液培養證實。無發燒或側翼(背部)疼痛。---簡單膀胱炎-復雜泌尿道感染:涉及到上尿路或腎。(腎盂腎炎,感染腎臟及輸尿管上段)。復雜泌尿感染危險因素包括妊娠,解剖或功能性尿道異常,糖尿病,免疫抑制。感染原因:糞便菌群。無并發癥膀胱炎通常是由于一種微生物,大腸桿菌。復雜性膀胱炎-多菌。2023/11/741病原體腸道革蘭陰性桿菌:大腸埃希菌,最常見原因??死撞鷮伲横t院獲得性尿路感染奇異變形桿菌:尿路感染及結石形成銅綠假單胞菌:醫院獲得性尿路感染
革蘭陽性球菌:腸球菌,醫院感染
病毒:腺病毒引起兒童出血性膀胱炎真菌:白假絲酵母菌:糖尿病患者,免疫功能低下的病人,留置導管者分枝桿菌不是尿路感染的主要原因腐生葡萄球菌,無乳鏈球菌(B組鏈球菌)2023/11/742實驗室膿尿(白細胞尿),血尿(紅細胞)-復雜的泌尿道感染。急性膀胱炎患者≥10WBC/mm3非離心標本。尿液試紙:非侵入性技術。篩選測試預測哪些尿樣本含有很高的細菌菌落總數。正常尿液無菌,蛋白質,白細胞,血細胞,亞硝酸鹽。浸入尿液,立即閱讀。硝酸鹽和白細胞酯酶+,顯示,細菌存在;中性粒細胞存在尿液培養,不論試紙的結果。2023/11/743培養清潔:肥皂和水三次,中段尿,導管進入膀胱、穿刺獲得標本,感染。尿液是培養基,立即交實驗室,冷藏保存。室溫1小時可產生篩選假陽性結果,細菌培養↑。接種環0.001或0.01毫升。菌落數乘以稀釋因子=每毫升尿液菌落總數。定量結果,正常無菌。>105CFU/毫升,確定有感染;藥敏試驗。超過3種菌數量相當,污染的正常菌群。
2023/11/744結果尿液培養結果大于100,選擇性革蘭陰性桿菌落數乘以1000,總菌落計數>105/mL。MacConkey紅色,乳糖發酵。腸桿菌的大腸桿菌,克雷伯桿菌和腸桿菌。吲哚陽性,最有可能是大腸桿菌。完整生化反應。藥敏試驗結果:氨芐青霉素,頭孢唑啉,環丙沙星,呋喃妥因,甲氧芐啶,復方新諾明。紙片擴散。2023/11/745發病除新生兒期,女性常見。隨年齡上升。部分患者沒有癥狀,尿液篩檢及尿培養是關鍵??芍聰⊙Y。各種因素。先天性解剖異常。糖尿病,妊娠,返流,神經功能障礙,腎結石,腫瘤。醫院療養院,留置導管是主要因素。上行感染或血行感染。最常見上行感染。血源性感染導致腎膿腫。菌毛附著在宿主細胞內特定受體結合位點感染。
2023/11/746病例314歲男性,嘔吐,腹部不適,腹瀉,非血性。3天前,參加學校旅行野餐,叉燒雞肉,馬鈴薯沙拉,烤豆,冰激凌。輕度腹部不適,間歇性痙攣性腹痛,水樣大便每天3至5次。沒有皮疹、尿痛或血尿,沒有寵物,否認服用抗生素。39℃。下腹輕度壓痛。糞便潛血陰性。至少50個其他野餐學生也報告類似癥狀。2023/11/747鑒別診斷急性腹瀉。腹瀉是指不正常的頻率,量。急性腹瀉≤14天,持續腹瀉>14天;慢性腹瀉≥30天。細菌或病毒的胃和腸道發炎(腸胃炎),食物中毒,或者非感染性原因。野餐,傳染性原因如細菌或病毒性腸胃炎。菌:嗜水氣單胞菌、空腸彎曲桿菌。艱難梭菌、大腸桿菌、[ETEC,EHEC、EPEC,EIEC]、痢疾桿菌?;魜y弧菌、副溶血弧菌、耶爾森菌。病毒:腺病毒(腸道)、星狀病毒真菌和分枝桿菌:不引起急性腹瀉2023/11/748鑒別診斷炎癥性腸?。号D?、毒物、潰瘍性結腸炎風險因素:病史線索。年齡,生活條件,地理位置,旅行史,飲食習慣,抗生素使用。零星案件/可能爆發。臨床線索
發燒/血性腹瀉?細菌性,沙門,痢疾,彎曲。
惡心嘔吐?病毒性,毒素/出血大腸埃希菌。
抗生素?艱難梭菌。
突然惡心嘔吐腹瀉發燒?金葡菌腸毒素。
2023/11/749實驗室糞便常規細菌培養識別彎曲,沙門菌,痢疾桿菌,耶爾森菌,嗜水氣單胞菌。O157:H7和霍亂弧菌。O157:H7-毒素。毒素檢測例行-艱難梭菌。常規細菌培養沙門菌,痢疾桿菌,空腸彎曲菌是最可能原因。無血便-腸出血性大腸桿菌不太可能,如O157:H7。沒有特定抗病毒療法。輪狀病毒-嬰幼兒腹瀉,例行。冬季、清潔,干燥容器以緊身或螺紋瓶蓋蓋。標本在運輸過程中可在室溫下保持。2023/11/750結果選擇性培養基。MacConkey瓊脂-革蘭陰性桿菌。乳糖發酵能力。硫化氫-沙門菌。O157:H7型接種山梨醇-MacConkey瓊脂。山梨醇陰性隔夜培養,“可疑”菌落,生物化學。抗血清。藥敏試驗。報告相關部門,發起流行病學調查。2023/11/751其他住院天數≥3。不可能沙門菌,痢疾桿菌或彎曲桿菌。艱難梭菌最有可能。檢查毒素。艱難梭菌相關性腹瀉(CDAD)可發展到偽膜結腸炎,嚴重的癥狀,可能需要手術干預。服用抗生素,是CDAD風險因素。停止濫用抗生素,良好的手部衛生和環境消毒控制和預防疾病傳染的感染。硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖(TCBS)瓊脂平板發酵蔗糖產酸,呈黃色2023/11/752病例421歲,水樣腹瀉6個星期,痙攣性腹痛。在過去2周,腹瀉帶血。在危地馬拉參加一個社區服務項目6個月。喝了水,吃了在當地社區的食物,不經常飲用煮沸的水。否認抗生素+,已采取瘧疾預防。營養良好,8-10磅重的體重損失。沒有發燒。血壓110/80mm汞柱,脈搏84/min和14/min呼吸,肺組織清晰。腹部檢查顯著局部壓痛到右上腹壓痛沒有反跳痛,但沒有肝腫大。2023/11/753鑒別診斷“旅行者腹瀉”是水樣腹瀉,到達一個新國家首周。伴隨著惡心,嘔吐,腹部痙攣和發燒,自限性,平均長度3-5天。欠發達國家、污染食物或水。感染的原因
菌:氣單胞菌??漳c彎曲桿菌。腸毒素性大腸桿菌(ETEC),50%的病例類志賀沙門菌。痢疾桿菌。弧菌。
病毒:輪狀病毒2023/11/754實驗室病史。旅行史+腹部壓痛,體重減輕。病原:痢疾桿菌,沙門菌,彎曲菌,腸出血性大腸桿菌,EIEC,阿米巴。檢查:培養、寄生蟲,潛血試驗。肝功能,腹部超聲或CT。
1。顯微鏡檢查。阿米巴包囊或滋養體2。抗體檢測(血清)。陽性>90%的病人有侵入疾病。抗體檢測診斷為阿米巴性肝膿腫。3。抗原檢測(糞便)。商業化,且測試可在2小時完成抗原。4。結腸鏡檢查。5。聚合酶鏈反應(PCR)。2023/11/755病例516歲男性發燒,嚴重頭痛,嘔吐,否認服用任何違禁藥物或有任何運動或外傷頭部受傷?;杌栌?,體溫40℃,血壓120/80毫米汞柱,脈搏80/min,呼吸14/分鐘。脖子僵硬,初步檢查皮膚沒有皮疹。
腰椎穿刺,分散的紅點(瘀斑)出現在背部,軀干和腿2023/11/756鑒別診斷脖子僵硬-腦膜炎。嘔吐是顱內壓增高。菌:大腸桿菌和其他腸道革蘭陰性桿菌、流感嗜血桿菌、李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌、金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌(B組鏈球菌)、葡萄球菌屬。病毒:蟲媒/腸/單純皰疹病毒(稀有)真菌和分枝桿菌造成慢性腦膜炎。2023/11/757鑒別診斷新生兒(嬰兒<6Weeks)無乳鏈球菌(B組鏈球菌),大腸桿菌和其他腸道革蘭氏陰性菌,李斯特菌,肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌,流感嗜血桿菌。2個月到5歲肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌,流感嗜血桿菌。5-16歲肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌。成人肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌,金黃色葡萄球菌,李斯特菌,流感嗜血桿菌(稀有原因)。老年人(>60歲)肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌,大腸桿菌和其他腸道革蘭氏陰性菌;李斯特菌,金黃色葡萄球菌,鏈球菌,B組相比,其他流感嗜血(稀有)。免疫功能低下患者:任何生物體有可能成為病原體,不應被視為污染物。2023/11/758實驗室腦脊液標本細胞計數,葡萄糖,蛋白質分析,腦脊液革蘭染色和細菌及病毒培養至關重要。經驗抗生素已啟動。治療腦膜炎不應因診斷而延遲,高發病率和死亡率。細菌革蘭染色和培養,腦脊液葡萄糖和蛋白質分析,病毒培養或保存在-70?未來使用腦脊液應迅速運到實驗室(<15分),盡快測試。細菌,真菌或寄生蟲測試在運輸過程中應保持≤2小時。病毒性冰或冷藏。離心用于革蘭染色和培養。2023/11/759結果發現腦脊液白細胞;細胞內和細胞外革蘭陰性雙球菌。腦膜炎奈瑟菌,C組,最常見的血清型年齡較大的兒童,青少年和成年人??股孛舾行詼y試沒有進行。應定期檢測β-內酰胺酶。2023/11/760標本采集腰椎穿刺2023/11/761標本采集62腦脊液壓力臥位0.78~1.76kpa,兒童0.4~1.0kpa。腦組織體積或腦脊液量增加,腦脊液壓力升高。壓力測定后收集于3個無菌試管中,第一管細菌培養第二管免疫學化學分析第三管一般性狀及鏡檢。必須立即送驗及時檢查,2023/11/76263一般實驗室檢查外觀、有形成分、細菌直接圖片、蛋白定性定量、葡萄糖定量、氯化物測定。影像學技術2023/11/763一般實驗室檢查642023/11/764病例6:性病與性傳播疾病性行為傳染,具有明顯的生殖器官損害癥狀。1975年WHO決定,將各種可通過性行為或類似性行為傳播的疾病,統稱為“性傳播疾病”(SexuallytransmitteddiseasesSTD)中華人民共和國衛生部頒布的性病防治管理辦法規定:
法定性?。毫懿 ⒚范尽滩”O測性病:非淋菌性尿道炎、軟下疳、性病性淋巴肉芽腫、尖銳濕疣、生殖器皰疹廣為流傳,社會病。傳播方式:性行為非性行為接觸血源胎盤產道醫源性其他途徑2023/11/765患者,男,38歲,因頭痛三月,加重伴右側肢體乏力三天入院?;颊哂谌齻€月前在外地開會時感頭痛,似于前額部明顯,不劇能忍,無惡心、嘔吐,無發熱咳嗽,無胸悶胸痛,未予重視,也未求診,當晚未參加會議活動,休息后第二天感覺頭痛緩解。此后近三月內間歇發作五六次,每次持續約一天到二天自行緩解,只有一次較劇伴輕微惡心自服散利痛一顆后緩解,仍一直無發熱咳嗽等表現。三天前與朋友們玩牌時,感頭痛復發,經休息后不能緩解,同時出現右側肢體乏力,右手明顯感到握力減弱。至今未見明顯緩解,來院就診。2023/11/766患者平時體健,否認高血壓、糖尿病、無肝炎結核史,煙一天20支左右,酒少量。平時常有熬夜史,平時也常有頭痛史數年。入院檢查:體檢神志清,僅右上下肢肌力四級,病理征未引出,頸抵抗可疑,其他心肝肺腎檢查均無陽性體征。血尿糞三大常規、肝腎功能、血脂血糖正常,心電圖、胸片、心超、腹部B超正常,腦CT示左頂葉低密度病灶,注入造影劑后有環形增強,腦MRI示同部位占位,但提示炎癥。2023/11/767該病人入院三天后病情未見明顯緩解,作為疑難病全院討論,主要考慮如下:
1、腦膿腫:但膿腫從何而來,沒有炎癥表現,僅CT提示,依據不足。
2、腦腫瘤:結合患者年齡,目前不能排除,但影象學沒有明確支持。
3、腦囊蟲?。耗壳皼]有依據,但同樣也不能排除。
4、結核病:患者結核毒血癥狀不明顯,其他部位也未發現。
5、其他未明病因的感染性疾病。2023/11/768臨床表現異常太少,診斷不能明確,在與家屬溝通時,家屬表示:不管他了,誰叫他這么花心。提示是不是該查STD方面的問題,如梅毒和艾滋病,第二天梅毒血清試驗陽性,但這與顱內病變有沒有關系呢,當天下午做了腰穿,確定腦脊液VDRL陽性,至此,神經型梅毒診斷成立,即與大劑量青霉素丙磺舒治療,第三天下午,頭痛明顯緩解,第四天開始肢體肌力有所恢復,一周后感覺右側肢體乏力明顯好轉,不再頭痛,復查CT,左頂葉低密度灶明顯縮小。繼予上述治療二十天后腦CT未見病灶,頭痛及肢體癥狀消失,痊愈出院。2023/11/769蒼白密螺旋體蒼白亞種(梅毒螺旋體)
T.pallidum
subsp.pallidum梵高,尼采,叔本華,貝多芬、莫扎特、舒伯特、福樓拜、莫泊桑、林肯、載淳法國人叫它“那不勒斯病”,德國人和波蘭人叫它“法國病”,俄羅斯人叫它“波蘭病”,土耳其人和阿拉伯人叫它“基督徒病”,印度人叫他“葡萄牙病”,嶺南以北的中國人叫他“廣東瘡”,日本人則叫它“中國瘡”。2023/11/770梅毒螺旋體梅毒是一種幾乎可以侵犯全身所有器官,而產生多種癥狀和體征的慢性傳染性疾病。在STD中雖發病率不高,但危險性較大。蒼白螺旋體:是一種小而纖細,呈螺旋狀的微生物。煮沸,干燥,肥皂及一般消毒劑勻可將其殺滅。根據傳染途徑,可將梅毒分為獲得性梅毒(后天梅毒)和胎傳梅毒(失天梅毒);根據病情發展,可分為早期梅毒和晚期梅毒。
一般認為梅毒感染后1y內,包括梅毒潛伏、一期梅毒、二期梅毒統稱為早期梅毒。
2023/11/771臨床表現一期梅毒主要癥狀為硬下疳。通常在螺旋體侵入人體后10一90天,平均3周。二期梅毒系一期梅毒未治療或治療不規范,梅毒螺旋體由淋巴系統進入血液循環大量繁殖播散而出現的癥狀。梅毒疹可自行消退。三期梅毒:2一4年后,約1/3患者發生三期梅毒??汕址竷扰K,特別是心血管及中樞系統等重要器官,危及生命。主動脈瘤破裂常是患者猝死的主要原因2023/11/772實驗室1、暗視野顯微鏡檢查/DFA-TP/銀染色2、非梅毒螺旋體血清試驗(1)VDRL(性病研究實驗室試驗):需滅活(2)USR(不加熱的血清反應素試驗)
(3)RPR(加速血漿反應素環狀卡片試驗)3、梅毒螺旋體血清試驗(1)TPHA(梅毒螺旋體血凝試驗)1966年(2)FT---ABS(熒光螺旋體抗體吸收試驗)1963年4、腦脊液檢查:對神經梅毒的診斷,治療及預后有幫助。5.PCR檢測梅毒螺旋體2023/11/773病例7患者,女性,30歲,因”乏力,納差,腹脹,尿黃1個多月”入院.患者于1個多月前無明顯誘因下開始反復乏力,納差,腹脹,尿黃,當時無畏寒,發熱,無腹痛腹瀉,無惡心嘔吐,無反酸噯氣.既往史:3年前因上消化道出血曾入住本院,輸血及血漿1000ML,入院查體:T36.8C,P76次/分,R20/分,BP110/80MMHG.神志清楚,精神差,臉色黃,鞏膜輕度黃染,蜘蛛痣(+),心肺未見異常,肝肋下2厘米,有觸及痛,脾肋下未觸及.輔助檢查:RBC4.56x1012/L,HB110g/L,WBC8x109/L.尿常規:BIL(+),URO(+),余正常.大便常規正常.
肝功能:血ALT182U/L,AST102U/L,
2023/11/774診斷思路1、主訴癥狀:近期出現的無其他原因可解釋的乏力,納差,腹脹,尿黃1月余。----懷疑尿黃是黃疸引起。做尿常規確診。無畏寒,發熱,無腹痛腹瀉,無惡心嘔吐,無反酸噯氣----排除消化道疾病。2、體格檢查。異常體征:A.肝腫大,伴有觸痛或叩痛。
B.臉色黃,鞏膜黃染。----有黃疸癥狀,懷疑肝炎。3、流行病學:是否曾接受過血及血制品或曾有其他醫源性感染,生活中的密切接觸,尤其是性接觸。----3年前曾接受輸血,懷疑從輸血途徑感染乙肝病毒或丙肝病毒。4、懷疑患者病毒性肝炎,進行微生物學檢查:尿常規:BIL(+),URO(+);----確診黃疸。肝功能:ALT182U/L,AST102U/L---升高2023/11/775病毒學檢查:HBsAg(+),HBeAg(+),抗HBs(-),抗HBe(-),HBVDNA(+).抗HCV(+),RNA定量為3×107綜上推斷患者感染類型為:慢性乙型病毒性肝炎合并丙型病毒性肝炎抗原抗體系統:
HBsAg與抗-HBs;HBeAg與抗-HBeHBc(HBcAg)與抗HBcAgELISA核酸檢測2023/11/776virusload–NAamplification不同臨床樣本的檢驗程序血液樣本細菌學檢驗、真菌學檢驗、病毒學檢驗腦脊液細菌真菌學檢驗體液樣本檢驗尿液樣本檢驗呼吸道樣本細菌學檢驗、真菌學檢驗胃腸道樣本檢驗生殖道樣本細菌學檢驗、病毒學檢驗皮膚軟組織樣本檢驗2023/11/778血液樣本細菌學檢驗2023/11/779血液樣本真菌學檢驗2023/11/780血液樣本病毒學檢驗2023/11/781腦脊液細菌真菌檢驗2023/11/782體液檢驗2023/11/783尿液檢驗2023/11/784呼吸道細菌學檢驗2023/11/785呼吸道真菌學檢驗2023/11/786胃腸道樣本檢驗2023/11/787生殖道樣本細菌學檢驗2023/11/788生殖道樣本病毒學檢驗2023/11/789皮膚軟組織樣本檢驗2023/11/790四、藥敏試驗1、指導醫生及有關專業人員合理用藥2、指導藥物學家研究開發新藥類型抗菌模式作用靶位作用機制Ⅰ抑菌(bacteriostatic)細胞質可逆性抑制:1)
轉錄2)
翻譯3)細胞代謝Ⅱ殺菌(bactericidal)染色體不可逆地阻遏基因復制Ⅲ溶菌(bacteriolytic)細胞壁使細胞溶解2023/11/791①可預測抗菌治療的效果,“敏感”治療可能有效;“耐藥”肯定失??;②指導醫生選擇使用抗生素,AST的結果為“耐藥”,即應更換藥物;③提供所選擇藥物的依據;④監測耐藥性,分析耐藥菌變遷,掌握耐藥菌感染病流行病學,控制和預防耐藥菌感染發生和流行。藥敏試驗意義2023/11/792抗菌藥物選擇A、B、C、U四組,A組為常規首選藥敏試驗藥物,B組為臨床使用主要抗菌藥:①對A組同類抗生素耐藥;②標本來源不同,如三代頭孢菌素使用于腦脊液中的腸桿菌;③多種細菌感染;④多部位感染;⑤感染流行的控制;⑤對A組抗生素過敏、耐受或無反應。C組藥物用于對A組藥物耐藥的流行菌株或對A組藥物過敏的病人和某些不常見細菌(如腸外分離的沙門菌屬或耐萬古霉素腸球菌)。U組僅用于尿道中分離的細菌。2023/11/793藥敏試驗方法:稀釋法瓊脂選擇法是將藥物混勻于瓊脂培養基中,配制含不同濃度藥物平板,使用多頭接種器接種細菌,經孵育后觀察細菌生長情況,以抑制細菌生長的瓊脂平板所含藥物濃度測得MIC。結果判斷將平板置于暗色、無反光表面上判斷試驗終點,以抑制細菌生長的藥物稀釋度為終點濃度(磺胺可見少許散在細菌生長)。試驗菌的結果報告可用MIC(μg/ml)或用敏感(S)、中介(I)和耐藥(R)報告。2023/11/794宏量稀釋法Minimalinhibitoryconcentration(MIC)Referencemethod.Addstandardinoculumtodilutionsofantibiotic.Incubateovernight.MICislowestconcentrationthatinhibitsgrowth(canalsobeperformedbyagardilution).Interpretation(SorR)isbasedonachievabledruglevels104cfu4210.50.250.120mg/ml2023/11/795微量稀釋法2023/11/796藥敏試驗方法:擴散法將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上,紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后不斷向紙片周圍擴散形成遞減的梯度濃度在紙片周圍抑菌濃度范圍內測試菌的生長被抑制,從而形成無菌生長的透明圈即為抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度,并與該藥對測試菌的MIC呈負相關關系。1.抗菌藥物紙片選擇直徑為6.35mm,吸水量為20μl的專用藥敏紙片用逐片加樣或浸泡方法使每片含藥量達規定所示。含藥紙片密封貯存2℃-8℃
且不超過1周。2.培養基水解酪蛋白(MH)培養基是兼性厭氧菌和需氧菌藥敏試驗標準培養基,4℃保存。2023/11/797(三)細菌接種用0.5麥氏比濁標準的菌液濃度,在瓊脂表面均勻涂片,在15min內接種完畢。將含藥紙片緊貼于瓊脂表面,35℃孵育18h后閱讀結果。(四)結果判斷和報告用精確度為1mm的游標卡尺量取抑菌圈直徑。根據CLSI標準,作出“敏感”,“耐藥”和“中介”的判斷。2023/11/7982023/11/7992023/11/7100藥敏試驗方法:E試驗E試條是一條5mm×50mm的無孔試劑載體,一面固定有預先制備的,濃度呈連續指數增長稀釋抗菌藥,另一面有讀數和判別的刻度。將E試條放在細菌接種過的瓊脂平板上孵育過夜,圍繞試條明顯可見橢圓形抑菌圈,圈的邊緣與試條交點的刻度濃度即為抗菌藥抑制細菌的特定濃度,又稱抑制濃度(IC),它與MIC呈高度相關。2023/11/7101藥敏試驗結果解釋“敏感”即表示測試菌可被測定藥物常規劑量給藥后在體內達到的血藥濃度所抑制;“耐藥”即表示測試菌不能被在體內感染部位可能達到的抗菌藥物濃度所抑制,臨床治療無效。“中介”者提示該細菌對常規用藥體液或組織中的藥物濃度的反應率低于敏感株,使用高于正常給藥量有療效。2023/11/7102聯合藥物敏感試驗目的在于:①治療混合性感染;②預防或推遲細菌抗生素耐藥性的發生;③聯合用藥可以減少劑量以避免達到毒性劑量;④聯合用藥比出現4種結果:①無關作用小,兩種藥物聯合作用的活性等于其單獨活性;②桔抗作用,兩種藥物聯合作用顯著低于單獨抗菌活性;③累加作用,兩種藥物聯合作用時的活性等于兩種單獨抗菌活性之和;④協同作用,兩種藥物聯合作用顯著大于其單獨作用的總和。2023/11/7103(二)聯合抑菌試驗棋盤稀釋法是常用的定量方法,首先分別測定擬聯合的抗菌
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