污灌區(qū)大白菜中有機提取物對小鼠肝、腎組織的氧化損傷作用

廢水灌溉會污染土壤和作物，積累污染物，并通過食物鏈進入人體，導(dǎo)致各種慢性疾病。目前,關(guān)于農(nóng)產(chǎn)品中重金屬、農(nóng)藥污染的研究較多,而對農(nóng)產(chǎn)品中其他有機物污染的研究相對較少。筆者以某污灌區(qū)大白菜有機提取物為研究對象,對小鼠進行染毒,以其肝、腎組織的總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量為觀察指標(biāo),探討污灌蔬菜中有機污染物的聯(lián)合毒性,以期為修訂和完善土壤、農(nóng)產(chǎn)品的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)提供毒理學(xué)依據(jù)。1材料和方法1.1濃縮器KQ-500VDB型超聲振蕩器(昆山超聲儀器廠),K-D型濃縮器(安譜科學(xué)儀器公司)。T-SOD活力、GSH-PX活力、MDA含量試劑盒購于南京建成生物工程研究所。丙酮、石油醚、環(huán)己烷、硅膠、無水硫酸鈉均為分析純,購自天津化學(xué)試劑廠。1.2樣品的采集和處理1.2.1灌溉農(nóng)田水質(zhì)于2007年5月,選取某污灌農(nóng)田生長的大白菜為研究對象(以下簡稱“污灌區(qū)”),灌溉水質(zhì)為劣Ⅴ類。選取遠離污灌區(qū)、采用地下水(水質(zhì)符合GB5749—2006《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》)灌溉農(nóng)田生長的大白菜為對照(以下簡稱“對照區(qū)”)。所有蔬菜樣品均采用梅花形布點采集,采樣量為5～10kg。1.2.2提取有機物樣品的前處理、提取、凈化參照文獻的方法進行。1.3小鼠的染毒實驗選擇健康清潔級昆明小鼠40只,體重為18～24g,雌雄各半,由華北煤炭醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供,動物合格證號為:SCXK(豫)2005-0001。將小鼠按體重隨機分為5組,分別為溶劑對照組(二甲亞砜)、對照區(qū)低劑量組、對照區(qū)高劑量組、污灌區(qū)低劑量組、污灌區(qū)高劑量組。高、低劑量組染毒劑量(以白菜干重計)分別為60、10g/(kg·d)。采用灌胃方式進行染毒,每日1次,灌胃容量為5ml/kg,連續(xù)染毒2周。染毒期間,動物可自由進食(實驗動物中心配制的標(biāo)準(zhǔn)飼料)和飲水(自來水),室溫為18～22℃,相對濕度為45%～60%。1.4小鼠肝、腎組織t-sod、gsh-px活力和mda含量測定于第15天稱重、處死小鼠,在冰浴中迅速分離小鼠的肝、腎組織,測定T-SOD、GSH-Px活力和MDA含量。嚴(yán)格按照試劑盒說明書的方法進行測定。1.5統(tǒng)計方法采用SAS8.2軟件包進行統(tǒng)計分析,多組間比較采用單因素方差分析(OneWayANOVA),組間兩兩比較采用SNK檢驗。2結(jié)果2.1不同采樣區(qū)域內(nèi)的白菜有機提取物污染對大鼠體重的影響表1可見,各組小鼠染毒前后的體重變化間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。2.2da含量和高劑量對肝組織t-sod活力的影響表2可見,與溶劑對照組比較,污灌區(qū)高、低劑量組肝組織中MDA含量和高劑量組肝組織中T-SOD活力均降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。而各組肝組織中GSH-Px活力間比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。2.3腎組織t-sod活力表3可見,與溶劑對照組比較,污灌區(qū)高劑量組腎組織中MDA含量和污灌區(qū)高、低劑量組腎組織中T-SOD活力均降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與對照區(qū)高劑量組比較,污灌區(qū)高劑量組腎組織中MDA含量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。而各組腎組織中GSH-Px活力間比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。3不同劑量污程序?qū)π∈蟾巍⒛I組織抗氧化酶系統(tǒng)的影響有機污染物數(shù)量眾多,僅在水中被發(fā)現(xiàn)的合成有機物就有1200種以上,且隨著工業(yè)的發(fā)展而增加。故針對每一種污染物都制訂標(biāo)準(zhǔn)是很難做到的,因此,選用適宜的毒理學(xué)試驗反映各種污染物聯(lián)合作用的毒性、預(yù)測污染物的遠期危害是比較切實可行的。T-SOD、GSH-Px是機體抗氧化系統(tǒng)中重要的酶類,在維持自由基代謝平衡方面發(fā)揮著重要作用。丙二醛是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物,其含量的變化可作為評定自由基生成及膜脂質(zhì)雙層機構(gòu)破壞的指標(biāo)。有機污染物進入動物體內(nèi)可產(chǎn)生毒性,肝臟是重要的解毒器官,腎臟是主要的排毒器官。本次研究結(jié)果顯示,與溶劑對照組比較,污灌區(qū)高、低劑量組肝組織中MDA含量和高劑量組肝組織中T-SOD活力均降低,污灌區(qū)高劑量組腎組織中MDA含量和污灌區(qū)高、低劑量組腎組織中T-SOD活力均降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與對照區(qū)高劑量組比較,污灌區(qū)高劑量組腎組織中MDA含量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而各組肝、腎組織中GSH-Px活力間比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。表明污灌區(qū)白菜有機提取物對小鼠肝、腎組織可產(chǎn)生氧化損傷作用。這可能是由于白菜中的有機污染物作為外源性化合物,抑制了體內(nèi)抗氧化酶活力、消耗了抗氧化物質(zhì),致使自由