2023/10/3霍亂實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

檢驗(yàn)科2023/10/3霍亂病原菌發(fā)現(xiàn)1883年德國科學(xué)家Koch發(fā)現(xiàn)霍亂弧菌1905年埃及埃兒托檢疫站首次分離到ElTor弧菌，與霍亂弧菌甚為相似，但經(jīng)過多年的觀察并不致病或僅引起輕度腹瀉，直到1937-1958年發(fā)生4次爆發(fā)后才逐漸認(rèn)識(shí)到ElTor弧菌致病性1992年10月印度馬德拉斯發(fā)現(xiàn)了新菌型O139霍亂弧菌2023/10/3一、霍亂概述霍亂是由01群和0139群霍亂弧菌（V．cholerae）引起的急性腸道傳染病，發(fā)病急、傳播速度快、波及范圍廣、危害嚴(yán)重的甲類傳染病。是國內(nèi)交通檢疫傳染病之一。也是當(dāng)今三種國際檢疫傳染病中最嚴(yán)重的一種。2023/10/3二、霍亂病原學(xué)霍亂的病原學(xué)分類霍亂的病原學(xué)特征2023/10/3霍亂弧菌抗原結(jié)構(gòu)及分類抗原結(jié)構(gòu)霍亂弧菌有耐熱的菌體（O）抗原和不耐熱的鞭毛（H）抗原。H抗原為霍亂弧菌屬所共有；O抗原有群特異性和型特異性兩種抗原，是霍亂弧菌分群和分型的基礎(chǔ)。WHO腹瀉控制中心將霍亂弧菌分為三群。一、01群霍亂弧菌：包括古典生物型霍亂弧菌（vibriocholerde）和埃爾托生物型（vibriocholerdeEL-Torbiotype）。01群的特異抗原有A、B、C三種，其中A抗原為01群所共有，A抗原與其他B與C抗原結(jié)合則可分為三型，即：原型——AC（稻葉，Inaba）、異型——AB（小川，Ogawa）和中間型——ABC（彥島，Hikojima）。2023/10/3二、非01群霍亂弧菌：本群弧菌鞭毛抗原與01群相同，而菌體（0）抗原則不同，不被01群霍亂弧菌多價(jià)血清所凝集，依O抗原之異，本群可分為137個(gè)血清型。以往認(rèn)為本群僅引起散發(fā)的胃腸炎性腹瀉，一般此類弧菌感染不作霍亂處理，但1992年在印度及孟加拉等地發(fā)生霍亂暴發(fā)流行，后證實(shí)流行菌不被01群和137個(gè)非01群霍亂弧菌診斷血清所凝集。乃定為0139霍亂弧菌，并認(rèn)定為真正的霍亂弧菌。三、不典型01群霍亂弧菌：可被多價(jià)01群血清所凝集，但該群菌不產(chǎn)生腸毒素，因此無致病性2023/10/3霍亂病原學(xué)特點(diǎn)形態(tài)與染色弧狀或逗點(diǎn)狀革蘭染色陰性有一根單鞭毛，細(xì)菌運(yùn)動(dòng)非常活潑，呈魚群穿梭樣或流星狀2023/10/3革蘭染色2023/10/3電鏡負(fù)染色—鞭毛2023/10/3霍亂弧菌動(dòng)力視頻鏈接/v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html2023/10/3三、霍亂弧菌常規(guī)檢驗(yàn)樣本采集、送檢和保存標(biāo)本的檢驗(yàn)流程2023/10/3樣本采集、送檢和保存

糞便：標(biāo)本的采集以病人糞便為主，水樣便采取1～3mL，亦可用棉拭或采便管由肛門插入直腸內(nèi)3～5cm處采取。急性期病人取水樣便標(biāo)本在增菌培養(yǎng)的同時(shí)可取其粘液絮片或用棉拭子直接接種于堿性瓊脂、TCBS瓊脂培養(yǎng)基。不能立即檢查的糞便標(biāo)本，要放入堿性蛋白胨水中。2023/10/3檢驗(yàn)流程接收到大便動(dòng)力弧菌培養(yǎng)標(biāo)本，請(qǐng)先建單。方法如下2023/10/31.左鍵單擊微生物檢驗(yàn)，進(jìn)入微生物檢驗(yàn)窗口。2023/10/3

2.單擊標(biāo)本號(hào)（左鍵、右鍵均可），會(huì)出現(xiàn)下拉框。單擊“其它”

2023/10/33.該標(biāo)本會(huì)由lis自動(dòng)生成編號(hào)，如1505970005。2023/10/3

4.編號(hào)由lis自動(dòng)生成后，根據(jù)病人實(shí)際信息，先選擇“患者類別”，然后輸入患者編號(hào)（門診號(hào)或住院號(hào)），項(xiàng)目類別自動(dòng)顯示為大便力霍亂弧培養(yǎng)。最后一步，點(diǎn)“建單”。2023/10/3建單完成后，如下圖2023/10/35.取糞便標(biāo)本在高倍鏡暗視野下看動(dòng)力，看完動(dòng)力后，在“初步動(dòng)力”欄錄入結(jié)果（陰性或陽性），并審核打印報(bào)告。同時(shí)糞便標(biāo)本轉(zhuǎn)種到堿性胨水中并放入35℃孵箱中培養(yǎng),在化驗(yàn)單上記錄轉(zhuǎn)種時(shí)間。2023/10/32023/10/36.增菌培養(yǎng)6-8小時(shí)后，需要取胨水生長物再次觀察動(dòng)力，進(jìn)行6-8小時(shí)動(dòng)力報(bào)告。并轉(zhuǎn)種到慶大霉素平板并放入35℃孵箱中培養(yǎng)。在進(jìn)行6-8小時(shí)動(dòng)力報(bào)告時(shí)，需要先取消之前的審核，在原報(bào)告單上進(jìn)行審核（1505970005）。2023/10/32023/10/3疑似菌落初步鑒定：7.慶大平板培養(yǎng)18-24h后挑取可疑菌落進(jìn)行動(dòng)力觀察，如動(dòng)力陰性，可進(jìn)行最終陰性報(bào)告，如下圖。2023/10/32023/10/3注意：1.動(dòng)力試驗(yàn)陰性，無需進(jìn)行血清制動(dòng)試驗(yàn)。2.任何一次動(dòng)力陽性，都需進(jìn)行血清制動(dòng)試驗(yàn)并在LIS上記錄和審核試驗(yàn)結(jié)果。3.當(dāng)動(dòng)力和血清制動(dòng)試驗(yàn)同為陽性時(shí)，為疑似霍亂弧菌感染，要立即通知開單科室和醫(yī)務(wù)處，對(duì)病人采取相應(yīng)的隔離治療等必要措施。2023/10/3血清制動(dòng)試驗(yàn)包括4瓶血清。第1瓶為O1群多價(jià)，第2、3瓶為小川、稻葉型單價(jià)。第4瓶為O139群抗血清。當(dāng)觀察到動(dòng)力陽性，首先進(jìn)行O1群多價(jià)的制動(dòng)試驗(yàn)。如為陰性，接著做O139群的制動(dòng)試驗(yàn)。兩者均陰性，可初步排除霍亂弧菌病感染。如O1多價(jià)制動(dòng)試驗(yàn)陽性，則進(jìn)一步進(jìn)行第2、3瓶的制動(dòng)試驗(yàn)，即進(jìn)行小川、稻葉型單價(jià)血清的制動(dòng)試驗(yàn)2023/10/3注意：門診在上午11：00之前收到的大便弧培標(biāo)本，需要將轉(zhuǎn)種好的胨水和患者化驗(yàn)單一起轉(zhuǎn)運(yùn)至微生物室，后續(xù)步驟由微生物室來完成：門診在上午11：00以后收到的標(biāo)本，需將轉(zhuǎn)種好的胨水和患者化驗(yàn)單一起放置門診35°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，門診拖班人員需跟當(dāng)晚住院部