丹參質(zhì)量標準的影響因素分析

丹參是嘴唇科植物的干燥根和根莖。具有消除淤血、促進血液循環(huán)、消除淤血、消除淤血等功效。主要治療冠狀動脈粥樣硬化、心絞痛、躁動、月經(jīng)不調(diào)、閉經(jīng)和痛經(jīng)等疾病。丹參中主要含有以丹參酮和隱丹參酮為主的脂溶性二萜類化合物和以丹酚酸類為主的水溶性多聚酚酸類化合物。其中丹參酮ⅡA磺酸鈉在治療心血管疾病方面有明顯療效;而丹酚酸B則常用于冠心病的治療,具有療效高、作用迅速和不良反應(yīng)少等優(yōu)點。1丹參的化學成分1.1丹酚酸b的激發(fā)丹參的水溶性有效成分中以丹酚酸B含量最高。丹酚酸B是由3分子丹參素與1分子咖啡酸縮合而成,其最大激發(fā)波長為394nm,在較高pH值下不穩(wěn)定。1.2提取液濃縮溫度脂溶性成分以丹參酮ⅡA為代表。此類化合物對光、熱和水敏感,易分解變質(zhì),因此,提取液及對照品應(yīng)在室溫下避光干燥保存,且盡快測定,濃縮時也應(yīng)控制溫度在60℃以下。2不同產(chǎn)地藥材的a、pb含量丹參分為野生和家種2種規(guī)格,野生藥材有效成分高于栽培品。野生丹參廣泛分布于我國華東、華北、中南地區(qū)以及西北、西南部分省份。不同產(chǎn)地及同一產(chǎn)地不同地區(qū)的丹參藥材中丹參酮ⅡA含量存在明顯差異(0.08%~0.67%)。栽培丹參主要集中在山東、四川、河南、河北、山西、陜西、湖北、安徽等省,其中川丹參和魯?shù)榱魍ㄖ械膬纱笃放啤；瘜W成分分析顯示,不同產(chǎn)地藥材的主要成分基本相同,但含量差異較大,其中山東、河南、山西產(chǎn)丹參的脂溶性成分的含量較高,河北、陜西、四川產(chǎn)丹參的水溶性成分的含量較高。另外,四川中江丹參的單株生物量,山西丹參的丹參酮ⅡA,四川中江丹參的隱丹參酮及總丹參酮,河北的高莖類型的丹參素,四倍體丹參的丹酚酸B及總丹酚酸的含量都在同類品中居首。3藥材最佳收獲期和季節(jié)姜衛(wèi)衛(wèi)等研究了丹參的最佳采收期:活性成分在9月11日處于最高或接近最高值,而藥材生物產(chǎn)量的最高值卻是10月11日,藥材的最佳收獲期為9月末。采收天氣宜選擇無雨、無曝日、無大風、無霜雪雹,較干燥時采挖。整個過程中忌用水洗或雨淋,丹參的有效成分在根皮部的含量約為木質(zhì)部的3倍,水洗或雨淋易使有效成分流失。4提取方法的影響4.1丹參素：a4.1.1影響丹參酮a及醇浸提取率的因素以乙醇為溶劑,用冷滲法進行提取,此法中乙醇的體積分數(shù)是影響丹參酮ⅡA及醇浸提取率的主要因素。韋敏等報道,最佳乙醇滲漉工藝為:藥材粉碎至綠豆粒大,用15倍量乙醇冷浸24h后,滲漉速度為3mL·min-1。4.1.2加熱回族提取法用加熱回流的方法提取丹參酮ⅡA,提取的丹參酮ⅡA含量與滲漉法相比并無明顯差異。4.1.3濕式超微粉碎提取此法處理用于提取丹參酮ⅡA,但由于其后續(xù)工序濃縮、干燥采用高溫等,丹參酮ⅡA會受熱降解。4.1.4超聲萃取法李磊等考察了超聲波對丹參酮提取率的影響。結(jié)果表明,常溫下以CH2Cl2-CH3OH的混合液(2∶8)為提取劑,超聲波萃取30min可顯著提高丹參酮的提取率,其效果優(yōu)于熱浸、冷浸和用醇加熱回流提取。屈燚等應(yīng)用高速逆流色譜法(HSCCC),從丹參的乙醇粗提物中快速有效地分離得到以丹參酮ⅡA為代表的5個丹參酮類化合物,為制定丹參的質(zhì)量標準提供了依據(jù)。4.2丹酚酸b4.2.1醇沉回收工藝關(guān)聽等在丹參注射劑提取工藝研究中采用一次性體積分數(shù)60%醇沉,然后上大孔樹脂吸附代替以前的體積分數(shù)75%和85%2次醇沉工藝,使得丹參素提高了23.1%,總酚酸提高了19.7%。4.2.2兩種提取溶劑的提取率王鳳美等研究結(jié)果表明,丹參生藥中丹酚酸B的提取以體積分數(shù)70%甲醇為溶劑提取率最高,其次為體積分數(shù)70%乙醇。但幾種提取溶劑差異并不顯著,水的提取率為體積分數(shù)70%甲醇的95.06%。由于水作溶劑成本較低,又不會造成環(huán)境污染,所以丹酚酸B直接用水提取較好。4.2.3提取工藝的提取謝靜報道,丹參水溶性成分的最佳提取工藝為加6倍量的體積分數(shù)30%乙醇,提取3次,每次60min,以丹酚酸B為指標,該提取工藝的提取率可達89.08%。通過結(jié)合高效液相色譜法測定含量,該法可作為丹參及其制劑的質(zhì)量控制分析方法。4.2.4微波提取朱曉薇等以6倍量的乙醇,在微波功率為320W的條件下提取30min,藥渣再以12倍量水微波提取2次,效果較好。4.2.5提取法與回流提取法、超聲提取法比較李霞等研究了超臨界CO2流體對丹參中有效成分的萃取功效,并與回流提取和超聲波提取法進行比較,顯示超臨界法萃取的成分最多,有17種,而回流提取和超聲波提取法則分別有11和12種。5評估方法的影響5.1的含量決定了參藥人的土地形態(tài)分類系統(tǒng),這也是分大量分析研究表明,丹參所含化學成分中二萜醌成分(以丹參酮ⅡA為代表)與系統(tǒng)發(fā)育有密切關(guān)系。因此,二萜醌類化合物組成的不同可以作為種類鑒別的依據(jù)。根據(jù)二萜醌成分含量的多少,一方面用作丹參的藥用植物親緣關(guān)系的劃分,校正植物形態(tài)分類系統(tǒng);另一方面也可以在生長周期上對丹參進行動態(tài)地監(jiān)控,制定合理的質(zhì)量標準。5.2參味材料的鑒定林佳等采用薄層色譜法比較后指出:在GF254薄層板上,以石油醚-醋酸乙酯(10∶1)為展開劑,展開2次,丹參的主要成分在野生品和栽培品中均能呈現(xiàn),以此可以作為識別丹參藥材真?zhèn)蔚膮⒖家罁?jù)。在此經(jīng)典方法中,展開劑的選取及結(jié)果的觀察時間尤為重要,應(yīng)加以規(guī)范。5.3紫外吸收光譜的識別丹參在253和270nm處有吸收特征峰,可以用于鑒別。5.4紫外導(dǎo)數(shù)光譜的識別李海鷹等研究表明,丹參與番薯根的石油醚、甲醇及氯仿提取物的零階和二階導(dǎo)數(shù)光譜均可用于二者的鑒別。5.5hplc法的識別李磊等運用HPLC技術(shù),發(fā)現(xiàn)在290~300nm波長的指紋圖譜能反映較多的指標成分信息量,可以對丹參的道地性進行評定。6量法的影響6.1高效液相色譜法6.1.1丹參素：a色譜條件多為中國藥典所規(guī)定:流動相為甲醇-水、乙腈-水或甲醇-乙腈-水等系統(tǒng);樣品多用甲醇、乙醇及乙醚等提取。6.1.2流動相及熒光檢測波長王鳳美等建立了用高效液相色譜-熒光檢測法測定丹酚酸B含量的方法:以甲醇-5mL·L-1冰醋酸水溶液為流動相,流速為1.0mL·min-1;熒光檢測波長λex為338nm,λem為443nm。此法加樣回收率為98.6%~108%,最低檢測限為0.013mg·L-1。6.2掃描法丹參酮ⅡA含量的薄層掃描法測定,一般為雙波長掃描法,展開系統(tǒng)多為苯-醋酸乙酯系統(tǒng)。6.3內(nèi)標物的測定李翔等用毛細管電泳法測定丹酚酸B的含量。此法用肉桂酸的甲醇-水溶液為內(nèi)標物測定丹酚酸B的含量。其結(jié)果質(zhì)量濃度在12~195mg·L-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,平均加樣回收率為96.2%,RSD為1.8%,最低檢測限為3.0mg·L-1。7制訂嚴格的質(zhì)量標準中藥是中國醫(yī)藥學的瑰寶,為中華民族的健康和生存繁衍做出