齒瓣石斛美容美容美容美容研究

慈姑是蘭科植物，也被稱為紫皮石斛、紫皮蘭、小黃草和蘭花。其性味甘、淡、微寒，具有養胃生津、滋陰除熱功效，主要用于熱病傷津、口干煩渴、病后虛弱、食欲不振、滋陰養顏等1材料和機器1.1試劑和試劑盒齒瓣石斛莖、花(購于云南省保山市龍陵天和土特產商貿發展有限公司，經保山中醫藥高等專科學校中藥教研室楊發建老師鑒定為蘭科石斛屬植物齒瓣石斛的莖、花);馬齒莧提取液(廣州百宇生物科技有限公司);羧甲基殼聚糖(尚品源精細化工有限公司);高分子透明質酸鈉、低分子透明質酸鈉(上海同頂實業有限公司);面膜紙(佛山艾詩蘭化妝品有限公司);變色硅膠(青島市鼎康硅膠有限公司);無水乙醇、甲醇均為分析純，購于天津市風船化學試劑科技有限公司;超氧陰離子試劑盒、羥自由基清除能力試劑盒、DPPH清除能力試劑盒(購于蘇州格銳思生物科技有限公司，批號:G20200908HH);硫酸銨、碳酸鉀、左旋多巴、曲酸、磷酸氫二鈉、一水合檸檬酸均為分析純，購于上海易恩化學技術有限公司;酪氨酸酶(購于酷爾化學科技(北京)有限公司，批號:E97934K)。1.2實驗儀器YF-150高速中藥粉碎機(浙江省瑞安市永歷制藥機械有限公司);IKARV10數顯型旋轉蒸發儀(德國IKA集團);SQP型電子天平(賽多利斯科學儀器(北京)有限公司);SHA-2冷凍水浴恒溫振蕩器(金壇市盛威實驗儀器廠);SB-800DTD超聲清洗儀(寧波新藝超聲設備有限公司;78-1磁力加熱攪拌器(常州丹瑞實驗儀器設備有限公司);BCD-165LTMPJ冰箱(青島海爾股份有限公司);DHP-9032電熱恒溫培養箱(上海一恒科學儀器有限公司);1524臺式高速離心機(丹麥Labogene公司);UV-1800紫外可見分光光度計(上海美普達儀器有限公司)。2方法2.1取石斛、花和溶液2.1.1提取液濃縮濃縮取干燥的齒瓣石斛莖適量，于60℃下烘干至恒重，粉碎過60目篩(0.25mm)，稱取100.00g粉末，用水提取，料液質量比為1∶25,100℃下回流提取2次，每次1h，提取液經減壓抽濾后，進行減壓濃縮。濃縮液用無水乙醇沉淀，使乙醇的最低質量分數達80%，于4℃下靜置24h，抽濾，將濾液減壓濃縮，回收乙醇，并濃縮至(生藥)0.05g/mL。2.1.2取石斛花的齒瓣提取方法同2.1，濃縮至(生藥)0.05g/mL。2.1.3羧甲基聚糖溶液的制備稱取適量的羧甲基殼聚糖，用去離子水配制成0.25g/mL，于4℃保存備用。2.1.4透明質酸鈉溶液配制分別稱取適量的高分子及低分子透明質酸鈉，用去離子水分別配制成1.00g/mL，然后以高分子與低分子透明質酸鈉溶液的體積比為1∶1混合，充分混勻，并于4℃保存備用。2.2齒瓣石斛耳液的制備和組成的優化設計2.2.1配方優化實驗結果齒瓣石斛面膜液嚴格遵循天然綠色的特性，配方均為無毒天然輔料，不添加有害的化學物質。其主要原料為齒瓣石斛莖、花的提取液，輔料為天然的防腐劑羧甲基殼聚糖、抗敏劑馬齒莧提取液、促吸收劑及增稠劑透明質酸鈉，以色澤、氣味及膚感作為感官評分指標，通過正交實驗極差分析確定各組分的用量，得到齒瓣石斛面膜液最優配方。以10mL總量進行配制，各組分按一定比例進行配制，用去離子水定容至10mL，各組分用量的正交實驗因素水平表L16(45)，見表1。2.2.2感官評分標準齒瓣石斛面膜液評審人員為20名女性在校學生，年齡為20±1歲。評審人應經過一定化妝品感官評價相關知識的培訓，評審項目以QB/T2872-2017《面膜》為參考，主要從外觀、香氣及膚感3個方面進行評審，各個實驗號感官評分的平均值為最終得分，具體評分標準，見表2。2.3齒瓣石斛莖提取液及羧甲基殼聚糖溶液配制齒瓣石斛面膜制備工藝流程如下:(1)面膜液配制流程:透明質酸鈉溶液→齒瓣石斛莖提取液→齒瓣石斛花提取液→馬齒莧提取液→羧甲基殼聚糖溶液→去離子水→混勻。(2)面膜貼制備:2.4影響面部的效果2.4.1保濕率的測定從包裝袋中取出面膜貼，折疊成6cm×6cm正方形，平鋪于直徑為12cm培養皿中，分別置于20℃下的變色硅膠、飽和碳酸鉀(相對濕度43%)、硫酸銨溶液(相對濕度81%)干燥器中，記錄0、4、8、12、24h的質量，各個時間點的平行操作3次，取平均質量，計算保濕率。保濕率=M式中，M2.4.2抗逆反應2.4.2.對超氧陰離子的清除率和平均清除率的測定取齒瓣石斛面膜液10.00mL，采用倍半稀釋法，用去離子水配制50%、25%、12.5%、6.25%及3.125%溶液，嚴格按照超氧陰離子試劑盒的要求進行操作，測定100%、50%、25%、12.5%、6.25%及3.125%溶液的吸光度，各個質量分數平行操作3次，取平均值，計算超氧陰離子的清除率及半數清除率(halfeliminationratio,IC2.4.2.對dpph的清除作用濃度梯度按照2.3.2.1的方法配制，嚴格按照DPPH清除能力試劑盒的要求進行操作，測定100%、50%、25%、12.5%、6.25%及3.125%溶液的吸光度，各個濃度平行操作3次，取平均值，計算DPPH的清除率及IC2.4.2.對羥自由基的清除率及ic濃度梯度按照2.3.2.1的方法配制，嚴格按照羥自由基清除能力試劑盒的要求進行操作，測定100%、50%、25%、12.5%、6.25%及3.125%溶液的吸光度，各個濃度平行操作3次，取平均值，計算羥自由基的清除率及IC2.4.3酪氨酸酶活性的測定濃度梯度按照2.3.2.1的方法配制，按照T/SHRH015-2018《化妝品-酪氨酸酶活性抑制實驗方法》中的方法，測定100%、50%、25%、12.5%、6.25%及3.125%溶液的吸光度，各個濃度平行操作3次，取平均值，計算酪氨酸酶活性抑制率及IC2.5皮膚健康完整邀請自愿的在校女大學30名，年齡在19～21歲，要求前臂屈側皮膚健康完整。實驗前，要求用清水洗凈受試部位，輕輕擦干，取1滴面膜液，均勻涂于此部位直徑約3cm,15min后用溫水洗凈，于使用后1、4、8、24、48h觀察皮膚反應。2.6感官、物理和衛生指標的檢測2.6.1感覺實驗按照QB/T2872-2017《面膜》的要求進行檢測。取出面膜貼，于室溫及非陽光照射下觀察外觀，并用嗅覺鑒別氣味。2.6.2h值的檢測按照GB/T13531.1-2008《化妝品通用檢驗方法pH值的測定》的要求進行檢測。取適量齒瓣石斛面膜液，倒入燒杯中，按照pH儀的操作說明測定pH值，其中pH值為兩次測量的平均值。2.6.3嚴格按照qb和t872-2017的要求進行耐寒和耐寒試驗2.6.3.面膜袋內部機構觀察取面膜貼2袋，將其中一袋置于(40±1)℃的恒溫培養箱內，24h后取出并放至室溫，剪開面膜袋與另一袋目測比較實驗前、后是否有明顯差異。2.6.3.2.耐寒試驗取面膜貼2袋，將其中一袋置于(-8±2)℃的冰箱內，24h后取出并放至室溫，剪開面膜袋與另一袋目測比較實驗前、后是否有明顯差異。2.6.4檢測指標及方法按照QB/T2872-2017《面膜》檢測指標及《化妝品安全技術規范》中的規定方法進行檢測。具體微生物、有害物質的指標限值，見表3、表4。3結果3.1正交試驗和齒瓣石斛的結果通過正交試驗L3.2齒瓣石斛表面的治療效果3.2.1面膜在24h內的保濕率實驗顯示，齒瓣石斛面膜的保濕率會隨著時間延長而降低，但在不同濕度下，保濕率下降的快慢不同。由圖1、圖2、圖3可見，在濕度81%下，面膜在24h內的保濕率始終保持在90%以上，最低值為95.47%，且保濕率曲線下降的慢;在濕度43%下，面膜在24h內保濕率在80%以上，最低值為87.72%，且保濕率曲線下降的快;在干燥劑變色硅膠下，面膜在24h內保濕率在70%以上，最低值為79.37%，且保濕率曲線下降的比較快。由此可知，當溫度一定，濕度越大，保濕率下降的越慢，保濕效果越好。3.2.2羥自由基清除率由圖4、圖5、圖6可知，隨著齒瓣石斛面膜液質量分數的增加，對超氧陰離子、DPPH及羥自由基清除率也增加，并呈量效關系。質量分數在25%以后，對羥自由基的清除率增加不明顯;質量分數在50%以后，對超氧陰離子、DPPH清除率增加不明顯。經計算，面膜液對超氧陰離子、DPPH及羥自由基的IC3.2.3酪氨酸酶的抑制率由圖7可見，隨著齒瓣石斛面膜液質量分數的增加，對酪氨酸酶抑制率也增加，并呈量效關系，當質量分數為100%時，抑制率可達42.17%。經計算，齒瓣石斛面膜液對酪氨酸酶的IC3.3皮膚健康完整實驗顯示，30名自愿者的前臂屈側皮膚健康完整，與使用前無明顯區別。未發現發紅、紅斑、丘疹、水腫、瘙癢、灼痛等現象，說明齒瓣石斛面膜貼無刺激性。3.4感官、理化及衛生指標檢測實驗根據QB/T2872-2017《面膜》及GB/T13531.1-2008《化妝品通用檢驗方法pH值的測定》的要求，對其感官、理化及衛生指標進行檢測，具體檢測結果，見表6。4齒瓣石斛面膜保濕性能檢測齒瓣石斛面膜液遵循綠色、無毒的研制原則，以齒瓣石斛莖、花提取液為主要原料，添加的輔料均為天然無毒化學物質。本文通過正交實驗方法，并對其色澤、氣味及膚感進行感官評分，利用極差分析法得到齒瓣石斛面膜液最優配方用量為齒瓣石斛莖提取液4%，齒瓣石斛花提取液2.8%，羧甲基殼聚糖溶液12%，馬齒莧提取液2.5%，透明質酸鈉溶液