理學(xué)小學(xué)期藥理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本知識(shí)及基本操作實(shí)驗(yàn)方法第1頁(yè)/共63頁(yè)本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第2頁(yè)/共63頁(yè)尼可剎米對(duì)兔呼吸興奮作用實(shí)驗(yàn)一

利尿藥、脫水藥的利尿作用的觀察實(shí)驗(yàn)二觀察

實(shí)驗(yàn)三組胺與抗組胺藥對(duì)離體腸肌和離體子宮作用的觀察目的：第3頁(yè)/共63頁(yè)1.驗(yàn)證所學(xué)理論，加深對(duì)理論知識(shí)的理解，鞏固獸醫(yī)藥理學(xué)的知識(shí)。2.通過(guò)實(shí)驗(yàn)掌握有關(guān)獸醫(yī)藥理學(xué)的技術(shù)和方法，培養(yǎng)學(xué)生客觀地對(duì)生命進(jìn)行觀察、比較和綜合分析能力以及創(chuàng)新思維和創(chuàng)新能力。獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法第4頁(yè)/共63頁(yè)獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的方法一般根據(jù)動(dòng)物的組織器官是在整體條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，還是將其解剖取下，置于人工環(huán)境條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可分為在體實(shí)驗(yàn)方法和離體實(shí)驗(yàn)方法。1.離體實(shí)驗(yàn)方法離體實(shí)驗(yàn)是根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?duì)象的需要，將所需的動(dòng)物器官或組織按照一定的程序從動(dòng)物機(jī)體上分離下來(lái)，置于人工環(huán)境中，設(shè)法在短時(shí)間內(nèi)保持它的生理機(jī)能而進(jìn)行研究的一種方法。生物放大器導(dǎo)線第5頁(yè)/共63頁(yè)處研研位位動(dòng)動(dòng)實(shí)實(shí)活。。2.在體實(shí)驗(yàn)方法

在體實(shí)驗(yàn)是在動(dòng)物于整體條件下，保持欲究的器官于正常的解剖置或從體內(nèi)除去，研究物或某器官生理機(jī)能的驗(yàn)方法。在體實(shí)驗(yàn)又可分為體解剖實(shí)驗(yàn)和慢性第6實(shí)頁(yè)/共驗(yàn)63頁(yè)獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求第7頁(yè)/共63頁(yè)實(shí)驗(yàn)前

預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容并復(fù)習(xí)相關(guān)理論知識(shí)；實(shí)驗(yàn)時(shí)遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則。實(shí)驗(yàn)桌上不要放置與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品，嚴(yán)禁實(shí)驗(yàn)過(guò)程中 進(jìn)食、飲水和嚼口香糖，杜絕危及安全和健康的隱患。愛(ài)惜實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，使其保持良好的興奮性；節(jié)約藥品、水、電。操作前注意傾聽(tīng)教師講解的實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)和操作要領(lǐng)，按程序正確操作儀器、 手術(shù)器械，按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。認(rèn)真觀察和記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并加上必要的標(biāo)記、文字說(shuō)明；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還 要思考出現(xiàn)了什么樣的結(jié)果，為什么會(huì)有這些結(jié)果，有什么意義。若出 現(xiàn)非可預(yù)期結(jié)果，還應(yīng)分析其原因，盡可能地及時(shí)解決。試驗(yàn)中要有耐心，必須等前一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)基本恢復(fù)正常后，才能進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí) 驗(yàn)，注意觀察實(shí)驗(yàn)的全過(guò)程。獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求第8頁(yè)/共63頁(yè)實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)完成后要及時(shí)關(guān)閉儀器和設(shè)備的電源；按規(guī)定整理實(shí)驗(yàn)器具，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在指定地點(diǎn)；做好桌面和教室的清潔衛(wèi)生；離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前要洗手。及時(shí)整理實(shí)驗(yàn)記錄，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，按時(shí)交老師批閱。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)第9頁(yè)/共63頁(yè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目目的原理材料：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，器材，藥品方法：用自己的語(yǔ)言簡(jiǎn)單扼要描述出來(lái)；結(jié)果：要求真實(shí)、清楚；

討論：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較、分析；實(shí)驗(yàn)中有哪些不足之處；結(jié)果異常或失敗的原因；結(jié)論：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行歸納總結(jié)，應(yīng)帶有提示性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本知識(shí)及基本操作、實(shí)驗(yàn)方法第10頁(yè)/共63頁(yè)—熟練的操作技術(shù)是實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室一、 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（experimental

animal）第11頁(yè)/共63頁(yè)婚墊雄蟾（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)蟾蜍（Toad）蟾蜍屬兩棲動(dòng)物，其一些基本生命活動(dòng)與哺乳動(dòng)物近似，其離體組織和器官所需的生理環(huán)境比較簡(jiǎn)單(無(wú)須供氧和恒溫)。蟾蜍常用于神經(jīng)生理、肌肉生理、心臟生理，微循環(huán)、水腫等實(shí)驗(yàn)。雄蟾第12頁(yè)/共63頁(yè)雌蟾（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)第13頁(yè)/共63頁(yè)小鼠（Mouse

)小鼠被廣泛的用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)大鼠（Rat

）大鼠應(yīng)用于生理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)，內(nèi)分泌學(xué)、神經(jīng)生理、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。第14頁(yè)/共63頁(yè)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)豚鼠（Guinea

pig

)常用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、傳染病學(xué)、聽(tīng)覺(jué)生理、實(shí)驗(yàn)性壞血癥等研究。第15頁(yè)/共63頁(yè)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)家兔(Rabbit

)常用于免疫學(xué)、腫瘤、實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、生殖生理、藥理學(xué)、遺傳性疾病等的方面的研究，制造生物制品。第16頁(yè)/共63頁(yè)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)貓（Cat）貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達(dá)，與人很相似。常用于神經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實(shí)驗(yàn)。第17頁(yè)/共63頁(yè)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)犬(Dog)常用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、藥理、毒理學(xué)、實(shí)驗(yàn)外科學(xué)、行為學(xué)、腫瘤學(xué)等方面研究第18頁(yè)/共63頁(yè)在以犬為實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物的研究成果中，只有應(yīng)用Beagle才能被國(guó)際公認(rèn)。（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)豬(Pig)常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、心血管及糖尿病、遺傳性和營(yíng)養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究第19頁(yè)/共63頁(yè)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)猴(Monkey)主要用于傳染病學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)、生殖生理、口腔醫(yī)學(xué)）營(yíng)養(yǎng)、代謝、行為學(xué)和高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)分泌病和畸胎學(xué)、腫瘤學(xué)第20頁(yè)/共63頁(yè)????第21頁(yè)/共63頁(yè)二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本操作蟾蜍（一）動(dòng)物的捉拿、固定A第22頁(yè)/共63頁(yè)B圖1青蛙(或蟾蜍)捉拿法圖2青蛙(或蟾蜍)固定法小鼠（一）動(dòng)物的捉拿、固定圖3第23頁(yè)/共63頁(yè)小白鼠的捉拿法大鼠、豚鼠家兔（一）動(dòng)物的捉拿、固定圖5 兔捉拿方法AB圖4大鼠和豚鼠的捉拿和固定第24頁(yè)/共63頁(yè)蟾蜍小白鼠家兔（二）動(dòng)物性別的辨別雄第25頁(yè)/共63頁(yè)雌圖6 小鼠性別的特征染色法掛牌法（三）動(dòng)物的編號(hào)213456789102030407050806090第26頁(yè)/共63頁(yè)圖7 小鼠背部的編號(hào)方法（四）常用給藥方法經(jīng)消化道給藥法·自動(dòng)攝取法·喂藥法·灌胃給藥法·經(jīng)直腸給藥圖8 小鼠灌胃法胃管開(kāi)口器圖9 兔灌胃方法第27頁(yè)/共63頁(yè)（四）常用給藥方法注射給藥法·皮下注射·腹腔注射圖10 小鼠腹腔注射方法第28頁(yè)/共63頁(yè)（四）常用給藥方法·肌肉注射·靜脈注射8.5cm注射給藥法3.5cm

1cm圖11 小鼠尾靜脈注射法第29頁(yè)/共63頁(yè)圖12兔耳緣靜脈注射法（四）常用給藥方法第30頁(yè)/共63頁(yè)涂布給藥法·藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏·作用時(shí)間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定（五）動(dòng)物被毛的去除法第31頁(yè)/共63頁(yè)拔毛法剪毛法剃毛法脫毛法三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第32頁(yè)/共63頁(yè)·氨基甲酸乙酯（烏拉坦）·氯醛糖·巴比妥類(lèi)·乙醚·局部麻醉藥三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第33頁(yè)/共63頁(yè)常用麻醉方法·全身麻醉吸入麻醉注射麻醉·局部麻醉三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第34頁(yè)/共63頁(yè)麻醉操作要求·麻醉的基本原則·補(bǔ)充麻醉·麻醉注意事項(xiàng)四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)第35頁(yè)/共63頁(yè)術(shù)前準(zhǔn)備··手術(shù)器械與使用1.手術(shù)刀執(zhí)刀姿勢(shì)視切口大小、位置等不同而有指壓式（又稱(chēng)琴弓式或執(zhí)弓式）、捉刀式（或稱(chēng)抓持式）、執(zhí)筆式及反挑式（外向執(zhí)筆式）等持法，見(jiàn)圖6中a-d。指壓式為最常用的一種執(zhí)刀方法，發(fā)揮腕和手指的力量，多用于腹部皮膚切開(kāi)及切斷鉗夾的組織。抓持式用于切割范圍較廣、用力較大的堅(jiān)硬組織，如筋腱、壞死組織、慢性增生組織

等，力量在手腕。執(zhí)筆式用以切割短小切口，用力輕柔而操作精細(xì)，如分離血管和神

經(jīng)以及切開(kāi)腹膜小口等，動(dòng)作和力量主要在手指。反挑式的手法是刀刃由內(nèi)向外挑開(kāi)，以避免深部組織或器官損傷，如腹膜切開(kāi)或挑開(kāi)狹窄的腱鞘等。第36頁(yè)/共63頁(yè)2.手術(shù)剪(外科剪、組織剪)有長(zhǎng)短、尖頭鈍頭、直彎之分；彎剪多用于深部組織的分離，手和剪柄不致妨礙視線。第37頁(yè)/共63頁(yè)3.剪毛剪（簡(jiǎn)稱(chēng)毛剪）毛剪與彎剪類(lèi)似，只是尖部平鈍。用于術(shù)部被毛的剪除，持法與手術(shù)剪同。剪毛時(shí)，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次將毛剪下，加力下壓或一手提起被毛，均易剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放入加有清水的污物盒內(nèi)，避免到處飛揚(yáng)。在兔耳緣靜脈注射或鼠尾靜脈注射時(shí)常用拔毛法。第38頁(yè)/共63頁(yè)4.止血鉗(血管鉗)止血鉗有彎直長(zhǎng)短之分，常用的是蚊嘴式。作用一是盡量少地夾住出血的血管或出血點(diǎn)達(dá)到止血目的；二是用于分離組織、牽引縫線等。第39頁(yè)/共63頁(yè)5.手術(shù)鑷大小不一，有有齒(外科鑷)無(wú)齒(解剖鑷)、直頭彎頭之分。用于夾住和提起組織，使于剝離、剪斷和縫合。有齒鑷用于夾持較堅(jiān)硬的組織，如皮膚、筋膜、肌腱等。無(wú)齒鑷用于夾持黏膜、血管和神經(jīng)等較脆嫩的組織。手術(shù)中一般多用左手以執(zhí)筆式執(zhí)鑷（圖8），持鑷時(shí)忌將鑷柄握于掌心而妨礙操作的靈活性。第40頁(yè)/共63頁(yè)蛙類(lèi)手術(shù)器械包括：蛙針（金屬探針）、鐵剪刀、眼科剪、外科鑷、眼科鑷、玻璃分針（玻璃鉤）、蛙板或玻璃板、鋅銅弓、蛙心夾等。哺乳類(lèi)手術(shù)器械通常包括：剪毛剪、手術(shù)刀、止血鉗、外科鑷、外科剪、眼科鑷、眼科剪、氣管插管、血管插管，有時(shí)用到縫合針線和持針鉗等。第41頁(yè)/共63頁(yè)四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)第42頁(yè)/共63頁(yè)手術(shù)··········五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法第43頁(yè)/共63頁(yè)六、常用生理溶液第44頁(yè)/共63頁(yè)生理溶液 在離體器官實(shí)驗(yàn)中，為維持其正常生命活動(dòng)，須提供適宜的環(huán)境。在體外模仿體液成分代替其功能的溶液即生理溶液，又稱(chēng)代體液。生理溶液一般應(yīng)具備以下條件：與組織液等滲；含有維持正常機(jī)體所必需的、比例適宜的各種無(wú)機(jī)鹽離子；應(yīng)含有氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；酸堿度應(yīng)與血漿相同，并且有一定緩沖能力。動(dòng)物種類(lèi)不同，相應(yīng)的生理溶液也會(huì)有區(qū)別。常用生理溶液成分見(jiàn)表1。配制溶液時(shí)，可按表1內(nèi)的數(shù)字用天平稱(chēng)取各種物質(zhì)，然后將其溶解于蒸餾水中。為求配制手續(xù)簡(jiǎn)便起見(jiàn)，可預(yù)先配好各種物質(zhì)的濃溶液（也稱(chēng)原液、基礎(chǔ)液），用量筒或吸管按比例吸取一定的容積，然后用蒸餾水稀釋至所需量即可。配制方法見(jiàn)表2。第45頁(yè)/共63頁(yè)第46頁(yè)/共63頁(yè)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)概述第47頁(yè)/共63頁(yè)青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是配置在微機(jī)上的4通道生物信號(hào)采集、放大、顯示、記錄與處理系統(tǒng)。它由以下三個(gè)主要部分構(gòu)成，參見(jiàn)圖1-1。、IBM兼容微機(jī)；、BL-420系統(tǒng)硬件；、BL-420F生物信號(hào)顯示與處理軟件。第48頁(yè)/共63頁(yè)BL-420系統(tǒng)硬件是一臺(tái)程序可控的，帶4通道生物信號(hào)采集與放大功能，并集成高精度、高可靠性以及寬適應(yīng)范圍的程控刺激器于一體的設(shè)備。BL-420F生物信號(hào)顯示與處理軟件利用微機(jī)強(qiáng)大的圖形顯示與數(shù)據(jù)處理功能，可同時(shí)顯示4道從生物體內(nèi)或離體器官中探測(cè)到的生物電信號(hào)或張力、壓力等生物非電信號(hào)的波形，并可對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行存貯、分析及打印。第49頁(yè)/共63頁(yè)BL-420系統(tǒng)原理第50頁(yè)/共63頁(yè)從廣義上講，生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是指這樣一種系統(tǒng)：研究人員、老師和學(xué)生可以通過(guò)該系統(tǒng)觀察到各種生物機(jī)體內(nèi)或離體器官中探測(cè)到的生物電信號(hào)以及張力、壓力、溫度等生物非電信號(hào)的波形，從而對(duì)生物肌體在不同的生理或藥理實(shí)驗(yàn)條件下所發(fā)生的機(jī)能變化加以記錄與分析。生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是研究生物機(jī)能活動(dòng)的主要設(shè)備和手段之一。BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的基本原理是：首先將原始的生物機(jī)能信號(hào)，包括生物電信號(hào)和通過(guò)傳感器引入的生物非電信號(hào)進(jìn)行放大（有些生物電信號(hào)非常微弱，比如減壓神經(jīng)放電，其信號(hào)為微伏級(jí)信號(hào)，如果不進(jìn)行信號(hào)的前置放大，根本無(wú)法觀察）、濾波（由于在生物信號(hào)中夾雜有眾多聲、光、電等干擾信號(hào)，比如電網(wǎng)的50Hz信號(hào)，這些干擾信號(hào)的幅度往往比生物電信號(hào)本身的強(qiáng)度還要大，如果不將這些干擾信號(hào)濾除掉，那么可能會(huì)因?yàn)檫^(guò)大的第51頁(yè)/共63頁(yè)干擾信號(hào)致使有用的生物機(jī)能信號(hào)本身無(wú)法觀察）等處理，然后對(duì)處理的信號(hào)通過(guò)模數(shù)轉(zhuǎn)換進(jìn)行數(shù)字化并將數(shù)字化后的生物機(jī)能信號(hào)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)內(nèi)部，計(jì)算機(jī)則通過(guò)專(zhuān)用的生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件接收從生物信號(hào)放大、采集卡傳入的數(shù)字信號(hào)，然后對(duì)這些收到的信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)處理，一方面進(jìn)行生物機(jī)能波形的顯示，一方面進(jìn)行生物機(jī)能信號(hào)的存貯，另外，它還要根據(jù)使用者的命令對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行指定的處理和分析，比如平滑濾波，微積分、頻譜分析等。第52頁(yè)/共63頁(yè)對(duì)于存貯在計(jì)算機(jī)內(nèi)部的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件可以隨時(shí)將其調(diào)出進(jìn)行觀察和分析，還可以將重要的實(shí)驗(yàn)波形和分析數(shù)據(jù)進(jìn)行打印。BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)原理圖第53頁(yè)/共63頁(yè)BL-420F生物信號(hào)顯示與處理軟件的主界面第54頁(yè)/共63頁(yè)利尿藥、脫水藥的利尿作用的觀察第55頁(yè)/共63頁(yè)目的：了解利尿藥和脫水藥的利尿作用。原理：通過(guò)藥物影響尿液的生成，觀察藥物的利尿作用。動(dòng)物：家兔藥品：利尿酸、戊巴比妥鈉、甘露醇器材：計(jì)算機(jī)生物信息采集與處理系統(tǒng)、記滴器輸尿?qū)Ч艿取?shí)驗(yàn)方法第56頁(yè)/共63頁(yè)將兔用3%戊巴比妥鈉/Kg麻醉，仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)，剪去頸部被毛，切開(kāi)皮膚肌肉，分離迷走神經(jīng)干，于其下穿一線備用，將導(dǎo)尿管送入膀胱。計(jì)算機(jī)化生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)：將尿滴記錄線接到記滴器上，通過(guò)記滴器與系統(tǒng)的4通道連接，待尿滴滴數(shù)穩(wěn)定后，描記尿液滴數(shù)，用量筒量取每5分鐘尿量。耳靜脈注射生理鹽水25毫升，觀察并記錄尿量變化。用聽(tīng)診器聽(tīng)正常心跳的情況，剪斷一側(cè)迷走神經(jīng)，以中等強(qiáng)度電流刺激其離中斷，用聽(tīng)診器聽(tīng)正常心跳的變化，情況待血壓顯著下降后，觀察并記錄尿量變化。10分鐘后，耳靜脈注射利尿酸，每隔10分鐘觀察并記錄尿量變化。以中等強(qiáng)度電流刺激其離中斷，用聽(tīng)診器聽(tīng)正常心跳的變化，情況待血壓顯著下降后，耳靜脈注射垂體后葉素1-2單位，觀察并記錄尿量變化。耳靜脈注射甘露醇每千克體重0.25-0.5mg，每隔10分鐘觀察并記錄尿量變化。結(jié)果第57頁(yè)/共63頁(yè)正常尿量注射生理鹽水后的尿量剪斷迷走神經(jīng)的尿量甘露醇垂體后葉素甘露醇10分鐘20分鐘